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声动力疗法通过诱导自噬抑制THP-1巨噬细胞NLRP3炎症小体介导的IL-1β分泌

中国病理生理学会心血管专业委员会第十五届学术大会暨国际心脏研究会中国分会第十二届学术大会

作者：田振姚剑挺旦菊花田野哈尔滨医科大学基础医学院病理生理学教研室黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学附属第一医院心血管内科黑龙江哈尔滨150001 哈尔滨医科大学基础医学院病理生理学教研室黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学附属第一医院心血管内科黑龙江哈尔滨150001

目的:动脉内巨噬细胞因脂质代谢紊乱形成胆固醇结晶(CHC),激活NLRP3炎症小体加剧炎症反应进而促进动脉粥样硬化斑块的形成.课题组在前期研究中发现声敏剂ALA可被斑块巨噬细胞特异性吸收,通过声动力疗法(ALA-SDT)可缩小斑块,但是SDT对斑...

目的:动脉内巨噬细胞因脂质代谢紊乱形成胆固醇结晶(CHC),激活NLRP3炎症小体加剧炎症反应进而促进动脉粥样硬化斑块的形成.课题组在前期研究中发现声敏剂ALA可被斑块巨噬细胞特异性吸收,通过声动力疗法(ALA-SDT)可缩小斑块,但是SDT对斑块炎症的作用仍不清楚.方法和结果:通过使用不同浓度的CHC与THP-1巨噬细胞共孵育,通过EHSA方法检测发现CHC可浓度依赖性上调促进细胞培养上清液中IL-1β的浓度,而使用细胞松弛素D抑制THP-1吞噬CHC后,上清液IL-1β的浓度与对照相比上调不明显.

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辣椒素对食管鳞状细胞癌细胞凋亡和NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响

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郑州大学学报（医学版） 2013年第4期48卷 437-440页

作者：田芳江亚南张晓艳范天黎郑州大学基础医学院病理生理学教研室郑州450001 郑州大学基础医学院药理学教研室郑州450001

目的:探讨辣椒素对食管鳞状细胞癌(食管鳞癌)细胞凋亡和NF-κB信号通路的影响。方法:采用Westernblot法检测食管鳞癌EC9706和Eca109细胞中IκBα、磷酸化IκBα(pIκBα)、p50和p65蛋白的表达及0、50、100和200μmol/L辣椒素作用后pIκ... 详细信息

目的:探讨辣椒素对食管鳞状细胞癌(食管鳞癌)细胞凋亡和NF-κB信号通路的影响。方法:采用Westernblot法检测食管鳞癌EC9706和Eca109细胞中IκBα、磷酸化IκBα(pIκBα)、p50和p65蛋白的表达及0、50、100和200μmol/L辣椒素作用后pIκBα和Bcl-2蛋白的表达;凝胶滞留实验检测2种食管鳞癌细胞胞核中NF-κB与DNA的结合活性及0、100和200μmol/L辣椒素作用对NF-κB与DNA结合活性的影响。2种食管鳞癌细胞分别分为对照组、5-FU组、辣椒素组和联合组,流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。结果:2种食管鳞癌细胞胞质均表达IκBα和pIκBα蛋白,胞核均表达p50和p65蛋白;随辣椒素作用浓度的增加,pIκBα和Bcl-2蛋白的表达逐渐下降,NF-κB与DNA的结合活性也逐渐下降。辣椒素可促进2种食管鳞癌细胞的凋亡,与5-FU联合使用时,凋亡细胞显著增加(EC9706:F辣椒素=2535.497,F交互=113.034,P<0.001;Eca109:F辣椒素=5984.040,F交互=5.150,P<0.05)。结论:辣椒素可能通过抑制IκBα的磷酸化阻断NF-κB信号通路,促进食管鳞癌细胞凋亡。

关键词：食管鳞状细胞癌辣椒素 NF-κB IκBα Bcl-2 EC9706 Eca109

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胰岛素对AD样小鼠学习记忆的影响及其机制

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天津医药 2013年第4期41卷 337-340页

作者：熊慧丁玲王景景宋金芝郑晨潘彬邓艳秋天津医科大学基础医学院病理生理学教研室 300070

目的研究胰岛素对阿尔茨海默病(AD)样小鼠学习记忆能力的影响及其机制。方法将21只小鼠随机分为对照(CON)组、模型(链脲佐菌素,STZ)组和胰岛素治疗(INS)组,每组7只,后2组小鼠脑室内注射STZ建立AD模型,INS组小鼠皮下注射胰岛素持续30d。M... 详细信息

目的研究胰岛素对阿尔茨海默病(AD)样小鼠学习记忆能力的影响及其机制。方法将21只小鼠随机分为对照(CON)组、模型(链脲佐菌素,STZ)组和胰岛素治疗(INS)组,每组7只,后2组小鼠脑室内注射STZ建立AD模型,INS组小鼠皮下注射胰岛素持续30d。Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力,Western blotting检测Tau和神经丝(NFs)蛋白的磷酸化水平,荧光染料Fluoro-Jade B(FJB)标记退化神经元。结果与CON组相比,STZ组小鼠平均逃避潜伏期和路径长度明显增加(P<0.05)、穿越隐匿平台次数明显减少(P<0.05),小鼠脑内Tau蛋白在Ser199/202、Ser396/404、Thr212和Thr205位点的磷酸化水平以及NFs蛋白的磷酸化增加(P<0.05),FJB标记的小鼠海马CA1区平均累积光密度(IOD)较CON组明显增加(P<0.001);与STZ组相比,INS组小鼠学习记忆改善,逃避潜伏期和路径长度明显减少(P<0.05)、穿越隐匿平台次数明显增加(P<0.05),Tau蛋白特异性位点和NFs蛋白的磷酸化作用明显降低(P<0.05),FJB标记的小鼠海马CA1区平均累积分光密度(IOD)明显减少(P<0.001)。结论胰岛素能改善STZ脑室内注射的AD样小鼠学习记忆减退,可能与降低Tau和NFs蛋白的过度磷酸化和神经细胞退行性变有关。

关键词：胰岛素阿尔茨海默病迷宫学习 tau蛋白质类链脲佐菌素神经丝

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护理专业技能理论教学中开展早期接触临床+PBL教学的效果观察

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护理学报 2014年第2期21卷 12-14页

作者：顾丽华王韧于异男王莉萍刘建伟马伟红郭爱军李稻上海立达职业技术学院护理与健康学院上海201609 上海市松江区叶榭镇社区卫生服务中心上海201609 上海交通大学医学院基础医学院病理生理学教研室上海200025

目的探讨在高职护理专业技能理论课学习期间开展"早期接触临床+PBL"教学的方法与效果。方法在护理专业技能课程理论教学中,对照班学生采用传统的理论课教学,上课时展示1个小案例,并带着问题进行理论课的讲授;实验班学生除了... 详细信息

目的探讨在高职护理专业技能理论课学习期间开展"早期接触临床+PBL"教学的方法与效果。方法在护理专业技能课程理论教学中,对照班学生采用传统的理论课教学,上课时展示1个小案例,并带着问题进行理论课的讲授;实验班学生除了完成理论课教学外,以小组为单位分别进入临床接触不同的患者,进行问诊、健康评估和整理案例,随后结合案例开展PBL教学活动和完成个案分析报告。并对两组学生进行学习效能问卷调查和期末成绩比较。结果实验班学生在对所学知识的理解有帮助、提高自主学习的积极性、能积极查阅文献的能力、勇于提出问题和质疑、不懂知识能主动寻找答案、能分享自己的知识和观点、积极开展小组内交流与学习、能做出合理的护理评价的得分上显著低于对照班,差异均有统计学意义(P<0.01)。实验班第2学期内科护理学期末成绩明显高于对照班(P<0.01)。结论开展"早期接触临床+PBL"教学提高了学生的学习效能和综合能力;并且能克服传统教育中理论与实践脱节的弊端,值得在高职护理专业教学中推广使用。

关键词：护理教学早期接触临床 PBL教学

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siRNA靶向干扰组蛋白H3表达对人鼻咽癌细胞增殖的抑制作用

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中国病理生理杂志 2013年第9期29卷 1625-1630页

作者：李彬彬黄国良孔霞李蓉董子明何志巍广东医学院病理生理学教研室广东东莞523808 广东医学院广东省医学分子诊断重点实验室广东东莞523808 郑州大学基础医学院病理生理学教研室河南郑州450001

目的:应用RNA干扰技术抑制人鼻咽癌细胞株CNE1中组蛋白H3的表达,观察其对鼻咽癌细胞增殖的影响。方法:构建针对组蛋白H3的小干扰RNA(siRNA)的真核表达载体,转染CNE1细胞并筛选获得稳定表达细胞株。实时荧光定量RT-PCR和Western blottin... 详细信息

目的:应用RNA干扰技术抑制人鼻咽癌细胞株CNE1中组蛋白H3的表达,观察其对鼻咽癌细胞增殖的影响。方法:构建针对组蛋白H3的小干扰RNA(siRNA)的真核表达载体,转染CNE1细胞并筛选获得稳定表达细胞株。实时荧光定量RT-PCR和Western blotting检测细胞中组蛋白H3 mRNA和蛋白表达的改变;CCK-8法和平板克隆形成实验观察细胞增殖能力的改变;双萤光素酶报告系统检测细胞激活蛋白1(AP-1)转录活性的改变。结果:与阴性对照组和空白对照组相比,siRNA-H3质粒转染组的组蛋白H3 mRNA和蛋白表达均显著下降,细胞生长速度明显减慢,表皮生长因子诱导的细胞克隆形成能力和AP-1转录活性均受到明显抑制。结论:通过RNA干扰技术阻断组蛋白H3的表达,可抑制CNE1细胞的生长、增殖,其机制可能与下调AP-1转录活性有关。组蛋白H3可能是潜在的肿瘤治疗新靶点。

关键词：鼻咽肿瘤组蛋白H3 RNA干扰激活蛋白1

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肺炎衣原体在血管平滑肌细胞中的生长状态及细胞超微结构的观察

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中国病原生物学杂志 2013年第1期8卷 5-8,34页

作者：魏俊燕王蓓蓓张利军张俊霞王海伟叶静张丽莙天津医科大学基础医学院病理生理学教研室天津300070

目的观察肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae,Cpn)在血管平滑肌细胞(VSMC)中的生长发育情况和细胞超微结构的改变,了解青霉素对Cpn感染状态的影响。方法利用免疫荧光染色鉴定Cpn感染VSMC情况;用透射电镜观察感染24h、48h和72h后Cpn在VSMC... 详细信息

目的观察肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae,Cpn)在血管平滑肌细胞(VSMC)中的生长发育情况和细胞超微结构的改变,了解青霉素对Cpn感染状态的影响。方法利用免疫荧光染色鉴定Cpn感染VSMC情况;用透射电镜观察感染24h、48h和72h后Cpn在VSMC中的形态和细胞超微结构的变化,及经青霉素处理后Cpn生长状态的改变。结果免疫荧光染色观察到Cpn在VSMC内形成包涵体和点状感染灶。透射电镜观察到细胞内Cpn包涵体逐渐成熟的过程及典型的原体(EB)和网状体(RB)结构,其中在感染48h时部分包涵体或单个RB发育受限,72h时包涵体膜消失;细胞内线粒体和粗面内质网初期增多,后期扩张变形。此外,青霉素处理后Cpn不形成典型包涵体且RB结构异常。结论 Cpn感染VSMC的能力与易感细胞相比较弱,虽包涵体及其EB和RB形态结构与在易感细胞相似,但部分发育停滞;Cpn在VSMC的发育周期不足72h。青霉素干预能抑制Cpn在VSMC中的生长发育。感染后VSMC超微结构的变化为进一步研究细胞功能的改变提供了依据。

关键词：肺炎衣原体血管平滑肌细胞超微结构青霉素

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ZNF300基因在肝癌耐药细胞HepG2/VCR中的表达及功能初探

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中国药理学通报 2013年第7期29卷 951-955页

作者：李静王涛安徽医科大学基础医学院机能实验中心安徽合肥230032 安徽医科大学基础医学院病理生理学教研室安徽合肥230032

目的建立人肝癌HepG2/VCR耐药细胞株,检测ZNF300基因在HepG2/VCR中的表达并初步分析其在肝癌多药耐药(MDR)中发挥的功能。方法采用体外低浓度梯度递增的诱导方法建立长春新碱(VCR)获得性HepG2/VCR耐药细胞株。MTT法检测确定HepG2/VCR耐... 详细信息

目的建立人肝癌HepG2/VCR耐药细胞株,检测ZNF300基因在HepG2/VCR中的表达并初步分析其在肝癌多药耐药(MDR)中发挥的功能。方法采用体外低浓度梯度递增的诱导方法建立长春新碱(VCR)获得性HepG2/VCR耐药细胞株。MTT法检测确定HepG2/VCR耐药细胞株对VCR的耐药性,用Western blot方法检测人锌指蛋白ZNF300基因编码的ZNF300及多药耐药基因编码的P糖蛋白(P-gp)在HepG2和HepG2/VCR细胞中的表达差异;在HepG2/VCR细胞中转染ZNF300基因正向或反向cDNA质粒后,MTT法检测VCR对耐药细胞IC50值的变化,Westernblot方法检测细胞内P-gp表达的影响。结果 MTT检测确认HepG2/VCR耐药细胞构建成功,Western blot检测发现耐药细胞中ZNF300及P-gp的表达相对于HepG2细胞明显增高。在HepG2/VCR细胞中转染正向ZNF300 cDNA质粒后,MTT和Western blot检测发现ZNF300过表达可使VCR对耐药细胞的IC50值增高,并使细胞内P-gp表达上调;在转染反向cDNA质粒Knockdown ZNF300基因表达后得到相反的结果。结论 ZNF300基因在HepG2/VCR耐药细胞中表达明显增高,并能通过上调耐药蛋白P-gp的表达促进肝癌细胞耐药性,可以作为逆转肝癌多药耐药的分子作用靶点。

关键词： ZNF300 肝癌多药耐药 P-糖蛋白化疗锌指蛋白

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阿霉素联合致敏树突状细胞对荷宫颈癌小鼠的治疗作用

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中国病理生理杂志 2013年第4期29卷 734-738页

作者：曾小平王红梅黄永红周晓燕蔡震宇徐方云南昌大学基础医学院免疫学教研室江西南昌330006 南昌大学基础医学院病理生理学教研室江西南昌330006

目的:探讨阿霉素(adriamycin,ADM)联合冻融抗原致敏的树突状细胞(dendritic cells,DCs)对荷宫颈癌小鼠的免疫治疗作用。方法:建立小鼠皮下移植瘤模型;应用反复冻融法处理小鼠宫颈癌U14细胞,并致敏小鼠骨髓来源的DCs,制备DCs疫苗;流式细... 详细信息

目的:探讨阿霉素(adriamycin,ADM)联合冻融抗原致敏的树突状细胞(dendritic cells,DCs)对荷宫颈癌小鼠的免疫治疗作用。方法:建立小鼠皮下移植瘤模型;应用反复冻融法处理小鼠宫颈癌U14细胞,并致敏小鼠骨髓来源的DCs,制备DCs疫苗;流式细胞术鉴定DCs成熟表型;荷瘤小鼠分为对照组(PBS组)、DCs疫苗组、ADM组和ADM联合DCs疫苗组,进行3个周期的治疗。观察肿瘤大小,第21 d取血,ELISA法检测小鼠血清IL-2、IL-12和IFN-γ含量;处死动物,称肿瘤重量。结果:肿瘤冻融抗原致敏DCs后,可高表达白细胞分化抗原CD11c、CD80和CD86;经3个周期的治疗后,ADM联合DCs疫苗组平均瘤重及平均瘤体积均小于ADM组、DCs疫苗组和对照组(P<0.05),联合治疗组抑瘤率大于其它3组(P<0.05),且血清IL-2、IL-12和IFN-γ水平明显升高(P<0.05)。结论:ADM联合肿瘤抗原致敏的DCs疫苗可增强动物的抗肿瘤免疫应答,能有效抑制荷宫颈癌小鼠肿瘤的生长。

关键词：树突状细胞阿霉素肿瘤免疫疗法子宫颈癌

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NGR-单壁碳纳米管-紫杉醇复合物的制备及其靶向性研究

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中国药学杂志 2013年第20期48卷 1748-1754页

作者：张艳艳付旭东刘康栋赵继敏董子明张振中郑州大学基础医学院病理生理学教研室郑州450001 郑州大学第五附属医院郑州450001 郑州大学药学院郑州450001

目的探讨NGR-单壁碳纳米管-紫杉醇复合物的最佳制备方法及其靶向性。方法溶液共混法制备单壁碳纳米管-紫杉醇,将其连接NGR构建NGR-单壁碳纳米管-紫杉醇载药系统,并对其进行表征。考察单壁碳纳米管-紫杉醇制备中表面活性剂的种类、探头... 详细信息

目的探讨NGR-单壁碳纳米管-紫杉醇复合物的最佳制备方法及其靶向性。方法溶液共混法制备单壁碳纳米管-紫杉醇,将其连接NGR构建NGR-单壁碳纳米管-紫杉醇载药系统,并对其进行表征。考察单壁碳纳米管-紫杉醇制备中表面活性剂的种类、探头超声次数、碳纳米管的量等因素对载药量和包封率的影响。以S180荷瘤小鼠为模型,分别静注NGR-单壁碳纳米管-紫杉醇,单壁碳纳米管-紫杉醇和紫杉醇,采用高效液相色谱法测定小鼠脾、心、肝、肺、肾、肿瘤各组织的药物浓度,用靶向效率(TE)评价制剂的靶向性。结果碳纳米管-紫杉醇为1∶2;表面活性剂Poloxamer188和苯丙氨酸以7∶3混合;选择功率600 W,超声15次为探头超声条件制得单壁碳纳米管-紫杉醇,与NGR反应得到NGR-单壁碳纳米管-紫杉醇复合物,其包封率为(83.9±2.7)%,载药量为(69.3±1.5)%,Zeta电位为(-22.6±1.5)mV,平均粒径为(182.1±2.4)nm。在小鼠脾、肝、肺和肿瘤组织中NGR-单壁碳纳米管-紫杉醇和单壁碳纳米管-紫杉醇的AUC显著大于紫杉醇组(P<0.05,P<0.01)。在小鼠脾、肝、肺组织中单壁碳纳米管-紫杉醇和NGR-单壁碳纳米管-紫杉醇的靶向效率无明显差别,在心、肾组织中的靶向效率有所下降(P<0.05),在肿瘤中靶向效率分别为6.78%和21.33%,差异显著(P<0.01)。结论优化条件制备的NGR-单壁碳纳米管-紫杉醇复合物制备工艺和储存稳定性好,载药量和包封率高,且能显著提高紫杉醇的肿瘤靶向性。

关键词： NGR 单壁碳纳米管紫杉醇溶液共混肿瘤靶向

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肿瘤相关基因的改变未必都促癌

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中华病理学杂志 2013年第11期42卷 791-792页

作者：王瑞安李增山第四军医大学西京医院病理科基础医学院病理学与病理生理学教研室西安710032

现在是分子生物学的时代,肿瘤的研究总离不了各种基因在肿瘤中的表达、相互作用及对肿瘤发生发展的影响.英国著名学者John Cairns有段话说得很有意思,＂肿瘤研究是与生物学共同发展的,人们对肿瘤的认识不可避免地要打上那个时代的烙印.... 详细信息

现在是分子生物学的时代,肿瘤的研究总离不了各种基因在肿瘤中的表达、相互作用及对肿瘤发生发展的影响.英国著名学者John Cairns有段话说得很有意思,＂肿瘤研究是与生物学共同发展的,人们对肿瘤的认识不可避免地要打上那个时代的烙印.在不同的时期,人们总会用当时那些最时髦的词语来描述肿瘤、归纳肿瘤的属性[1].＂回想起来,确实如此.在20世纪70和80年代中,当微量元素不足致病说盛行的时候,人们曾经把北方一些省份食管癌的高发归因于钼的缺乏;癌基因发现后,人们把肿瘤归因于癌基因的突变;在细胞凋亡研究时髦的时候,都认为是细胞凋亡的减少;细胞周期研究获得诺贝尔奖之后,人们认为肿瘤是细胞增殖失控所导致;当microRNA（miRNA）火热的时候,人们又把肿瘤当做miRNA病;如今好像又认为是与自噬有关的病.总体上看,还是哲学上的定律在起作用：我们对肿瘤的认识,在不断的否定中.

关键词：肿瘤相关基因促癌分子生物学肿瘤发生发展细胞增殖失控细胞凋亡 miRNA 相互作用

来源：评论

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