检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞生物学杂志 2008年第3期30卷 397-400页

作者：金玲陈剑吴静周清刘小勇赵芳徐锦堂赵松滨暨南大学附属第一医院眼科广州510632 暨南大学医学院眼科研究室广州510632

研究妊娠晚期兔羊膜上皮细胞(amniotic epithelial cells,AECs)在体外生长和增殖特性。取妊娠晚期兔(27-28E)AECs进行体外培养,光镜、扫描电镜下观察后,利用免疫组化单克隆抗体AE1/AE3、AE5检测培养的AECs中细胞角蛋白的表达,并采用流... 详细信息

研究妊娠晚期兔羊膜上皮细胞(amniotic epithelial cells,AECs)在体外生长和增殖特性。取妊娠晚期兔(27-28E)AECs进行体外培养,光镜、扫描电镜下观察后,利用免疫组化单克隆抗体AE1/AE3、AE5检测培养的AECs中细胞角蛋白的表达,并采用流式细胞仪检测表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)和血清对AECs细胞周期的影响。结果表明妊娠晚期兔AECs在体外培养条件下生长良好、增殖旺盛;单克隆抗体AE1/AE3、AE5染色阳性;血清组、EGF组和联合应用组分别与对照组比较,各周期细胞比例发生变化,G0/G1期减少,S期、G2/M期增加,细胞增殖指数(PI)增加,P<0.01,联合应用组分别与血清组、EGF组比较,P<0.05。说明妊娠晚期兔AECs表达细胞角蛋白CK3,血清和EGF均能通过改变妊娠晚期兔AECs的细胞周期而促进AECs增殖,两者联合应用对促进AECs的增殖更为显著。

关键词：兔羊膜上皮细胞体外培养细胞周期

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纤维蛋白胶与兔角膜3种细胞构建组织工程细胞片研究

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中国病理生理杂志 2008年第4期24卷 797-801页

作者：梁晓东陈建苏郑佩娥陈小琳暨南大学附属第一医院眼科广东广州510632 暨南大学医学院眼科研究室广东广州510632 暨南大学医学院病理学教研室广东广州510632 暨南大学医学院病理生理学教研室广东广州510632

目的:观察兔角膜3种细胞能否在体外构建的纤维蛋白胶体上良好生长,探讨纤维蛋白胶作为组织工程细胞片支架材料的可行性。方法:将培养扩增的兔角膜3种细胞分别接种于纤维蛋白胶表面,采用倒置显微镜,HE染色和扫描电子显微镜,观察兔角膜3... 详细信息

目的:观察兔角膜3种细胞能否在体外构建的纤维蛋白胶体上良好生长,探讨纤维蛋白胶作为组织工程细胞片支架材料的可行性。方法:将培养扩增的兔角膜3种细胞分别接种于纤维蛋白胶表面,采用倒置显微镜,HE染色和扫描电子显微镜,观察兔角膜3种细胞在纤维蛋白胶表面生长情况。结果:制备的薄层纤维蛋白胶支架光滑、透明,随培养细胞的生长部分降解,可获得仅带少量纤维蛋白胶的细胞片。角膜3种细胞在纤维蛋白胶表面生长良好,可保持生理状态的细胞形态。角膜上皮细胞可形成单层和复层,细胞间连接紧密。角膜内皮细胞呈圆形或多角形,细胞大小一致,排列紧密。角膜基质细胞拉长生长,呈三角形或树枝状,细胞间连接明显,可形成网状连接。结论:体外构建的纤维蛋白胶与角膜3种细胞有组织相容性,纤维蛋白胶有望作为角膜3种细胞的生长载体构建可供移植的组织工程细胞片。

关键词：纤维蛋白组织黏着剂角膜细胞培养组织工程

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猫角膜内皮细胞与人脉络膜色素瘤细胞共培养后增殖能力的变化

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广东医学 2008年第2期29卷 191-193页

作者：黎颖莉吴静李永平何文婷徐锦堂暨南大学附属第一医院眼科广州510630 暨南大学医学院眼科研究室广州510632 中山大学中山眼科中心广州510060

目的观察猫角膜内皮细胞(CEC)与人脉络膜黑色素瘤细胞(OCM-1)共培养后增殖能力及细胞周期的变化。方法将角膜内皮细胞分别与肿瘤细胞OCM-1、兔角膜基质细胞在Transwell体系中共培养,通过流式细胞术观察内皮细胞增殖能力及细胞周期的变... 详细信息

目的观察猫角膜内皮细胞(CEC)与人脉络膜黑色素瘤细胞(OCM-1)共培养后增殖能力及细胞周期的变化。方法将角膜内皮细胞分别与肿瘤细胞OCM-1、兔角膜基质细胞在Transwell体系中共培养,通过流式细胞术观察内皮细胞增殖能力及细胞周期的变化。结果与空白对照组角膜内皮细胞周期比较,肿瘤细胞组与基质细胞组角膜内皮细胞S期细胞比例增加,G1期细胞比例下降,肿瘤组增加幅度高于基质细胞组的。肿瘤细胞组角膜内皮细胞S期细胞比例比空白对照组的平均增加近19%,增殖能力显著提高。结论与肿瘤细胞OCM-1共培养能促进角膜内皮细胞增殖。

关键词：角膜内皮细胞 Transwell体系共培养增殖

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泪道黏膜超微结构研究

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2008年第4期29卷 378-380页

作者：张涛王继群王丽华王全军曹庆松暨南大学附属第一医院耳鼻咽喉科广东广州510630 暨南大学医学院眼科研究室广东广州510632 华南农业大学医院五官科广东广州510642

目的:观察泪道黏膜表面超微结构,明确泪道黏膜表面是否存在纤毛系统。方法:应用扫描电镜对7例正常人鼻泪管黏膜表面的超微结构进行观察。结果:泪道黏膜表面存在皱襞,部分上皮细胞表面有微绒毛样结构,未见类似鼻腔的纤毛系统。结论:泪道... 详细信息

目的:观察泪道黏膜表面超微结构,明确泪道黏膜表面是否存在纤毛系统。方法:应用扫描电镜对7例正常人鼻泪管黏膜表面的超微结构进行观察。结果:泪道黏膜表面存在皱襞,部分上皮细胞表面有微绒毛样结构,未见类似鼻腔的纤毛系统。结论:泪道黏膜表面具有黏膜皱襞以及部分上皮细胞表面存在微绒毛结构可以推测泪道上皮对泪液可能具有一定的吸收功能。泪道黏膜不具备纤毛系统提示泪道黏膜排泄泪液是通过虹吸和重力作用而无主动排泄功能。

关键词：泪道黏膜超微结构

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角膜内皮细胞高表达TGF-β_1的免疫学作用

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眼科研究 2007年第7期25卷 489-493页

作者：马慧香徐锦堂姜振友赵松滨陈建苏暨南大学医学院附属第一医院眼科暨南大学医学院眼科研究室广州510632 暨南大学医学院免疫教研室广州510632

目的探讨TGF-β1基因转染角膜内皮细胞后表达产物的免疫学活性。方法分别用RT-PCR、Western blot、免疫组织化学法检测pSecTag2-TGF-β1MP质粒转染角膜内皮细胞48h后TGF-β1基因的表达,ELISA法检测TGF-β1浓度;MTT法检测其对ConA诱导的... 详细信息

目的探讨TGF-β1基因转染角膜内皮细胞后表达产物的免疫学活性。方法分别用RT-PCR、Western blot、免疫组织化学法检测pSecTag2-TGF-β1MP质粒转染角膜内皮细胞48h后TGF-β1基因的表达,ELISA法检测TGF-β1浓度;MTT法检测其对ConA诱导的淋巴细胞转化反应的影响;用流式细胞仪法检测其对淋巴细胞凋亡以及淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+、CD25+、CD69+、CD71+亚群分化的影响。结果从mRNA转录和蛋白质水平均证实TGF-β1基因在角膜内皮细胞获得高效表达。瞬时转染48h角膜内皮细胞培养上清中TGF-β1的表达为(98±3)pg/ml,高于对照组。在其作用下淋巴细胞活化增生受抑制;出现明显的亚二倍体峰;CD25+、CD69+、CD71+阳性细胞比率下降。结论基因转染角膜内皮细胞高表达TGF-β1,可抑制淋巴细胞的活化增生,促使淋巴细胞凋亡。

关键词：转化生长因子-β1 基因转染淋巴细胞免疫

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人羊膜上皮细胞的原代及传代培养

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广东医学 2007年第2期28卷 181-183页

作者：刘小勇陈剑吴静周清王彦平李红徐锦堂赵松滨暨南大学附属第一医院眼科广州510630 暨南大学医学院眼科研究室广州510630 暨南大学病理生理学教研室广州510630 暨南大学附属第一医院病理科广州510630

目的建立体外培养人羊膜上皮细胞的方法，观察体外培养的羊膜上皮细胞的生物学特性。方法取足月剖宫产术后羊膜，经胶原酶和胰蛋白酶消化后，获取的羊膜上皮细胞接种于含10％胎牛血清培养基中进行原代和传代培养，探索其合适的培养条件... 详细信息

目的建立体外培养人羊膜上皮细胞的方法，观察体外培养的羊膜上皮细胞的生物学特性。方法取足月剖宫产术后羊膜，经胶原酶和胰蛋白酶消化后，获取的羊膜上皮细胞接种于含10％胎牛血清培养基中进行原代和传代培养，探索其合适的培养条件，用倒置显微镜观察培养的人羊膜上皮细胞体外生长的特征。用苏木精-伊红染色、扫描电镜和细胞角蛋白免疫组织化学染色的方法对培养细胞进行形态学观察和鉴定。结果人羊膜上皮细胞可以在体外成功的培养传代，体外可连续传8～10代。体外培养细胞呈多角形，长满后呈上皮细胞特有的铺路石样外观。扫描电镜观察细胞表面有丰富的微绒毛。细胞角蛋白keratin单克隆抗体染色阳性。结论人羊膜上皮细胞在体外可成功进行原代和传代培养，体外培养的人羊膜上皮细胞在一定时间内可维持增殖能力。

关键词：羊膜上皮细胞细胞培养

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视觉发育可塑性关键期后弱视大鼠视皮质c-fos的表达

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广东医学 2007年第10期28卷 1594-1596页

作者：周清陈剑刘珏徐锦堂王彦平赵松滨暨南大学附属第一医院眼科广州510630 暨南大学医学院眼科研究室广州510630 暨南大学病理生理学教研室广州510630

目的观察双眼形觉剥夺性弱视成年大鼠光照刺激诱导视皮质神经元c-fos表达情况,探讨已过视觉发育可塑性关键期的弱视大鼠视皮质内视觉可塑性的存留程度。方法14日龄SD大鼠共21只,随机分为无光照弱视组8只、光照弱视组8只和正常对照组5只... 详细信息

目的观察双眼形觉剥夺性弱视成年大鼠光照刺激诱导视皮质神经元c-fos表达情况,探讨已过视觉发育可塑性关键期的弱视大鼠视皮质内视觉可塑性的存留程度。方法14日龄SD大鼠共21只,随机分为无光照弱视组8只、光照弱视组8只和正常对照组5只,弱视组行双侧眼睑缝合术建立双眼形觉剥夺性弱视模型。饲养至100日龄后光照弱视组和对照组暴露于外界光线中0.5h,无光照弱视组不接触光线。取材后采用Nissl染色法及电镜观察3组视皮质神经元的形态改变,并用免疫组化技术检测c-fos蛋白表达情况。结果①弱视组视皮质神经元比正常组体积变小:②超微结构显示:弱视组视皮质出现早期类凋亡改变的神经元;③光照弱视组视皮质内Ⅱ～Ⅳ层各层中c-fos免疫刚性神经元密度明显高于另外两组(P<0.05)。结论双眼形觉剥夺性弱视成年大鼠视皮质经光照刺激诱导c-fos表达增加,提示已过视觉发育敏感期成年大鼠的视皮质仍存留一定程度的视觉可塑性。

关键词：形觉剥夺性弱视 SD成年大鼠 c-fos 视觉发育可塑性

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骨髓间质干细胞与Ⅱ型胶原修饰的PLGA黏附性的观察

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中国矫形外科杂志 2007年第20期15卷 1566-1569页

作者：张利查振刚周长忍姚平吴昊林宏生杨淑野王双利暨南大学附属第一医院骨科广州510630 暨南大学理工学院生物材料研究室广州510630 暨南大学医学院生理教研室广州510630

[目的]优化骨髓间质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)体外分离培养技术,改良生物材料聚乙醇酸-乳酸共聚物(poly lactide-co glycolide,PLGA)的细胞黏附性,观察BMSCs与Ⅱ型胶原修饰的PL-GA的黏附性。[方法]密度梯度离... 详细信息

[目的]优化骨髓间质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)体外分离培养技术,改良生物材料聚乙醇酸-乳酸共聚物(poly lactide-co glycolide,PLGA)的细胞黏附性,观察BMSCs与Ⅱ型胶原修饰的PL-GA的黏附性。[方法]密度梯度离心法分离BMSCs,流式细胞分析法(FACS)对细胞表面抗原、细胞活力、细胞周期进行检测,相差显微镜观察细胞形态。相分离法制做PLGA,Ⅱ型胶原进行表面修饰,取第三代干细胞与PLGA附和,扫描电镜观察细胞与材料的黏附情况。[结果]BMSCs可在体外分离扩增,表达CD29、CD44和CD106,不表达CD34和CD45,细胞活力为88.96%,G0-G1细胞占90.32%。细胞形态为长梭形,Ⅱ型胶原表面修饰的PLGA平均孔径为100μm,与BMSCs有较好的黏附性。[结论]BMSCs可在体外长期、稳定培养,是理想的组织工程种子细胞。Ⅱ型胶原表面修饰的PLGA与干细胞有较好的黏附性,可用来做组织工程生物材料。

关键词：骨髓间质干细胞 PLGA 组织工程

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形觉剥夺性弱视成年大鼠视皮质c-fos表达的研究

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中华神经医学杂志 2007年第6期6卷 613-615页

作者：周清陈剑刘珏徐锦堂王彦平赵松滨暨南大学附属第一医院眼科广州510630 暨南大学医学院眼科研究室广州510632 暨南大学医学院病理生理学教研室广州510632

目的研究双眼形觉剥夺性弱视成年大鼠光刺激诱导视皮质神经元c-fos表达情况。方法缝合14日龄SD大鼠双侧眼睑建立双眼形觉剥夺性弱视模型9只,正常对照组5只。饲养至100日龄两组成年大鼠均暴露于外界自然光线中0.5 h后取材,对两组视皮质... 详细信息

目的研究双眼形觉剥夺性弱视成年大鼠光刺激诱导视皮质神经元c-fos表达情况。方法缝合14日龄SD大鼠双侧眼睑建立双眼形觉剥夺性弱视模型9只,正常对照组5只。饲养至100日龄两组成年大鼠均暴露于外界自然光线中0.5 h后取材,对两组视皮质组织进行Nissl染色和c-fos蛋白免疫组化染色,并对染色结果进行计算机图像分析。结果弱视组大鼠视皮质表达c-fos蛋白阳性神经元较正常对照组多,两组差异有显著性(P<0.05)。结论双眼形觉剥夺性弱视成年大鼠视皮质经光刺激诱导c-fos表达增加,提示已过视觉发育敏感期成年大鼠的视皮质仍存留一定程度的视觉可塑性。

关键词：形觉剥夺性弱视 SD成年大鼠 c-fos

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新型两亲性共聚物复合骨形成蛋白修复兔下颌骨缺损

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中国组织工程研究与临床康复 2007年第35期11卷 6946-6949页

作者：冯智强赖仁发缪婧周长忍上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔医学院口腔颌面外科上海市200011 暨南大学附属第一医院口腔医疗中心广东省广州市510630 暨南大学材料科学与工程系生物材料研究室广东省广州市510632

目的:由于PLA-PVP两亲性共聚物具有亲-疏水微相分离的结构,与人体内血管结构相似,非常有利于细胞的黏附和生长。实验观察应用聚乳酸以及PLA-PVP/rhBMP-2复合物修复兔下颌骨缺损过程中材料与颌骨的结合况及颌骨缺损的修复情况,验证PLA-PV... 详细信息

目的:由于PLA-PVP两亲性共聚物具有亲-疏水微相分离的结构,与人体内血管结构相似,非常有利于细胞的黏附和生长。实验观察应用聚乳酸以及PLA-PVP/rhBMP-2复合物修复兔下颌骨缺损过程中材料与颌骨的结合况及颌骨缺损的修复情况,验证PLA-PVP作为人工骨支架材料的可行性。方法:实验于2005-06/2006-03在暨南大学医学院动物实验室完成。①造模:取健康新西兰大白兔26只,用牙科电钻在双侧下颌骨下缘造成约15mm×6mm范围的全层骨缺损,然后随机分为4组,rhBMP-2/PLA-PVP组8只,植入复合有rhBMP-2的PLA-PVP两亲性共聚物;PLA-PVP组8只,植入PLA-PVP两亲性共聚物;PLA组8只,植入PLA;对照组2只,不植入任何材料。前3组分别于2,4,8及12周各处死2只,对照组2只于术后12周处死。②观察指标:取材后行X射线、苏木精-伊红染色及电镜观察材料降解及新生骨生长情况,并应用Lunar Prodigy骨密度仪检测骨矿物质密度,以探明成骨的质量和成骨速度。结果:①各组材料植入后无感染和排斥反应,组织学及扫描电镜显示各组随时间的增长材料逐渐降解,新生骨组织逐渐替换材料并修复缺损区。②术后骨密度测量显示各组材料骨修复区随时间的增长密度逐渐增大,PLA-PVP/rhBMP-2组术后2,4,8,12周骨密度值明显优于PLA-PVP组和PLA组(P<0.01),PLA-PVP组优于PLA组(P<0.01)。③术后12周,PLA-PVP完全降解,PLA则有部分残留,对照组骨缺损区未能修复。结论:①PLA-PVP/rhBMP-2复合物具有良好的生物相容性和诱导成骨能力。②PLA-PVP生物相容性好,效果优于聚乳酸,可作为骨形成蛋白2的有效载体,有希望成为修复骨缺损的新型生物可降解材料。

关键词：两亲性共聚物(PLA-PVP) 骨形成蛋白聚乳酸颌骨缺损

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