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第十五届全国实验血液学学术会议

作者：曹长姝吴琼杨力建李扬秋暨南大学血液病研究所暨南大学医学院解剖学教研室

目的急性T细胞白血病(T-acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)是一类生物学特征异质性非常大的疾病,由T系前体细胞发生恶性转化致使造血系统病变的恶性肿瘤.临床应用标准的化疗方案治疗后,由于化疗药物的副作用和复发患者产生抗药性,...

目的急性T细胞白血病(T-acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)是一类生物学特征异质性非常大的疾病,由T系前体细胞发生恶性转化致使造血系统病变的恶性肿瘤.临床应用标准的化疗方案治疗后,由于化疗药物的副作用和复发患者产生抗药性,均使得治疗效果不甚理想.3,5-二羟基-6,7,3',4'-四甲氧基黄酮(3,5-hydroxy-6,7,3',4'-tetrameth-oxyflavone,DHTMF)是从中草药臭灵丹中提取的具有抗肿瘤活性的多甲氧基黄酮类化合物.在前期的研究中,我们发现DHTMF可以通过内源性的线粒体凋亡通路抑制伊马替尼耐药的K562R细胞增殖和诱导细胞凋亡.本研究探讨DHTMF单独和联合长春新碱对人急性T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat细胞的增殖、凋亡的影响,以期为提高T-ALL的临床治疗效果提供实验基础.

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含硒铜配合物对慢性粒细胞白血病细胞株K562和以及伊马替尼耐药的K562R细胞的抑制作用

含硒铜配合物对慢性粒细胞白血病细胞株K562和以及伊马替尼耐药的...

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第十五届全国实验血液学学术会议

作者：吴琼李扬秋曹长姝杨力建李萡暨南大学血液病研究所暨南大学医学院解剖学教研室暨南大学再生医学教育部重点实验室

目的前期研究提示金属铜配合物可以特异性结合铜转运蛋白，下调其表达，减少了药物的流失，增强了药物对肿瘤细胞的敏感性。本研究目的主要是研究自主合成含硒铜配合物Se2Cu对白血病细胞的抑制作用及其可能的耐药机制。方法采用CCK8...

目的前期研究提示金属铜配合物可以特异性结合铜转运蛋白，下调其表达，减少了药物的流失，增强了药物对肿瘤细胞的敏感性。本研究目的主要是研究自主合成含硒铜配合物Se2Cu对白血病细胞的抑制作用及其可能的耐药机制。方法采用CCK8检测含硒铜配合物Se2Cu对慢性粒细胞白血病K562细胞和耐药的K562R细胞的抑制作用;应用流式细胞术检测含硒铜配合物抑制白血病细胞生长的作用机制;由于铜配合物具有荧光，采用实时荧光法检测含硒铜配合物在细胞内的分布与定位;应用Western Bloting检测含硒铜配合物处理后的铜转运蛋白的表达量，以研究其抗耐药的机制。

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DHTMF对Jurkat细胞的抑制作用研究

DHTMF对Jurkat细胞的抑制作用研究

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广东省医学会第十九次血液病学学术会议

作者：曹长姝吴琼杨力建李扬秋暨南大学血液病研究所暨南大学医学院解剖学教研室暨南大学血液病研究所暨南大学再生医学教育部重点实验室暨南大学血液病研究所暨南大学血液病研究所暨南大学再生医学教育部重点实验室暨南大学第一附属医院血液科

目的急性T细胞白血病(T-acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)是一类生物学特征异质性非常大的疾病,南T系前体细胞发生恶性转化致使造血系统病变的恶性肿瘤.临床应用标准的化疗方案治疗后,由于化疗药物的副作用和复发患者产生抗药性,...

目的急性T细胞白血病(T-acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)是一类生物学特征异质性非常大的疾病,南T系前体细胞发生恶性转化致使造血系统病变的恶性肿瘤.临床应用标准的化疗方案治疗后,由于化疗药物的副作用和复发患者产生抗药性,均使得治疗效果不甚理想.3,5-二羟基-6,7,3',4'-四甲氧基黄酮(3,5-hydroxy-6,7,3',4'-tetrameth-oxyflavone,DHTMF)是从中草药臭灵丹中提取的具有抗肿瘤活性的多甲氧基黄酮类化合物.在前期的研究中,我们发现DHTMF可以通过内源性的线粒体凋亡通路抑制伊马替尼耐药的K562R细胞增殖和诱导细胞凋亡.

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含硒铜配合物对慢性粒细胞白血病细胞株K562和以及伊马替尼耐药的K562R细胞的抑制作用

含硒铜配合物对慢性粒细胞白血病细胞株K562和以及伊马替尼耐药的...

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广东省医学会第十九次血液病学学术会议

作者：吴琼曹长姝杨力建李萡李扬秋暨南大学血液病研究所暨南大学再生医学教育部重点实验室暨南大学医学院解剖学教研室暨南大学再生医学教育部重点实验室暨南大学血液病研究所暨南大学再生医学教育部重点实验室暨南大学第一附属医院血液科

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PML-RARα245与hGM-CSF双基因DNA疫苗的构建与表达

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江苏医药 2013年第8期39卷 878-881,F0002页

作者：胡刚周羽竝岑东芝杨力建陈少华李扬秋惠东县人民医院内二科广东省516300 暨南大学医学院血液病研究所暨南大学医学院生化教研室暨南大学再生医学教育部重点实验室

目的采用长度为245bp的急性早幼粒细胞白血病PML-RARα融合基因片段构建新的PML-RARα与hGM-CSF真核双表达载体。方法用RT-PCR技术从NB4细胞的RNA中扩增长度为245bp的PML-RARα基因片段,PCR技术从pORF-hGM-CSF质粒中扩增出hGM-CSF基因,... 详细信息

目的采用长度为245bp的急性早幼粒细胞白血病PML-RARα融合基因片段构建新的PML-RARα与hGM-CSF真核双表达载体。方法用RT-PCR技术从NB4细胞的RNA中扩增长度为245bp的PML-RARα基因片段,PCR技术从pORF-hGM-CSF质粒中扩增出hGM-CSF基因,分别将两基因片段连接到pIRES质粒的多克隆位点A和B中,构建真核双表达载体。用酶切和序列分析方法验证所构建载体的正确性。将重组质粒转染K562细胞,利用RT-PCR和点杂交技术检测重组质粒在真核细胞中的转录和翻译情况。结果双酶切结果证明重组质粒中含有相应大小的PML-RARα基因片段及hGM-CSF基因,序列分析证明重组质粒中插入片段的碱基序列完全正确。该重组质粒能够在真核细胞中正常转录和翻译。结论成功构建了含有PML-RARα245及hGM-CSF的双表达载体,为筛选合适的抗原片段用于构建治疗急性早幼粒细胞白血病的PML-RARαDNA疫苗提供重要资料。

关键词： PML-RARα融合基因 hGM-CSF基因急性早幼粒细胞白血病 DNA疫苗

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pIRES-PML-RARα重组载体的构建和表达研究

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沈阳医学院学报 2013年第2期15卷 69-72页

作者：胡刚岑东芝杨力建陈少华周羽竝李扬秋广东省惠东县人民医院内一科广东惠东516300 暨南大学医学院血液病研究所暨南大学医学院生物化学教研室暨南大学再生医学教育部重点实验室

目的:采用不同长度的PML-RARα融合基因片段与pIRES质粒构建真核表达载体,并检测其在真核细胞中的表达。方法:利用逆转录多聚酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)从NB4细胞的RNA中分别扩增出包含PML-RAR... 详细信息

目的:采用不同长度的PML-RARα融合基因片段与pIRES质粒构建真核表达载体,并检测其在真核细胞中的表达。方法:利用逆转录多聚酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)从NB4细胞的RNA中分别扩增出包含PML-RARα基因融合点的长度为245 bp和384 bp的基因片段,并将不同长度的基因片段分别克隆到pIRES质粒中,通过酶切和测序验证重组质粒的正确性。将重组质粒转染K562细胞,通过RT-PCR和实时荧光定量PCR检测该质粒在真核细胞中的转录。结果:NheⅠ/MluⅠ双酶切证明重组质粒中含有相应大小的PML-RARα融合基因片段,测序结果证明重组质粒中插入片段的碱基序列均完全正确。将构建的pIRES-PML-RARα质粒转染K562细胞后经RT-PCR和实时荧光定量PCR鉴定表明,插入到重组质粒中的PML-RARα基因能够在真核细胞中进行正常转录。结论:成功构建了含有不同长度的PML-RARα基因的真核表达载体,该载体能够在真核细胞中正常转录,为研发DNA疫苗用于治疗急性早幼粒细胞白血病提供重要资料。

关键词： PML-RARα融合基因急性早幼粒细胞白血病 DNA疫苗

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长期培养的人脐带间充质干细胞PCNA、IL-6、IL-11和galectin-3的表达

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中国病理生理杂志 2012年第6期28卷 1051-1056页

作者：毛文哲许超李扬秋陈少华柳菁刘俊廖继东暨南大学医学院田家炳医学实验中心广东广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632 暨南大学医学院生物化学教研室广东广州510632

目的:探讨长期培养的人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)增殖细胞核抗原(PCNA)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-11(IL-11)和半乳糖凝集素-3(galectin-3)mRNA及蛋白表达的变化情况,为hUC-MSCs的实验研究和临床应用提供实验资料和理论依据。... 详细信息

目的:探讨长期培养的人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)增殖细胞核抗原(PCNA)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-11(IL-11)和半乳糖凝集素-3(galectin-3)mRNA及蛋白表达的变化情况,为hUC-MSCs的实验研究和临床应用提供实验资料和理论依据。方法:取剖宫产新生儿脐带,分离、传代培养hUC-MSCs;收集第3、8、18、28和33代细胞及培养上清,用qRT-PCR、ELISA及Western bloting检测PCNA、IL-6、IL-11和galectin-3 mRNA和蛋白水平。结果:(1)hUC-MSCs PCNA、IL-6、IL-11 mRNA及IL-6、IL-11蛋白的表达随培养传代次数增加而减少,第33代较第3代分别降低了33%、56%、37%和50.3%、58.9%,差异显著(均P<0.01)。(2)各代间galectin-3 mRNA表达无显著差异(P>0.05),且各代间蛋白表达亦无明显差异。结论:(1)体外长期传代培养过程中hUC-MSCs增殖能力和支持造血能力可能逐渐减弱甚至丧失。(2)体外长期传代培养可能对hUC-MSCs的免疫调节功能无显著影响,这有待进一步的实验验证。

关键词：人脐带间充质干细胞长期培养增殖细胞核抗原白细胞介素6 白细胞介素11 半乳糖凝集素3

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PML-RARα245-hIL-2双基因表达载体的构建和表达研究

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沈阳医学院学报 2012年第2期14卷 69-72页

目的:采用长度为245 bp的PML-RARα融合基因片段构建一种新的PML-RARα融合基因与人白介素-2(hIL-2)基因真核双表达质粒。方法:利用RT-PCR从NB4细胞的RNA中扩增出包含PML-RARα基因融合点的长度为245 bp的基因片段,通过RT-PCR从Jurkat... 详细信息

目的:采用长度为245 bp的PML-RARα融合基因片段构建一种新的PML-RARα融合基因与人白介素-2(hIL-2)基因真核双表达质粒。方法:利用RT-PCR从NB4细胞的RNA中扩增出包含PML-RARα基因融合点的长度为245 bp的基因片段,通过RT-PCR从Jurkat细胞中扩增hIL-2基因,并将两基因片段分别克隆到pIRES质粒中,通过酶切和测序验证重组质粒的正确性。将重组质粒转染A549细胞,通过RT-PCR检测该质粒在真核细胞中的转录情况,利用点杂交和ELISA技术检测目的蛋白的表达。结果:Nhe I/Mlu I和Sal I/Not I双酶切证明重组质粒中含有相应大小的PML-RARα融合基因片段和hIL-2基因,测序结果证明重组质粒中插入片段的碱基序列均完全正确。将构建的pIRES-PML-RARα245-hIL-2质粒转染A549细胞后经RT-PCR鉴定表明,插入到重组质粒中的PML-RARα和hIL-2基因能够在真核细胞中进行正常转录并翻译出相应蛋白。结论:成功构建了含有245 bp的PML-RARα基因与hIL-2基因的真核双表达载体,该载体能够在真核细胞中正常转录并翻译出PML-RARα和hIL-2蛋白,为利用DNA疫苗治疗急性早幼粒细胞白血病提供了更丰富的资料。

关键词： PML-RARα融合基因 hIL-2 急性早幼粒细胞白血病 DNA疫苗

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VEGF siRNA致中国仓鼠肺细胞染色体畸变的研究

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卫生研究 2011年第5期40卷 576-578页

作者：荆春霞张洹杨光吴赤蓬何林暨南大学医学院流行病学教研室广州510632 暨南大学医学院血液病学研究所广州510632 暨南大学医学院寄生虫系广州510632 暨南大学医学院卫生学教研室广州510632

目的研究VEGF siRNA对中国仓鼠肺细胞(CHL)的染色体畸变作用。方法采用25、50和100nmol/L的VEGF siRNA转染中国仓鼠的肺细胞,分别观察24h、48h后的染色体畸变情况。结果在VEGF siRNA转染24小时,仅100nmol/L VEGF siRNA产生可疑阳性反应... 详细信息

目的研究VEGF siRNA对中国仓鼠肺细胞(CHL)的染色体畸变作用。方法采用25、50和100nmol/L的VEGF siRNA转染中国仓鼠的肺细胞,分别观察24h、48h后的染色体畸变情况。结果在VEGF siRNA转染24小时,仅100nmol/L VEGF siRNA产生可疑阳性反应,其染色体的畸变率为6%;在VEGF siRNA转染48小时后,50nmol/L的VEGF siRNA和100nmol/L的VEGF siRNA均产生可疑阳性反应,染色体的畸变率分别为6%和10%。而25nmol/L的VEGF siRNA无论是在转染后24h还是48h,均未产生染色体的畸变作用。VEGF siRNA产生的染色体畸变类型有断裂、双着丝粒、多倍体、裂隙、三射体。结论 100nmol/L的VEGF siRNA分子可引起CHL细胞产生染色体畸变。

关键词：血管内皮生长因子 VEGF siRNA 中国仓鼠肺细胞(CHL) 染色体畸变

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VEGF siRNA增强白血病HL60细胞对阿糖胞苷药物的敏感性

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基础医学与临床 2011年第5期31卷 546-550页

作者：荆春霞张洹杨光暨南大学医学院流行病学教研室广东广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632 暨南大学医学院人体寄生虫学系广东广州510632

目的探讨VEGF siRNA是否能增强白血病细胞HL60对化疗药物阿糖胞苷的敏感性。方法体外转录合成VEGF siRNA,转染HL60细胞,采用CCK8法检测细胞增殖的情况,RT-PCR方法检测细胞血管内皮细胞生长因子(VEGF)mRNA的表达水平,ELISA方法定量检测... 详细信息

目的探讨VEGF siRNA是否能增强白血病细胞HL60对化疗药物阿糖胞苷的敏感性。方法体外转录合成VEGF siRNA,转染HL60细胞,采用CCK8法检测细胞增殖的情况,RT-PCR方法检测细胞血管内皮细胞生长因子(VEGF)mRNA的表达水平,ELISA方法定量检测细胞培养液VEGF蛋白的表达水平,用流式细胞仪检测细胞的凋亡。结果 VEGFsiRNA可以提高HL60细胞对阿糖胞苷的敏感性,VEGFsiRNA与阿糖胞苷联用能显著抑制HL60细胞的存活,抑制率为82.9%(F=121.63,P<0.01)。VEGF siRNA能降低VEGF mRNA121(F=17.17,P<0.01)和VEGF蛋白(F=3290.49,P<0.01)的表达水平。但是VEGF siRNA没有促进阿糖胞苷诱导的细胞凋亡水平。结论 VEGF siRNA通过抑制细胞的增殖来增强HL60细胞对阿糖胞苷的敏感性。

关键词：血管内皮生长因子 siRNA 阿糖胞苷药物敏感性

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