检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病理生理杂志 2008年第5期24卷 888-891页

作者：尹青松李扬秋杨力建陈少华周羽竝暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632 暨南大学医学院生物化学教研室广东广州510632

目的:检测多发性骨髓瘤(MM)患者外周血中23个TCRVβ亚家族的T细胞受体删除DNA环(sjTRECs)的存在特点,从而了解MM患者相应Vβ亚家族nave T细胞的近期胸腺输出情况。方法:利用半巢式PCR分别扩增12例MM患者每5×104个外周血单个核细... 详细信息

目的:检测多发性骨髓瘤(MM)患者外周血中23个TCRVβ亚家族的T细胞受体删除DNA环(sjTRECs)的存在特点,从而了解MM患者相应Vβ亚家族nave T细胞的近期胸腺输出情况。方法:利用半巢式PCR分别扩增12例MM患者每5×104个外周血单个核细胞(PBMCs)中的23个Vβ亚家族sjTRECs,10例正常人外周血作为对照。结果:在5×104个PBMCs中,检测到MM患者sjTRECs的Vβ亚家族数量约为(5.00±2.45)个,与正常人的(9.60±5.48)个相比,检出的亚家族数量明显减少(P<0.05);23个Vβ亚家族sjTRECs在正常人中均可以检测到,而在MM患者仅检测到部分;并且Vβ2、Vβ10、Vβ16、Vβ17和Vβ21等5个亚家族sjTRECs的检出率明显低于正常水平。12例MM患者检出的亚家族数量(2-9个)不等,患者的年龄与检出的亚家族数量存在负相关(r=-0.892;P<0.01)。结论:MM患者胸腺近期输出的23个Vβ亚家族nave T细胞存在不同程度的缺失或水平降低,表明患者存在不同程度的细胞免疫功能缺陷以及T细胞谱系重建的能力和潜能受损。

关键词：多发性骨髓瘤 Naive T细胞胸腺

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T-ALL及T细胞株相关TCR Vβ基因谱系和克隆性分析

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免疫学杂志 2004年第6期20卷 439-442页

作者：黄梅娟李扬秋陈少华周羽竝杨力建韩素芳暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632 暨南大学医学院生物化学教研室广东广州510632

目的　了解T细胞急性淋巴细胞白血病 (T ALL)患者外周血中的T细胞及T细胞株的TCRVβ基因谱系及其克隆性增殖情况。方法　利用RT PCR方法扩增 6个不同的T细胞株和 6例初发未治T ALL病人外周血单个核细胞中 2 4个TCRVβ基因的互补决定区 ... 详细信息

目的　了解T细胞急性淋巴细胞白血病 (T ALL)患者外周血中的T细胞及T细胞株的TCRVβ基因谱系及其克隆性增殖情况。方法　利用RT PCR方法扩增 6个不同的T细胞株和 6例初发未治T ALL病人外周血单个核细胞中 2 4个TCRVβ基因的互补决定区 3(CDR3) ,PCR产物进一步经荧光标记和基因扫描分析CDR3长度而确定T细胞的克隆性 ,部分T细胞株的单克隆PCR产物进一步进行序列分析。结果　与正常人外周血表达全部 2 4个Vβ亚家族不同 ,6例T ALL病人分别表达 5～ 12个Vβ亚家族。 6例病人均存在 1个或多个Vβ亚家族的寡克隆或双克隆增殖T细胞 ,另外 ,还有一些Vβ亚家族多克隆模式发生改变 ,呈现寡克隆性增殖的趋势。T细胞株多显示为表达一个Vβ亚家族的单克隆T细胞 ,不同T细胞株的CDR3长度和序列不尽相同。结论　T ALL患者外周血T细胞的TCRVβ谱系出现限制性改变 ,均可检测到克隆性增殖T细胞 ,尚需进一步鉴定其性质 (肿瘤性或抗原特异性增殖 ) 。

关键词： T细胞-急性淋巴细胞白血病 T细胞株 T细胞受体Vβ基因 T细胞克隆性

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独特型TCR Vβ2 DNA疫苗的构建和体外表达检测

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中国病理生理杂志 2006年第7期22卷 1320-1323页

作者：周羽竝黄梅娟杨力建陈少华李扬秋暨南大学医学院生物化学教研室广东广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632

目的:构建抗淋巴细胞白血病的独特型TCRVβ2DNA疫苗,并检测其转染K562细胞和体外表达情况。方法:利用RT-PCR扩增表达TCRVβ2的Molt-4细胞株的独特型TCRVβ2基因片段,定向克隆于pIREs表达载体中,重组质粒转染至K562细胞中,利用间接免疫... 详细信息

目的:构建抗淋巴细胞白血病的独特型TCRVβ2DNA疫苗,并检测其转染K562细胞和体外表达情况。方法:利用RT-PCR扩增表达TCRVβ2的Molt-4细胞株的独特型TCRVβ2基因片段,定向克隆于pIREs表达载体中,重组质粒转染至K562细胞中,利用间接免疫荧光法、SDS-PAGE和Westernblotting等检测其表达情况。结果:经PCR检测证实成功构建pIREs-TCRVβ2重组子,转染至K562细胞后,利用Vβ2单抗可检测到K562细胞表面表达TCRVβ2,SDS-PAGE分离检测为15kD的蛋白质,并经Vβ2特异抗体Westernblotting鉴定为TCRVβ2蛋白。结论:成功构建pIREs-TCRVβ2DNA疫苗,并可以在K562细胞株中表达特异蛋白。

关键词：基因,TCR Vβ 疫苗,DNA 印迹法,蛋白质 K562细胞

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PPP2R5C基因结构特点和生物学功能

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中国实验血液学杂志 2009年第5期17卷 1127-1129页

作者：李扬秋周羽竝杨力建暨南大学医学院血液病研究所暨南大学教育部再生医学重点实验室暨南大学医学院生化教研室广东广州510632

PPP2R5C是蛋白磷酸酶2A的调节性亚单位中一个家族成员,它在调节细胞增殖、分化和转化等方面具有重要作用,其作用主要通过对P53蛋白某些位点氨基酸的去磷酸化而实现。近期研究提示,PPP2R5C基因表达模式的改变与细胞恶性转化相关;此外,有... 详细信息

PPP2R5C是蛋白磷酸酶2A的调节性亚单位中一个家族成员,它在调节细胞增殖、分化和转化等方面具有重要作用,其作用主要通过对P53蛋白某些位点氨基酸的去磷酸化而实现。近期研究提示,PPP2R5C基因表达模式的改变与细胞恶性转化相关;此外,有研究发现PPP2R5C可以作为B-CLL病情进展的相关标记。本文就PPP2R5C基因结构、生物学功能及PPP2R5C基因与肿瘤发生发展的关系进行了探讨。

关键词： PPP2R5C基因蛋白磷酸酶2A 细胞转化

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三氧化二砷对肝癌细胞生长抑制作用差异性探讨

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中国病理生理杂志 2004年第7期20卷 1179-1182页

作者：任玮玮李弘张洹暨南大学医学院病理生理学教研室广东广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632

目的 :观察三氧化二砷对肝癌SMMC - 772 1和BEL - 74 0 2细胞生长抑制作用差异性并且探讨其可能的作用机理。方法 :应用细胞培养和台盼蓝拒染法观察不同时间和不同浓度的三氧化二砷对肝癌细胞SMMC - 772 1和BEL - 74 0 2细胞生长的抑制... 详细信息

目的 :观察三氧化二砷对肝癌SMMC - 772 1和BEL - 74 0 2细胞生长抑制作用差异性并且探讨其可能的作用机理。方法 :应用细胞培养和台盼蓝拒染法观察不同时间和不同浓度的三氧化二砷对肝癌细胞SMMC - 772 1和BEL - 74 0 2细胞生长的抑制作用 ,比较生长抑制率的差异并用谷胱甘肽检测试剂盒测定两种肝癌细胞内谷胱甘肽(GSH)的含量。结果 :三氧化二砷浓度为 0 5 0 μmol/L、作用时间为 2 4h可显著抑制肝癌细胞系BEL - 74 0 2的生长 ,抑制作用呈时间、剂量依赖性 ;对SMMC - 772 1细胞 ,三氧化二砷浓度为 2 0 0 μmol/L、作用时间为 2 4h才出现抑制细胞生长作用 ,二者的生长抑制率存在显著差异 ,0 2 5 - 2 0 0 μmol/LAs2 O3 作用 72h后 ,BEL - 74 0 2细胞的生长抑制率均高于SMMC - 772 1细胞 (P <0 0 5 )。检测SMMC - 772 1和BEL - 74 0 2细胞内GSH含量分别为 (5 0 8± 5 2 ) μmol/gprotein和 (18 7± 1 4 ) μmol/gprotein ,存在明显差异。结论 :三氧化二砷抑制肝癌细胞SMMC - 772 1和BEL - 74 0 2的生长存在显著的差异 ;BEL - 74 0 2细胞对三氧化二砷非常敏感性 ,可能与其细胞内谷胱甘肽含量较低。

关键词：三氧化二砷谷胱甘肽 SMMC-7721细胞 BEL-7402细胞

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VEGF165真核表达载体的构建及其对白血病细胞增殖和化疗药物敏感性的影响

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中国病理生理杂志 2010年第3期26卷 533-538页

作者：荆春霞张洹杨光暨南大学医学院流行病学教研室广东广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632 暨南大学医学院人体寄生虫学系广东广州510632

目的:构建血管内皮细胞生长因子的真核表达载体,探讨其对白血病细胞的增殖以及化疗药物敏感性的影响。方法:应用常规基因克隆方法构建pEGFP-C1-hVEGF165真核表达载体,转染白血病细胞K562,采用CCK8法检测重组质粒对细胞增殖的影响,RT-PC... 详细信息

目的:构建血管内皮细胞生长因子的真核表达载体,探讨其对白血病细胞的增殖以及化疗药物敏感性的影响。方法:应用常规基因克隆方法构建pEGFP-C1-hVEGF165真核表达载体,转染白血病细胞K562,采用CCK8法检测重组质粒对细胞增殖的影响,RT-PCR方法检测细胞血管内皮细胞生长因子(VEGF)mRNA的表达水平,ELISA方法定量检测细胞培养液和细胞内VEGF蛋白的表达水平,用流式细胞仪检测细胞周期。结果:经酶切鉴定和基因测序证实成功构建了VEGF165真核表达载体。稳定转染pEGFP-C1-hVEGF165的K562细胞较转染pEGFP-C1空质粒的K562细胞增殖加快,VEGF165 mRNA表达明显增加,细胞分泌VEGF蛋白水平上调。转染pEGFP-C1-hVEGF165还可以提高白血病细胞在化疗药物高三尖杉酯碱和氟尿嘧啶作用时的细胞存活率。结论:VEGF165真核表达载体可以上调白血病细胞K562的VEGF mRNA和VEGF蛋白的表达水平,从而促进白血病细胞的增殖,同时可以降低白血病细胞对化疗药物高三尖杉酯碱和氟尿嘧啶的敏感性。

关键词：血管内皮细胞生长因子真核表达载体 K562细胞高三尖杉酯氟尿嘧啶

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组胺H_2受体阻滞剂对免疫介导小鼠再生障碍性贫血发生的阻断作用

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中华血液学杂志 2000年第10期21卷 527-529页

作者：汪明春廖继东赵忻林晨江振友马秀君深圳市血液病研究所深圳市红十字会医院血液科518035 暨南大学医学院中心实验室暨南大学医学院微生物教研室

目的　探讨组胺H2 受体阻滞剂对免疫介导小鼠再生障碍性贫血 (再障 )的发生有无阻断作用。方法　通过给全身亚致死量照射的BALB/c小鼠转输H 2相同、MLS不同的DBA/ 2小鼠胸腺、淋巴结混合细胞诱导小鼠再障发生 ,实验组每天腹腔注射 1次... 详细信息

目的　探讨组胺H2 受体阻滞剂对免疫介导小鼠再生障碍性贫血 (再障 )的发生有无阻断作用。方法　通过给全身亚致死量照射的BALB/c小鼠转输H 2相同、MLS不同的DBA/ 2小鼠胸腺、淋巴结混合细胞诱导小鼠再障发生 ,实验组每天腹腔注射 1次甲氰咪胍 ,共 8次 ,于照射后第 14天 ,观察股骨骨髓增生程度。结果　腹腔注射 0 .5 0 ,1.0 0 ,2 .0 0mg·(10g体重 ) -1·d-1甲氰咪胍的小鼠的股骨平均骨髓造血组织容量分别为 (4 6 .5 8± 2 0 .41) %、(5 1.88± 2 4.94) %和 (5 9.12± 32 .48) % ,显著高于再障组的 (19.99± 10 .98) % (P <0 .0 1) ,而与单纯照射组 (5 3 .81± 31.72 ) %相比 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　组胺H2 受体阻滞剂能阻断半相合淋巴细胞诱导经亚致死量照射的小鼠的再障的发生。

关键词：再生障碍性贫血组胺H2受体阻滞剂免疫介导

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聚乙烯亚胺-整合素配体复合物介导bcl-2反义核酸对结肠癌细胞的作用

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2005年第2期26卷 145-150页

作者：唐永松蒋建伟张洹暨南大学医学院生物化学教研室广东广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632

目的:观察聚乙烯亚胺(PEI) -整合素蛋白的配体(Arg -Gly -Asp ,RGD)介导的bcl - 2反义核酸(antisenseoligodeoxynucleotide ,ASODN)对结肠癌细胞caco - 2的作用效果。方法:将阳离子复合物jetPEI-RGD与bcl- 2反义核酸混合形成ASODN -PEI-RGD三聚体复合物,转染caco - 2细胞。用台盼蓝拒染法计数活细胞,观察ASODN -PEI-RGD对caco - 2细胞的生长抑制作用,用流式细胞仪检测细胞的亚二倍体百分率,Heochst332 5 8染色观察细胞凋亡。结果:与ASODN对照组和jetPEI-RGD对照组相比,ASODN -PEI -RGD能够明显抑制caco - 2细胞增殖和诱导细胞凋亡(P<0 0 5 ) ,呈剂量和时间-效应关系。ASODN -PEI-RGD作用4 8h ,荧光染色可见大量的caco - 2细胞核固缩、核碎裂。结论:jetPEI-RGD介导的bcl- 2反义核酸能抑制caco - 2细胞增殖和诱导细胞凋亡。

关键词：反义核酸结肠癌 bcl-2基因整合素

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超抗原SEA联合PML-RARα对外周血T细胞TCR Vβ亚家族基因表达的影响

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免疫学杂志 2008年第5期24卷 530-533页

作者：林晨高珂白雪陈少华杨力建李扬秋暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广州510632

目的探讨超抗原SEA联合PML-RARα多肽对外周血T细胞TCR Vβ亚家族基因表达的影响。方法分别将SEA、PML-RARα多肽以及SEA联合PML-RARα多肽与正常人外周血单个核细胞共同培养,20d后收集增殖细胞,利用RT-PCR及基因扫描技术分析诱导后增殖... 详细信息

目的探讨超抗原SEA联合PML-RARα多肽对外周血T细胞TCR Vβ亚家族基因表达的影响。方法分别将SEA、PML-RARα多肽以及SEA联合PML-RARα多肽与正常人外周血单个核细胞共同培养,20d后收集增殖细胞,利用RT-PCR及基因扫描技术分析诱导后增殖T细胞TCRVβ亚家族的利用和克隆性增殖的特点。结果单纯SEA诱导后,T细胞表达了11个TCR Vβ亚家族,且仍为多克隆增殖。单纯PML-RARα多肽诱导后,T细胞限制性表达8个Vβ亚家族,其中Vβ13、Vβ14表现出寡克隆或寡克隆趋势。PML-RARα多肽联合SEA共同诱导,其T细胞表达TCR Vβ亚家族依然呈明显的限制性,且Vβ13、Vβ14亚家族呈寡克隆、双克隆及寡克隆趋势。结论SEA能协同PML-RARα多肽诱导的T细胞克隆性活化与增殖。

关键词：超抗原SEA PML-RARα 细胞受体克隆性

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甲氰咪呱对K562细胞诱导脐血T细胞TCR Vβ亚家族克隆性的影响

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第三军医大学学报 2009年第17期31卷 1637-1640页

作者：田红霞林晨陈少华杨力建江振友高珂郜世隽李扬秋暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广州510632

目的研究甲氰咪呱(cimetidine)对K562细胞体外诱导脐血T细胞TCR Vβ亚家族克隆性的影响。方法体外分别将甲氰咪呱、K562细胞、甲氰咪呱+K562细胞与正常人的脐带血单个核细胞(mononuclear cells,MNC)混合培养2周,检测诱导增殖T细胞的特... 详细信息

目的研究甲氰咪呱(cimetidine)对K562细胞体外诱导脐血T细胞TCR Vβ亚家族克隆性的影响。方法体外分别将甲氰咪呱、K562细胞、甲氰咪呱+K562细胞与正常人的脐带血单个核细胞(mononuclear cells,MNC)混合培养2周,检测诱导增殖T细胞的特异杀伤活性,同时利用RT-PCR基因扫描技术分析培养后T细胞的TCR Vβ亚家族谱系的选择性利用和克隆性增殖情况。结果经甲氰咪呱、K562细胞、甲氰咪呱+K562细胞诱导培养2周后,各组均不同程度诱导细胞增殖,其中甲氰咪呱联合K562细胞诱导组的T细胞对K562细胞的特异性杀伤作用显著增强(P<0.01)。3组均呈现不同程度的T细胞TCR Vβ亚家族选择性利用,均有TCR Vβ21亚家族呈克隆性增殖。结论甲氰咪呱可协助增强bcr-abl抗原刺激的特异性抗CML T细胞作用。

关键词：甲氰咪呱 T细胞受体Vβ基因慢性粒细胞白血病脐血

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