检索结果-内蒙古大学图书馆

中华传染病杂志 2014年第4期32卷 204-208页

作者：梁训宏吴劲松冯晓博卢月梅吴伟元吴文苑暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院检验科、深圳市病原微生物及细菌耐药监控重点实验室 518020 上海交通大学医学院附属新华医院皮肤科真菌实验室

目的通过对深圳地区新生隐球菌和格特隐球菌临床分离株进行分子流行病学调查,分析其种、变种、基因型和交配型的构成.方法受试菌株为从临床标本中分离的55株隐球菌,利用刀豆氨酸-甘氨酸-溴麝香草酚蓝培养法区分新生隐球菌和格特隐球菌... 详细信息

目的通过对深圳地区新生隐球菌和格特隐球菌临床分离株进行分子流行病学调查,分析其种、变种、基因型和交配型的构成.方法受试菌株为从临床标本中分离的55株隐球菌,利用刀豆氨酸-甘氨酸-溴麝香草酚蓝培养法区分新生隐球菌和格特隐球菌;利用M13的PCR指纹分型法鉴定基因型;利用变种和交配型特异性引物扩增分型法,区分新生隐球菌格鲁比变种、新生变种和格特隐球菌,同时鉴定α交配型和a交配型;利用GEF1-限制性片段长度多态性分析法同步鉴定和验证受试株的基因型和交配型;对VGⅡ基因型菌株进行IGS1序列类型的分析.结果 55株临床株中,52株为新生隐球菌,均为格鲁比变种、VN Ⅰ基因型和a交配型;3株为格特隐球菌,包括1株VG Ⅰ基因型、α交配型和2株VGⅡ基因型、a交配型.2株VGⅡ基因型菌株的IGS1序列类型为Ⅱ型.结论深圳地区隐球菌致病菌株中绝大多数仍为新生隐球菌格鲁比变种、VN Ⅰ基因型和α交配型.存在少数格特隐球菌菌株,其中包括导致国外高发病率的VGⅡ基因型,后者的IGS1序列类型与VGⅡb基因亚型一致.

关键词：隐球菌属基因型交配型流行病学,分子

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人睾丸特异性新基因hT279的重组表达及其单克隆抗体制备

人睾丸特异性新基因hT279的重组表达及其单克隆抗体制备

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广东省医学会第四次生殖医学学术会议

作者：颜秋霞李介华陈彩蓉冼英杰周秀琴陈润强蔡志明唐爱发暨南大学医学院附属清远医院暨清远市人民医院生殖中心 511518 清远暨南大学医学院附属清远医院暨清远市人民医院检验科 518035 深圳深圳大学第一附属医院暨深圳市第二人民医院 518035 深圳

目的构建人睾丸特异性新基因hT279(GenBank登录号BC016750)的原核表达载体,纯化融合蛋白并以其为抗原免疫BALB/c小鼠制备抗人睾丸特异性hT279蛋白单克隆抗体(mAb),并进行特性鉴定.方法用PCR方法得到睾丸特异性新基因hT279并克隆至pET... 详细信息

目的构建人睾丸特异性新基因hT279(GenBank登录号BC016750)的原核表达载体,纯化融合蛋白并以其为抗原免疫BALB/c小鼠制备抗人睾丸特异性hT279蛋白单克隆抗体(mAb),并进行特性鉴定.方法用PCR方法得到睾丸特异性新基因hT279并克隆至pET32a原核表达载体中,转化大肠杆菌BL21诱导融合蛋白表达;获得的可溶性蛋白经亲和层析纯化、SDS-PAGE鉴定后,免疫BALB/c小鼠,应用淋巴细胞杂交瘤技术制备抗hT279 mAb,并通过间接ELISA、Western blot和免疫组织化学法对mAb进行特性鉴定.结果实现了hT279的原核表达,获得了1株稳定分泌抗hT279mAb的杂交瘤细胞株4B2,抗体亚型为IgG2b(κ),效价达到1×*** blot鉴定表明,该mAb在人正常睾丸蛋白中相对分子质量约为22 kDa处检测到特异条带.免疫组织化学显示hT279蛋白主要在正常人睾丸的精母细胞及圆形精子细胞中表达,而在男性不育患者睾丸组织中表达消失.结论成功制备出1株抗hT279的mAb 4B2,为进一步研究hT279在人类精子发生中的功能和男性不育症的诊断提供了特异的检测工具.

关键词：人睾丸特异性新基因原核表达单克隆抗体

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精子顶体相关蛋白Dkkll在小鼠睾丸组织中的表达研究

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中国男科学杂志 2013年第10期27卷 3-7页

作者：颜秋霞郭晓燕陈彩蓉李介华蔡志明唐爱发暨南大学医学院第五附属医院暨清远市人民医院生殖中心清远511518 暨南大学医学院第五附属医院暨清远市人民医院检验科深圳大学第一附属医院暨深圳市第二人民医院

目的：研究顶体相关蛋白Dkkl1在小鼠睾丸组织发育过程中的表达特征。方法将4d、9d、18d、35d、54d和6月龄小鼠睾丸组织cDNA探针与Affymetrix全基因组芯片进行杂交，筛选出差异表达的Dkkl1基因。采用RT-PCR方法检测Dkkl1基因在小鼠不同... 详细信息

目的：研究顶体相关蛋白Dkkl1在小鼠睾丸组织发育过程中的表达特征。方法将4d、9d、18d、35d、54d和6月龄小鼠睾丸组织cDNA探针与Affymetrix全基因组芯片进行杂交，筛选出差异表达的Dkkl1基因。采用RT-PCR方法检测Dkkl1基因在小鼠不同日龄和不同组织中的表达情况，采用免疫组化方法检测Dkkl1蛋白在小鼠睾丸组织中的定位。结果对Affymetrix全基因组芯片杂交结果分析后，筛选得到1个差异表达杂交点，通过在NCBI网站与小鼠全基因组序列Blast分析可知该差异表达基因是Dkkl1基因。RT-PCR结果表明Dkkl1 mRNA呈小鼠睾丸特异性表达，在出生31d小鼠睾丸开始高表达，在成年前达到高峰。Dkkl1蛋白主要定位在睾丸精母细胞和圆形精子细胞。结论 Dkkl1基因存在发育的表达调控，为小鼠年龄依赖性表达基因，其表达与小鼠精子发生的过程有很强的一致性，且具有睾丸特异性表达的特征，因此我们推测该基因可能在精子发生中具有关键作用。

关键词：基因芯片 Dkkl1基因精子发生

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Q-开关激光对黄褐斑动物模型黑素细胞黑素合成的影响

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中国美容医学 2013年第11期22卷 1178-1183页

作者：杨鹏杨慧兰麦跃戴勇孙林潮鲁东平大连医科大学附属深圳阳光医院皮肤科广东深圳518000 南方医科大学附属广州军区广州总医院皮肤科暨南大学医学院第二附属深圳市人民医院动物实验中心深圳市宝安区慢性病防治院

目的：观察Q开关激光不同能量照射对黄褐斑动物模型黑素细胞的增殖、黑素生成及酪氨酸酶活性的影响。方法：用Q开关激光不同能量照射黄褐斑动物模型，取表皮黑素细胞进行细胞培养，采用MTT法测定细胞活力的影响；氢氧化钠裂解法测定黑... 详细信息

目的：观察Q开关激光不同能量照射对黄褐斑动物模型黑素细胞的增殖、黑素生成及酪氨酸酶活性的影响。方法：用Q开关激光不同能量照射黄褐斑动物模型，取表皮黑素细胞进行细胞培养，采用MTT法测定细胞活力的影响；氢氧化钠裂解法测定黑素的含量；体外多巴氧化反应法测定酪氨酸活性的变化；光学显微镜观察细胞形态学变化。结果：除高能高频组外各能量密度和频率组激光照射后即刻黑素细胞形态无明显变化。第5次治疗后高能量密度照射组明显可见黑素细胞数目减少、体积变小、树突数量减少，长度缩短。而低能量高频率照射组仅黑素细胞体积变小，树突数量减少，长度缩短。与术前比较，低能量低频率照射组黑素细胞增殖、黑素含量、酪氨酸活性无显著差异，但其他三组显著性下降。然而，3周术后黑素细胞增殖、黑素含量、酪氨酸活性增强趋势，有显著性意义（P〈0．05）。结论：当激光能量和频率达到一定阈值时能抑制黑素细胞的合成和酪氨酸活性，而这种损伤在一定范围内是可逆性的。从而为临床应用Q开关Nd：YAG 1064nm激光治疗色素性疾病提供了实验依据。

关键词：激光黑素细胞黑素生成酪氨酸酶动物模型

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Q-开关激光对黄褐斑动物模型黑素细胞病理形态的影响

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中国美容医学 2013年第9期22卷 941-946页

目的:探讨Q-开光1064nm Nd:YAG激光不同能量照射对黄褐斑动物模型表皮黑素细胞病理形态的影响。方法:用Q-开关1064nm Nd:YAG激光不同能量和频率照射黄褐斑动物模型背部皮肤,分别于激光照射前和照射后不同阶段取材,通过HMB45免疫组化染色... 详细信息

目的:探讨Q-开光1064nm Nd:YAG激光不同能量照射对黄褐斑动物模型表皮黑素细胞病理形态的影响。方法:用Q-开关1064nm Nd:YAG激光不同能量和频率照射黄褐斑动物模型背部皮肤,分别于激光照射前和照射后不同阶段取材,通过HMB45免疫组化染色法,光镜观察豚鼠表皮黑素细胞的变化。结果:第一次激光照射后即刻可见高能量两组黑素阳性细胞减少,第5次激光照射后即刻可见低能高频组黑素阳性细胞减少。与术前比较,低能量密度低频率照射组黑素细胞阳性细胞数无显著差异。5次治疗后软件分析结果显示,高能高频、高能低频和低能高频组与照射前比较黑素细胞阳性目标个数、平均数密度、平均光密度下降,但平均灰度值上升,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:高能量密度Q-开光Nd:YAG激光照射对表皮黑素细胞的影响大于低能量密度,当其超过一定阈值时能高能量高频率可导致黑素细胞的损伤和减少。从而为临床应用Q-开关1064nm Nd:YAG激光治疗色素性疾病提供了实验依据。

关键词：激光黑素细胞黑素光镜动物模型

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Q-开关激光对黄褐斑动物模型黑素细胞周期与凋亡的影响

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中国美容医学 2013年第12期22卷 1286-1291页

作者：杨鹏杨慧兰麦跃戴勇孙林潮鲁东平大连医科大学附属深圳阳光医院皮肤科广东深圳518000 南方医科大学附属广州军区广州总医院皮肤科广东广州510010 暨南大学医学院第二附属深圳市人民医院动物实验中心深圳市宝安区慢性病防治院

目的:探讨Q-开关Nd:YAG激光不同能量照射黄褐斑动物模型对表皮黑素细胞周期与凋亡的影响。方法:用Q-开关激光不同能量照射黄褐斑动物模型,取表皮黑素细胞进行细胞培养,光学显微镜观察黑素细胞形态学变化,流式细胞仪检测照射后细胞周期... 详细信息

目的:探讨Q-开关Nd:YAG激光不同能量照射黄褐斑动物模型对表皮黑素细胞周期与凋亡的影响。方法:用Q-开关激光不同能量照射黄褐斑动物模型,取表皮黑素细胞进行细胞培养,光学显微镜观察黑素细胞形态学变化,流式细胞仪检测照射后细胞周期与凋亡。结果:软件分析结果显示,除高能高频组外Q-开关Nd:YAG 1064nm激光第一次照射后即刻各能量密度与频率组黑素细胞形态、细胞周期与凋亡无明显改变。第5次激光照射后即刻,高能高频、高能低频和低能高频组与照射前比较树突数量明显减少和长度明显缩短,S期细胞比率减少,凋亡率显著增加,差异有统计学意义(P<0.01)。照射后1周各组数据更加显著,随后照射后3周又呈明显上升趋势。低能低频照射组照射前后无显著差异(P>0.01)。结论:当激光能量和频率达到一定阈值时能使黑素细胞体积变小、树突数量减少、长度缩短、S期细胞比率减少、凋亡率显著增加。为临床应用Q-开关1064nm Nd:YAG激光治疗色素性疾病提供了实验依据。

关键词：激光黑素细胞细胞周期细胞凋亡

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慢性应激抑郁型黄褐斑动物模型建立与现有模型的比较研究

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中国美容医学 2013年第3期22卷 349-354页

目的:建立并验证慢性应激抑郁型黄褐斑动物模型,并与现有其他模型进行比较。方法:在注射黄体酮同时,进行慢性轻度不可预见的应激刺激,并紫外线局部照射。结果:黄体酮+紫外线+慢性应激抑郁法造模较其他方法更能导致皮肤丙二醛(Malondiald... 详细信息

目的:建立并验证慢性应激抑郁型黄褐斑动物模型,并与现有其他模型进行比较。方法:在注射黄体酮同时,进行慢性轻度不可预见的应激刺激,并紫外线局部照射。结果:黄体酮+紫外线+慢性应激抑郁法造模较其他方法更能导致皮肤丙二醛(Malondialdehyde,MDA)升高和超氧化物歧化酶(Superoxidedismutase,SOD)降低以及皮肤黑素细胞的增加,并且具有抑郁症的行动学表现。与空白组比较,经慢性轻度不可预见性应激刺激的动物体重显著下降,敞箱试验中穿格次数、理毛时间和次数、直立次数得分显著下降,液体消耗试验中糖水消耗和糖水偏爱百分比明显下降,而纯水消耗显著提高。结论:黄体酮+紫外线+慢性应激抑郁法建立的抑郁型黄褐斑豚鼠多因素模型获得成功。与现有其他模型比较,其皮肤MDA、SOD与皮肤黑素细胞等客观指标的变化也更加接近人类黄褐斑的病变。

关键词：黄褐斑抑郁症动物模型

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SXI2a基因在新生和格特隐球菌交配型鉴定中的作用

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中国人兽共患病学报 2010年第5期26卷 463-466页

作者：吴劲松冯晓博卢月梅吴伟元李文青暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院检验科深圳518020 上海交通大学医学院附属新华医院皮肤科真菌实验室上海200092

目的设计针对a交配型位点内特有的SXI2a基因的特异扩增法,评价其在鉴定新生和格特隐球菌所有主要基因型a交配型中的作用。方法在SXI2a基因4号外显子的序列保守区设计引物SXI2aF-SXI2aR特异扩增新生和格特隐球菌a交配型,并比较其与现有... 详细信息

目的设计针对a交配型位点内特有的SXI2a基因的特异扩增法,评价其在鉴定新生和格特隐球菌所有主要基因型a交配型中的作用。方法在SXI2a基因4号外显子的序列保守区设计引物SXI2aF-SXI2aR特异扩增新生和格特隐球菌a交配型,并比较其与现有的针对STE20a、MFa或STE3a基因的特异扩增法及交配试验在鉴定新生和格特隐球菌所有主要基因型a交配型中的作用。结果针对SXI2a基因的特异扩增法准确鉴定受试的各主要基因型a交配型菌株,而针对STE20a、MFa或STE3a基因的特异扩增法均至少无法扩增1种以上主要基因型的a交配型。部分受试菌株不能发生交配,交配试验无法鉴定其交配型。结论针对SXI2a基因的PCR扩增可鉴定新生和格特隐球菌各主要基因型的a交配型。SXI2aF-SXI2aR引物在快速鉴定a交配型中具有更好的通用性和特异性。

关键词：新生隐球菌 SXI2a基因交配型基因型聚合酶链反应

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中国首株格特隐球菌VGII基因型分离株XH91的分子和表型特征鉴定

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微生物学报 2010年第11期50卷 1460-1465页

作者：冯晓博吴劲松凌波任大明姚志荣上海交通大学医学院附属新华医院皮肤科上海200092 暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院检验科深圳518020 复旦大学遗传学研究所遗传工程国家重点实验室上海200092

【目的】研究我国首次临床分离的一株格特隐球菌VGII基因型菌株(XH91)的分子和表型特征。【方法】对受试株XH91进行血清型的分子鉴定;选取核基因组和线粒体基因组中共16个基因片段进行多位点序列分型;对受试株进行单倍体繁育、同性交配... 详细信息

【目的】研究我国首次临床分离的一株格特隐球菌VGII基因型菌株(XH91)的分子和表型特征。【方法】对受试株XH91进行血清型的分子鉴定;选取核基因组和线粒体基因组中共16个基因片段进行多位点序列分型;对受试株进行单倍体繁育、同性交配及异性交配能力评价;观察受试株的黑色素生成、荚膜厚度及37℃生长等表型特征。【结果】我国首株格特隐球菌VGII基因型菌株XH91为血清B型;该菌株在多位点序列分型上与温哥华岛致病基因型VGIIb一致;XH91能与a交配型发生交配,产生担孢子,而不能与α交配型发生交配且不具备单倍体繁育能力;XH91的黑色素生成、荚膜厚度及37℃生长等表型特征与参考株无明显差异。【结论】我国首株格特隐球菌VGII基因型菌株XH91在基因型、表型特征上均与温哥华岛VGIIb基因亚型一致,该结果将为我国格特隐球菌VGII基因型的分子流行病学和疾病监控提供重要资料。

关键词：格特隐球菌基因型序列分析交配表型

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窄谱中波紫外线联合中药治疗白癜风临床疗效观察

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贵阳中医学院学报 2009年第2期31卷 50-51页

作者：张雅洁戚世玲周荣华张艳灵王启操暨南大学医学院第二附属医院深圳市人民医院皮肤科广东深圳518020

目的:观察窄谱中波紫外线(Narrow-Band Ultravile B,NB-UVB)治疗白癜风的临床疗效及安全性。方法:98例稳定期白癜风患者随机分为两组,治疗组采用NB-UVB联合白灵片、复方卡力孜然酊治疗,对照组只采用白灵片和复方卡力孜然酊治疗。结果:... 详细信息

目的:观察窄谱中波紫外线(Narrow-Band Ultravile B,NB-UVB)治疗白癜风的临床疗效及安全性。方法:98例稳定期白癜风患者随机分为两组,治疗组采用NB-UVB联合白灵片、复方卡力孜然酊治疗,对照组只采用白灵片和复方卡力孜然酊治疗。结果:窄谱中波紫外线治疗组有效率达81.63%,明显高于对照组(P<0.05)。结论:NB-UVB联合中药联合治疗白癜风疗效明显,不良反应可耐受,是安全有效的治疗方法,值得推广应用。

关键词：窄谱中波紫外线白灵片复方卡力孜然酊白癜风

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