检索结果-内蒙古大学图书馆

暨南大学学报（自然科学与医学版） 2013年第4期34卷 378-384页

作者：高媛纪志盛龚晓兵林宏生郭国庆暨南大学附属第一医院消化科广东广州510630 暨南大学医学院解剖学教研室广东广州510630 暨南大学附属第一医院骨科广东广州510630 暨南大学附属第一医院消化科广东广州510630

目的：建立脑组织生长锥提取的方法。方法：采用梯度蔗糖离心的方法提取生长锥，透射电镜和扫描电镜观察分离物的形态，免疫荧光和免疫印迹检测GAP．43的表达。结果：梯度浓度蔗糖离心把脑组织悬液分离为3层，上层密度小，浓度位于上清... 详细信息

目的：建立脑组织生长锥提取的方法。方法：采用梯度蔗糖离心的方法提取生长锥，透射电镜和扫描电镜观察分离物的形态，免疫荧光和免疫印迹检测GAP．43的表达。结果：梯度浓度蔗糖离心把脑组织悬液分离为3层，上层密度小，浓度位于上清至0．75mol／L蔗糖之间，中层密度较大，浓度位于0．75～1．00mol／L蔗糖之间，下层密度最大，浓度位于1．00—2．66mol／L蔗糖之间；透射电镜见上层分离物为大量着色浅的空泡状结构，颗粒大小较均匀，中、下层分离物为大量着色深的致密颗粒及不规则形态的细胞碎片，颗粒大小不均匀；扫描电镜见分离物颗粒均为白色、大小不一、形状不规则的颗粒，上层较中、下层颗粒体积大；免疫荧光及免疫印迹证实分离物中均有大量GAP－43表达，上层分离物几乎无GFAP表达，中、下层有少量GFAP表达。结论：梯度蔗糖离心的方法可以依据颗粒的大小分离脑组织，分离物最上层内的组分为生长锥。

关键词：梯度蔗糖离心大鼠生长锥电镜免疫荧光免疫印迹

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伤科接骨片对兔下颌骨缺损修复中骨保护素及配体基因表达的影响

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中国中西医结合杂志 2013年第1期33卷 109-113页

作者：翁春辉赖晓宇詹春华戴丽冰钟志勇暨南大学医学院第四附属医院广州市红十字会医院口腔科广州510220 暨南大学医学院第四附属医院广州市红十字会医院广州市创伤外科研究所广州510220 广东省医学动物实验中心比较医学实验室广东省广州528248

目的探讨伤科接骨片在下颌骨缺损修复中的作用机制。方法健康雄性新西兰兔72只,随机分为正常对照组(24只)、模型组(24只)和伤科接骨片组(24只),建立下颌骨缺损模型。正常对照组、模型组动物给予正常饲料,伤科接骨片组动物给予伤科接骨... 详细信息

目的探讨伤科接骨片在下颌骨缺损修复中的作用机制。方法健康雄性新西兰兔72只,随机分为正常对照组(24只)、模型组(24只)和伤科接骨片组(24只),建立下颌骨缺损模型。正常对照组、模型组动物给予正常饲料,伤科接骨片组动物给予伤科接骨片饲料。分别于建模后第7、14、28、56天处死相同例数动物(n=6),收集下颌骨缺损处骨组织块。采用RT-PCR技术检测骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、骨保护素配体(osteoprotegerin ligand,OPGL)基因表达,免疫组化检测骨组织染色强度和面积。结果与正常对照组比较,模型组兔下颌骨组织OPGmRNA表达在建模后第7天显著上调(P<0.05),OPGL mRNA表达在建模后第14天显著上调(P<0.05);与模型组比较,伤科接骨片组建模后第14、28、56天OPGmRNA表达均上调明显(P<0.05),骨组织阳性染色更强,面积更广,建模后第14天OPGL mRNA表达下调明显(P<0.05),骨组织阳性染色更弱,面积更小,OPG mRNA/OPGL mRNA比值在建模后第14、28、56天明显上调(P<0.05)。结论伤科接骨片促进下颌骨缺损修复的作用可能与其调节OPGmRNA、OPGL mRNA表达水平有关。

关键词：下颌骨缺损伤科接骨片骨保护素骨保护素配体基因表达

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MALT1基因2种转录本在正常人和B细胞白血病患者中的表达特点

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中国病理生理杂志 2013年第6期29卷 1124-1128,1132页

作者：王旭张帆徐艳吴秀丽陈少华杨力建李萡卢育洪李扬秋暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632 暨南大学第一附属医院血液科广东广州510632

目的:比较正常人和B细胞白血病患者外周血中黏膜相关淋巴样组织淋巴瘤转位基因1(MALT1)2种异构体的分布和表达差异。方法:根据MALT1基因的结构特点,设计2对引物,通过建立2种转录本的逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法分析8例B细胞急性... 详细信息

目的:比较正常人和B细胞白血病患者外周血中黏膜相关淋巴样组织淋巴瘤转位基因1(MALT1)2种异构体的分布和表达差异。方法:根据MALT1基因的结构特点,设计2对引物,通过建立2种转录本的逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法分析8例B细胞急性淋巴细胞白血病(B-ALL)、8例B细胞慢性淋巴细胞白血病(B-CLL)和8例正常人的外周血单个核细胞(PBMC)中MALT1的表达情况。实时定量PCR分析各组样本的MALT1 mRNA表达水平。结果:所有样本中均能得到所预期的PCR产物,其中第1对引物可以扩增出2条片段,分别为MALT1转录本1(包含第5、6、7、8、9外显子)和MALT1转录本2(包含第5、6、8、9外显子),第2对引物只能扩增出1条包含转录本1的片段,所有PCR产物均通过核苷酸序列分析证实。MALT1 2种转录本均在外周血中有表达,并且MALT1转录本2表达水平高于转录本1。通过灰度分析发现,在B-ALL中,MALT1转录本1的灰度与正常人相比显著增高(P<0.05),而MALT1转录本2显著降低(P<0.05);在B-CLL中,MALT1 2种转录本的灰度与正常人相比无显著差异(P>0.05)。此外,B-ALL中,MALT1 mRNA表达水平(中位数:1.253)低于正常人(中位数:1.976)(P=0.05);而B-CLL中,MALT1 mRNA的表达水平与正常人相比无显著差异(P>0.05)。结论:MALT1 2种转录本均表达于正常和B细胞白血病样本中,但B-ALL中两者的表达水平有所差异,同时,B-ALL的MALT1 mRNA表达水平也有所降低。B-ALL中MALT1基因表达的异常可能影响MALT1信号通路而与疾病的发生发展相关。

关键词：黏膜相关淋巴样组织淋巴瘤转位基因1 转录本白血病 B细胞基因表达

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丹酚酸B促进人软骨细胞生长并上调β-连环蛋白和类细胞介素-1的表达

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中山大学学报（自然科学版） 2013年第4期52卷 110-115页

作者：刘少杰杨小红崔树良梁佩红谭见容张金丽沈伟哉徐敏暨南大学医学院附属广州市红十字会医院普外科广东广州510220 暨南大学医学院附属广州市红十字会医院∥广州市创伤外科研究所广东广州510220 香港浸会大学中医药学院中国香港九龙澳大利亚墨尔本大学理学院动物学系墨尔本3010 暨南大学医学院人体解剖学学系广东广州510632

为探讨中药丹参的主要活性成份丹酚酸B对人软骨细胞系C28112细胞的增殖作用及其调节作用机制中相关因子的初步辨识采用MTS法检测丹酚酸B的对软骨细胞作用的有效浓度;吖碇橙荧光标记软骨细胞的DNA及RNA,观察细胞分裂及形态学改变;Western... 详细信息

为探讨中药丹参的主要活性成份丹酚酸B对人软骨细胞系C28112细胞的增殖作用及其调节作用机制中相关因子的初步辨识采用MTS法检测丹酚酸B的对软骨细胞作用的有效浓度;吖碇橙荧光标记软骨细胞的DNA及RNA,观察细胞分裂及形态学改变;Western Blotting(WB)检测β-Catenin及新型软骨生长因子类细胞介素1的蛋白质表达。结果显示MTS法检测加入丹酚酸B后的所有剂量实验组与对照组比较吸光度值均有不同程度的增高,差异均有统计学意义(P<0.01);丹酚酸B实验组可见明显核分裂及较多的双核现象,细胞增生较活跃;半定量WB分析结果显示丹酚酸B实验组比对照组的类细胞介素1蛋白表达量显著升高,β-Catenin蛋白质表达量亦显上调趋势。表明丹酚酸B能促进人软骨细胞的增殖并上调了相关因子的表达。其作用机制可能与丹酚酸B作用于软骨细胞中Wnt信号调节通路,上调信号调节因子β-Catenin表达量,激活靶基因类细胞介素1的转录并促进其表达释放有关。

关键词：丹酚酸B 软骨细胞 β-连环蛋白类细胞介素1

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去甲斑蝥素抑制胃癌MGC-803细胞生长并诱导其凋亡

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2013年第4期34卷 385-390页

作者：张鹏林晨张晓凯李宝霞谭丹丹王莉蒋建伟暨南大学医学院微生物学与免疫学系广东广州510632 暨南大学第一附属医院普外科广东广州510630 暨南大学医学院生化系广东广州510632 暨南大学广州市番禺区中心医院检验科广东广州511400

目的:探讨去甲斑蝥素对胃癌MGC-803细胞的抑制作用及其可能的作用机制。方法:噻唑蓝(MTT)法及克隆形成抑制实验观察去甲斑蝥素对胃癌MGC-803细胞的生长抑制作用,碘化丙锭(propidium iodide,PI)单染色检测细胞周期改变,膜连蛋白-异硫氰... 详细信息

目的:探讨去甲斑蝥素对胃癌MGC-803细胞的抑制作用及其可能的作用机制。方法:噻唑蓝(MTT)法及克隆形成抑制实验观察去甲斑蝥素对胃癌MGC-803细胞的生长抑制作用,碘化丙锭(propidium iodide,PI)单染色检测细胞周期改变,膜连蛋白-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC/PI)双染流式细胞术检测细胞凋亡水平,Western blotting检测凋亡相关蛋白的表达。结果:去甲斑蝥素作用MGC-803细胞后,不同浓度的去甲斑蝥素对胃癌细胞的生长均有抑制作用,且呈剂量-效应关系(P<0.05),去甲斑蝥素作用于胃癌MGC-803细胞48 h和72 h的IC_(50)浓度分别为69.92μmol/L和31.27μmol/L;与对照组相比随着去甲斑蝥素的浓度增加,细胞克隆逐渐减少;细胞周期检测结果显示,随着去甲斑蝥素浓度的增加,胃癌MGC-803细胞出现明显G2/M期阻滞;不同浓度去甲斑蝥素作用后,出现明显的凋亡细胞群;Western blotting检测结果显示,去甲斑蝥素处理组细胞的Bcl-2蛋白家族中抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xL、Mcl-1表达明显降低,促凋亡蛋白Bax表达基本不变。Casepase-9、Caspase-3活化降解,PARP蛋白出现切割条带。结论:去甲斑蝥素能够抑制胃癌MGC-803细胞生长,使细胞周期抑制在G2/M期,并通过线粒体凋亡途径诱导细胞发生凋亡。

关键词：去甲斑蝥素胃癌MGC-803细胞增殖抑制细胞周期凋亡

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B-ALL患者外周血γδT细胞TCR亚家族谱系分布和增殖特点

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免疫学杂志 2013年第2期29卷 147-151页

作者：胡峻岩吴秀丽陈少华杨力建李萡王亮李扬秋暨南大学医学院血液病研究所广州510632 广州医学院第三附属医院急诊科 510150 暨南大学第一附属医院肿瘤科广州510632 再生医学教育部重点实验室

目的了解急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者外周血T细胞的T细胞受体(TCR)Vγ和Vδ亚家族的T细胞谱系分布和克隆性增殖情况。方法利用反转录-多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测14例B-ALL患者外周血单个核细胞中3个TCR Vγ和8个TCR Vδ亚家族基... 详细信息

目的了解急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者外周血T细胞的T细胞受体(TCR)Vγ和Vδ亚家族的T细胞谱系分布和克隆性增殖情况。方法利用反转录-多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测14例B-ALL患者外周血单个核细胞中3个TCR Vγ和8个TCR Vδ亚家族基因谱系的分布情况;进一步经荧光素标记和基因扫描分析TCR Vγ和TCR Vδ亚家族基因的互补决定区3(CDR3),以检测T细胞克隆性。10例健康成人外周血作为对照。结果 B-ALL患者外周血中TCR Vγ亚家族表达率降低,其中VγII亚家族表达率降低与健康对照组的差异具有统计学意义(P=0.006)。B-ALL患者外周血中Vδ1(57.1%)、Vδ2(42.9%)和Vδ3(14.3%)亚家族表达率均低于健康对照组,且差异有统计学意义(P=0.024,0.006,0.001)。此外,在B-ALL患者外周血中可以检测到在健康人中未检测到的Vδ4(14.3%)和Vδ5(14.3%)亚家族;且Vδ6(28.6%)、Vδ7(21.4%,)和Vδ8(35.7%)亚家族表达率也高于健康对照组。B-ALL患者外周血中存在克隆性增殖的Vγ和Vδ亚家族T细胞,其中,Vδ8亚家族T细胞寡克隆增殖的发生频率最高(35.7%),其次为Vδ6(28.6%)和Vδ7(21.4%)亚家族T细胞。结论 B-ALL患者外周血TCR Vγ和TCR Vδ亚家族T细胞出现限制性表达和克隆性增殖,其中高频率出现的寡克隆性增殖的Vδ亚家族T细胞可能与体内存在的白血病抗原相关。

关键词：急性B淋巴细胞白血病 γδT细胞 T细胞受体基因扫描克隆性

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褪黑激素对增生性瘢痕成纤维细胞分泌转化生长因子β1的影响及其机制

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中华烧伤杂志 2013年第2期29卷 207-209页

作者：谢有富刘思隽戴丽冰杜高伟谭艳艳暨南大学医学院第四附属医院广州市红十字会医院烧伤整形科广州市510220

目的研究褪黑激素对增生性瘢痕Fb分泌TGF-β1的影响及机制。方法采用组织块法分离培养人增生性瘢痕Fb,按随机数字表法将细胞分为褪黑激素组、褪黑激素＋Luzindole（褪黑激素受体拮抗剂）组、Luzindole组和对照组（仅以细胞培养液培养... 详细信息

目的研究褪黑激素对增生性瘢痕Fb分泌TGF-β1的影响及机制。方法采用组织块法分离培养人增生性瘢痕Fb,按随机数字表法将细胞分为褪黑激素组、褪黑激素＋Luzindole（褪黑激素受体拮抗剂）组、Luzindole组和对照组（仅以细胞培养液培养），前3组每孔细胞分别添加相应物质与细胞培养液培养，褪黑激素终浓度为1×10-3 mmol/L、Luzindole终浓度为1 mmol/L。每组10个复孔。培养24 h，采用ELISA法检测细胞培养上清液中TGF-β1含量，实时荧光定量PCR检测细胞TGF-β1、Smad 7和Rho激酶（ROCK）mRNA表达。对数据进行单因素方差分析或LSD-t检验或Kruskal-Wallis检验，组间比较采用Nemneyi法。结果褪黑激素组Fb上清液中TGF-β1含量为（2.8±2.4）pg/mL，低于褪黑激素＋Luzindole组的（23.9±2.7）pg/mL、对照组的（28.9±2.0）pg/mL和Luzindole组的（24.9±2.8）pg/mL（F=94.58，P〈0.05）。褪黑激素组细胞TGF-β1 mRNA表达量为11.9±1.2，明显低于其他组（F=20.79，P〈0.05）；褪黑激素＋Luzindole组TGF-β1 mRNA表达量（14.9±1.8）与对照组（17.2±0.6）比较差异无统计学意义（t=0.806，P〉0.05）。褪黑激素组Fb Smad 7 mRNA表达量（0.076±0.080）明显高于对照组（0.023±0.024）、褪黑激素＋Luzindole组（0.026±0.026）、Luzindole组（0.037±0.021），χ2=9.567，P〈0.05。褪黑激素组ROCK mRNA的表达量明显低于对照组（0.002 30±0.002 70）、褪黑激素＋Luzindole组（0.001 30±0.001 20）和Luzindole组（0.001 10±0.001 20）， χ2=9.420，P〈0.05。结论褪黑激素可通过与受体结合，上调瘢痕Fb中Smad 7表达、下调ROCK表达，从而抑制增生性瘢痕Fb表达TGF-β1。

关键词：瘢痕成纤维细胞转化生长因子β1 褪黑激素受体褪黑激素

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CM-Dil与DAPI联合标记人羊膜上皮细胞的可行性研究

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眼科新进展 2013年第11期33卷 1001-1005页

作者：王黎周清杨艳陈剑徐锦堂暨南大学附属第一医院眼科广东省广州市510630 暨南大学医学院眼科研究室广东省广州市510632

目的建立人羊膜上皮细胞（human amniotic epithelial cell，HAEC）的体外培养方法，并探讨氯甲基苯甲酰胺（CM—Dil）与4’，6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）对HAEC进行联合标记示踪的可行性。方法运用酶消化法获取HAEC，收集第2代细胞，... 详细信息

目的建立人羊膜上皮细胞（human amniotic epithelial cell，HAEC）的体外培养方法，并探讨氯甲基苯甲酰胺（CM—Dil）与4’，6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）对HAEC进行联合标记示踪的可行性。方法运用酶消化法获取HAEC，收集第2代细胞，流式细胞仪检测CD29、CD34、CD44、CIM5和CD105的表达率，SP免疫化学法鉴定HAEC。CM—Dil与DAPI对HAEC进行体外标记，荧光倒置显微镜下观察1d、7d和14d的标记情况，台盼蓝染色检测细胞活力，CCK-8法检测细胞增殖以明确联合标记对体外培养HAEC生长特性的影响。结果HAEC贴壁培养后呈扁平多角形，CD29、CD34、CD44、CD45和CD105的阳性率分别为99．64％、2．21％、32．41％、0．84％、36．70％，细胞角蛋白Keratin阳性表达。HAEC在cM—Dil和DAPI联合标记1d后，荧光显微镜下可观察到细胞膜和细胞核分别在不同波长下呈红色和蓝色荧光，标记率为100％；14d后，经传代培养的HAEC荧光强度与1d时相近，细胞形态无改变。台盼蓝染色显示标记细胞存活率为96．8％-98．9％，CCK-8检测标记细胞的增殖力较未标记组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论CM—Dil和DAPI可有效标记HAEC，染色简单、无细胞毒性，荧光衰减较慢，可作为HAEC的标记及示踪方法。

关键词：人羊膜上皮细胞氯甲基苯甲酰胺 4’ 6-二脒基-2-苯基吲哚标记示踪

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乳化氟碳保存液对大鼠供肺的保护作用

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中华麻醉学杂志 2013年第9期33卷 1082-1084页

作者：彭雪梅席露王华东张清德刘慧慧帅兵 510630广州市暨南大学第一附属医院麻醉科广州医学院第三附属医院麻醉科暨南大学医学院病理生理学教研室广州中医药大学第一附属医院麻醉科番禺何贤纪念医院麻醉科

目的评价乳化氟碳保存液对大鼠供肺的保护作用.方法健康雄性SD大鼠24只,体重350 ～ 400 g,采用随机数字表法,将其分为2组（n=12）：UW液组（UW组）和乳化氟碳保存液组（FCE组）.建立肺灌注模型后取下心肺,置于4℃UW液或乳化氟碳保存液... 详细信息

目的评价乳化氟碳保存液对大鼠供肺的保护作用.方法健康雄性SD大鼠24只,体重350 ～ 400 g,采用随机数字表法,将其分为2组（n=12）：UW液组（UW组）和乳化氟碳保存液组（FCE组）.建立肺灌注模型后取下心肺,置于4℃UW液或乳化氟碳保存液中.于6h时取肺组织,采用WST法测定SOD活性,TBA法测定MDA含量,ELISA法测定MPO活性和IL-1β、IL-6、TNF-α的含量,并观察肺组织病理学结果.结果与UW组比较,FCE组肺组织MPO活性降低（P＜0.05）；2组肺组织SOD活性及MDA、IL-1β、IL-6和TNF-α的含量比较差异均无统计学意义（P＞0.05）.结论乳化氟碳保存液可降低肺组织中性粒细胞的浸润程度,提示其在减轻供肺损伤方面较UW液更具优势.

关键词：氟碳化合物乳化剂肺移植细胞保护

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尼古丁对人脐带间充质干细胞增殖和迁移的影响

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中国病理生理杂志 2013年第5期29卷 778-783页

作者：曾慧兰卜欠欠陈慧中覃永亮李阳柏小芬钟启余泮熹刘宏伟刘革修苏泽轩暨南大学附属第一医院血液科广东广州510632 暨南大学医学院口腔医学系广东广州510632 江门市人民医院血液科广东江门529020 广东省第二人民医院血液科广东广州510317 暨南大学国际学院广东广州510632 暨南大学第一医院整形外科广东广州510632 暨南大学血液病研究所广东广州510632

目的:探讨尼古丁对人脐带间充质干细胞(MSCs)一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、活性氧(ROS)、线粒体膜电位及细胞因子生成的影响。方法:尼古丁作用MSCs后,硝酸还原酶法测NO的释放情况;分光光度计法测NOS和i... 详细信息

目的:探讨尼古丁对人脐带间充质干细胞(MSCs)一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、活性氧(ROS)、线粒体膜电位及细胞因子生成的影响。方法:尼古丁作用MSCs后,硝酸还原酶法测NO的释放情况;分光光度计法测NOS和iNOS活性;流式细胞技术测ROS及线粒体膜电位的变化;ELISA法测培养上清液中细胞间黏附分子1(ICAM-1)、基质细胞衍生因子1(SDF-1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)、胰岛素样生长因子I(IGF-I)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)水平的变化。结果:在24 h和36 h,NO水平随尼古丁浓度上升而增加(P<0.05),但在48 h,0.8 g/L与1.0 g/L组,NO水平低于对照组;NOS和iNOS活性随尼古丁浓度上升而逐渐增加;尼古丁可增加MSCs的ROS水平,并降低线粒体膜电位;在尼古丁作用下,MSCs分泌SDF-1、TGF-β1、IGF-I及bFGF水平下降,ICAM-1、MMP-9及TIMP-1表达均上升。结论:尼古丁通过增加NO、NOS、iNOS和ROS水平,降低线粒体膜电位,使SDF-1、TGF-β1、IGF-I及bFGF分泌下降,ICAM-1、MMP-9及TIMP-1表达上升,可能影响MSCs的增殖、黏附、迁移等特性。

关键词：尼古丁间充质干细胞一氧化氮一氧化氮合酶活性氧线粒体膜电位细胞因子类

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