检索结果-内蒙古大学图书馆

暨南大学学报（自然科学与医学版） 2008年第6期29卷 533-537页

作者：黄欣李扬秋陈思陈少华杨力建卢育洪暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632 暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632

目的:分析T-ALL/淋巴瘤中BCL11B基因转录本的特点。方法:利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和实时定量聚合酶链式反应(RQ-PCR)方法分析12例T-ALL/淋巴瘤外周血单个核细胞(PBMC)中BCL11B基因的表达情况;限制性内切酶消化确定PCR产物的特... 详细信息

目的:分析T-ALL/淋巴瘤中BCL11B基因转录本的特点。方法:利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和实时定量聚合酶链式反应(RQ-PCR)方法分析12例T-ALL/淋巴瘤外周血单个核细胞(PBMC)中BCL11B基因的表达情况;限制性内切酶消化确定PCR产物的特异性。结果:3例T-ALL/淋巴瘤患者中出现2种BCL11B转录本:野生型和第3外显子缺失型,其余9例均表达第3外显子缺失型的转录本。两组病人PBMC中BCL11B表达水平无显著差别(P=0.301)。结论:3例T-ALL/淋巴瘤病人中存在2种BCL11B基因转录本,但在表达水平上无明显差别。

关键词： BCL11B基因 T-ALL/淋巴瘤聚合酶链式反应实时定量聚合酶链式反应

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Elf-1基因在急性髓细胞性白血病中的表达情况

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2009年第6期30卷 581-584页

作者：沈琦郑海涛陈少华杨力建李扬秋暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632 暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632

目的:建立实时定量PCR检测Elf-1基因表达水平的方法,了解急性髓细胞性白血病(AML)患者外周血Elf-1基因表达水平。方法:采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测33例AML患者:M2型17例、M3型6例、M5型10例和20例健康人外周血的... 详细信息

目的:建立实时定量PCR检测Elf-1基因表达水平的方法,了解急性髓细胞性白血病(AML)患者外周血Elf-1基因表达水平。方法:采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测33例AML患者:M2型17例、M3型6例、M5型10例和20例健康人外周血的单核细胞的Elf-1表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,采用公式2-ΔCt×100%计算Elf-1基因表达水平。结果:AML组Elf-1表达水平(13.518±19.197)%明显高于健康对照组(2.044±1.321)%(P<0.01),不同AML亚型之间Elf-1的表达水平没有显著性差异(P=0.52),但各亚型AML的Elf-1的表达水平均与健康对照组比较均有显著性差异(P<0.01)。结论:建立SYBR GreenⅠ荧光实时定量PCR分析外周血Elf-1表达水平的方法,检测急性髓细胞性白血病Elf-1基因高表达情况。

关键词： Elf-1基因实时定量PCR 急性髓细胞性白血病(AML) T细胞免疫缺陷 TCRζ链

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慢性粒细胞白血病患者FcεRⅠγ链基因表达上调

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2011年第4期32卷 379-382页

作者：闫小娟查显丰沈琦陈少华杨力健李萡李扬秋暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632 暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632

目的:在慢性粒细胞白血病病人(CML),CD3ζ链表达明显下降,分析与CD3ζ存在互补关系的FcεRⅠγ基因在CML患者中表达水平,以了解T细胞免疫中TCR信号转导的变化情况。方法:利用SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR法测定CML患者和健康人各20... 详细信息

目的:在慢性粒细胞白血病病人(CML),CD3ζ链表达明显下降,分析与CD3ζ存在互补关系的FcεRⅠγ基因在CML患者中表达水平,以了解T细胞免疫中TCR信号转导的变化情况。方法:利用SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR法测定CML患者和健康人各20例的外周血单个核细胞(PBMCs)的FcεRⅠγ基因表达水平,以β2微球蛋白基因(β2MG)作为内参照,采用相对定量公式:2-ΔCt×100%,计算FcεRⅠγ链的相对mRNA表达量。结果:CML患者PBMCs中FcεRⅠγ基因表达水平明显高于健康对照组(P<0.001)。FcεRⅠγ表达水平变化与病人外周血CD3+T细胞比例无相关性。结论:CML病人中FcεRⅠγ表达上升,提示FcεRⅠγ可能在一定程度调节CD3ζ链缺陷所带来的T细胞免疫异常。

关键词：慢性粒细胞性白血病 FcεRⅠγ CD3ζ 基因表达实时荧光定量RT-PCR

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PPP2R5C转录本在正常人和血液肿瘤病人中的分布情况

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2010年第6期31卷 550-554页

作者：陈宇郑海涛陈少华杨力建李萡卢育洪李扬秋暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632

目的:建立分析不同PPP2R5C转录本检测方法,分析正常人和血液肿瘤病人中5种PPP2R5C基因转录本的表达特点。方法:根据PPP2R5C基因的结构特点,设计4对引物,利用RT-PCR方法分析9例正常人、7例T细胞-非霍奇金淋巴瘤(T-NHL)、11例B细胞-急性... 详细信息

目的:建立分析不同PPP2R5C转录本检测方法,分析正常人和血液肿瘤病人中5种PPP2R5C基因转录本的表达特点。方法:根据PPP2R5C基因的结构特点,设计4对引物,利用RT-PCR方法分析9例正常人、7例T细胞-非霍奇金淋巴瘤(T-NHL)、11例B细胞-急性淋巴细胞白血病(B-ALL)和8例急性髓细胞白血病(AML)病人外周血单个核细胞(PBMC)中PPP2R5C基因的表达情况。结果:所设计的4对引物,均可在样本中扩增到预期PCR产物,其中第1对引物可扩增两个不同大小PCR产物(包含12+13+14外显子的大片段及仅含12+14外显子的小片段),而另3对对引物所扩增的产物分别为10+11+12+12 a外显子,Ⅲ+2外显子和Ⅳ+2外显子的基因片段,所有PCR产物均通过核苷酸序列分析证实。结果显示所有样本均表达全部PPP2R5C转录本。结论:初步建立区分不同PPP2R5C转录本的方法,各转录本在正常人和不同血液肿瘤病人中的分布情况基本一致。

关键词： PPP2R5C基因转录本聚合酶链式反应血液肿瘤

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T细胞介导炎症与血液肿瘤发生相关性研究进展

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2012年第2期33卷 111-115页

作者：李扬秋杨力建陈少华暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632 暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632

慢性炎症是肿瘤发生过程中一个重要因素,越来越多的研究显示T细胞介导炎症与多种肿瘤发生密切相关。本文主要综述近期有关T细胞介导炎症与血液肿瘤发生的相关性及其分子机制的新进展。

关键词： T细胞慢性炎症自身免疫性疾病血液肿瘤肿瘤发生

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血液肿瘤病人TCR/CD3信号缺陷及其治疗策略

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2011年第4期32卷 357-361页

作者：李扬秋杨力建陈少华李萡暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632 暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632

T细胞免疫缺陷导致机体监测恶性转化细胞不力,是血液肿瘤发生发展的重要原因,T细胞受体信号分子CD3复合物尤其是CD3ζ表达下降或缺失严重影响T细胞的活化功能,本文主要综述近年对血液肿瘤中T细胞受体信号传导分子CD3ζ的缺陷及其可能的... 详细信息

T细胞免疫缺陷导致机体监测恶性转化细胞不力,是血液肿瘤发生发展的重要原因,T细胞受体信号分子CD3复合物尤其是CD3ζ表达下降或缺失严重影响T细胞的活化功能,本文主要综述近年对血液肿瘤中T细胞受体信号传导分子CD3ζ的缺陷及其可能的治疗策略的研究进展。

关键词：血液肿瘤 CD3链基因基因表达免疫缺陷

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稳定表达HLA-A＊1101蛋白的K562细胞株的建立

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中国实验血液学杂志 2011年第5期19卷 1112-1116页

作者：査显丰周羽竝杨力建陈少华李萡闫小娟李扬秋暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632 暨南大学医学院生化教研室广东广州510632 暨南大学医学院再生医学教育部重点实验室广东广州510632

本研究目的是建立稳定表达HLA-A*1101分子的K562细胞株,为研究慢性髓系白血病(CML)HLA-I限制性抗原特异T细胞的细胞毒作用提供靶细胞。利用RT-PCR从CML患者外周血单个细胞中扩增HLA-A*1101基因全长序列;利用重组PCR将2A肽连接子(D-V-E-X... 详细信息

本研究目的是建立稳定表达HLA-A*1101分子的K562细胞株,为研究慢性髓系白血病(CML)HLA-I限制性抗原特异T细胞的细胞毒作用提供靶细胞。利用RT-PCR从CML患者外周血单个细胞中扩增HLA-A*1101基因全长序列;利用重组PCR将2A肽连接子(D-V-E-X-N-P-G-P)基因连接到HLA-A*1101的3'端,并将其定向克隆入带有增强型绿色荧光蛋白基因的真核表达载体pEGFP-N3,构成HLA-A*1101-T2A-EGFP转录盒的重组表达载体;利用电穿孔技术将pEGFP-N3或重组质粒转染入K562细胞,利用荧光显微镜监测绿色荧光蛋白的表达,通过G418筛选出有效转染pEGFP-N3或HLA-A*1101-T2A-EGFP载体的K 562细胞株;利用RT-PCR和流式细胞术检测HLA-A*1101基因和蛋白的表达情况。结果表明,成功构建了以2A肽基因为连接子的HLA-A*1101-T2A-EGFP真核表达载体;重组质粒转染的K562细胞经G418筛选2个月后,获得2株表达绿色荧光蛋白的K562稳定细胞株HLA-A*1101+K562和pEGFP-N3+K562。RT-PCR检测证明,HLA-A*1101+K562细胞表达HLA-A*1101基因,而pEGFP-N3+K562细胞则不表达HLA-A*1101;流式细胞术分析显示,HLA-A*1101和GFP蛋白双阳性HLA-A*1101+K562细胞占88.5%,明显高于pEGFP-N3+K562细胞(0.698%)。结论:建立了一个简单有效地筛选HLA-A*1101+K562细胞株的方法,并成功地建立了膜稳定表达HLA-A*1101蛋白的K562细胞株,为进一步研究CML的特异性细胞免疫提供工具细胞。

关键词：慢性髓系白血病 K562细胞 HLA-A＊1101 基因克隆基因转导

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T细胞CD3ζ3'-UTR区域突变类型的特点

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2017年第1期38卷 46-50页

作者：罗伟峰赵素文肖彦恺郭理杏廖紫薇邬明娟方苏李琰李萡广州血液中心广东广州510095 暨南大学再生医学教育部重点实验室暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632

目的:分析CD3ζ3'-UTR区域的突变/SNP的类型情况,深入了解中国汉族健康人CD3ζ3'-UTR的突变/SNP特点.方法:利用RT-PCR,T载体克隆以及核苷酸测序等技术分析20例健康人外周血单个核细胞中CD3ζ3'-UTR突变/SNP突变类型等情况.... 详细信息

目的:分析CD3ζ3'-UTR区域的突变/SNP的类型情况,深入了解中国汉族健康人CD3ζ3'-UTR的突变/SNP特点.方法:利用RT-PCR,T载体克隆以及核苷酸测序等技术分析20例健康人外周血单个核细胞中CD3ζ3'-UTR突变/SNP突变类型等情况.结果:20例健康人外周血单个核细胞中CD3ζ3'-UTR区域共检出21种突变/***3ζ3'-UTR区域的腺嘌呤、胸腺嘧啶、鸟嘌呤和胞嘧啶均发生不同频率的突变,依次为37.36%,16.48%,40.66%和5.50%.腺嘌呤的突变频率显著高于胸腺嘧啶和胞嘧啶(P均为0.00);鸟嘌呤的突变频率显著高于胸腺嘧啶和胞嘧啶(P均为0.00);胸腺嘧啶的突变频率显著高于胞嘧啶(P=0.02).CD3ζ3'-UTR区域缺失、转换和颠换突变检出频率依次为21.98%,35.16%和42.86%,缺失突变的频率显著低于转换和置换突变(P=0.05,P=0.02),转换/颠换比值为0.82.结论:首次报道中国健康人外周血单个核细胞中CD3ζ3'-UTR区域突变类型特点,T>C转换突变在中国汉族健康人CD3ζ3'-UTR区域的高频出现影响转换/颠换比.

关键词： CD3ζ基因 3’-UTR 单核苷酸多态性突变

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CML病人外周血T细胞CD3基因表达模式变化

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中国实验血液学杂志 2010年第4期18卷 937-941页

作者：杨力建陈少华王亮陈思郁志卢育洪李扬秋暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632 暨南大学附属第一医院血液科广东广州510632 暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632

在我们前期研究发现慢性髓系白血病(CML)病人中T细胞受体信号传导分子CD3ζ基因表达下调的基础上,本研究进一步分析病人外周血中全部4种CD3γδεζ基因的表达模式特点,以深入了解病人的T细胞免疫中信号转导的变化。利用SYBR GreenⅠ实... 详细信息

在我们前期研究发现慢性髓系白血病(CML)病人中T细胞受体信号传导分子CD3ζ基因表达下调的基础上,本研究进一步分析病人外周血中全部4种CD3γδεζ基因的表达模式特点,以深入了解病人的T细胞免疫中信号转导的变化。利用SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测17例初诊慢性期CML病人外周血单个核细胞中CD3γ、δ、ε和ζ链的表达水平,以β2微球蛋白基因(β2MG)作为内参照,采用相对定量公式:2-△Ct×100%,计算CD3分子各亚单位的相对mRNA表达量,以17例健康成人外周血作为对照。结果表明:CML中CD3γ、δ、ε基因表达水平分别为2.344%,0.515%和3.516%(中位数),与健康对照组比较(3.093%,0.853%和2.302%)并没有显著性差异(p=0.072,p=0.190,p=0.615),而CML中CD3ζ链基因的表达水平(0.395%)则明显低于健康对照组(1.538%)(p<0.001)。在CML中4种CD3分子表达水平模式依次为CD3ε>CD3γ>CD3δ>CD3ζ,而对照组中则为CD3γ>CD3ε>CD3ζ>CD3δ。结论:本研究首先提供了CML病人中CD3各基因表达模式情况,显示以CD3ζ为主的TCR信号分子的表达缺陷,4种CD3链分子的表达水平模式也发生变化。

关键词：慢性髓系白血病 CD3链基因基因表达免疫缺陷

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脐带血CD4^+和CD8^+ T细胞中T细胞特异转录因子Elf-1表达特点

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中国病理生理杂志 2010年第4期26卷 777-780页

作者：林春兰陈少华杨力建郑海涛沈琦周羽竝李扬秋暨南大学医学院生物化学教研室广东广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632 暨南大学医学院再生医学教育部门重点实验室广东广州510632

目的:了解脐带血单个核细胞(CBMCs)及其CD4+和CD8+ T细胞亚群中转录因子Elf-1的表达特点。方法:采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测12例脐带血CBMCs、CD4+和CD8+ T细胞亚群中Elf-1基因的表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M... 详细信息

目的:了解脐带血单个核细胞(CBMCs)及其CD4+和CD8+ T细胞亚群中转录因子Elf-1的表达特点。方法:采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测12例脐带血CBMCs、CD4+和CD8+ T细胞亚群中Elf-1基因的表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参照,10例健康成人作为对照,采用相对定量公式:2-△Ct×100%,计算Elf-1mRNA相对表达量。结果:脐带血和健康成人外周血单个核细胞(PBMC)、CD4+和CD8+ T细胞均表达Elf-1,具体表达量呈现明显的个体差异性。Elf-1 mRNA相对表达量在CBMCs为18.55%±2.48%(其中最高为36.22%,最低为6.45%),在脐带血CD8+ T细胞为3.52%±0.45%(其中最高为6.75%,最低为1.71%),均明显高于健康成人PBMC(9.16%±1.92%)及其CD8+ T细胞(2.02%±0.27%)(P<0.01,P<0.05),而脐带血CD4+T细胞Elf-1 mRNA相对表达量为3.83%±0.61%,与健康成人外周血CD4+ T细胞(2.73±0.52%)比较,无显著差异。结论:本研究率先报道脐带血T细胞亚群中Elf-1 mRNA表达特点,结果提示Elf-1基因在CBMCs及其CD8+ T细胞亚群中的高表达可能是T细胞的免疫学特点之一。

关键词：脐带血基因,Elf-1 T淋巴细胞

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