检索结果-内蒙古大学图书馆

武汉大学学报（医学版） 2002年第2期23卷 157-159,166页

作者：刘俊孟运莲罗善云武汉大学医学院组织学与胚胎学教研室武汉430071

目的 :利用米非司酮 (RU4 86 )阻断孕激素受体 ,观察孕激素作用被抑制后雌激素对输卵管的效应。方法 :实验动物选用成年SD雌鼠 ,体重 2 0 0～ 2 5 0g,随机分为RU4 86处理组和对照组 ,对照组动物根据阴道脱落细胞学检查又分为动情前期 (... 详细信息

目的 :利用米非司酮 (RU4 86 )阻断孕激素受体 ,观察孕激素作用被抑制后雌激素对输卵管的效应。方法 :实验动物选用成年SD雌鼠 ,体重 2 0 0～ 2 5 0g,随机分为RU4 86处理组和对照组 ,对照组动物根据阴道脱落细胞学检查又分为动情前期 (PE)组、动情期 (E)组、动情后期 (ME)组和动情间期 (DE)组。结果 :①光镜观察见RU4 86处理组输卵管粘膜上皮为假复层柱状 ,粘膜上皮细胞分化完全 ,由纤毛细胞和分泌细胞构成。经检测计量分析RU4 86处理组输卵管壶腹部粘膜上皮细胞高度较对照组各组明显增高 ,峡部粘膜上皮细胞高度未见明显变化。②增殖细胞核抗原 (PCNA)免疫组化实验结果发现大鼠输卵管壶腹部粘膜上皮细胞PCNA面积阳性率以RU4 86处理组最高 ,对照组中各组变化趋势为动情期 >动情前期 >动情间期 >动情后期 ,各组峡部粘膜上皮仅偶见PCNA阳性细胞。结论 :当孕激素效应被RU4 86拮抗后 ,雌激素对输卵管壶腹部粘膜上皮持续发挥了促细胞增长、增殖作用 ,继而可能导致输卵管的功能活动增强 ,并与正常生理状态具有一定的差异 ,但这一效应在峡部体现并不明显。提示雌、孕激素的相互拮抗作用对维持输卵管的正常功能活动 ,尤其对于壶腹部具有不容忽视的作用。

关键词：米非司酮输卵管上皮大鼠

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大鼠造血骨髓整体显示标本的制作

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解剖学杂志 2003年第4期26卷 410-411页

作者：王雅琴肖长义三峡大学医学院组织学与胚胎学教研室宜昌443003

对于造血骨髓的研究,是医学研究的一个重要环节,如何显示在生理状态和病理状态下造血骨髓的分布一般使用传统的切片法来显示,但该方法却不能全方位观察,故效果不佳.笔者采用整体透明标本来显示造血骨髓的形态与分布,可从全方位观察造血... 详细信息

对于造血骨髓的研究,是医学研究的一个重要环节,如何显示在生理状态和病理状态下造血骨髓的分布一般使用传统的切片法来显示,但该方法却不能全方位观察,故效果不佳.笔者采用整体透明标本来显示造血骨髓的形态与分布,可从全方位观察造血骨髓的分布情况,能从整体上了解机体造血骨髓的状态分布.

关键词：造血骨髓整体显示标本制作丙酮脱脂氢氧化钠

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蛋白激酶B在佛波酯诱导人胃癌细胞系凋亡中的作用

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解剖学报 2008年第2期39卷 207-213页

作者：张兵夏春厦门大学医学院组织学胚胎学教研室厦门361005 厦门大学附属中山医院厦门361004

目的探讨佛波酯(TPA)诱导胃癌细胞系凋亡过程中蛋白激酶B(PKB)的作用。方法通过BrdU处理,流式细胞术检测以及DAPI染色,荧光显微镜观察分析TPA对胃癌BGC-823细胞的影响;免疫印迹法检测TPA对PKB蛋白表达水平、磷酸化的影响;核浆分离获得... 详细信息

目的探讨佛波酯(TPA)诱导胃癌细胞系凋亡过程中蛋白激酶B(PKB)的作用。方法通过BrdU处理,流式细胞术检测以及DAPI染色,荧光显微镜观察分析TPA对胃癌BGC-823细胞的影响;免疫印迹法检测TPA对PKB蛋白表达水平、磷酸化的影响;核浆分离获得核浆蛋白,用于免疫印迹法检测TPA对胃癌细胞内PKB和其Ser 473位点磷酸化的核浆表达影响,以及激光扫描共焦显微镜观察TPA是否改变胃癌细胞内PKB的分布。结果TPA诱导BGC-823细胞凋亡;TPA下调BGC-823细胞内PKB蛋白表达,并且与TPA作用时间和TPA浓度呈正相关,与PP2A降解作用无关;TPA抑制PKB的Ser 473位点磷酸化,而对其Thr 308位点磷酸化没有明显影响;TPA下调细胞核内PKB的表达以及Ser 473位点的磷酸化;TPA并不改变PKB在胃癌细胞内的分布。结论PKB的抑制作用可能参与TPA诱导胃癌细胞凋亡过程;由TPA诱导的胃癌细胞凋亡可能部分是由于细胞核内PKB蛋白表达和Ser 473位点磷酸化下降所致。

关键词：佛波酯细胞凋亡蛋白激酶B 免疫印迹法激光扫描共焦显微镜 BGC-823细胞

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脂多糖联合冻融肿瘤细胞抗原与树突状细胞的成熟

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解剖学杂志 2013年第5期36卷 892-895,900页

作者：魏霞付承英三峡大学医学院组织学与胚胎学教研室宜昌443002

目的：探讨脂多糖（LPS）联合冻融肿瘤细胞抗原对树突状细胞（DCs）的超微结构特征和表面共刺激分子的影响。方法：常规方法分离DCs，采用GM-CSF和IL-4诱导后，实验分实验组即DCs-（Ag＋LPS）组用结肠癌细胞冻融物联合脂多糖，I）CsAg... 详细信息

目的：探讨脂多糖（LPS）联合冻融肿瘤细胞抗原对树突状细胞（DCs）的超微结构特征和表面共刺激分子的影响。方法：常规方法分离DCs，采用GM-CSF和IL-4诱导后，实验分实验组即DCs-（Ag＋LPS）组用结肠癌细胞冻融物联合脂多糖，I）CsAg组用结肠癌细胞冻融物，DCs—LPS组用脂多糖分别刺激未成熟DCs。电镜观察；流式细胞仪检测DCs表面的共刺激分子CD80、CD83。结果：透射电镜观察实验组较各对照组小鼠骨髓DCs表面突起明显增多，DCs-（Ag＋LPS）组DCs表面突起最多，胞质内可见大量较其他各组电子密度更低的多泡体，有时可见多泡体贴近细胞膜。流式检测显示LPS联合冻融肿瘤细胞抗原组IX；s表面共刺激分子CD80、CD83的表达也较对照组明显升高。结论：LPS联合冻融的肿瘤抗原较单一的LPS或冻融肿瘤抗原更能促进DCs从未成熟向成熟DCs的转化。

关键词：树突状细胞超微结构抗原负载脂多糖

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活化的蛋白激酶C受体1真核表达载体的构建与鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2012年第5期28卷 497-499页

作者：张露萍王海燕孙红亚梁虹王建军朱永泽盛树青郑英扬州大学医学院组织学与胚胎学教研室江苏扬州225001

目的:构建活化的激酶C受体1(RACK1)WD1-4真核表达载体,通过细胞转染和Western blot鉴定其是否在细胞中表达。方法:应用PCR法扩增RACK1蛋白中第1～4个WD40区域的片段,将其与PGEM-T载体连接,测序后再将其克隆至pEGFP-N1中。采用脂质体法... 详细信息

目的:构建活化的激酶C受体1(RACK1)WD1-4真核表达载体,通过细胞转染和Western blot鉴定其是否在细胞中表达。方法:应用PCR法扩增RACK1蛋白中第1～4个WD40区域的片段,将其与PGEM-T载体连接,测序后再将其克隆至pEGFP-N1中。采用脂质体法将重组质粒转染至293T细胞中,观察其在真核细胞中的表达,并用Western blot法进行鉴定。结果:pEGFP-N1-RACK1(WD1-4)重组质粒经酶切鉴定及测序证实,目的基因的序列完全正确。荧光显微镜观察发现,转染了重组质粒的细胞株可见绿色荧光融合蛋白的表达,Western blot结果进一步证实了上述结果。结论:成功构建pEGFP-N1-RACK1(WD1-4)重组质粒且进行了真核表达,为下一步研究RACK1蛋白的功能奠定了基础。

关键词： RACK1蛋白真核表达载体构建蛋白表达

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佛波酯处理人胃癌MGC80-3细胞过程中磷酯酶C-γ2的意义

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解剖学报 2007年第5期38卷 546-551页

作者：张兵夏春厦门大学医学院组织学与胚胎学教研室厦门361005 厦门大学附属中山医院厦门361005

目的探讨佛波酯(TPA)处理人胃癌MGC80-3细胞过程中磷酯酶Cγ-2(PLCγ-2)的意义。方法通过DAPI染色,荧光显微镜观察分析TPA对胃癌MGC80-3细胞的影响;借助核浆分离手段获得胃癌细胞核浆蛋白,并通过免疫印迹(Western blotting)检测TPA对PLC... 详细信息

目的探讨佛波酯(TPA)处理人胃癌MGC80-3细胞过程中磷酯酶Cγ-2(PLCγ-2)的意义。方法通过DAPI染色,荧光显微镜观察分析TPA对胃癌MGC80-3细胞的影响;借助核浆分离手段获得胃癌细胞核浆蛋白,并通过免疫印迹(Western blotting)检测TPA对PLCγ-2蛋白表达水平影响;通过免疫荧光技术处理,激光扫描共焦显微镜观察胃癌细胞内PLCγ-2蛋白的定位和转运;用PLCγ-2的抑制剂(U73122)预处理细胞,免疫印迹和激光扫描共焦显微镜分别检测其对TPA作用胃癌细胞内PLCγ-2的影响;以及荧光显微镜下观察分析U73122是否影响TPA对胃癌细胞的作用。结果TPA诱导胃癌MGC80-3细胞凋亡;同时TPA提高PLCγ-2蛋白表达水平,并诱导其发生核浆转运;其抑制剂(U73122)可以降低TPA对PLCγ-2蛋白表达水平的作用,但并不能影响TPA诱导胃癌细胞凋亡;而TPA诱导的PLCγ-2核浆转运却没有被PLCγ-2抑制剂(U73122)阻止。结论尽管TPA提高了胃癌MGC80-3细胞中PLCγ-2表达水平,但PLCγ-2表达水平和TPA诱导的胃癌MGC80-3凋亡没有直接关系,而其核浆转运可能与TPA诱导的胃癌细胞凋亡相关。

关键词：佛波酯磷酯酶C—γ2 蛋白表达 MGC80—3细胞免疫印迹法激光扫描共焦显微镜

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新生昆明小鼠睾丸支持细胞和精原细胞的共培养及支持细胞的作用

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解剖学报 2009年第2期40卷 240-245页

作者：张晓丽高英茂赵舒武邴鲁军山东大学附属省立医院生殖中心济南250021 山东大学医学院组织学胚胎学教研室济南250012 天津中医药大学组织学胚胎学教研室天津300193

目的分离、纯化、培养小鼠睾丸支持细胞,通过与精原细胞共培养,研究体外培养的支持细胞对精原细胞的影响。方法用复合酶消化、密度梯度离心和差异贴壁法分离、纯化、培养新生小鼠睾丸支持细胞,以苏丹Ⅳ染色鉴定支持细胞;用丝裂霉素-C处... 详细信息

目的分离、纯化、培养小鼠睾丸支持细胞,通过与精原细胞共培养,研究体外培养的支持细胞对精原细胞的影响。方法用复合酶消化、密度梯度离心和差异贴壁法分离、纯化、培养新生小鼠睾丸支持细胞,以苏丹Ⅳ染色鉴定支持细胞;用丝裂霉素-C处理支持细胞后作为饲养层,与精原细胞共培养;以直接分离培养的精原细胞作对照。倒置相差显微镜观察,细胞培养第3天,四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定精原细胞的增殖率;膜联蛋白Ⅴ-异硫氰酸荧光素/磷脂酰肌醇（ANNEXIN-Ⅴ-FITC/PI）染色;激光扫描共焦显微镜观察记录精原细胞的凋亡率,比较精原细胞克隆大小、存活时间、增殖率和凋亡率的不同。结果分离、纯化后经苏丹Ⅳ染色鉴定的小鼠支持细胞纯度可达95%以上,与支持细胞共培养的精原细胞的克隆大小、存活时间和细胞增殖率明显高于对照组,而凋亡率则明显低于对照组。结论支持细胞可以促进精原细胞的增殖,抑制其凋亡。

关键词：支持细胞精原细胞饲养层共培养小鼠

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人工脂褐素制备方法的初步探索

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解剖学报 2002年第4期33卷 442-445页

作者：肖志英肖长义杨毅三峡大学医学院组织学胚胎学教研室宜昌443003

目的　探讨人工脂褐素的制备方法 ,及其组织化学特征和生物学效应。　方法　提取大鼠肝脏线粒体 ,氧化还原交联 ,制备人工脂褐素 ,小鼠腹腔内注射 ,做巨噬细胞吞噬实验。取 1～ 5d的腹腔巨噬细胞 ,作动态观察。　结果　 1～ 5d的腹腔巨... 详细信息

目的　探讨人工脂褐素的制备方法 ,及其组织化学特征和生物学效应。　方法　提取大鼠肝脏线粒体 ,氧化还原交联 ,制备人工脂褐素 ,小鼠腹腔内注射 ,做巨噬细胞吞噬实验。取 1～ 5d的腹腔巨噬细胞 ,作动态观察。　结果　 1～ 5d的腹腔巨噬细胞多种组织化学染色和荧光示踪呈阳性反应 ,胞质内颗粒或荧光团明显 ,分布特征与阳性对照相似。　结论　人工脂褐素具有天然脂褐素的组织化学特征和生物学效应 ,可以作为替代品。

关键词：人工脂褐素制备方法组织化学生物学抗衰老作用

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高迁移率族蛋白B1基因的克隆及其与神经管发育的相关关系

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解剖学杂志 2006年第2期29卷 141-145页

作者：于丽管英俊高英茂孙秀宁潍坊医学院组织学与胚胎学教研室潍坊261042 山东大学医学院组织学与胚胎学教研室济南250012 潍坊医学院寄生虫学教研室潍坊261042

目的:构建神经管cDNA文库,寻找神经管发育相关基因。方法:提取E8.5 d金黄地鼠神经管总RNA;SMART技术构建神经管cDNA噬菌体表达文库;重组噬菌体PCR鉴定。将出现频率很高的重组噬菌斑,经质粒转化、酶切鉴定和DNA序列分析,证实为高迁移率... 详细信息

目的:构建神经管cDNA文库,寻找神经管发育相关基因。方法:提取E8.5 d金黄地鼠神经管总RNA;SMART技术构建神经管cDNA噬菌体表达文库;重组噬菌体PCR鉴定。将出现频率很高的重组噬菌斑,经质粒转化、酶切鉴定和DNA序列分析,证实为高迁移率族蛋白B1基因(HMGB1)。将HMGB1 cDNA片段回收、纯化,制备探针;Northern杂交检测不同发育阶段神经管中HMGB1 mRNA的表达变化。结果:构建的HMGB1cDNA片段含有完整的cDNA序列。Northern杂交显示:随胚胎发育,神经管HMGB1 mRNA表达量逐渐增加,E10 d增加最为明显,E12 d仍处于较高水平;而8.5 d高温致畸胚神经管,HMGB1 mRNA表达量较对照组明显减少。结论:HMGB1基因的表达与神经管发育及高温致神经管畸形的发生密切相关。

关键词：神经管生长与发育高迁移率族蛋白B1基因克隆,分子

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小鼠子宫内膜干细胞的存在及其分布规律

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广东医学 2011年第8期32卷 973-975页

作者：耿江涛卢晓晔覃莉暨南大学医学院组织胚胎学教研室广州510632

目的通过标记滞留细胞技术检测昆明小鼠子宫内膜干细胞的存在及其分布规律。方法取出生3 d雌性乳鼠皮下注射BrdU50μg/g体重,连续3 d。分别在注射后第1、2、3、4、6和8周取子宫。采用免疫组化SP法检测子宫内膜BrdU的表达情况,并在高倍... 详细信息

目的通过标记滞留细胞技术检测昆明小鼠子宫内膜干细胞的存在及其分布规律。方法取出生3 d雌性乳鼠皮下注射BrdU50μg/g体重,连续3 d。分别在注射后第1、2、3、4、6和8周取子宫。采用免疫组化SP法检测子宫内膜BrdU的表达情况,并在高倍镜下计算阳性细胞百分率。结果 BrdU阳性细胞在第1周时在内膜上皮及基质部均广泛表达,但阳性细胞的数量随时间逐渐下降,至第8周时则主要位于基质部血管周围以及基质与肌层交界处。结论小鼠子宫内膜基质中存在成体干细胞。

关键词：子宫内膜标记滞留细胞 BrdU 干细胞免疫组化

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