检索结果-内蒙古大学图书馆

广东医学 2010年第4期31卷 404-406页

作者：李军张洹王彦平颜亮徐浩弓健刘革修暨南大学医学院血液病研究所暨南大学医学院病理生理教研室广州510632 暨南大学附属第一医院核医学科广州510630

目的研究小鼠胎盘源干细胞抗臭氧致衰老的功效。方法吸入臭氧法制造小鼠衰老模型;剖宫产取小鼠胎盘,密度梯度离心法分离、腹腔注射法移植小鼠胎盘源干细胞;Y染色体原位杂交法检测细胞植入情况;超声检查小鼠心脏;各器官做组织学衰老程度... 详细信息

目的研究小鼠胎盘源干细胞抗臭氧致衰老的功效。方法吸入臭氧法制造小鼠衰老模型;剖宫产取小鼠胎盘,密度梯度离心法分离、腹腔注射法移植小鼠胎盘源干细胞;Y染色体原位杂交法检测细胞植入情况;超声检查小鼠心脏;各器官做组织学衰老程度比较、评分。结果移植30d后治疗组小鼠心脏、肾脏、肺脏、皮肤等器官各衰老指标与模型组之间差异无统计学意义。结论单纯移植小鼠胎盘源干细胞不能有效地抗臭氧致衰老。

关键词：衰老臭氧干细胞

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苯中毒患者胸腺近期输出功能和T细胞亚群变化

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中国职业医学 2003年第6期30卷 2-4页

作者：韩素芳李扬秋周羽竝杨力建陈少华刘薇薇陈嘉榆暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632 暨南大学医学院生化教研室 510632 广州市第十二人民医院 510620

目的　分析职业性慢性轻度苯中毒工人外周血单个核细胞中信号结合T细胞受体删除DNA环 (sjTRECs)的含量和CD4+/CD8+比值 ,从而了解其初始 (naive)T细胞含量和胸腺近期输功能 ,以及外周T细胞亚群分布情况。方法　利用间接免疫荧光法检测 1... 详细信息

目的　分析职业性慢性轻度苯中毒工人外周血单个核细胞中信号结合T细胞受体删除DNA环 (sjTRECs)的含量和CD4+/CD8+比值 ,从而了解其初始 (naive)T细胞含量和胸腺近期输功能 ,以及外周T细胞亚群分布情况。方法　利用间接免疫荧光法检测 11例健康人和 5例轻度苯中毒患者外周血单个核细胞中CD4+/CD8+比值 ;采用实时荧光定量聚合酶链反应 (real timePCR)和TaqMan方法检测两组外周血单个核细胞中sjTRECs的含量。结果　每 10 0 0个外周血单个核细胞中sjTRECs含量在正常人中为 9 10± 4 5 5 ,轻度苯中毒为 2 80± 3 79,P <0 0 5 ;轻度苯中毒者CD4+/CD8+的比值 (0 92± 0 3 5 )明显低于正常人 (1 49± 0 2 1) ,P <0 0 1。结论　轻度苯中毒患者胸腺近期输出功能低下。

关键词：苯胸腺功能实时定量PCR T淋巴细胞亚群信号结合T细胞受体删除DNA环

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AML-M5患者外周血naiveT细胞水平和TCRVβ谱系利用特点

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现代临床医学生物工程学杂志 2004年第4期10卷 283-286页

作者：李扬秋杨力建陈少华周羽竝耿素霞秋陈青山暨南大学医学院血液病研究所 510632 暨南大学医学院血液病研究所生化教研室广州510632 暨南大学医学院血液病研究所流行病学教研室广州510632

目的　了解急性髓性白血病M5亚型 (AML -M5 )患者T细胞受体重排删除DNA环 (TRECs)的含量和TCRVβ基因谱系利用和克隆性 ,从而了解AML患者的胸腺近期输出功能和TCRVβ亚家族T细胞增殖特点 .方法　利用实时定量PCR(TaqMan)方法检测 5例M5... 详细信息

目的　了解急性髓性白血病M5亚型 (AML -M5 )患者T细胞受体重排删除DNA环 (TRECs)的含量和TCRVβ基因谱系利用和克隆性 ,从而了解AML患者的胸腺近期输出功能和TCRVβ亚家族T细胞增殖特点 .方法　利用实时定量PCR(TaqMan)方法检测 5例M5患者外周血单个核细胞TRECs的水平 ,并根据外周血中CD3阳性率计算CD3细胞中TRECs水平 .利用RT -PCR和基因扫描分析患者外周血单个核细胞的TCRVβ2 4个亚家族基因表达和克隆性 .9例正常人外周血作为对照 .结果　M5患者外周血中TRECs含量为 0 .76± 1.2 1/ 10 0 0CD3+ 细胞 ,明显低于正常人TRECs水平 (6 .84± 4 .71/ 10 0 0CD3+ 细胞 ,p <0 .0 5 ) .5例患者外周血T细胞表达不同数量Vβ亚家族 (2 - 16个 ) .基因扫描分析显示 4例病人外周血中的一些Vβ亚家族出现克隆性T细胞 ,Vβ1,Vβ15和Vβ2 1克隆性T细胞均分别见于 3例病人中 .结论　率先报道了AML -M5型患者胸腺近期输出naiveT细胞功能明显降低 ,尽管整体T细胞免疫功能低下 ,患者仍存在优势利用和克隆性增殖Vβ亚家族T细胞。

关键词： TRECs 胸腺近期输出功能白血病实时定量PCR

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pIRES-PML-RARα-hIL-2重组质粒的构建和表达研究

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癌症进展 2008年第4期6卷 357-361,366页

作者：胡刚李扬秋周羽竝陈少华杨力建岑东芝暨南大学医学院血液病研究所暨南大学医学院生化教研室广州510632

目的构建PML-RARα融合基因与人白介素-2(hIL-2)基因真核双表达质粒。方法利用RT-PCR技术从NB4细胞的RNA中扩增出PML-RARα融合点附近的部分基因片段,通过RT-PCR扩增Jurkat细胞中的hIL-2基因,并分别将两基因片段连接到pIRES质粒的多克... 详细信息

目的构建PML-RARα融合基因与人白介素-2(hIL-2)基因真核双表达质粒。方法利用RT-PCR技术从NB4细胞的RNA中扩增出PML-RARα融合点附近的部分基因片段,通过RT-PCR扩增Jurkat细胞中的hIL-2基因,并分别将两基因片段连接到pIRES质粒的多克隆位点(MCS)A和B中,构建真核双表达质粒。利用酶切和序列分析方法验证所构建质粒的正确性。将构建成功的重组质粒转染A549细胞,通过RT-PCR检测重组质粒在真核细胞中的转录情况,利用点杂交、ELISA检测目的蛋白的表达情况。结果NheⅠ/MluⅠ和SalⅠ/NotⅠ双酶切证明重组质粒中含有相应大小的PML-RARα基因片段及hIL-2基因,序列分析证明重组质粒中插入片段的碱基序列均完全正确。将所构建的pIRES-PML- RARα-hIL-2质粒转染A549细胞后经RT-PCR鉴定表明,插入到重组质粒中的PML- RARα和hIL-2基因能够在真核细胞中进行正常转录。经点杂交和ELISA检测显示重组质粒在真核细胞中可表达hIL-2蛋白。结论成功构建了pIRES-PML-RARα-hIL-2质粒,该重组质粒能够在真核细胞中正常转录并表达PML—RARα和hIL-2蛋白。

关键词： PML-RARα hIL-2 急性早幼粒细胞白血病 DNA疫苗

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超抗原SEA增强PML-RARα多肽体外诱导特异性CTL杀伤活性的机制

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肿瘤防治研究 2008年第9期35卷 627-629页

作者：林晨白雪高珂杨力建陈少华李扬秋暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广州510632

目的探讨超抗原SEA体外增强PML-RARα多肽诱导特异性CTL杀伤活性的机制。方法分别将SEA、PML-RARα多肽以及SEA联合PML-RARα多肽与正常人外周血单个核细胞共同培养,利用CCK-8比色法检测诱导后T细胞对NB4和K562细胞株杀伤活性,同时利用... 详细信息

目的探讨超抗原SEA体外增强PML-RARα多肽诱导特异性CTL杀伤活性的机制。方法分别将SEA、PML-RARα多肽以及SEA联合PML-RARα多肽与正常人外周血单个核细胞共同培养,利用CCK-8比色法检测诱导后T细胞对NB4和K562细胞株杀伤活性,同时利用流式细胞术测定诱导T细胞表面CD4与CD8表达情况。结果诱导后第20天,SEA能明显增强PML-RARα多肽特异性杀伤NB4细胞株的作用。诱导后第5、10、20天动态检测表明,多肽及SEA联合多肽组CD4+/CD8+比值逐渐降低,其中SEA联合PML-RARα多肽诱导组降低最显著。结论超抗原SEA能明显增强PML-RARα多肽体外诱导特异性CD8+T细胞的增殖与特异性的杀伤作用。

关键词：超抗原 PML-RARα多肽 NB4细胞 T细胞

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B细胞非霍奇金淋巴瘤患者TCR ζ基因的表达特点

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肿瘤防治研究 2010年第5期37卷 547-550页

作者：李菊香陈少华杨力建林春兰李扬秋暨南大学附属第一医院临床医学检验中心广州510632 暨南大学医学院血液病研究所暨南大学医学院生化教研室暨南大学再生医学教育部重点实验室

目的分析B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)患者外周血中T细胞信号转导分子TCRζ基因的表达特点。方法采用SYBRGreenⅠ实时定量RT-PCR和相对定量分析法检测17例B-NHL患者外周血单个核细胞(PBMCs)中TCRζ基因的表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M... 详细信息

目的分析B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)患者外周血中T细胞信号转导分子TCRζ基因的表达特点。方法采用SYBRGreenⅠ实时定量RT-PCR和相对定量分析法检测17例B-NHL患者外周血单个核细胞(PBMCs)中TCRζ基因的表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,采用相对定量公式:2-△Ct×100%,计算TCRζ基因的相对mRNA表达量,17例健康成人作为对照。结果全部B-NHL样本均全部表达TCRζ基因,但其表达水平显著低于对照组(P=0.000),健康人PBMCs的TCRζ基因mRNA的表达水平为B-NHL患者的3.26倍。B-NHL患者TCRζ基因表达水平与患者的年龄无相关性。结论 B-NHL患者中TCRζ基因的mRNA表达水平明显下调,可能是其细胞免疫功能缺陷的原因之一。

关键词： TCRζ基因非霍奇金淋巴瘤实时定量RT-PCR

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脐带血CD4^+和CD8^+ T细胞中T细胞特异转录因子Elf-1表达特点

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中国病理生理杂志 2010年第4期26卷 777-780页

作者：林春兰陈少华杨力建郑海涛沈琦周羽竝李扬秋暨南大学医学院生物化学教研室广东广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632 暨南大学医学院再生医学教育部门重点实验室广东广州510632

目的:了解脐带血单个核细胞(CBMCs)及其CD4+和CD8+ T细胞亚群中转录因子Elf-1的表达特点。方法:采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测12例脐带血CBMCs、CD4+和CD8+ T细胞亚群中Elf-1基因的表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M... 详细信息

目的:了解脐带血单个核细胞(CBMCs)及其CD4+和CD8+ T细胞亚群中转录因子Elf-1的表达特点。方法:采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测12例脐带血CBMCs、CD4+和CD8+ T细胞亚群中Elf-1基因的表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参照,10例健康成人作为对照,采用相对定量公式:2-△Ct×100%,计算Elf-1mRNA相对表达量。结果:脐带血和健康成人外周血单个核细胞(PBMC)、CD4+和CD8+ T细胞均表达Elf-1,具体表达量呈现明显的个体差异性。Elf-1 mRNA相对表达量在CBMCs为18.55%±2.48%(其中最高为36.22%,最低为6.45%),在脐带血CD8+ T细胞为3.52%±0.45%(其中最高为6.75%,最低为1.71%),均明显高于健康成人PBMC(9.16%±1.92%)及其CD8+ T细胞(2.02%±0.27%)(P<0.01,P<0.05),而脐带血CD4+T细胞Elf-1 mRNA相对表达量为3.83%±0.61%,与健康成人外周血CD4+ T细胞(2.73±0.52%)比较,无显著差异。结论:本研究率先报道脐带血T细胞亚群中Elf-1 mRNA表达特点,结果提示Elf-1基因在CBMCs及其CD8+ T细胞亚群中的高表达可能是T细胞的免疫学特点之一。

关键词：脐带血基因,Elf-1 T淋巴细胞

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多发性骨髓瘤患者外周血CD3ε基因的表达特点

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细胞与分子免疫学杂志 2010年第2期26卷 159-161页

作者：林春兰陈少华杨力建周羽竝陈思李扬秋暨南大学医学院生物化学教研室广东广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632 暨南大学医学院再生医学教育部门重点实验室广东广州510632

目的:建立荧光定量PCR法检测CD3ε链表达水平的方法,了解多发性骨髓瘤(MM)T细胞信号传导分子CD3ε基因的表达特点。方法:采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测22例MM患者及22例正常人外周血单个核细胞CD3ε基因的表达情况,... 详细信息

目的:建立荧光定量PCR法检测CD3ε链表达水平的方法,了解多发性骨髓瘤(MM)T细胞信号传导分子CD3ε基因的表达特点。方法:采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测22例MM患者及22例正常人外周血单个核细胞CD3ε基因的表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,22例健康人作为对照,采用相对定量公式:2-△Ct×100%,计算MM患者CD3ε基因相对mRNA表达量。结果:MM患者和正常人外周血单个核细胞均表达CD3ε基因,具体表达量呈现很大的个体差异性。MM患者CD3ε基因mRNA相对表达量最高为39.78%,最低为0.48%,正常人CD3ε基因mRNA相对表达量最高为5.15%,最低为0.01%。MM患者CD3ε基因表达量明显高于正常人(P<0.05)。结论:成功建立SYBR GreenⅠ荧光定量PCR法检测CD3ε链表达水平的方法,率先报道了多发性骨髓瘤中CD3ε基因高表达的特点,为了解多发性骨髓瘤T细胞免疫学特点提供新的资料。

关键词：多发性骨髓瘤荧光定量PCR CD3ε基因

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经卡介苗刺激后结核性胸腔积液中记忆性γδT细胞的细胞因子水平及其受体表达

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中华结核和呼吸杂志 2010年第10期33卷 775-778页

作者：李丽乔丹劳穗华陈少华李扬秋吴长有中山大学医学院免疫学教研室热带传染病教育部重点实验室广州510080 广州市胸科医院暨南大学医学院血液病研究所

目的观察卡介苗刺激后结核性胸膜炎患者的胸腔积液细胞中γδ T细胞的细胞因子及细胞受体表达,了解γδ T细胞在结核病局部细胞免疫应答中的作用.方法分离结核性胸膜炎患者的胸腔积液细胞,经卡介苗刺激后检测γδ T细胞的细胞因子分... 详细信息

目的观察卡介苗刺激后结核性胸膜炎患者的胸腔积液细胞中γδ T细胞的细胞因子及细胞受体表达,了解γδ T细胞在结核病局部细胞免疫应答中的作用.方法分离结核性胸膜炎患者的胸腔积液细胞,经卡介苗刺激后检测γδ T细胞的细胞因子分泌、细胞亚群、细胞表型及细胞受体表达特征,并提取mRNA,利用3种Vγ和8种Vδ引物,经逆转录PCR扩增cDNA,将PCR产物进行基因扫描分析γδ T细胞各亚家族克隆性.结果卡介苗刺激胸腔积液细胞后,CD4＋和γδ T细胞分泌γ-干扰素的阳性率分别为0.38%和5.35%,且γδ T细胞分泌γ-干扰素的阳性率远高于CD4＋ T细胞,分泌γ-干扰素的γδ T细胞主要表达白细胞共同抗原（CD45RO）,其阳性率为73.5%.此外,δ2细胞也分泌γ-干扰素（11.1%）和肿瘤坏死因子-α（25.5%）.与未刺激者相比,卡介苗选择性扩增δ2细胞,由多克隆或双克隆转变为寡克隆.结论卡介苗刺激结核性胸膜炎患者的胸腔积液细胞能诱导记忆性γδT细胞分泌细胞因子,卡介苗体外扩增γδT细胞后,基因扫描显示Vδ2出现寡克隆性.

关键词：受体,抗原,T细胞,γ-δ 细胞因子类卡介苗

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免疫介导小鼠再障模型方法的改进

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中国病理生理杂志 2002年第6期18卷 716-717页

作者：赵忻汪明春廖继东林晨马秀君江振友暨南大学医学院中心实验室广东广州510632 深圳市血液病研究所暨南大学医学院微生物免疫学教研室广东广州510632

目的 :探讨建立免疫介导小鼠再障模型中的最适照射剂量。方法 :采用不同剂量的 [60 Co γ]射线对BALB/c小鼠进行全身照射 ,并输入DBA/2小鼠的胸腺、淋巴结混合细胞 ,于照射并输入细胞后第 14d处死实验小鼠观察股骨骨髓增生程度及病理改... 详细信息

目的 :探讨建立免疫介导小鼠再障模型中的最适照射剂量。方法 :采用不同剂量的 [60 Co γ]射线对BALB/c小鼠进行全身照射 ,并输入DBA/2小鼠的胸腺、淋巴结混合细胞 ,于照射并输入细胞后第 14d处死实验小鼠观察股骨骨髓增生程度及病理改变 ,以确定诱导再障发生的情况。结果 :6 0Gy、5 5Gy和 5 0Gy各照射剂量再障诱导组的再障发生率分别为 85 7%、84 6 %和 2 2 2 %。各实验组小鼠第 14d存活率分别为 5 7 1%、10 0 %和10 0 %。结论 :本实验条件下 ,5 5Gy的照射剂量对建立免疫介导小鼠再障模型较为合适。

关键词：免疫介导小鼠再障模型再障性贫血最适辐射剂量存活率动物模型改进方法

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