检索结果-内蒙古大学图书馆

中国修复重建外科杂志 2017年第5期31卷 600-606页

作者：张金丽刘志河汤文彬熊喜峰张志曹雯娟李孝建广州市红十字会医院暨南大学医学院附属广州红十字会医院创伤外科研究所广州510220 广州市红十字会医院暨南大学医学院附属广州红十字会医院烧伤整形科广州510220

目的探讨大鼠脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)对紫外线照射造成的软骨细胞DNA损伤的修复作用。方法取3~4周龄SD大鼠(体质量100~120 g)腹股沟脂肪,利用Ⅰ型胶原酶消化法体外分离培养ADSCs并传代;取第3代细胞采用流式... 详细信息

目的探讨大鼠脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)对紫外线照射造成的软骨细胞DNA损伤的修复作用。方法取3~4周龄SD大鼠(体质量100~120 g)腹股沟脂肪,利用Ⅰ型胶原酶消化法体外分离培养ADSCs并传代;取第3代细胞采用流式细胞仪检测其表面相关标记,行成骨及成脂诱导鉴定其多向分化潜能。另取SD大鼠关节软骨,利用酶消化法分离培养软骨细胞并传代,并行甲苯胺蓝染色鉴定。取第3代软骨细胞,采用40 J/m^2剂量紫外线照射;照射后细胞分别以正常培养基培养(照射组)、以含ADSCs培养上清的培养基培养(ADSCs上清组)或与ADSCs共培养(ADSCs组)24h。以不进行紫外线照射的正常第3代软骨细胞作为对照(对照组)。采用MTS法检测细胞增殖情况,免疫荧光染色、Western blot法检测软骨细胞DNA损伤标志蛋白磷酸化组蛋白2A变异体(phosphorylatedhistone family 2A variant,γH2AX)的表达情况。结果经流式细胞仪检测及成骨、成脂诱导鉴定,所培养细胞为ADSCs。对照组、照射组及ADSCs上清组吸光度(A)值分别为2.20±0.10、1.34±0.04、1.57±0.06,照射组及ADSCs上清组显著低于对照组,照射组显著低于ADSCs上清组,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光染色示,照射组、ADSCs上清组及ADSCs组γH2AX蛋白荧光强度明显高于对照组,但ADSCs上清组及ADSCs组γH2AX蛋白荧光强度明显弱于照射组,ADSCs组和ADSCs上清组则无明显区别。Western blot法检测示,照射组、ADSCs上清组及ADSCs组γH2AX蛋白相对表达量均明显高于对照组,但ADSCs上清组及ADSCs组显著低于照射组,差异均有统计学意义(P<0.05);ADSCs组和ADSCs上清组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论大鼠ADSCs有助于恢复紫外线照射后的软骨细胞的增殖,降低DNA损伤标志蛋白γH2AX的表达,对紫外线照射所致软骨细胞损伤具有修复作用。

关键词：脂肪来源干细胞软骨细胞辐射修复大鼠

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穗花杉双黄酮抑制人脐静脉内皮细胞血管形成的实验研究

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中山大学学报（自然科学版） 2016年第6期55卷 148-152页

作者：张金丽曹文娟熊喜峰戴丽冰刘志河广州市红十字会医院∥暨南大学医学院附属广州红十字会医院创伤外科研究所广东广州510220

为探讨穗花杉双黄酮(Amentoflame,AF)对人脐静脉内皮细胞ECV304血管形成及机制的影响,从而为穗花杉双黄酮治疗肿瘤及其他血管增生性疾病提供理论基础,采用MTS检测AF对ECV304血管内皮细胞增殖的作用,细胞划痕实验观察AF对ECV304细胞迁移... 详细信息

为探讨穗花杉双黄酮(Amentoflame,AF)对人脐静脉内皮细胞ECV304血管形成及机制的影响,从而为穗花杉双黄酮治疗肿瘤及其他血管增生性疾病提供理论基础,采用MTS检测AF对ECV304血管内皮细胞增殖的作用,细胞划痕实验观察AF对ECV304细胞迁移的影响,体外血管形成实验观察AF对ECV304血管形成的影响,Western blot检测AF对ECV304细胞血管形成相关信号通路及蛋白如磷酸化AKT(p-AKT)、金属基质蛋白酶9(Matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、促血管生成素2(angiopoietin 2,Ang 2)表达影响。结果表明AF能够抑制ECV304细胞的增殖作用,并呈梯度依赖性;AF具有抑制ECV304细胞迁移的作用,并且能够抑制ECV304体外血管样结构的形成;Western blot结果显示100μmol/L的AF能够降低ECV304细胞p-AKT、MMP-9、Ang-2的蛋白表达。

关键词：血管生成内皮细胞穗花杉双黄酮

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选择性环氧合酶-2抑制剂对HSC-T6细胞增殖的抑制作用

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中华肝脏病杂志 2009年第5期17卷 346-349页

作者：何雅军潘洁舒建昌沈雁吕霞方力暨南大学医学院附属广州红十字会医院中心实验室广州510220 暨南大学医学院附属广州红十字会医院消化科广州510220 暨南大学医学院附属广州红十字会医院创伤研究所广州510220 暨南大学医学院附属广州红十字会医院病理科广州510220 暨南大学第一临床学院

目的观察选择性环氧合酶-2抑制剂NS398对肝星状细胞系HSC-T6细胞增殖的抑制作用，并探讨其可能的机制。方法采用不同浓度的NS398作用于HSC-T6，四甲基偶氮唑盐法检测HSC—T6细胞增殖情况，乳酸脱氢酶法检测NS-398对HSC-T6细胞的毒性作... 详细信息

目的观察选择性环氧合酶-2抑制剂NS398对肝星状细胞系HSC-T6细胞增殖的抑制作用，并探讨其可能的机制。方法采用不同浓度的NS398作用于HSC-T6，四甲基偶氮唑盐法检测HSC—T6细胞增殖情况，乳酸脱氢酶法检测NS-398对HSC-T6细胞的毒性作用、流式细胞仪检测HSCT6细胞周期的改变，以EliVision^TM plus细胞免疫化学法检测HSC—T6中COX-2、增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白表达的变化。多组数据间的比较采用单因素方差分析或独立样本丁检验，计数资料采用χ^2检验。结果在20～160mol／L浓度范围内，NS398以剂量和时间依赖性地抑制HSC—T6增殖（P〈0．01）。90、120、150umol／L的NS-398作用HSCT648h后，细胞周期分析结果显示S期细胞稍增多，Gz／M期细胞显著增加，各组之间细胞周期构成差异具有统计学意义（χ^2=12．35，P〈0．05）。以120μmol／LNS398作用HSC—T648h后，PCNA阳性细胞百分比为28．91％±0．11％，与对照组（85．99％±0．13％）比较，差异具有统计学意义（P〈0．01）；COX-2的阳性细胞百分比为13．80％±0．43％，与对照组（14．07％±0．59％）比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论NS-398可以显著抑制HSC-T6增殖，使其发生G2／M期阻滞，其作用具有剂量与时间依赖性，NS398可能通过抑制HSC中PCNA的表达而抑制其增殖，但不影响COX-2的表达。

关键词：环氧合酶-2 NS-398 肝星状细胞增殖细胞周期

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高纯度猪软骨II型胶原的制备与检测

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生物医学工程学杂志 2001年第4期18卷 592-594页

作者：李斯明叶春婷邹海燕彭燕豪杨小红暨南大学医学院附属广州市红十字会医院广州市创伤外科研究所广州510220

探讨以猪透明软骨为原材料制备高纯度 II型胶原的方法 ,为批量化生产提供依据。以猪透明软骨为原料 ,采用盐酸胍抽提蛋白多糖 ,酸性条件下酶解 ,中间过程经多步纯化去除杂胶原、降解及变性产物 ,最后经Sepharose H.P.阴离子柱层析纯化... 详细信息

探讨以猪透明软骨为原材料制备高纯度 II型胶原的方法 ,为批量化生产提供依据。以猪透明软骨为原料 ,采用盐酸胍抽提蛋白多糖 ,酸性条件下酶解 ,中间过程经多步纯化去除杂胶原、降解及变性产物 ,最后经Sepharose H.P.阴离子柱层析纯化制备出产品并以 Sigma公司产品作对照。 SDS- PAGE电泳、氨基酸成份分析和紫外最大吸收光谱的结果表明 ,所提取的 II型胶原性质符合文献报导 ,纯度比 Sigm a公司的产品高。所提取的 II型胶原为高纯度的 II型胶原 ,由于采用肉用猪作原料 ,来源丰富 ,成本低。

关键词： Ⅱ型胶原制备检测抗体高纯度猪软骨

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成纤维细胞生长因子和表皮生长因子及复合因子对兔ACL、MCL体外增殖作用

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中国修复重建外科杂志 2005年第3期19卷 229-233页

作者：沈雁陈鸿辉李贤让唐毅钟灿灿梁佩红任国梅梁伟国暨南大学医学院附属广州市红十字会医院广州市创伤外科研究所

目的　观察酸性成纤维细胞生长因子 (acid fibroblast growth factor,a FGF)、碱性成纤维细胞生长因子 (basic fibroblastgrowth factor,b FGF)和表皮生长因子 (epidermal growth factor,EGF)以及复合因子对兔前交叉韧带 (anterior cruciate ligament,ACL)和内侧副韧带 (medial collateral ligament,MCL)的促增殖作用。　方法　分离传代培养 10周龄新西兰大白兔骨关节韧带的 ACL 和 MCL 的成纤维细胞 ,接种 96孔板 ,并加入浓度为 0 (对照组 )、1、5、10、5 0、10 0 ng/ ml的 a FGF或 b FGF,浓度为 0 (对照组 )、1.5 6、3.13、6 .2 5、12 .5 0、2 5、5 0 ng/ ml的 EGF,单独或 a FGF+EGF两种因子联用与细胞 (n=4 )共同培养 4 8h,以 XTT方法测定其促细胞增殖作用。　结果　 3种生长因子单独应用对ACL和 MCL都有促进作用 ,a FGF对两种细胞均存在量效关系 ;b FGF 1ng/ ml,EGF 5 ng/ ml对 ACL作用最好 ,而对MCL 则是 b FGF和 EGF均存在量效关系。浓度为 5 ng/ ml的 a FGF与 5 0 ng/ ml的 EGF联合 1ng/ ml a FGF与3.13ng/ ml EGF作用于 ACL 或 MCL均有协同作用。　结论　 3种生长因子对 ACL 和 MCL 均有促进作用 ,单独应用a FGF或联用 EGF优于单一因子促进兔 ACL 和 MCL 细胞的增殖 ,并且提示低浓度的 a FGF联?

关键词：前交叉韧带内侧副韧带成纤维细胞生长因子表皮生长因子复合因子兔软组织损伤

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积雪草苷对增生性瘢痕成纤维细胞结缔组织生长因子及RhoA/ROCK-Ⅰ调控信号的影响

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中国药学杂志 2010年第14期45卷 1067-1072页

作者：戴丽冰潘姝沈雁黄粤梁蓉康宁李叶扬李孝建谢有富李罡张琰暨南大学医学院第四附属医院广州市红十字会医院广州市创伤外科研究所广州510220

目的研究积雪草苷对增生性瘢痕成纤维细胞结缔组织生长因子(CTGF)的影响及RhoA/ROCK-Ⅰ信号通路在其中的作用。方法分离培养人增生性瘢痕组织来源的成纤维细胞,应用积雪草苷300μ***-1及RhoA的下游效应器Rho激酶的特异抑制剂Y-27632对... 详细信息

目的研究积雪草苷对增生性瘢痕成纤维细胞结缔组织生长因子(CTGF)的影响及RhoA/ROCK-Ⅰ信号通路在其中的作用。方法分离培养人增生性瘢痕组织来源的成纤维细胞,应用积雪草苷300μ***-1及RhoA的下游效应器Rho激酶的特异抑制剂Y-27632对实验细胞进行干扰实验。分为对照组、积雪草苷组、Y-27632组、积雪草苷+Y-27632组。运用荧光定量PCR(SYBR Green)及免疫荧光细胞化学的方法检测各组瘢痕成纤维细胞中RhA、ROCK-Ⅰ、CTGF mRNA与蛋白表达。结果积雪草苷300μ***-1能抑制RhoA、ROCK-Ⅰ、CTGF的mRNA与蛋白表达,与对照组比较具有统计学意义(P<0.05);Y-27632能阻碍积雪草苷的作用,积雪草苷(300μ***-1)+Y-27632组,CTGF的mRNA与蛋白表达明显高于单纯积雪草苷组(P<0.05),与对照组及Y-27632组比较无显著性差异(P>0.05);Y-27632组与对照组比较RhoA、ROCK-Ⅰ、CTGF的mRNA与蛋白表达没有统计学意义。结论积雪草苷300μ***-1能抑制RhoA、ROCKⅠ-、CTGF的mRNA与蛋白表达;而且可通过RhoA/ROCKⅠ-信号通路抑制瘢痕成纤维细胞中CTGF mRNA与蛋白表达。这可能是积雪草苷治疗瘢痕的作用机制之一。

关键词：增生性瘢痕成纤维细胞积雪草苷 RhoA ROCK-Ⅰ 结缔组织生长因子

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股骨颈骨折加压螺钉取出术后继发股骨头缺血坏死的原因分析

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实用医学杂志 2018年第23期34卷 3913-3916页

作者：姚依村曹良国叶冬平王文李爱国梁伟国广州市红十字会医院暨南大学医学院附属广州红十字会医院骨科广州 510220 广州市红十字会医院暨南大学医学院附属广州红十字会医院广州市创伤外科研究所广州 510220

目的对股骨颈骨折加压螺钉内固定术后骨愈合后,内固定取出术后继发股骨头缺血坏死的因素进行分析,探讨最佳的治疗方案。方法回顾性分析2008年7月至2016年7月期间,因股骨颈骨折加压螺钉内固定术后骨愈合行内固定取出术而入我院创伤外科... 详细信息

目的对股骨颈骨折加压螺钉内固定术后骨愈合后,内固定取出术后继发股骨头缺血坏死的因素进行分析,探讨最佳的治疗方案。方法回顾性分析2008年7月至2016年7月期间,因股骨颈骨折加压螺钉内固定术后骨愈合行内固定取出术而入我院创伤外科住院患者,共有71例纳入研究。其中男性32例,女性39例。年龄13～80岁,平均56.48岁。随访期间,对继发股骨头缺血坏死和未继发股骨头缺血坏死患者的年龄、性别、骨折类型、受伤后至手术病程、复位质量、加压螺钉取出时机、加压螺钉取出后钉道是否植骨以及加压螺钉取出后患肢负重时间等因素进行分析。结果平均随访35.62个月(24个月～62个月),在随访期间,经临床症状和影像学评估证实继发股骨头缺血坏死病例23例,未继发股骨头缺血坏死病例48例。单因素分析显示:年龄,骨折类型,受伤后至手术病程、复位质量、加压螺钉取出时机、加压螺钉取出后钉道是否植骨以及加压螺钉取出后患肢负重时间(P <0.05)与加压螺钉取出后是否继发股骨头缺血性坏死相关,而性别与此无明显关(P> 0.05)。多因素回归分析进一步表明,年龄(OR=2.072)、骨折类型(OR=0.059)、复位质量(OR=41.968)、加压螺钉取出时机(OR=0.000)以及加压螺钉取出后患肢负重时间(OR=0.000)是加压螺钉取出后是否继发股骨头缺血性坏死的独立危险因素(P <0.05)。结论患者年龄、骨折类型、复位质量、加压螺钉取出时机和加压螺钉取出后患肢负重时间是影响股骨颈骨折加压螺钉取出术后继发股骨头缺血坏死的重要危险因素,对股骨颈骨折加压螺钉取出术患者的治疗具有指导意义。

关键词：股骨颈骨折骨愈合内固定取出股骨头缺血坏死

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Annexin V FITC/PI流式细胞术检测姜黄素诱导的肝星状细胞凋亡

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实用医学杂志 2009年第1期25卷 28-30页

作者：何雅军舒建昌吕霞沈雁暨南大学医学院附属广州市红十字会医院检验科 510220 暨南大学医学院附属广州市红十字会医院消化内科 510220 暨南大学医学院附属广州市红十字会医院创伤研究所 510220

目的:探讨Annexin V FITC/PI流式细胞术在检测姜黄素诱导的肝星状细胞(HSC)凋亡中的应用。方法:不同浓度姜黄素作用肝星状细胞株HSC-T6 24h,用Annexin V FITC/PI流式细胞术检测HSC凋亡。结果:姜黄素浓度为10μmol/L时,早期凋亡细胞开始... 详细信息

目的:探讨Annexin V FITC/PI流式细胞术在检测姜黄素诱导的肝星状细胞(HSC)凋亡中的应用。方法:不同浓度姜黄素作用肝星状细胞株HSC-T6 24h,用Annexin V FITC/PI流式细胞术检测HSC凋亡。结果:姜黄素浓度为10μmol/L时,早期凋亡细胞开始增多,至30μmol/L时,坏死细胞开始增多,随姜黄素浓度增高,各组凋亡细胞随之增多。0、10、20、30、40μmol/L5组的凋亡率分别是(3.81±0.64)%、(6.52±1.88)%、(11.61±2.79)%、(52.03±4.38)%、(87.11±12.62)%,与0μmol/L组比较,20、30、40μmol/L3组的凋亡率差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Annexin V FITC/PI流式细胞术可定量检测姜黄素诱导的HSC早期凋亡。

关键词：细胞凋亡流式细胞术姜黄素 Annexin V 肝星状细胞

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维生素C对TNF-α及血清剥夺诱导的人髓核细胞凋亡的作用

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中国修复重建外科杂志 2015年第4期29卷 490-497页

作者：戴丽冰刘志河梁伟国姚依村徐家科叶冬平邹隆强沈雁暨南大学医学院第四附属医院广州市红十字会医院广州市创伤外科研究所广州510220 广州市红十字会医院骨科广州510220 广州市红十字会医院西澳大利亚大学外科学院病理学和医学实验室广州510220

目的探讨维生素C(Vitamin C,Vit C)在TNF-α及血清剥夺诱导人椎间盘髓核细胞凋亡中的作用及机制。方法取脊柱矫形手术患者的髓核组织,消化法获得正常髓核细胞,取第3代细胞按不同处理因素分为Vit C作用组(A组)、TNF-α诱导组(B组)和血清... 详细信息

目的探讨维生素C(Vitamin C,Vit C)在TNF-α及血清剥夺诱导人椎间盘髓核细胞凋亡中的作用及机制。方法取脊柱矫形手术患者的髓核组织,消化法获得正常髓核细胞,取第3代细胞按不同处理因素分为Vit C作用组(A组)、TNF-α诱导组(B组)和血清剥夺组(C组),每组再分为以下亚组:A组分为A1组(基础培养液)、A2组(100μg/m L Vit C)、A3组(200μg/m L Vit C);B组分为B0组(对照组)、B1组(100 ng/m L TNF-α)、B2组(100μg/m L Vit C+100 ng/m L TNF-α)、B3组(200μg/m L Vit C+100 ng/m L TNF-α);C组分为C0组(对照组)、C1组(FBS浓度由8%降低为2%)、C2组(2%FBS+100μg/m L Vit C)、C3组(2%FBS+200μg/m L Vit C)。各组作用24 h后,采用流式细胞术检测各组膜联蛋白V、碘化丙啶双染后髓核细胞凋亡率;实时荧光定量PCR检测p53(基因编码相对分子质量为53×103的蛋白质)、脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase3)、Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原、Sox9和糖胺多糖(Aggrecan)m RNA表达。结果 A组:与A1组比较,A2、A3组的Vit C均能降低髓核细胞凋亡及p53、FAS、Caspase 3 m RNA表达(P<0.05),但A2、A3组间比较差异无统计学意义(P>0.05);A2、A3组的Vit C可促进髓核细胞Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原、Aggrecan、Sox9 m RNA表达,且A3组促进作用显著大于A2组(P<0.05)。B组:与B0组比较,B1组TNF-α促进了髓核细胞凋亡,增加了髓核细胞p53、FAS、Caspase 3 m RNA表达(P<0.05);与B1组比较,B3组的Vit C能降低髓核细胞凋亡及p53、FAS、Caspase 3 m RNA表达,而B2组的Vit C则增加其凋亡及p53、FAS、Caspase 3 m RNA表达,差异均有统计学意义(P<0.05)。C组:与C0组比较,C1组2%FBS能诱导髓核细胞凋亡,但降低了髓核细胞p53、FAS、Caspase 3 m RNA表达(P<0.05);与C1组比较,C3组的Vit C能降低髓核细胞凋亡及p53、FAS、Caspase 3 m RNA表达,而C2组的Vit C则增加其凋亡及p53、FAS m RNA表达,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Vit C能延缓或降低髓核细胞凋亡、促进细胞外基质合成与分泌,200μg/m L Vit C可延缓或降低100 ng/m L TNF-α和2%FBS诱导的凋亡,而100μg/m L Vit C则促进其诱导的凋亡。

关键词：维生素C 髓核细胞 TNF-α 血清剥夺细胞凋亡椎间盘退变

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姜黄素治疗肝纤维化及其作用机制的初步研究

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中华肝脏病杂志 2007年第10期15卷 753-757页

作者：舒建昌叶国荣吕霞方力吴海恩陈小娟暨南大学医学院附属广州红十字会医院消化内科广州510220 广东省药物研究所药理科

目的观察姜黄素治疗肝纤维化的效果,初步探讨其作用机制。方法四氯化碳腹腔注射制作大鼠肝纤维化模型,以丹参治疗作为阳性对照,检测血清ALT、AST、HA、LN、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、一氧化氮（NO）含量;检测肝组织超氧化物歧化酶（SOD）、... 详细信息

目的观察姜黄素治疗肝纤维化的效果,初步探讨其作用机制。方法四氯化碳腹腔注射制作大鼠肝纤维化模型,以丹参治疗作为阳性对照,检测血清ALT、AST、HA、LN、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、一氧化氮（NO）含量;检测肝组织超氧化物歧化酶（SOD）、羟脯氨酸（Hyp）、丙二醛（MDA）含量;肝组织行HE和Masson胶原染色,光镜下观察病理学改变,并按肝纤维化半定量计分系统进行评分。结果与模型组比较,姜黄素治疗组能明显降低肝纤维化时异常升高的ALT、AST、NO、HA、LN、PCⅢ、MDA、Hyp,模型对照组分别为（693.75±117.57）U/L、（892.50±105.69）U/L、（70.95±10.23）μmol/L、（468.22±93.45）mg/L、（346.44±75.08）mg/L、（279.82±54.00）μg/L、（402.25±39.16）nmol/g、（752.50±77.62）μg/g,姜黄素（每100g体重40mg）治疗组分别为（218.50±48.89）U/L、（376.60±79.13）U/L、（47.96±6.53）μmol/L、（289.96±60.43）mg/L、（107.35±27.24）mg/L、（148.95±28.63）μg/L、（236.10±30.54）nmol/g、（478.40±75.74）μg/g,P值均〈0.05;提升肝纤维化时异常降低的肝组织SOD水平,姜黄素（每100g体重40 mg）治疗组和对照组分别为（90.39±21.23）U/mg、（46.52±20.01）U/mg,P〈0.05;明显改善四氯化碳所致大鼠肝纤维化的病理学改变,肝纤维化评分明显降低（P〈0.05）,接近正常对照组,且该作用随着姜黄素剂量增大而加强。结论姜黄素具有治疗大鼠肝纤维化作用;抗脂质过氧化损伤、直接影响胶原代谢可能是其重要的作用机制。

关键词：肝纤维化治疗姜黄素四氯化碳

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