检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病理生理杂志 2024年第3期40卷 572-576页

作者：谭秋婵林嘉伟阳小雅潘丽姚丹丹王立伟陈丽新巫株华广州卫生职业技术学院生理学教研室广东广州510450 佛山市第一人民医院乳腺外一科广东佛山528000 暨南大学医学院广东广州510632 广东省结核病控制中心广东广州510630

目的:探索一种快速且简便易行的小鼠原代甲状腺细胞的培养方法。方法:通过酶消化法分离小鼠甲状腺细胞,并用改良的培养液对其进行培养,观察14 d内细胞的形态、特征以及分泌功能。结果:甲状腺组织经25 min消化即可获得活性较好的原代细胞... 详细信息

目的:探索一种快速且简便易行的小鼠原代甲状腺细胞的培养方法。方法:通过酶消化法分离小鼠甲状腺细胞,并用改良的培养液对其进行培养,观察14 d内细胞的形态、特征以及分泌功能。结果:甲状腺组织经25 min消化即可获得活性较好的原代细胞;细胞第2天贴壁生长;第5~7天可出现次级滤泡结构;95%以上细胞胞质内可检测到甲状腺球蛋白;7 d内,总三碘甲状腺原氨酸和总甲状腺素分泌量均能保持60%以上;特异性基因的表达在10 d内仍能达到50%以上。结论:应用该方法可快速培养小鼠甲状腺原代细胞,细胞在7 d内可用于甲状腺内分泌相关的研究,在10 d内可用于基因的研究。

关键词：甲状腺内分泌原代培养小鼠

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灭活的新型结核病疫苗菌株(B/R菌株)对小鼠T淋巴细胞免疫记忆的影响

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中国人兽共患病学报 2023年第11期39卷 1100-1106页

作者：丰启盈邓喜玲张杰董江涛柳小玲梁粟王菊张辉吴江东章乐吴芳张万江石河子大学医学院病理生理学教研室/新疆地方与民族高发病教育部重点实验室石河子832002 石河子大学药学院石河子832002 石河子大学医学院第一附属医院石河子832002

目的探讨灭活的新型结核病疫苗菌株(B/R菌株)对小鼠T淋巴细胞免疫记忆的影响。方法以PBS、BCG菌株、B/R菌株与灭活B/R菌株为分组方式,单次皮下接种免疫C57BL/6小鼠。于免疫后第9周、第12周和第15周,分别取各组小鼠脾脏,提取脾脏淋巴细... 详细信息

目的探讨灭活的新型结核病疫苗菌株(B/R菌株)对小鼠T淋巴细胞免疫记忆的影响。方法以PBS、BCG菌株、B/R菌株与灭活B/R菌株为分组方式,单次皮下接种免疫C57BL/6小鼠。于免疫后第9周、第12周和第15周,分别取各组小鼠脾脏,提取脾脏淋巴细胞。各组脾脏淋巴细胞半数直接检测,其余部分进行体外培养,并按实验设计以结核菌素纯蛋白衍生物(PPD)进行刺激,而后进行检测。应用流式细胞技术分别检测未经PPD刺激和经刺激的小鼠脾脏淋巴细胞内中央型记忆性T细胞(T_(CM))和效应型记忆性T细胞(T_(EM))数量。结果免疫后未经PPD刺激,第9周时,灭活B/R组、B/R组、BCG组诱导产生的CD_(4)^(+)T_(CM)(F=13.20,P<0.05)与CD_(4)^(+)T_(EM)(F=28.15,P<0.05)高于PBS组;诱导产生的CD_(8)^(+)T_(CM)(F=8.92,P<0.05)与CD_(8)^(+)T_(EM)(F=6.13,P<0.05)高于PBS组。第12周时,各组诱导产生的CD_(4)^(+)T_(CM)(F=15.97,P<0.05)与CD_(4)^(+)T_(EM)(F=13.60,P<0.05)高于PBS组;诱导产生的CD_(8)^(+)T_(CM)(F=5.52,P<0.05)与CD_(8)^(+)T_(EM)(F=20.15,P<0.05)高于PBS组。第15周时,各组诱导产生的CD_(4)^(+)T_(CM)(F=15.40,P<0.05)与CD_(4)^(+)T_(EM)(F=7.43,P<0.05)高于PBS组;诱导产生的CD_(8)^(+)T_(CM)(F=6.57,P<0.05)与CD_(8)^(+)T_(EM)(F=9.27,P<0.05)高于PBS组。免疫后经结核特异性抗原PPD刺激,在第9周时,灭活B/R组、B/R组、BCG组诱导产生的CD_(4)^(+)T_(CM)(F=9.66,P<0.05)与CD_(4)^(+)T_(EM)(F=11.20,P<0.05)高于PBS组;诱导产生的CD_(8)^(+)T_(CM)(F=7.24,P<0.05)与CD_(8)^(+)T_(EM)(F=9.30,P<0.05)高于PBS组。第12周时,各组诱导产生的CD_(4)^(+)T_(CM)(F=9.33,P<0.05)与CD_(4)^(+)T_(EM)(F=6.94,P<0.05)高于PBS组;诱导产生的CD_(8)^(+)T_(CM)(F=67.71,P<0.05)与CD_(8)^(+)T_(EM)(F=10.86,P<0.05)高于PBS组。第15周时,各组诱导产生的CD_(4)^(+)T_(CM)(F=39.88,P<0.05)与CD_(4)^(+)T_(EM)(F=11.93,P<0.05)高于PBS组;诱导产生的CD_(8)^(+)T_(CM)(F=138.80,P<0.05)与CD_(8)^(+)T_(EM)(F=38.47,P<0.05)高于PBS组。值得注意的是,在第15周时,灭活B/R组与B/R组诱导产生的CD_(8)^(+)T_(CM)(q灭活B/R=12.24,q B/R=12.61,P<0.05)与CD_(8)^(+)T_(EM)(q灭活B/R=7.19,q B/R=5.00,P<0.05)均高于BCG组。结论灭活B/R菌株免疫小鼠后,所诱导对小鼠T淋巴细胞免疫记忆的能力与B/R菌株相当,热灭活未影响B/R菌株诱导小鼠免疫记忆的能力。

关键词：结核病灭活疫苗 T淋巴细胞免疫记忆

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新型结核杆菌融合菌株蛋白衍生物毒性与安全性的比较研究

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中国人兽共患病学报 2025年第4期41卷 376-384页

作者：许昊祺董江涛张杰吴芳梁粟柳小玲高蓝茹王菊张辉吴江东章乐邓喜玲张万江石河子大学医学院病理生理学教研室/新疆地方与民族高发病教育部重点实验室石河子832002 石河子大学第一附属医院石河子832003 石河子大学药学院药学系/新疆植物药资源利用教育部重点实验室石河子832002

目的探究新型结核杆菌融合菌株蛋白衍生物(简称B/R菌株活性蛋白)的毒性与安全性。方法细胞实验以各疫苗制剂分别干预处理RAW264.7细胞并检测凋亡率。动物实验采用C57BL/6小鼠皮下注射免疫接种,观察并记录2、4、8、12、16周小鼠存活情况... 详细信息

目的探究新型结核杆菌融合菌株蛋白衍生物(简称B/R菌株活性蛋白)的毒性与安全性。方法细胞实验以各疫苗制剂分别干预处理RAW264.7细胞并检测凋亡率。动物实验采用C57BL/6小鼠皮下注射免疫接种,观察并记录2、4、8、12、16周小鼠存活情况与体重值变化;取肺脏、脾脏计算脏器系数并进行病理损伤检测;免疫8周时用高浓度BCG感染小鼠,感染4周后观察肺脏和脾脏病理学改变。结果对6 h、12 h、24 h细胞凋亡率进行流式分析,6 h的实验组凋亡率较PBS组升高(P<0.05);在12 h、24 h实验组凋亡率较PBS组升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。免疫接种后,4组小鼠正常生长;体重没有停止增长或负增长。Protein组肺脏系数在免疫4、12周时高于同时期PBS组,BCG组小鼠各时间段肺脏系数升高(P<0.05)。Protein组与BCG组脾脏系数在2、4、8、12、16周均高于PBS组,ICD B/R组仅在第8周时高于PBS组(P<0.05)。病理损伤情况检测结果显示PBS组肺脾组织均正常。在免疫接种2~8周内,各实验组肺脏与脾脏组织均有不同程度损伤;在12~16周组织损伤逐渐减轻;所有实验组均未出现结核结节。高浓度BCG感染后各组小鼠肺脾表面未见明显病理变化,镜下观察各实验组小鼠肺脾组织病理改变较PBS组轻,Protein组与BCG组差异不大。结论B/R菌株活性蛋白毒性安全性与BCG相当,且具备一定的免疫保护效果,为新型结核病疫苗的研究提供了实验依据。

关键词：结核病 B/R菌株活性蛋白毒性安全性

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Kir2.1在LPS或IL-4诱导的巨噬细胞M1/M2型极化中的作用

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中国病理生理杂志 2022年第3期38卷 385-393页

作者：王璐杨瑞张莹莹李新芝马克涛石河子大学医学院新疆地方与民族高发病教育部重点实验室新疆石河子832000 石河子大学医学院第一附属医院国家卫健委中亚高发病防治重点实验室新疆石河子832000 石河子大学医学院生理学教研室新疆石河子832000 石河子大学医学院病理生理学教研室新疆石河子832000

目的:通过激活或阻断内向整流钾通道2.1(inwardly-rectifying potassium channel 2.1,Kir2.1),检测巨噬细胞M1/M2型极化标志物及相关细胞因子的改变,探讨Kir2.1在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)或白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)诱导的巨噬细胞M1/M2型极化过程中的具体作用。方法:采用RAW264.7小鼠巨噬细胞系,将未转染慢病毒的RAW264.7细胞分为对照(control)组、LPS组、IL-4组、LPS+zacopride(Kir2.1选择性激动剂)组及IL-4+ML133(Kir2.1选择性阻断剂)组,将转染慢病毒的RAW264.7细胞分为vector组、LPS+vector组、IL-4+vector组、KD-shKir2.1组、LPS+KD-shKir2.1组及IL-4+KD-shKir2.1组。应用ELISA技术检测巨噬细胞培养液上清中IL-1β、IL-6和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的浓度;应用实时荧光定量PCR技术检测巨噬细胞中Kir2.1、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、CD86、CD206、IL-6及TNF-α的mRNA表达;应用细胞免疫荧光技术和Western blot技术检测巨噬细胞中Kir2.1、iNOS、CD86及CD206的定位和表达。结果:Kir2.1在RAW264.7细胞的胞膜及胞质中均有表达,并且LPS干预RAW264.7细胞后Kir2.1的蛋白表达显著下降(P<0.01),IL-4干预巨噬细胞后Kir2.1的蛋白表达显著升高(P<0.01)。激活Kir2.1能够显著减少炎症细胞因子的释放(P<0.05或P<0.01),降低M1型极化标志物iNOS和CD86的mRNA和蛋白表达(P<0.05或P<0.01),而阻断或敲减Kir2.1能够显著增加炎症细胞因子的释放(P<0.05或P<0.01),升高M1型极化标志物iNOS和CD86的mRNA和蛋白表达(P<0.05或P<0.01),降低M2型极化标志物CD206的mRNA和蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。结论:激活Kir2.1能够抑制LPS诱导的巨噬细胞向M1型极化;而阻断或敲减Kir2.1能够促进LPS诱导的巨噬细胞向M1型极化,抑制IL-4诱导的巨噬细胞向M2型极化。

关键词：巨噬细胞极化内向整流钾通道炎症动脉粥样硬化

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阻断连接子蛋白43(Cx43)抑制脂多糖诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞M1型极化

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细胞与分子免疫学杂志 2022年第11期38卷 972-978页

作者：蒋涵王璐张莹莹何文君闫美娟单莉娅李新芝马克涛石河子大学医学院、新疆地方与民族高发病教育部重点实验室新疆石河子832000 石河子大学医学院、病理生理学教研室新疆石河子832000 绵阳市中心医院四川绵阳621099 石河子大学医学院生理学教研室新疆石河子832000

目的研讨连接子蛋白43(Cx43)在脂多糖(LPS)诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞M1型极化中的作用。方法将体外培养的小鼠RAW264.7巨噬细胞分为对照组、LPS组、LPS联合Cx43阻断剂模拟肽19(Gap19)或模拟肽26(Gap26)预处理组(LPS联合Gap19组、LPS联... 详细信息

目的研讨连接子蛋白43(Cx43)在脂多糖(LPS)诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞M1型极化中的作用。方法将体外培养的小鼠RAW264.7巨噬细胞分为对照组、LPS组、LPS联合Cx43阻断剂模拟肽19(Gap19)或模拟肽26(Gap26)预处理组(LPS联合Gap19组、LPS联合Gap26组)。Western blot法检测小鼠RAW264.7巨噬细胞Cx43和M1型极化标志物CD86、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的蛋白水平,免疫荧光细胞化学染色观察CD86在RAW264.7巨噬细胞的表达和定位,流式细胞术检测小鼠RAW264.7巨噬细胞M1型极化标志物CD86的表达频数。结果与对照组相比,LPS组中CD86、iNOS和Cx43的蛋白表达明显升高,CD86的表达频数明显升高;与LPS组相比,在LPS联合Gap19组和LPS联合Gap26组中CD86和iNOS的蛋白表达均显著降低,CD86的表达频数均显著降低。因此,LPS可以诱导小鼠RAW264.7巨噬细胞向M1型极化,而Gap19和Gap26能够降低M1型极化标志物的表达。结论通过阻断Cx43可以抑制巨噬细胞M1型极化。

关键词：脂多糖(LPS) RAW264.7巨噬细胞极化连接子蛋白43(Cx43)

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连接蛋白43在氧化低密度脂蛋白诱导RAW264.7细胞自噬中的作用

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实用医学杂志 2023年第20期39卷 2572-2578页

作者：熊思渊王璐田俊杰谷扬马雅静马克涛张莹莹李新芝新疆地方与民族高发病教育部重点实验室新疆石河子832000 国家卫健委中亚高发病防治重点实验室新疆石河子832000 石河子大学医学院生理学教研室新疆石河子832000 石河子大学医学院病理生理学教研室新疆石河子832000 石河子大学医学院第一附属医院检验科新疆石河子832000

目的探究连接蛋白43(Connexins43,Cx43)在氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导小鼠单核巨噬细胞系(RAW264.7细胞)自噬中的作用。方法利用ox-LDL(100μg/mL,24 h)构建RAW264.7自噬及泡沫化模型。实验分为Control组、ox-LDL组、ox-LDL+Gap26组、ox-LDL+Gap19组。qRT-PCR检测各组Cx43、自噬蛋白Beclin-1及LC3B mRNA水平。Western blot检测Cx43、Beclin-1及LC3B蛋白水平。细胞免疫荧光技术检测Cx43、Beclin-1及LC3B在RAW264.7细胞上的定位和表达。结果油红O染色结果显示,ox-LDL干预RAW264.7细胞24 h后,ox-LDL组细胞浆内出现红染脂滴,即细胞发生泡沫化。Western blot、qRT-PCR及免疫荧光结果显示,ox-LDL干预RAW264.7细胞24 h后,ox-LDL组细胞中Cx43的表达水平升高。此外,Western blot、qRT-PCR及免疫荧光结果表明,ox-LDL干预RAW264.7细胞24 h后,与Control组相比,ox-LDL组细胞的Beclin-1、LC3BmRNA及蛋白表达水平降低;与ox-LDL组相比,ox-LDL+Gap26组及ox-LDL+Gap19组的自噬相关蛋白表达水平升高。结论阻断Cx43能促进ox-LDL诱导RAW264.7细胞自噬。

关键词：连接蛋白43 巨噬细胞自噬

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钙敏感受体调控高血压大鼠巨噬细胞极化的机制研究

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中国病理生理杂志 2025年第4期41卷 625-636页

作者：杨晓芳何丽娟唐娜王腊梅屈媛媛钟华张强邓峰美唐斌席冬梅何芳石河子大学医学院新疆地方与民族高发病教育部重点实验室石河子大学医学院第一附属医院国家卫健委中亚高发病防治重点实验室石河子大学医学院病理生理学教研室新疆石河子832000 农八师石河子市总医院(石河子市人民医院、石河子大学医学院第三附属医院) 新疆石河子832000 成都医学院发育与再生四川省重点实验室四川成都610000 成都医学院第一附属医院四川成都610000

目的:探究钙敏感受体(calcium-sensing receptor,Ca SR)在调控高血压大鼠巨噬细胞极化中的作用和机制。方法:以雄性自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)和Wistar-Kyoto(WKY)大鼠为研究对象,分为WKY组、SHR组、SHR+R568(Ca SR激动剂)组和SHR+NPS2143(Ca SR抑制剂)组,分离胸主动脉并通过免疫荧光染色观察主动脉中Ca SR和巨噬细胞极化标志物的表达;麻醉后分别无菌提取SHR和WKY大鼠的原代腹腔巨噬细胞,经R568和NPS2143干预后,通过Western blot和免疫荧光染色观察腹腔巨噬细胞M1和M2型标志物的表达;通过ELISA检测白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)和IL-10的水平;通过免疫荧光染色检测腹腔巨噬细胞中Ca^(2+)浓度;采用Western blot检测Ca SR和核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)炎症小体组分蛋白的表达;麻醉后采用贴壁法提取SHR的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs),并与巨噬细胞上清液建立共培养体系,通过CCK-8法筛选最佳作用时间。结果:与SHR组相比,激动Ca SR后,SHR主动脉中M1型极化标志物蛋白表达减少(P<0.05),M2型极化标志物蛋白表达增加(P<0.05);与SHR组相比,给予R568后,SHR腹腔巨噬细胞中M1型极化标志物蛋白减少(P<0.05),M2型极化标志物蛋白增多(P<0.05),NLRP3炎症小体组分蛋白表达水平下降(P<0.05),细胞内Ca^(2+)荧光强度显著增强(P<0.05)。给予NLRP3炎症小体抑制剂MCC950,结果与R568组一致(P<0.05);磷脂酶C(phospholipase C,PLC)抑制剂U73122干预则逆转了上述作用(P<0.05)。与0 h相比,用24 h收集的腹腔巨噬细胞上清液去培养VSMCs 24 h,增强细胞活力的作用最强(P<0.05)。结论:Ca SR通过PLC-Ca^(2+)信号通路抑制NLRP3炎症小体活化,从而介导高血压大鼠巨噬细胞向M2型极化增多,向M1型极化减少。

关键词：原发性高血压钙敏感受体巨噬细胞极化 NLRP3炎症小体

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结核分枝杆菌PPE2的生物信息学分析

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中国病原生物学杂志 2022年第11期17卷 1252-1255,1260页

作者：冯楠柳小玲张杰董江涛梁粟王菊张辉丰启盈邹炙臻吴江东章乐吴芳张万江石河子大学医学院病理生理学教研室 “新疆地方与民族高发病”教育部重点实验室新疆石河子832002 石河子大学医学院第一附属医院

目的应用生物信息学软件预测分析结核分枝杆菌PPE2蛋白的结构与功能。方法从NCBI中获得PPE2序列及其编码基因序列,通过OFR Finder、ProtParam、ProtScaleon Expasy、TMHMM Sever v.2.0、SignalP 4.1 Sever、PSORT、NetPhos 3.1 Sever、BLAST、SOPMA、SWISS-MODEL、ABCpred、SYFPEITHI等工具预测分析PPE2编码蛋白的生物学结构与特性。结果PPE2蛋白由556个氨基酸组成,相对分子质量为56951.97×10~3,等电点4.78,为亲水性蛋白,无跨膜区域及信号肽;编码基因Rv0256c总长度为1671 bp,有10个开放阅读框架;PPE2蛋白有53个磷酸化位点,1个保守结构域;蛋白二级结构中α-螺旋占41.91%,β-折叠占11.33%,β-转角占3.96%,无规则卷曲占42.81%;有57个(得分>0.5)B细胞抗原表位和113个(得分>15)T细胞抗原表位。结论PPE2蛋白为亲水蛋白,具有潜在的T、B细胞抗原表位,可作为研发结核病疫苗的候选蛋白。

关键词： PPE2蛋白结核分枝杆菌 Rv0256c 生物信息学

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中药大承气汤改良方对术后肠梗阻小鼠胃肠功能的影响及机制研究

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中国病理生理杂志 2021年第3期37卷 466-474页

作者：李敏林思思刘胜远徐晓娟李琨李永渝刘晓红遵义医科大学基础医学院生理教研室贵州遵义563000 遵义医药高等专科学校生理教研室贵州遵义563000 同济大学医学院病理生理教研室上海200092 遵义医科大学附属医院外科贵州遵义563000

目的:探讨中药大承气汤改良方(Da-Cheng-Qi-Tang,DCQT)对实验性术后肠梗阻(postoperative ileus,POI)小鼠胃肠功能的影响及机制。方法:实验设24 h和48 h两个观测时点,用成年C57BL/6小鼠各24只,雌雄不拘,随机均分成4组:对照(control)组(n... 详细信息

目的:探讨中药大承气汤改良方(Da-Cheng-Qi-Tang,DCQT)对实验性术后肠梗阻(postoperative ileus,POI)小鼠胃肠功能的影响及机制。方法:实验设24 h和48 h两个观测时点,用成年C57BL/6小鼠各24只,雌雄不拘,随机均分成4组:对照(control)组(n=6)、假手术(sham)组(n=6)、POI组(n=6)和POI+DCQT组(n=6)。通过经典小肠干扰术诱导POI模型。术后以饮用水(control、sham和POI组)或DCQT(POI+DCQT组)灌胃,每天2次。术后24 h和48 h观测小鼠胃肠运动功能、肠道组织结构、局部神经递质及血清胃肠肽水平;用16S rRNA高通量测序检测肠黏膜菌群结构及其多样性,用高通量液体芯片检测血清促炎细胞因子的水平。结果:与control组或sham组比较,POI组小鼠胃肠排推运动减慢,肠黏膜充血水肿,肠道细菌结构和多样性发生改变,这些变化在DCQT处理后有不同程度减轻。在POI组,无论术后24 h或48 h,血清促炎细胞因子白细胞介素1α(interleukin-1α,IL-1α)、IL-6和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平均较control组或sham组显著升高(P<0.05或P<0.01),单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)和IL-17水平在24 h显著升高(P<0.05);同时,POI组小鼠血清血管活性肠肽(vasoactive inestinal peptide,VIP)水平显著升高,胃动素(motilin,MTL)水平显著降低,回肠和结肠组织中5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)水平显著降低,组胺(histamine,HIS)水平显著升高(P<0.05或P<0.01);用DCQT处理后上述变化均有不同程度逆转(P<0.05或P<0.01)。结论:DCQT可有效改善POI小鼠的胃肠道运动功能,减轻炎症反应,调节肠道黏膜细菌的变化和胃肠肽的失衡。

关键词：大承气汤术后肠梗阻肠道菌群胃肠运动胃肠肽

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小鼠棕色脂肪透射电子显微镜样品固定方法的改良

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解剖学报 2023年第6期54卷 738-742页

作者：魏纯纯王平林方兴麻献华章卫平谢志芳海军军医大学病理生理学教研室上海200433 国家卫生健康委员会激素与发育重点实验室(天津医科大学) 天津市代谢性疾病重点实验室、天津医科大学朱宪彝纪念医院&天津市内分泌研究所天津300134 海军军医大学生物物理学教研室上海200433 上海交通大学医学院附属新华医院环境与儿童健康重点实验室上海200092

目的改良小鼠棕色脂肪组织透射电子显微镜样品固定方法,以获得更好的线粒体和脂滴的超微结构。方法对小鼠棕色脂肪组织的固定方法进行优化,主要包括将前固定剂中多聚甲醛的浓度从2%提高到4%;将后固定剂四氧化锇的缓冲液换成咪唑缓冲液;... 详细信息

目的改良小鼠棕色脂肪组织透射电子显微镜样品固定方法,以获得更好的线粒体和脂滴的超微结构。方法对小鼠棕色脂肪组织的固定方法进行优化,主要包括将前固定剂中多聚甲醛的浓度从2%提高到4%;将后固定剂四氧化锇的缓冲液换成咪唑缓冲液;同时采用心脏灌注和浸泡结合的固定方式。比较两种方法制备的细胞超微结构(每组3只小鼠);并将改良后的方法应用于线粒体和脂滴的定量分析实验。结果与改良前相比,用改良后的方法制备的棕色脂肪细胞的线粒体嵴及其他膜性细胞器的结构更完整;脂滴呈现为高电子密度的圆形结构。用该方法观察到了冷适应后棕色脂肪细胞线粒体嵴密度升高和脂滴增多现象。结论改良后的方法能更好地保存棕色脂肪细胞中的细胞器特别是线粒体和脂滴的超微结构,可应用于研究该类型细胞在不同生理或病理条件下发生的超微结构变化。

关键词：棕色脂肪细胞超微结构固定方法线粒体脂滴组织学透射电子显微术小鼠

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