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西安交通大学学报（医学版） 2011年第5期32卷 557-560页

作者：吕军何功浩周颖侯征陈瑛瑛薛晓燕罗晓星第四军医大学药学系药理学教研室陕西西安710032 西安交通大学医学院第一附属医院药学部陕西西安710061 成都军区昆明总医院药学部云南昆明650032

目的直接证明PC12细胞能够合成和分泌组胺(histamine,HA),为将其应用于交感神经共存递质囊泡循环动力学研究提供实验依据。方法常规培养PC12细胞,用嵌套RT-PCR(nRT-PCR)和Western blot技术检测其合成HA的关键酶组氨酸脱羧酶(histidine d... 详细信息

目的直接证明PC12细胞能够合成和分泌组胺(histamine,HA),为将其应用于交感神经共存递质囊泡循环动力学研究提供实验依据。方法常规培养PC12细胞,用嵌套RT-PCR(nRT-PCR)和Western blot技术检测其合成HA的关键酶组氨酸脱羧酶(histidine decarboxylase,HDC)的mRNA和蛋白表达,利用免疫荧光技术观测HA、HDC以及HA囊泡在细胞中的定位。结果从基因和蛋白水平均证实了该细胞中表达HDC,并利用形态学方法在细胞中检测到HA、HDC以及HA囊泡的存在。结论 PC12细胞确实含有HA,结合分化型PC12细胞与交感神经元相似的特征,可将其作为交感神经共存递质囊泡循环动力学研究的理想细胞模型。

关键词：组胺组氨酸脱羧酶 PC12 囊泡共存递质嵌套RT-PCR(nRT-PCR) 交感神经元

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白细胞介素-6基因多态性与高脂血症的相关性

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中国老年学杂志 2011年第1期31卷 23-25页

作者：何美霞张明明刘琼华海婴巴云鹏张莉蓉郑州大学医药科学研究院河南省医药科学研究院药理研究室河南郑州450052 中南大学湘雅医院心血管内科郑州大学第一附属医院耳鼻喉科郑州大学基础医学院药理教研室

目的探讨高血脂患者白细胞介素-6（IL-6）启动子-634C/G基因多态性是否为高脂血症的遗传因素。方法筛选高脂血症患者197例,健康志愿者200例。采用酚-氯仿法提取外周血DNA,PCR-RFLP技术检测IL-6基因多态性。结果高脂血症组CC、CG和GG基... 详细信息

目的探讨高血脂患者白细胞介素-6（IL-6）启动子-634C/G基因多态性是否为高脂血症的遗传因素。方法筛选高脂血症患者197例,健康志愿者200例。采用酚-氯仿法提取外周血DNA,PCR-RFLP技术检测IL-6基因多态性。结果高脂血症组CC、CG和GG基因型的频率分别为51.3%（101/197）,37.6%（74/197）和11.1%（22/197）,与正常对照组〔CC：65%（130/200）;CG：28.5%（57/200）;GG：6.5%（13/200）〕相比差异具有显著性（P〈0.05）。关联分析显示G等位基因是高脂血症的一个独立危险因素（OR=1.736,95%CI=1.257~2.397）。高脂血症组中,CG及GG基因型者的总胆固醇（TC）水平明显高于CC型,GG基因型高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平明显低于CC型。结论 IL-6-634 CG及GG基因型和G等位基因携带者具有高脂血症易感性。

关键词： IL-6-634C/G 基因多态性高脂血症

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亚胺培南耐药铜绿假单胞菌的金属β-内酰胺酶检测

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中国抗生素杂志 2011年第3期36卷 223-227页

作者：余广超徐霖袁广卿张甜陈康蒋岗姜余琴许沙沙常彦敏曹开源暨南大学附属第一医院临床检验中心广州510630 中山大学临床检验标准化研究中心广州510080 中山大学中山医学院微生物学教研室广州510080 广东省重大传染病预防和控制技术研究中心广州510080

目的了解金属β-内酰胺酶在广州地区铜绿假单胞菌中的流行状况及其流行亚型,完善广州地区金属β-内酰胺酶的分子流行病学资料。方法采用双纸片协同法和双纸片增效法对164株亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌筛选金属β-内酰胺酶表型阳性的菌株... 详细信息

目的了解金属β-内酰胺酶在广州地区铜绿假单胞菌中的流行状况及其流行亚型,完善广州地区金属β-内酰胺酶的分子流行病学资料。方法采用双纸片协同法和双纸片增效法对164株亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌筛选金属β-内酰胺酶表型阳性的菌株,采用PCR检测5类金属β-内酰胺酶的编码基因(IMP家族、VIM家族、GIM-1、SPM-1和SIM-1),利用生物信息学的方法对检测到的金属β-内酰胺酶亚型进行比对分析并制作分子进化树。结果 164株亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌中筛选出22株金属β-内酰胺酶表型阳性的菌株,IMP阳性15株(9.1%),其中11株为IMP-9亚型,另外4株携带一个新的亚型,命名为IMP-25,VIM阳性5株(3.0%),均为VIM-2亚型,未检测到GIM-1、SPM-1和SIM-1型金属β-内酰胺酶。结论广州地区铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶的基因型已经出现多型化的特征,同时存在IMP型和VIM型金属β-内酰胺酶的流行,本次研究发现了一个新的金属β-内酰胺酶亚型(IMP-25),为IMP家族金属β-内酰胺酶的多样性及其分子流行病学资料提供了新的信息。

关键词：铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶耐药基因

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颈椎病椎动脉减压脊柱稳定技术进展

颈椎病椎动脉减压脊柱稳定技术进展

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2011全国骨关节创伤学术研讨会

作者：陈鸿儒董圻汪华侨暨南大学附属第一医院骨科广东省广州市 510630 医学院解剖教研室中山大学中山第一医院人体解剖研究室

目的：探讨椎动脉减压脊柱稳定技术,治疗椎动脉型颈椎病(CSA)效果与进展。　　方法：回顾椎动脉减压脊柱稳定技术的进展,及其手术方法及意外处理。术前后康复治疗并分对照组比较。　　结果：MRA及三维CTA造影术显示椎动脉痉挛,迂曲是非... 详细信息

目的：探讨椎动脉减压脊柱稳定技术,治疗椎动脉型颈椎病(CSA)效果与进展。
　　方法：回顾椎动脉减压脊柱稳定技术的进展,及其手术方法及意外处理。术前后康复治疗并分对照组比较。
　　结果：MRA及三维CTA造影术显示椎动脉痉挛,迂曲是非手术适应症,椎动脉受压致管腔狭窄是手术适应症。在手术显微镜辅助下进行的微创颈椎减压椎间融合内固定技术,适应椎动脉被骨赘直接受压的重症患者,本组1284例各型颈椎病中CSA 107例占8．3％。107例分两组：A组(对照)53例椎动脉减压术前后常规治疗,B组(治疗)54例椎动脉减压术前、后用康复综合治疗。采用t检验及Lysholm①临床症状,②TCD血流参数,③MRA表现．评分评定。结果：对照A组53例,优良率91．7％。治疗B组54例,优良率98％与A组相比差异有统计学意义(P>0．05)。经5～24年随访,无手术并发症，近远期疗效满意。
　　结论：椎动脉减压术脊柱稳定技术是微创开放安全有效的手术治疗。康复治疗CSA的中西药物、高氧综合治疗、颈椎操等对CSA前后应用,符合祖国医学内外兼治，筋骨并重的原理,提高远期疗效。椎动脉血管重建、血管内支架成形术及经皮椎间盘微创外科治疗,都具有很好发展前景。

关键词：椎动脉减压脊柱稳定技术血管重建内支架成形术康复治疗临床疗效

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大黄素对Cx32组成的细胞缝隙连接通讯功能的影响

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中国现代药物应用 2011年第10期5卷 3-4页

作者：吕显林王琴陈清陶亮东莞市横沥人民医院药剂科 523460 中山大学医学院药理学教研室中山大学附属第一医院药学部

目的在转染并稳定表达Cx32的Hela细胞上,观察大黄素对Cx32的GJIC以及Cx32蛋白表达水平的影响。方法采用SRB法检测不同浓度大黄素对Hela细胞的毒性;用细胞接种荧光示踪法（＂parachute＂dye-couplinga ssay）观察不同浓度大黄素对GJIC的... 详细信息

目的在转染并稳定表达Cx32的Hela细胞上,观察大黄素对Cx32的GJIC以及Cx32蛋白表达水平的影响。方法采用SRB法检测不同浓度大黄素对Hela细胞的毒性;用细胞接种荧光示踪法（＂parachute＂dye-couplinga ssay）观察不同浓度大黄素对GJIC的影响;用western blot法研究大黄素在影响GJIC功能浓度范围内对Cx32蛋白表达的影响。结果大黄素在0~1μmol/L浓度时对Hela细胞无毒性作用;大黄素（24~600nmol/L）预处理4h,能浓度依赖性地增强GJIC及Cx32蛋白表达量。结论大黄素能够增强Cx32的细胞GJIC;此增强作用可能与其增加Cx32蛋白表达水平有关。

关键词：大黄素缝隙连接蛋白缝隙连接通讯

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H2O2促进子痫前期外周免疫细胞活化

H2O2促进子痫前期外周免疫细胞活化

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2011中国妇产科学术会议暨浙江省计划生育与生殖医学学术年会暨生殖健康讲习班

作者：钱中清曾耀英王才智汪洪涛姚春艳蚌埠医学院免疫学教研室安徽省感染免疫重点实验室暨南大学组织移植与免疫实验中心蚌埠医学院第一附属医院产科

目的探讨子痫前期患者血清中HO与中性粒细胞及T淋巴细胞活化的关系。方法①荧光标记抗体全血染色后,流式细胞仪分别检测正常非孕妇组,正常孕妇组及子痫前期患者组外周血CD3/HLA-D,CD3/CD62L细胞百分率,及粒细胞区CD62L细胞百分率;②40μ... 详细信息

目的探讨子痫前期患者血清中HO与中性粒细胞及T淋巴细胞活化的关系。方法①荧光标记抗体全血染色后,流式细胞仪分别检测正常非孕妇组,正常孕妇组及子痫前期患者组外周血CD3/HLA-D,CD3/CD62L细胞百分率,及粒细胞区CD62L细胞百分率;②40μmol/L HO体外刺激正常孕妇PBMCs 24h,流式细胞仪检测CD3/HLA-DR,CD3/CD62L细胞百分率;③40μmol/L HO体外刺激正常孕妇外周血来源中性粒细胞6h,HDCFDA荧光探针染色,流式细胞仪检测平均荧光强度水平;④贴壁分离法去除贴壁细胞的正常孕妇外周血来源PBMCs,与经40μmol/L HO体外刺激6h的中性粒细胞继续共培养24h,流式细胞仪检测CD3/HLA-DR细胞百分率。结果①子痫前期患者组外周血CD3/HLA-DR细胞百分率（61.64±10.48,n=16）,与正常非孕妇组（10.37±6.01,n=12）及正常孕妇组（25.26±11.72,n=19）比较均显著升高,具有统计学意义（P<0.01）;子痫前期患者组CD3/CD62细胞百分率（63.04±14.34,n=16）与正常非孕妇组（48.46±13.03,n=12）或正常孕妇组（80.58±17.89,n=19）比较均显著降低,具有统计学意义（P<0.01）;②与正常非孕妇外周血粒细胞区高表达CD62L细胞区的平均荧光强度值（213.46±10.24,n=19）比较,正常孕妇（363.86±11.31,n=12）及子痫前期患者（288.51±8.76,n=16）均显著升高,具有统计学意义（P<0.01）;③40μmol/L HO体外刺激正常孕妇PBMCs 24h后,CD3/CD62L细胞百分率分别为（16.57±2.11）和（69.11±6.72）,分别与空白对照组（17.19±1.93）及（73.19±5.77）比较,均无统计学意义（P>0.05,n=12）。④40μmol/L HO体外刺激正常孕妇中性粒细胞6h后,其胞内ROS探针平均荧光强度为（86.42±5.13）,与对照组（54.23±3.57）比较有统计学意义（P<0.01,n=12）;⑤正常孕妇PBMCs与经40μmol/L HO预处理的正常孕妇中性粒细胞共培养24h后,CD3/HLA-DR细胞百分率明显升高（P<0.01,n=12）,去除贴壁细胞可显著降低这一效应（P<0.01,n=12）。结论子痫前期患者血清高水平HO可通过活化中性粒细胞促进外周T淋巴细胞的活化,并需贴壁细胞的参与。

关键词：子痫前期过氧化氢中性粒细胞 T淋巴细胞

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实时定量PCR检测BK病毒时尿样本的优化处理

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第二军医大学学报 2010年第4期31卷 438-441页

作者：林春兰卢育洪陈少华李扬秋朱康儿张涛暨南大学医学院生物化学教研室广州510632 暨南大学附属第一医院血液科广州510632 暨南大学医学院血液研究所广州510632

目的建立简便有效的样本处理方法,提高实时荧光定量PCR法检测尿液中BK病毒载量的敏感性和准确性。方法任意选择24例BK病毒阳性样本,每一样本进行4种不同的处理:原尿、原尿病毒DNA提纯、1:10稀释尿液、1:100稀释尿液,实时荧光定量PCR法... 详细信息

目的建立简便有效的样本处理方法,提高实时荧光定量PCR法检测尿液中BK病毒载量的敏感性和准确性。方法任意选择24例BK病毒阳性样本,每一样本进行4种不同的处理:原尿、原尿病毒DNA提纯、1:10稀释尿液、1:100稀释尿液,实时荧光定量PCR法检测各组样本BK病毒载量,所测数据用SPSS11.0进行统计学分析。结果4种不同的处理方法对实时荧光定量PCR法检测尿液中BK病毒载量有明显的影响:原尿阴性3例,病毒载量在4组中的最低值占66.7%;1:100稀释尿阴性2例,病毒载量在4组中的最高值占79.2%,但中位值和1:10稀释组差异无统计学意义;DNA纯化组与1:10稀释尿液病毒检出率相当,均为100%,但DNA纯化组目标基因的流失量较明显。结论在临床尿液中BK病毒载量检测时,1:10稀释尿在实时荧光定量PCR检测BK病毒时DNA损失小,效率高,且处理过程简便、成本低,是一种较好的尿样本处理方法。

关键词： BK病毒尿实时荧光定量PCR 病毒载量

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关节置换术治疗膝关节色素沉着绒毛结节性滑膜炎伴关节软骨破坏1例

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临床骨科杂志 2011年第2期14卷 240-240页

作者：苗贵强查振刚吴昊刘宁林宏生姚平张嘉晴李劼若暨南大学骨科疾病研究所暨南大学附属第一医院骨科广东广州510630 暨南大学医学院生理教研室广东广州510632 暨南大学医学院生化教研室广东广州510632

1病例资料患者,女,62岁,7年前在无明显诱因的情况下出现左膝关节肿胀,经休息和理疗症状好转,后又反复发作。近1年多症状逐渐加重,膝关节肿胀明显,影响生活。在当地医院反复做膝关节穿刺,每次抽出约100 ml暗红色液体,抽液后症状明显缓解。

关键词：膝关节滑膜炎,色素绒毛结节性关节成形术,置换,膝

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纳米金与VEGF_(165)分子作用的原子力显微镜研究

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中国病理生理杂志 2010年第12期26卷 2295-2300页

作者：潘运龙邱思远覃莉王存川丁晖程欣杜彬暨南大学附属第一医院普外科广东广州510630 暨南大学医学院组织与胚胎学教研室广东广州510630 暨南大学附属第一医院病理科广东广州510630

目的:用原子力显微镜(AFM)从分子水平、可视化角度研究纳米金(GNP)与血管内皮生长因子(VEGF165)的分子作用。方法:GNP与VEGF165作用前后,用AFM表征粒子大小和形貌,光谱学检测GNP紫外吸收光谱变化,粒径分析仪检测粒径分布变化;用VEGF165... 详细信息

目的:用原子力显微镜(AFM)从分子水平、可视化角度研究纳米金(GNP)与血管内皮生长因子(VEGF165)的分子作用。方法:GNP与VEGF165作用前后,用AFM表征粒子大小和形貌,光谱学检测GNP紫外吸收光谱变化,粒径分析仪检测粒径分布变化;用VEGF165刺激无血清培养液的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖,在GNP干预前后,用AFM观察HUVECs细胞表面超微结构变化。MTT法观察纳米金对HUVECs增殖的影响。结果:GNP与VEGF165作用后,其吸收峰发生红移;粒径分析表明GNP粒径的主要分布从20 nm变成30 nm;AFM表征下,单个GNP粒径22.05 nm±1.52 nm,呈椭圆形,边界清晰,加入VEGF165后,平均粒径变成33.91 nm±2.61 nm,边界模糊,形状不甚规则,表明GNP与VEGF165结合;在AFM观察到VEGF165作用的HUVECs细胞出现伪足、细胞膜孔洞、细胞膜颗粒化和细胞连接增多等表现,而GNP可以明显抑制这一现象,MTT法表明GNP抑制VEGF165介导的HUVECs增殖。结论:GNP可与VEGF165通过化学键连接,形成以GNP为核、VEGF165为壳的GNP-VEGF165复合物,使VEGF165与其受体结合的位点失活或被阻断,抑制VEGF165的信号转导,从而抑制HUVECs增殖。

关键词：纳米金血管内皮生长因子原子力显微镜人脐静脉内皮细胞

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大鼠CRMP1基因siRNA的筛选

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2010年第6期31卷 560-564页

作者：张忠其李斌陈万群张文斌龚晓兵郭国庆暨南大学医学院人体解剖学教研室暨南大学医学院生物化学教研室广东广州510632 暨南大学附属第一医院外科暨南大学附属第一医院消化内科人工肝室广东广州510630

目的:筛选有效抑制大鼠CRMP1基因表达的siRNA序列。方法:化学合成3对针对大鼠CRMP1基因的特异性siRNA,用脂质转染胺(lipofectamine)LTX转染大鼠海马神经元,通过流式细胞仪检测转染效率,使用RT-PCR与实时PCR检测CRMP1基因mRNA的表达,从... 详细信息

目的:筛选有效抑制大鼠CRMP1基因表达的siRNA序列。方法:化学合成3对针对大鼠CRMP1基因的特异性siRNA,用脂质转染胺(lipofectamine)LTX转染大鼠海马神经元,通过流式细胞仪检测转染效率,使用RT-PCR与实时PCR检测CRMP1基因mRNA的表达,从而筛选抑制效率最高的siRNA。结果:流式细胞仪检测转染效率为52.5%。通过RT-PCR的初步检测和实时PCR的定量检测结果显示,与对照组相比,所设计的3对siRNA均能不同程度抑制CRMP1基因mRNA的表达,其中CRMP1-249 siRNA抑制效果最佳,抑制率达84.3%。结论:成功筛选出1对能有效抑制大鼠CRMP1基因表达的siRNA序列。

关键词：小干扰RNA 坍塌反应调节蛋白1 实时荧光定量PCR 大鼠

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