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CD40L-PLL-CpG寡核苷酸交联复合物的制备及其对B淋巴细胞的靶向性

中国病理生理杂志 2005年第5期21卷 902-905页

作者：蒋建伟郑梅珍曾慧兰曾耀英狄静芳严玉霞吴美玉暨南大学医学院生化教研室广东广州510632 暨南大学第一附属医院血液科广东广州510632 暨南大学组织移植与免疫研究中心广东广州510632

目的探讨CpG寡核苷酸(CpGODN)对B淋巴细胞的靶向性及免疫增强效应。方法制备CD40配体(CD40L)-多聚左旋赖氨酸(PLL)-CpGODN交联复合物。复合物与脐血单个核细胞(MNCs)共培养,流式细胞仪检测MNCs对羧基荧光素FAM标记CpGODN的摄取率、淋巴... 详细信息

目的探讨CpG寡核苷酸(CpGODN)对B淋巴细胞的靶向性及免疫增强效应。方法制备CD40配体(CD40L)-多聚左旋赖氨酸(PLL)-CpGODN交联复合物。复合物与脐血单个核细胞(MNCs)共培养,流式细胞仪检测MNCs对羧基荧光素FAM标记CpGODN的摄取率、淋巴细胞亚群的表达;MTT法测MNCs增殖情况;ELISA法测培养上清IgG水平。结果与CpGODN相比,MNCs对CD40L-PLL-CpGODN交联复合物摄取率更高(>98%),达摄取峰值时间更早,细胞内荧光强度维持更稳定;MNCs与之共培养后CD19+、CD22+、CD20+细胞表达明显升高,MTT法测MNCs增殖情况、ELISA法测培养上清IgG水平均明显升高。结论CD40L-PLL载体系统能将CpGODN靶向作用于B细胞,增强其免疫效应。

关键词： CD40配体寡核苷酸类交联复合物 B淋巴细胞靶向

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肾小球疾病患者败血症与其免疫状况的相关性

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广东医学 2005年第11期26卷 1508-1509页

作者：陈求刚钟雪云廖康陈冬梅曾燕禤建美崔颖鹏中山大学附属第一医院医学检验部广州510080 暨南大学医学院病理教研室广州510630

目的对肾小球疾病患者血液感染时的免疫状况与非感染患者进行对照研究,探讨影响其血液感染的免疫因素。方法散射比浊法检测血清IgG,IgA,IgM,C3,C4;法国梅里埃公司VITEK-60 System全自动细菌分析仪鉴定菌种;美国Coulter公司T540全血分析... 详细信息

目的对肾小球疾病患者血液感染时的免疫状况与非感染患者进行对照研究,探讨影响其血液感染的免疫因素。方法散射比浊法检测血清IgG,IgA,IgM,C3,C4;法国梅里埃公司VITEK-60 System全自动细菌分析仪鉴定菌种;美国Coulter公司T540全血分析仪或日立9500+3500 System流水线五分类自动分析仪做白细胞分析。结果肾小球疾病合并败血症14例,非感染者29例,两组IgG,IgA,IgM,C3,C4,白细胞,中性粒细胞和淋巴细胞总数差异无显著性(P>0.05);感染组、非感染组与正常对照组相比,除中性粒细胞外差异无显著性。血液感染以真菌为主,占43%,杆菌和球菌感染相当。结论肾小球疾病患者的血液感染与血清免疫球蛋白数量无关,免疫功能低下是其感染的主要因素之一。

关键词：肾小球疾病败血症免疫状况血液感染免疫球蛋白

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妊娠相关糖蛋白Glycodelin抑制E型选择素介导的细胞黏附

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广东医学 2005年第5期26卷 610-612页

作者：王晓玉林绍强屈洋 U.Jeschke R.Stahn 暨南大学附属第一医院妇产科广州510630 暨南大学医学院免疫学教研室广州510630 暨南大学医学院病理生理学教研室广州510630 慕尼黑大学妇产医院戴尔布吕克分子医学研究中心

目的探讨来源于孕妇羊水和血清的高纯度Glycodelin对E型选择素介导的细胞黏附过程的影响程度。方法以色谱仪分离和纯化孕妇羊水和血清的Glycodelin,测定铬51标记的肝癌细胞系-HepG2细胞在不同来源、不同浓度Glycodelin作用下和重组E型... 详细信息

目的探讨来源于孕妇羊水和血清的高纯度Glycodelin对E型选择素介导的细胞黏附过程的影响程度。方法以色谱仪分离和纯化孕妇羊水和血清的Glycodelin,测定铬51标记的肝癌细胞系-HepG2细胞在不同来源、不同浓度Glycodelin作用下和重组E型选择素的黏附能力,从而评价Glycodelin对E型选择素介导的细胞黏附过程的影响。结果血清和羊水Glycodelin能有效抑制Hepg2细胞和重组E型选择素之间的黏附,其抑制作用呈浓度依赖关系,其相对抑制力分别为纯四糖结构Sialyl-Lewisx(sLex)的9.4×105和4.0×105倍。结论妊娠相关糖蛋白Glycodelin高度抑制E型选择素介导的细胞黏附。

关键词： Glycodelin 细胞黏附妊娠相关选择素糖蛋白 E型介导 HepG2细胞 Hepg2细胞分离和纯化肝癌细胞系影响程度黏附能力不同浓度浓度依赖抑制作用高纯度血清羊水色谱仪孕妇重组

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人碱性成纤维细胞生长因子缓释海绵促进大鼠外周神经损伤的修复

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中国临床康复 2005年第21期9卷 86-88,i003页

作者：姚成灿姚平吴昊查振刚李校堃暨南大学药学院广东省广州市510632 暨南大学医学院生理教研室广东省广州市510632 暨南大学第一附属医院骨科广东省广州市510632

目的:观察含有人碱性成纤维细胞生长因子的缓释性胶原蛋白海绵对大鼠外周神经损伤修复的促进作用,并与单独应用胶原海绵和人碱性成纤维细胞生长因子组进行效果比较。方法:实验于2004-07/09在暨南大学药学院完成。制备大鼠坐骨神经横断... 详细信息

目的:观察含有人碱性成纤维细胞生长因子的缓释性胶原蛋白海绵对大鼠外周神经损伤修复的促进作用,并与单独应用胶原海绵和人碱性成纤维细胞生长因子组进行效果比较。方法:实验于2004-07/09在暨南大学药学院完成。制备大鼠坐骨神经横断损伤模型后,40只动物随机分为生理盐水对照组8只,造模后肌注生理盐水,1次/周,10μL/次,连续4周。人碱性成纤维细胞生长因子注射组8只,造模后肌注碱性成纤维细胞生长因子溶液,1次/周,500U/次,连续4周。胶原海绵组8只,用2cm×2cm的胶原海绵包裹受损神经处。人碱性成纤维细胞生长因子缓释海绵组8只,用2cm×2cm的人碱性成纤维细胞生长因子缓释海绵包裹受损神经处。假手术组8只,未切断坐骨神经,术后不做任何处理。分别于第2,3,4,5周测定坐骨神经的传导速度并评定坐骨神经的功能指数;第5周测定后处死动物,取远端坐骨神经组织切片行苏木精-伊红染色,观察病理改变情况。结果:40只大鼠全部进入结果分析。①大体观察结果:各组大鼠术后伤口愈合良好,人碱性成纤维细胞生长因子缓释海绵组蛋白海绵逐步降解,远端神经光泽、周径正常。②光镜观察结果:人碱性成纤维细胞生长因子缓释海绵组的神经纤维、髓鞘和雪旺细胞都较接近假手术组,可显著改善受损神经的病理形态学结构。③电生理学检测坐骨神经功能指数结果:术后第2,3,4,5周胶原海绵组大鼠的坐骨神经功能指数与生理盐水对照组基本一致,而人碱性成纤维细胞生长因子组和人碱性成纤维细胞生长因子缓释海绵组明显优于生理盐水对照组(P<0.01);而且人碱性成纤维细胞生长因子缓释海绵组坐骨神经功能指数评定结果明显优于人碱性成纤维细胞生长因子组(P<0.01)。④电生理学检测坐骨神经传导速度:人碱性成纤维细胞生长因子缓释海绵组坐骨神经传导速度最接近假手术组,明显快于其他3组(P<0.01)。结论:以生物相容性、可降解性、可吸收性较好的胶原蛋白海绵为载体,与稳定性和活性较差的人碱性成纤维细胞生长因子相结合,应用于神经损伤的修复,获得了预期效果。

关键词：周围神经/损伤成纤维细胞生长因子,碱性胶原

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大鼠睾丸热作用后各类生精细胞DNA分析

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生殖与避孕 2005年第6期25卷 328-332页

作者：许多朱伟杰王自能秦达念暨南大学附属第一医院妇产科广州510632 暨南大学生殖免疫研究中心广州510632 汕头大学医学院生理教研室汕头515031

目的:探讨热作用后大鼠睾丸各类生精细胞DNA变化和生精功能的改变。方法:雄性Sprague-Dawley大鼠80只,随机分热处理组(43℃,30min)和对照组(22℃,30min),热处理组按热处理后0.5d、1d、3d、6d、10d、25d、35d和50d随机分成8个亚组(n=6),... 详细信息

目的:探讨热作用后大鼠睾丸各类生精细胞DNA变化和生精功能的改变。方法:雄性Sprague-Dawley大鼠80只,随机分热处理组(43℃,30min)和对照组(22℃,30min),热处理组按热处理后0.5d、1d、3d、6d、10d、25d、35d和50d随机分成8个亚组(n=6),每亚组相应设立对照组(n=4)。应用流式细胞仪,对各组大鼠睾丸各类生精细胞DNA含量进行检测和分析。结果:与对照组相比较,热作用后0.5-35d组4C(初级精母细胞)细胞群和6-50d组1C(精子细胞和精子)细胞群的比例显著降低(P<0.05),3-35d组2C(精原细胞和次级精母细胞)细胞群比例显著升高(P<0.05)。8个实验组4C∶2C和3-35d组1C∶2C均显著低于对照组(P<0.05),1d组1C∶4C显著高于对照组(P<0.05)。结论:热作用后首先引起初级精母细胞数量显著下降,其次为精子细胞及精子。热作用使生精过程多个环节效率降低,流式细胞术是一种研究热作用引起生精功能变化的有效方法,有助于分析各类生精细胞在热损伤后的DNA变化。

关键词： DNA含量流式细胞术精子发生热作用

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大鼠睾丸局部热作用对生精细胞Bcl-2及Bax蛋白表达的影响

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生殖与避孕 2005年第5期25卷 268-271页

作者：许多朱伟杰王自能秦达念暨南大学附属第一医院妇产科广州510632 暨南大学生殖免疫研究中心广州510632 汕头大学医学院生理教研室汕头515031

目的:探讨睾丸局部热作用对大鼠生精细胞凋亡调节蛋白Bcl-2及Bax的影响。方法:雄性Sprague-Dawley大鼠40只,随机分热处理组和对照组,热处理组按热处理后0.5d、1d、3d和6d随机分成4个亚组(n=6),每个亚组相应设立对照组(n=4)。应用免疫组... 详细信息

目的:探讨睾丸局部热作用对大鼠生精细胞凋亡调节蛋白Bcl-2及Bax的影响。方法:雄性Sprague-Dawley大鼠40只,随机分热处理组和对照组,热处理组按热处理后0.5d、1d、3d和6d随机分成4个亚组(n=6),每个亚组相应设立对照组(n=4)。应用免疫组织化学方法检测Bcl-2和Bax在生精细胞的表达。结果:与对照组相比较,热作用后各组Bcl-2阳性细胞表达率及染色阳性细胞Bcl-2含量均显著下降(P<0.01),热作用后各组染色阳性细胞Bax含量均显著增高(P<0.01),除6d组Bax阳性细胞表达率显著下降外(P<0.01),其它各组Bax阳性细胞表达率无差别(P>0.05)。热作用后Bax阳性信号重新分布,从对照组分布在胞浆变成热作用后分布在核周及核。结论:热作用诱导睾丸生精细胞Bcl-2表达下降,Bax表达增高且重新分布。Bcl-2及Bax基因与热诱导生精细胞凋亡发生密切相关。

关键词： Bcl—2 Bax 热作用生精细胞大鼠

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热诱导大鼠睾丸生精上皮多核细胞的出现和变化

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生殖与避孕 2005年第4期25卷 201-204页

作者：许多朱伟杰王自能秦达念暨南大学附属第一医院妇产科广州510632 暨南大学生殖免疫研究中心广州510632 汕头大学医学院生理教研室汕头515031

目的:研究大鼠睾丸局部热作用后生精上皮多核细胞的出现和变化。方法:雄性Sprague-Dawley大鼠50只,随机分热处理组和对照组,热处理组按热处理后1d、3d、6d、10d和25d随机分成5个亚组(n=6),每亚组相应设立对照组(n=4)。应用HE染色、原位... 详细信息

目的:研究大鼠睾丸局部热作用后生精上皮多核细胞的出现和变化。方法:雄性Sprague-Dawley大鼠50只,随机分热处理组和对照组,热处理组按热处理后1d、3d、6d、10d和25d随机分成5个亚组(n=6),每亚组相应设立对照组(n=4)。应用HE染色、原位末端标记法(TUNEL)和免疫组织化学方法检测大鼠睾丸局部受热后1d、3d、6d、10d和25d生精上皮组织学结构变化,多核细胞凋亡情况以及Fas和FasL在多核细胞中的表达情况。结果:热作用后生精上皮出现多核细胞,以1d、3d组最多见,并且多核细胞存在凋亡现象, Fas和FasL在多核细胞中亦可见表达。结论:大鼠睾丸局部热作用诱导生精上皮多核细胞出现,且随热作用后时间不同而变化。多核细胞在生精上皮热损伤中可能具有独特的生物学意义。

关键词：多核细胞热作用睾丸大鼠

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兔角膜缘上皮细胞在体外壳聚糖共混膜上的培养及生物学鉴定

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2005年第2期26卷 205-209页

作者：丁勇徐锦堂陈建苏陈剑吴春云张志雄周长忍暨南大学附属第一医院眼科广东广州510632 暨南大学医学院病原学教研室广东广州510632 暨南大学生命科学院广东广州510632

目的:探讨壳聚糖-胶原-硫酸软骨素共混膜作为兔角膜缘上皮细胞体外培养载体的可行性。方法:采用消化培养法,用特殊培养液在壳聚糖-胶原-硫酸软骨素共混膜上培养兔角膜缘上皮细胞,第7d应用免疫组化方法对培养细胞作生物学鉴别并在扫描电... 详细信息

目的:探讨壳聚糖-胶原-硫酸软骨素共混膜作为兔角膜缘上皮细胞体外培养载体的可行性。方法:采用消化培养法,用特殊培养液在壳聚糖-胶原-硫酸软骨素共混膜上培养兔角膜缘上皮细胞,第7d应用免疫组化方法对培养细胞作生物学鉴别并在扫描电子显微镜下观察细胞形态。结果:上皮细胞AE1/AE5单克隆抗体免疫组化阳性,培养第7d的上皮细胞有多种细胞形态,细胞胞体饱满,相互通过突起连接,表面可见微绒毛。结论:兔角膜缘上皮细胞可在壳聚糖-胶原-硫酸软骨素共混膜上生长,并具有分裂增殖能力。

关键词：壳聚糖共混膜兔角膜缘上皮细胞体外培养生物学鉴别

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肿节风防治化疗后血小板减少症的研究

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中药材 2005年第1期28卷 35-38页

作者：钟立业刘天浩陈运贤钟雪云杜欣陆泽生翁建宇吴穗晶林伟广东省人民医院血液内科广州510080 中山大学附属第二医院肿瘤科广州510120 中山大学附属第一医院血液内科广州510080 暨南大学医学院病理教研室广州510632

目的 :探讨肿节风对大剂量化疗后小鼠血小板减少的防治作用。方法 :本研究以Babl/c纯系清洁级小鼠为实验对象 ,通过大剂量 5 氟尿嘧啶腹腔注射复制血小板减少的动物模型 ,用肿节风稀释液从实验开始连续进行灌胃干预 ,分别在预处理前、... 详细信息

目的 :探讨肿节风对大剂量化疗后小鼠血小板减少的防治作用。方法 :本研究以Babl/c纯系清洁级小鼠为实验对象 ,通过大剂量 5 氟尿嘧啶腹腔注射复制血小板减少的动物模型 ,用肿节风稀释液从实验开始连续进行灌胃干预 ,分别在预处理前、化疗前、化疗后第 2、第 4及第 7天测定小鼠血常规 ;并在化疗后第 7天处死小鼠 ,行骨髓病理活检 ,观察骨髓造血情况。结果 :经过肿节风预处理后 ,化疗前单药干预组及联合干预组小鼠外周血小板数量显著高于同期对照组 (P <0 0 5 ) ,化疗后两个实验组小鼠的血小板数量与对照组相比无显著下降 (P <0 0 5 ) ,而两实验组间无显著性差异 (P >0 0 5 )。骨髓病理检查结果提示 ,两实验组小鼠骨髓增生活跃 ,骨髓腔内可见巨核细胞 ,对照组小鼠骨髓增生低下 ,未发现巨核细胞。结论 :肿节风具有对抗大剂量 5 FU所造成的血小板减少的作用 ,从而预防并治疗化疗后血小板减少症的发生。

关键词：化疗后小鼠肿节风对照组血小板减少症骨髓增生化疗前纯系稀释液治疗

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黄芪注射液对刀豆蛋白诱导的小鼠肝脏损伤的保护作用

中华实用中西医杂志

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中华实用中西医杂志 2005年第20期18卷 1287-1289页

作者：侯敬申潘运龙覃莉赵莉暨南大学附属第一医院暨南大学医学院组胚教研室暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广州510632

目的:观察免疫损伤模型组与实验组小鼠外周血中T细胞亚群的变化情况,探讨黄芪注射液对小鼠肝脏损伤的保护作用.方法实验组小鼠每天腹腔注射黄芪注射液400μl,正常组与模型组小鼠每天给予等剂量的生理盐水.第7天在给药1小时后,模型组与... 详细信息

目的:观察免疫损伤模型组与实验组小鼠外周血中T细胞亚群的变化情况,探讨黄芪注射液对小鼠肝脏损伤的保护作用.方法实验组小鼠每天腹腔注射黄芪注射液400μl,正常组与模型组小鼠每天给予等剂量的生理盐水.第7天在给药1小时后,模型组与实验组小鼠分别经尾静脉注射刀豆蛋白,正常组小鼠则给予等剂量的生理盐水.8小时后检测各组动物外周血中CD4+T、CD8+T细胞以及CD4+/CD25+T细胞所占比例,检测血浆转氨酶水平,制备肝脏病理标本,进行HE染色.结果尾静脉注射8小时后,实验组小鼠外周血的CD4+所占T细胞比例较模型组有所升高(P<0.05),但仍低于正常组水平(P>0.05);而CD8+T细胞的比例则无明显变化(P＞0.05).实验组ALT、AST水平明显低于模型组(P<0.05).实验组汇管区淋巴细胞浸润明显减少.结论黄芪注射液对刀豆蛋白诱导的小鼠肝损伤有确切的保护作用.

关键词：刀豆蛋白A 黄芪注射液肝损伤 CD4+ T细胞

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