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2010广东省医学会骨科年会暨岭南骨科学术大会

作者：叶冬平梁伟国戴丽冰沈雁暨南大学医学院第四附属医院广州市红十字会医院广州市创伤外科研究所

目的采用外源性端粒酶反转录酶(hTERT)基因转导入髓核细胞激活端粒酶的方法，探讨一种新的获得永生化髓核细胞株的组织工程技术，为进一步研究退行性椎间盘病的病变机理提供标准细胞株.方法用PCR方法将PCR产物经1％琼脂糖凝胶电泳分...

目的采用外源性端粒酶反转录酶(hTERT)基因转导入髓核细胞激活端粒酶的方法，探讨一种新的获得永生化髓核细胞株的组织工程技术，为进一步研究退行性椎间盘病的病变机理提供标准细胞株.方法用PCR方法将PCR产物经1％琼脂糖凝胶电泳分离、鉴定，按快速凝胶回收试剂盒说明书方法回收纯化PCR产物，获得目的基因PCR产物与载体T-Easy按比例进行连接进行目的基因克隆;用DNASIS软件对所测的基因序列和氨基酸序列与GenBank公布的序列进行同源性比较进行真核表达质粒中目的基因序列测定;构建目的基因pGFP-hTERT真核表达质粒;用BIOMIGA质粒提取试剂盒进行转染hTERT表达检测.结果 2.1 RT-PCR扩增目的基因hTERT片段的结果

关键词：

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BMP-2对人退变椎间盘髓核细胞影响的实验研究

BMP-2对人退变椎间盘髓核细胞影响的实验研究

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2010广东省医学会骨科年会暨岭南骨科学术大会

作者：叶冬平梁伟国戴丽冰沈雁暨南大学医学院第四附属医院广州市红十字会医院广州市创伤外科研究所

目的探讨BMP-2对人退变髓核细胞合成细胞外基质的影响,观察正常髓核细胞高表达而退变髓核细胞表达阴性的生长刺激因子对退变髓核细胞的影响.方法分离、培养人退变椎间盘髓核细胞,取第2代髓核细胞,随机将退变椎间盘髓核细胞分为2组.A... 详细信息

目的探讨BMP-2对人退变髓核细胞合成细胞外基质的影响,观察正常髓核细胞高表达而退变髓核细胞表达阴性的生长刺激因子对退变髓核细胞的影响.方法分离、培养人退变椎间盘髓核细胞,取第2代髓核细胞,随机将退变椎间盘髓核细胞分为2组.A组：加入100ng/mlBMP-2,B组：加入200ng/mlBMP-2,C组：对照组,不加干扰因素.通过对试验组和对照组髓核细胞采用光镜、电镜等形态学方法进行大体形态和超微结构观察,细胞Ⅱ型胶原和糖胺多糖的mRNA表达.ELISA检测细胞培养上清中人Ⅱ型胶原含量,DMMB比色法检测细胞培养上清中糖胺多糖含量.结果 BMP-2刺激退变髓核细胞,髓核细胞中Ⅱ型胶原、糖胺多糖、Sox-9mRNA表达水平分别为空白组(7天)：1.0±0.103, 1.0±0.043,阴性.BMP-2(100ng/ml,7天)：6.88±0.73, 2.0±0.06,0.046±0.0062.

关键词：骨形态发生蛋白-2 人退变髓核细胞

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CDMP-1逆转人退变椎间盘髓核细胞的实验研究

CDMP-1逆转人退变椎间盘髓核细胞的实验研究

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2010广东省医学会骨科年会暨岭南骨科学术大会

作者：戴丽冰梁伟国沈雁叶冬平暨南大学医学院第四附属医院广州市红十字会医院广州市创伤外科研究所

目的通过CDMP-1促进退变髓核细胞外基质合成来逆转椎间盘退变.方法分离、培养人退变椎间盘髓核细胞,取第3代髓核细胞,应用CDMP-1分组进行干预实验.A组为对照组,B组和C组为实验组,B组加入100 ng/mlCDMP-1,C组加入200 ng/mlCDMP-1.采用... 详细信息

目的通过CDMP-1促进退变髓核细胞外基质合成来逆转椎间盘退变.方法分离、培养人退变椎间盘髓核细胞,取第3代髓核细胞,应用CDMP-1分组进行干预实验.A组为对照组,B组和C组为实验组,B组加入100 ng/mlCDMP-1,C组加入200 ng/mlCDMP-1.采用光学相差显微镜及透射电镜对照组和实验组细胞形态和超微结构进行对比观察;XTT-PMS法检测各组髓核细胞12天的生长曲线,研究三组细胞间的生长动力学差异;实时荧光定量PCR检测髓核细胞7,14,21天Ⅱ型胶原和糖胺多糖的mRNA表达.

关键词：人退变髓核细胞生物学性状 Ⅱ型胶原糖胺多糖软骨形态发生蛋白-Ⅰ

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兔膑骨-膑腱结合部损伤动物模型术后石膏固定的比较

兔膑骨-膑腱结合部损伤动物模型术后石膏固定的比较

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第十一届全军骨科学术大会

作者：梁佩红王文董飞谭见容梁伟国陈鸿辉暨南大学医学院附属第四医院广州市红十字会医院广州市创伤外科研究所 510220

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兔膝关节软骨缺损动物模型的建立

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中国组织工程研究与临床康复 2009年第2期13卷 280-283页

作者：梁佩红叶春婷康宁杨小红谭见容戴丽冰沈雁王文梁伟国陈鸿辉暨南大学医学院附属第四医院广州市红十字会医院创伤外科研究所广东省广州市510220

背景:以往制备骨关节模型的方法成模时间较长。目的:建立一个理想的兔膝关节软骨缺损动物模型。设计、时间及地点:随机分组设计,对照动物实验,于2007-03/2008-10在广州市红十字会医院创伤外科研究所完成。材料:用新西兰大白兔16只,雌雄... 详细信息

背景:以往制备骨关节模型的方法成模时间较长。目的:建立一个理想的兔膝关节软骨缺损动物模型。设计、时间及地点:随机分组设计,对照动物实验,于2007-03/2008-10在广州市红十字会医院创伤外科研究所完成。材料:用新西兰大白兔16只,雌雄不限,体质量3.2～4.0kg。方法:以6g/L戊巴比妥钠行耳缘静脉注射麻醉下,通过在实验兔后腿关节的股骨髁关节面部位用电动骨钻,在控制其直径4.5mm,深度为3mm,造成其关节软骨的缺损,制模后2,6,12,18周取出其股骨髁。主要观察指标:用大体观察、组织学染色共聚焦显微镜观察缺损部位软骨修复情况。结果:实验兔后腿关节的股骨髁关节面的关节软骨缺损后,在制模后2,6周缺损部位凹陷明显,只有少许肉芽组织和纤维组织生长填充,未见软骨细胞爬行生长,12,18周见缺损部位以纤维组织增生为主,底部及边缘可见骨组织和软骨增生,但是镜下形态仍与正常软骨组织区别较大,表面仍未见软骨细胞爬行生长。结论:实验建立的兔膝关节软骨缺损模型成模时间短,且缺损部位不能通过自我修复达到自愈。

关键词：软骨缺损模型,动物组织构建

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PPAR-γ在增生性瘢痕成纤维细胞中的表达及意义

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广东医学 2009年第11期30卷 1595-1596页

作者：潘姝李叶扬戴丽冰黄粤暨南大学医学院第四附属医院广东省广州市红十字会医院烧伤整形科510220 暨南大学医学院第四附属医院广东省广州市红十字会医院创伤外科研究所510220

目的探讨核转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)在增生性瘢痕成纤维细胞中的表达状况及其意义。方法应用免疫细胞化学检测3例增生性瘢痕和正常皮肤成纤维细胞中PPAR-γ的表达。结果免疫细胞化学显示PPAR-γ蛋白在增生性瘢... 详细信息

目的探讨核转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)在增生性瘢痕成纤维细胞中的表达状况及其意义。方法应用免疫细胞化学检测3例增生性瘢痕和正常皮肤成纤维细胞中PPAR-γ的表达。结果免疫细胞化学显示PPAR-γ蛋白在增生性瘢痕和正常皮肤成纤维细胞中均有表达,但是在增生性瘢痕中表达较正常皮肤低。结论核内受体PPAR-γ在增生性瘢痕成纤维细胞中呈下调表达,提示激活PPAR-γ可能是增生性瘢痕治疗的一种新方法。

关键词： PPAR-γ 增生性瘢痕成纤维细胞

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Caspase 3 siRNA抑制关节软骨细胞的凋亡

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中国组织工程研究与临床康复 2009年第50期13卷 9832-9836页

作者：叶春婷黄耀熊杨小红暨南大学生物医学工程系广东省广州市510632 暨南大学医学院附属广州市红十字会医院广州市创伤外科研究所广东省广州市510220

背景:到目前为止,国内外对caspase 3抑制剂的研发大都集中在肽类或非肽类化合物的合成和发现上,而利用RNAi干扰技术直接沉默caspase 3基因,在基因水平抑制软骨细胞凋亡还未见报道。目的:利用慢病毒载体,把Caspase 3 siRNA转入软骨细胞,... 详细信息

背景:到目前为止,国内外对caspase 3抑制剂的研发大都集中在肽类或非肽类化合物的合成和发现上,而利用RNAi干扰技术直接沉默caspase 3基因,在基因水平抑制软骨细胞凋亡还未见报道。目的:利用慢病毒载体,把Caspase 3 siRNA转入软骨细胞,使其caspase 3基因沉默,相对阻断凋亡效应的联级反应,期望达到抵抗软骨细胞凋亡的目的。设计、时间及地点:单一样本观察,于2008-06/2009-06在暨南大学医学院附属广州市红十字会医院,广州市创伤外科研究所完成。材料:软骨细胞从SPF级SD大鼠关节中提取,caspase 3 siRNA慢病毒载体为实验构建。方法:构建大鼠pSIH1-H1-copGFP-Caspase 3 siRNA表达质粒,使用慢病毒包装系统,在293TN细胞中进行包装生产含caspase 3 siRNA的慢病毒颗粒,然后转导(transduce)入大鼠软骨细胞。主要观察指标:实时荧光定量-聚合酶链反应和Westernblot检测转导后软骨细胞caspase 3基因沉默情况,再用肿瘤坏死因子α诱导软骨细胞凋亡,流式细胞技术AnnexinV/PI检测软骨细胞凋亡情况。结果:Caspase 3 siRNA能顺利转入软骨细胞,转导率达90%;实时荧光定量-聚合酶链反应检测软骨细胞中Caspase 3mRNA的表达量,实验组低于与对照组差异有显著性(P<0.01);Western blot检测软骨细胞的Caspase 3蛋白表达量,实验组低于与对照组差异有显著性意义(P<0.01);在使用肿瘤坏死因子α诱导软骨细胞凋亡时,caspase 3 siRNA转导组抑制细胞凋亡的能力是对照组的7倍。结论:利用慢病毒载体把caspase 3 siRNA转入软骨细胞,使软骨细胞的caspase 3基因沉默,可以达到相对拮抗软骨细胞凋亡的目的。

关键词：软骨细胞 Caspase 3 siRNA 基因沉默慢病毒载体细胞凋亡

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胶原在软骨组织工程中的应用

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中国矫形外科杂志 2009年第13期17卷 998-1000页

作者：秦胜男陈鸿辉暨南大学医学院附属广州市红十字会医院广州市创伤外科研究所广州510220 暨南大学生物医学工程研究所广州510632

软骨组织工程的出现,为解决软骨修复这个临床难题提供了新的方法。然而寻找一种合适的生物载体材料是目前软骨组织工程的热点。胶原是一种天然支架材料,具有良好的生物相容性、可降解性和生物活性,可作为细胞三维生长支架,并且有维持种... 详细信息

软骨组织工程的出现,为解决软骨修复这个临床难题提供了新的方法。然而寻找一种合适的生物载体材料是目前软骨组织工程的热点。胶原是一种天然支架材料,具有良好的生物相容性、可降解性和生物活性,可作为细胞三维生长支架,并且有维持种子细胞增殖、黏附和分化的能力。本文就胶原及其复合材料在软骨组织工程方面的应用状况与前景作一综述。

关键词：胶原软骨修复组织工程

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前列腺癌患者血清PSA、AR表达、Gleason评分和临床分期的相关性研究

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岭南现代临床外科 2009年第3期9卷 186-188,191页

作者：潘文海李正明黄文胜李刚施国强郑荣根李颂方力暨南大学医学院第四附属医院广州市红十字会医院泌尿外科广州510220 暨南大学医学院第四附属医院广州市红十字会医院病理科广州510220

目的探讨前列腺癌患者血清前列腺特异抗原(PSA)、雄激素受体(AR)表达、Gleason评分和临床分期之间的相关性。方法回顾性分析我院55例前列腺癌患者的临床、病理和免疫组化资料。结果TPSA、FPSA值与Gleason评分、临床分期呈正相关,TPSA、F... 详细信息

目的探讨前列腺癌患者血清前列腺特异抗原(PSA)、雄激素受体(AR)表达、Gleason评分和临床分期之间的相关性。方法回顾性分析我院55例前列腺癌患者的临床、病理和免疫组化资料。结果TPSA、FPSA值与Gleason评分、临床分期呈正相关,TPSA、FPSA、AR表达强度以及Gleason评分均与临床分期呈正相关(相关系数分别为:0.419,0.385,0.376,0.514),其中Gleason评分与临床分期的相关性最高。随着TPSA值的升高,对晚期Pca的判断价值明显增大,以TPSA≥30ng/ml为标准判断晚期Pca的准确性较高。结论TPSA、FPSA值、AR表达强度以及Gleason评分值与临床分期有正相关关系,它们可以作为进行临床分期时需综合考虑的因素;TPSA≥30ng/ml可以作为判断晚期Pca有价值的标准。

关键词：前列腺癌前列腺特异性抗原雄激素受体 Gleason评分临床分期

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乳腺癌手术中局部应用沙培林的临床观察

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中国肿瘤临床与康复 2009年第4期16卷 342-343页

作者：陈伟光李梅李艳薇暨南大学医学院第四附属医院广州市红十字会医院普外科 510220

目的观察乳腺癌患者手术中局部应用沙培林对患者术后恢复的影响。方法随机抽取乳腺癌手术患者81例,观察组42例术中应用沙培林,对照组39例术中不给予沙培林。术后对患者24 h体温变化情况、伤口疼痛时间、伤口引流量及拔除伤口引流管的时... 详细信息

目的观察乳腺癌患者手术中局部应用沙培林对患者术后恢复的影响。方法随机抽取乳腺癌手术患者81例,观察组42例术中应用沙培林,对照组39例术中不给予沙培林。术后对患者24 h体温变化情况、伤口疼痛时间、伤口引流量及拔除伤口引流管的时间进行比较研究。结果两组伤口疼痛时间、发热等不良事件的发生差异无显著性;观察组伤口引流量较少,拔管时间短。结论乳腺癌术中应用沙培林不良反应少,患者耐受性好。同时能有效减少创面引流量,提早拔除伤口引流管的时间,有利于切口愈合及患者恢复。

关键词：乳腺肿瘤沙培林伤口引流

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