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眼皮肤白化病Ⅰ型基因突变研究在产前诊断中的应用及一种致病性TYR基因新突变

暨南大学学报（自然科学与医学版） 2011年第6期32卷 624-628页

作者：苗春越闻人庆郑辉李洪义暨南大学医学院生理学教研室广东广州510632 中山大学中山医学院遗传学教研室广东广州510080

目的:对1名生育过眼皮肤白化病(OCA)先证者母亲再次怀孕的家庭进行酪氨酸酶(TYR)基因突变研究和产前基因诊断。方法:应用聚合酶链反应(PCR)技术扩增TYR基因各外显子、外显子内含子交界区及启动子区,分别以异源双链分析法(HA)、变性高效... 详细信息

目的:对1名生育过眼皮肤白化病(OCA)先证者母亲再次怀孕的家庭进行酪氨酸酶(TYR)基因突变研究和产前基因诊断。方法:应用聚合酶链反应(PCR)技术扩增TYR基因各外显子、外显子内含子交界区及启动子区,分别以异源双链分析法(HA)、变性高效液相层析(DHPLC)和DNA序列测定技术分析先证者及其父母的基因突变,明确突变的致病性后,检测胎儿TYR基因相应位点与基因型。结果:先证者的基因型为c.232_233insGGG/c.841G>T,其父母基因型分别为c.232_233insGGG和c.841G>T突变杂合子。E281X具有致病性。胎儿未获得父亲的c.232_233insGGG突变和母亲的c.841G>T突变。HA和DHPLC法所获得结果与测序结果完全一致。结论:确定了先证者基因型,并检测出一种新的致病性突变c.841G>T。胎儿未获得致病性基因突变,具有正常的基因型。

关键词：眼皮肤白化病Ⅰ型 TYR基因基因突变产前诊断

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联合雾化吸入氟碳及中药川芎嗪治疗急性肺损伤的血流动力学及组织病理的改变

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南方医科大学学报 2011年第8期31卷 1382-1386页

作者：彭雪梅谢娟华帅兵李雅兰王仲红王华东王彦平暨南大学附属第一医院麻醉科广东广州510630 番禺区何贤纪念医院麻醉科广东广州511400 暨南大学医学院病理生理教研室广东广州510630

目的探讨联合雾化吸入PFC(perfluorocarbon)与中药川芎嗪治疗急性肺损伤时血流动力学及组织病理的改变。方法采用肺灌洗诱导急性肺损伤(acute lung injury,ALI)后,动物分3组:①雾化吸入PFC(perfluorocarbon group,P组)组;②联合雾化吸入... 详细信息

目的探讨联合雾化吸入PFC(perfluorocarbon)与中药川芎嗪治疗急性肺损伤时血流动力学及组织病理的改变。方法采用肺灌洗诱导急性肺损伤(acute lung injury,ALI)后,动物分3组:①雾化吸入PFC(perfluorocarbon group,P组)组;②联合雾化吸入PFC-川芎嗪(tetramethylpyrazine-perfluorocarbon group,TP组)组;③雾化中药川芎嗪(chinese medicial con-tral group,T组)组。分别在ALI前、灌洗后、ALI及ALI后1、2、3、4 h 7个时段观察MAP、PetCO2、mPAP、CVP以及PAWP等血流动力学指标的变化,实验结束后取肺组织做病理学分析。结果肺灌洗后3组动物MAP、mPAP、CVP以及PAWP显著升高(P>0.05),TP组治疗干预后各时段MAP、mPAP、CVP以及PAWP变化与P、T组相应时段比较具有统计学意义(P<0.05)。组织病理学显示TP组的病理改变最小,T组改变最大。结论联合雾化吸入PFC与中药川芎嗪能有效的改善氧合,显著的降低肺动脉压,减少肺组织损伤。

关键词：雾化氟碳急性肺损伤川芎嗪肺动脉压

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GSK-3β抑制剂对结肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响

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中国病理生理杂志 2011年第1期27卷 97-101页

作者：刘坤平钟雪云罗枫赵彤南方医科大学南方医院病理科广东广州510515 暨南大学医学院附属清远医院病理科广东清远511500 暨南大学医学院病理学教研室广东广州510632

目的:探讨糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)抑制剂(2 Z,3 E)-6-溴靛-3-肟(BIO)对结肠癌SW480细胞β-catenin、Bcl-2蛋白表达及细胞周期、凋亡的影响。方法:应用不同浓度BIO作用于结肠癌SW480细胞,采用流式细胞术检测细胞周期及凋亡,Western b... 详细信息

目的:探讨糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)抑制剂(2 Z,3 E)-6-溴靛-3-肟(BIO)对结肠癌SW480细胞β-catenin、Bcl-2蛋白表达及细胞周期、凋亡的影响。方法:应用不同浓度BIO作用于结肠癌SW480细胞,采用流式细胞术检测细胞周期及凋亡,Western blotting检测β-catenin和Bcl-2蛋白表达,免疫细胞化学检测β-catenin及cyclin D1的表达,HE染色观察细胞形态。结果:与BIO处理前SW480细胞相比,BIO处理组SW480细胞β-catenin蛋白表达明显上调并出现部分细胞核移位,cyclin D1蛋白表达及S期和G2/M期细胞不同程度增多,Bcl-2蛋白表达有所下调,细胞凋亡率明显下降,并出现细胞形态改变。结论:GSK-3β抑制剂BIO作用于结肠癌SW480细胞呈现促增殖及抑凋亡作用,其机制主要与β-catenin信号转导通路激活以及与Bcl-2调控通路的平衡有关,其中β-catenin上调可能是影响结肠癌SW480细胞转归的主要因素。

关键词：结直肠肿瘤糖原合酶激酶3β β-catenin Bcl-2 细胞增殖细胞凋亡

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人羊膜上皮细胞的体外培养及标记

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广东医学 2011年第5期32卷 555-558页

作者：阮余霞周清陈剑王彦平杨筱曦李红唐光霞吴静暨南大学附属第一医院眼科广州510630 暨南大学医学院病理生理学教研室广州510632 暨南大学附属第一医院病理科广州510630 暨南大学医学院眼科研究室广州510632

目的改良人羊膜上皮细胞的培养方法,检测生长特性,观察荧光染料4,-6-联脒-2-苯基吲哚(DAPI)标记人羊膜上皮细胞(HAECs)的效率。方法取足月剖宫产术后羊膜经胶原酶和胰蛋白酶消化获得上皮细胞。MTT法绘制细胞生长曲线、流式细胞仪检测细... 详细信息

目的改良人羊膜上皮细胞的培养方法,检测生长特性,观察荧光染料4,-6-联脒-2-苯基吲哚(DAPI)标记人羊膜上皮细胞(HAECs)的效率。方法取足月剖宫产术后羊膜经胶原酶和胰蛋白酶消化获得上皮细胞。MTT法绘制细胞生长曲线、流式细胞仪检测细胞的生长周期,免疫组化对细胞角蛋白进行鉴定。并用DAPI标记,测1、2周荧光阳性率。结果培养的HAECs多角形,生长分为缓滞期、对数增长期和平台期,近80%处于细胞周期的静止期G0。细胞角蛋白keratin阳性表达。DAPI标记1周标记率为100%;2周细胞形态好,标记率不变,荧光强度减弱。结论该实验方法成功培养人羊膜上皮细胞。DAPI短期标记效果理想。

关键词：人羊膜上皮细胞 4,6-联脒-2-苯基吲哚细胞培养

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鸡胚早期发育过程中细胞迁移的基因调控

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中国细胞生物学学报 2011年第10期33卷 1069-1077页

作者：王广李艳杨雪松暨南大学医学院组织与胚胎教研室再生医学教育部重点实验室广州510632

鸡胚是发育生物学研究的经典动物模型,通过基因导入技术调节胚胎发育的基因功能,研究鸡胚早期发育过程中的细胞迁移,有助于更好地诠释相关先天性疾病的发生发展过程。在早期胚胎发育的过程中,原肠胚期三胚层的形成、心管的发生及神经嵴... 详细信息

鸡胚是发育生物学研究的经典动物模型,通过基因导入技术调节胚胎发育的基因功能,研究鸡胚早期发育过程中的细胞迁移,有助于更好地诠释相关先天性疾病的发生发展过程。在早期胚胎发育的过程中,原肠胚期三胚层的形成、心管的发生及神经嵴的发育都伴随着显著的细胞迁移过程。该文将结合近年来国内外对该过程的研究进展,介绍这三个不同时期细胞的迁移及相关基因调控。

关键词：细胞迁移基因调控原条心管神经嵴

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茵栀黄注射液对新生大鼠胆红素脑损伤的保护作用

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2011年第6期32卷 589-592页

作者：刘妮徐君李华娇何斯纯暨南大学医学院生理学教研室广东广州510632 暨南大学附属第一医院危重症医学科广东广州510630

目的:探讨茵栀黄注射液对新生大鼠胆红素脑损伤的保护作用。方法:175只7日龄SD大鼠随机分成正常对照组、脑损伤组、治疗组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ,腹腔注射质量分数为120 mg/kg的胆红素溶液诱发新生大鼠脑损伤,治疗组Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ新生大鼠建模同时每... 详细信息

目的:探讨茵栀黄注射液对新生大鼠胆红素脑损伤的保护作用。方法:175只7日龄SD大鼠随机分成正常对照组、脑损伤组、治疗组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ,腹腔注射质量分数为120 mg/kg的胆红素溶液诱发新生大鼠脑损伤,治疗组Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ新生大鼠建模同时每天分别腹腔注射质量分数分别为513.2、265.5和132.8mg/kg的茵栀黄注射液,持续给药2周。在给药治疗48h和2周后,重氮反应法检测脑组织中胆红素浓度,定磷法检测脑组织Na+-K+-ATP酶的活性,并在给药治疗2周后苏木精-伊红(HE)染色观察大脑皮层组织形态学的改变。结果:治疗组大鼠脑组织胆红素浓度均明显低于脑损伤组,而脑组织Na+-K+-ATP酶活性明显高于脑损伤组,且有显著的量效关系;治疗组大鼠大脑皮层组织形态结构的异常改变较脑损伤组大鼠有不同程度的改善。结论:茵栀黄注射液能显著改善胆红素脑损伤新生大鼠脑组织Na+-K+-ATP酶活性和形态结构的异常改变。

关键词：胆红素脑损伤茵栀黄注射液 Na+-K+-ATP酶新生大鼠

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超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A对活化T细胞端粒长度影响及其相关机制研究

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实用医学杂志 2011年第22期27卷 4015-4017页

作者：秦雅楠王冠明张鹏林晨高永鹏田红霞李扬秋暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州市510632 暨南大学医学院血液病研究所广州市510632

目的:研究超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)对T细胞端粒长度的作用及机制。方法:SEA、K562细胞、SEA联合K562细胞以及抗CD3单克隆抗体分别刺激脐带血单核细胞,SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测端粒、hTERT及IL-7R表达。结果:SEA组、K562细... 详细信息

目的:研究超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)对T细胞端粒长度的作用及机制。方法:SEA、K562细胞、SEA联合K562细胞以及抗CD3单克隆抗体分别刺激脐带血单核细胞,SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测端粒、hTERT及IL-7R表达。结果:SEA组、K562细胞组、SEA联合K562细胞组及抗CD3单抗组活化T细胞的端粒相对长度比值为1.63±0.08、1.06±0.06、3.24±0.61、1.37±0.07;hTERT的表达差异倍数为1.88±0.07、1.95±0.05、3.93±0.23、1.30±0.06;IL-7R表达差异倍数为6.61±0.52、12.81±0.34、17.42±0.50、4.87±0.66;SEA联合K562细胞组均明显高于其他3组(P<0.01),SEA组对端粒长度影响大于单纯K562细胞组。结论:超抗原SEA可以直接刺激T细胞的端粒酶活性及上调表达IL-7R,联合特异性抗原K562细胞株诱导T细胞活化上调效果更明显。

关键词：白血病髓系慢性 BCR-ABLB阳性肠毒素类端粒长度 IL-7R hTERT

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TGF-β1与乳腺癌中microRNA-21表达的关系

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2011年第2期32卷 176-180页

作者：闫雍容周序珑夏明汗蒋光愉钟雪云杜彬暨南大学医学院病理学教研室广东广州510632 暨南大学附属第一医院病理科广东广州510630

目的:研究乳腺癌中microRNA-21(miR-21)的表达及其与转化生长因子-β1(TGF-β1)的关系。方法:用不同质量浓度的TGF-β1 0、1.25、2.5、5、10 ng/mL干预MCF-7细胞24 h,以及不同时间(0、6、12、24、48、72 h)TGF-β1干预MCF-7细胞,用茎环... 详细信息

目的:研究乳腺癌中microRNA-21(miR-21)的表达及其与转化生长因子-β1(TGF-β1)的关系。方法:用不同质量浓度的TGF-β1 0、1.25、2.5、5、10 ng/mL干预MCF-7细胞24 h,以及不同时间(0、6、12、24、48、72 h)TGF-β1干预MCF-7细胞,用茎环实时荧光定量聚合酶链反应法(Real-time PCR)测定miR-21的表达。分别用实时定量PCR和免疫组织化学SP法检测37例乳腺癌中miR-21和TGF-β1的表达情况及其相关性。结果:茎环实时定量PCR法检测miR-21表达的敏感性和特异性良好,MCF-7细胞中miR-21的表达随TGF-β1作用呈时间依赖性和浓度依赖性。乳腺癌组织中miR-21的表达与淋巴结转移及TGF-β1的表达程度有关(P<0.05)。结论:高表达的TGF-β1可引起miR-21表达升高,与乳腺癌的侵袭转移有密切关系。

关键词：乳腺癌微小RNA miR-21 转化生长因子-β1(TGF-β1)

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长期培养人脐带间充质干细胞的生物活性及其限制性

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中国组织工程研究与临床康复 2011年第10期15卷 1750-1754页

作者：许超廖继东柳菁毛文哲李扬秋暨南大学医学院田家炳医学实验中心广东省广州市510632 暨南大学医学院生化教研室广东省广州市510632 暨南大学医学院血液病研究所广东省广州市510632

背景:间充质干细胞具有多向分化能力、免疫调节能力,并可在体外进行长期培养扩增,但其体外长期培养的生物学活性变化特点及其限制性仍不十分清晰。目的:观察体外长期培养人脐带间充质干细胞的生物活性变化特点及其限制性。方法:无菌收... 详细信息

背景:间充质干细胞具有多向分化能力、免疫调节能力,并可在体外进行长期培养扩增,但其体外长期培养的生物学活性变化特点及其限制性仍不十分清晰。目的:观察体外长期培养人脐带间充质干细胞的生物活性变化特点及其限制性。方法:无菌收集剖宫产新生儿脐带,经胶原酶Ⅱ消化后,用黏附生长选择法获取人脐带间充质干细胞,胰酶消化传代;取第3代细胞进行流式分析,脂肪和成骨诱导鉴定;收集不同代的细胞分别用MTT法、流式细胞仪和爬片分析法检测细胞增殖活性、细胞周期、凋亡率及黏附能力。结果与结论:人脐带间充质干细胞的细胞表型CD105+/CD29+/CD44+/CD31-/CD34-/CD45-/HLADR-,可诱导分化为脂肪细胞和成骨细胞;传代培养第3～23代细胞形态无明显变化,生长曲线基本一致,第28代后细胞增长缓慢;流式分析发现第33代细胞较第3代G0/G1减少17.9%、S+G2/M增加103.4%、细胞凋亡率增加316.7%,差异均有显著性意义(P<0.01),第3～18代细胞间G0/G1、S+G2/M、细胞凋亡率和黏附细胞数差异均无显著性意义(P>0.05)。提示在体外长期培养环境中,随着传代次数的递增,人脐带间充质干细胞的增殖及黏附能力下降,细胞凋亡率增加,总的生物活性呈逐渐下降趋势,其最佳生物活性期出现在培养第3～18代之间。

关键词：人脐带间充质干细胞培养生物活性限制性脐带

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纳米金抑制Ang-2和RGS-5表达导致裸鼠肝癌血管正常化

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中国病理生理杂志 2011年第12期27卷 2247-2252页

作者：傅岳武潘运龙覃莉孙立刘英梅暨南大学附属第一医院普外科广东广州510632 暨南大学医学院组织学与胚胎学教研室广东广州510632 暨南大学医学院中医系广东广州510632 中山大学附属孙逸仙纪念医院心内科广东广州510120

目的:观察纳米金在一定时间窗内,对裸鼠H22肝癌组织中血管生成素-1(Ang-1)、血管生成素-2(Ang-2)、G蛋白信号调节蛋白-5(RGS-5)表达及肝癌血管正常化的影响。方法:6周龄BALB/c裸鼠48只,从右腋皮下注入H22肝癌细胞,肿瘤形成约3～4 mm大小... 详细信息

目的:观察纳米金在一定时间窗内,对裸鼠H22肝癌组织中血管生成素-1(Ang-1)、血管生成素-2(Ang-2)、G蛋白信号调节蛋白-5(RGS-5)表达及肝癌血管正常化的影响。方法:6周龄BALB/c裸鼠48只,从右腋皮下注入H22肝癌细胞,肿瘤形成约3～4 mm大小,随机分为对照组(12只,注入生理盐水)和实验组(36只)。实验组从肿瘤周围及瘤内注入纳米金溶液0.2 mL(浓度为500 nmol/L),每天1次;连续给药3 d、7 d、11d后,分批处死12只,取肿瘤标本,用免疫化学染色法检测Ang-1、Ang-2及RGS-5的表达,并用电镜观察肿瘤血管壁周细胞形态。结果:(1)Ang-1在纳米金治疗后第3 d、第7 d及第11 d阳性率分别为16.7%、50.0%和16.7%,均高于对照组(8.3%),差异显著(P<0.05);其中实验组第7 d时Ang-1阳性率最高,与其在第3 d、第11d时比较,差异显著(P<0.05)。Ang-2在纳米金治疗后第3 d、第7 d及第11 d阳性率分别为33.3%、16.7%和41.7%,均低于对照组(58.3%),差异显著(P<0.05);其中Ang-2在第7 d时阳性率最低,与其在第3 d、第11 d时比较,显著差异(P<0.05)。(2)RGS-5在纳米金治疗后第3 d、第7 d和第11 d阳性率分别为33.3%、16.7%和50.0%,其中第7 d阳性率最低;低于对照组(50.0%)及第3 d、第11 d实验组,差异显著(P<0.05)。(3)不成熟周细胞覆盖率在纳米金治疗后第7 d时最低,为19.6%±4.3%,低于对照组(64.8%±11.7%)及第3 d(32.5%±7.9%)、第11 d(41.2%±9.1%)实验组,差异显著(P<0.05)。电镜观察见实验组裸鼠在纳米金治疗后第7 d血管外壁周细胞形态多数趋于正常,完整覆盖内皮细胞;而对照组周细胞形态大小不一、结构不完整,对内皮细胞覆盖少。结论:纳米金在其用药7 d时间窗内,能最大限度地通过抑制Ang-2和RGS-5在裸鼠肝癌组织中的过度表达,减少不成熟周细胞对新生血管的覆盖,使裸鼠肝癌血管正常化。

关键词：纳米金 G蛋白信号调节蛋白-5 血管生成素-2 血管正常化肝肿瘤

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