检索结果-内蒙古大学图书馆

人喉鳞癌组织中c-myc蛋白的表达及c-myc siRNA下调喉癌Hep-2细胞中c-myc的表达对细胞增殖的影响

临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2011年第15期25卷 695-700页

作者：桑建中刘丽田芳金红军袁林林娄卫华郑州大学第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科郑州450052 河南职工医学院内科教研室郑州大学基础医学院病理生理学教研室

目的:检测喉鳞状细胞癌组织中c-myc的表达及利用RNA干扰(RNAi)技术特异性地抑制喉癌Hep-2细胞中c-myc的表达对细胞增殖及抗凋亡的影响,探讨在喉癌治疗中将c-myc作为基因治疗靶点的价值。方法:免疫组织化学法检测80例喉鳞状细胞癌和30例... 详细信息

目的:检测喉鳞状细胞癌组织中c-myc的表达及利用RNA干扰(RNAi)技术特异性地抑制喉癌Hep-2细胞中c-myc的表达对细胞增殖及抗凋亡的影响,探讨在喉癌治疗中将c-myc作为基因治疗靶点的价值。方法:免疫组织化学法检测80例喉鳞状细胞癌和30例声带息肉组织中的c-myc和Rb蛋白的表达;利用RNAi技术将c-myc siRNA转染到喉癌Hep-2细胞中,Western Blotting法检测c-myc蛋白的表达,RT-PCR法检测c-myc mRNA的表达;MTT法检测转染c-myc siRNA 24、48、72 h后,或转染不同浓度的c-myc siRNA(25、50、75 nmol/L)培养72 h,或在转染后加入不同浓度的5-Fu培养48 h,细胞增殖情况;流式细胞仪检测c-myc siRNA与5-Fu联合应用对喉癌细胞凋亡的影响。结果:免疫组织化学结果显示c-myc蛋白在喉鳞状细胞癌组织中表达增强,Rb蛋白表达下降,二者存在负相关;Hep-2细胞转染c-myc siRNA后,c-myc蛋白和mRNA的表达水平逐渐下调;MTT结果显示随着转染c-myc siRNA浓度的增加,Hep-2细胞的存活率受到明显的抑制,具有浓度依赖性;当转染c-myc siRNA(50 nmol/L)后Hep-2细胞的抑制效率随时间的延长而增加,具有时间依赖性;当联合使用5-Fu时,在同一浓度5-Fu作用下,转染c-myc siRNA组细胞的增殖活性明显受到抑制;凋亡检测结果显示,当c-myc siRNA与5-Fu联合使用时,可明显提高Hep-2细胞对5-Fu的敏感性,在较低剂量时凋亡细胞显著增加,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:喉鳞状细胞癌组织中存在c-myc的高表达,c-myc siRNA可以特异性地下调Hep-2细胞中c-myc的表达,抑制喉癌细胞的增殖,增加细胞对5-Fu的敏感性,表明c-myc或许可以成为喉癌基因治疗中一个重要的分子靶点。

关键词：喉肿瘤癌,鳞状细胞 c-myc RNA干扰细胞凋亡

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地塞米松和1,25-(OH)_2D_3对EC1细胞增殖和细胞周期的影响

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郑州大学学报（医学版） 2011年第5期46卷 664-666页

作者：张震付聪王冰一窦蒙蒙赵继敏黄幼田赵明耀郑州大学临床医学系郑州4500012 郑州大学基础医学院病理生理学教研室郑州450001

目的:观察地塞米松(DEX)和1,25-(OH)2D3及2药联用对食管鳞状细胞癌EC1细胞增殖及周期的影响。方法:分别用10-7mol/LDEX与10-7mol/L1,25-(OH)2D3以及同种浓度2药联合处理EC1细胞48、72和96h,并设溶剂对照组。采用MTT法检测细胞增殖情况... 详细信息

目的:观察地塞米松(DEX)和1,25-(OH)2D3及2药联用对食管鳞状细胞癌EC1细胞增殖及周期的影响。方法:分别用10-7mol/LDEX与10-7mol/L1,25-(OH)2D3以及同种浓度2药联合处理EC1细胞48、72和96h,并设溶剂对照组。采用MTT法检测细胞增殖情况及流式细胞仪检测细胞周期变化。结果:1,25-(OH)2D3单独应用具有抑制EC1细胞增殖的作用(F1,25-(OH)2D3=51.185,P<0.001);DEX单独应用具有阻滞细胞周期的作用(FDEX=8.170,P=0.009)。DEX、1,25-(OH)2D3及时间3种因素两两间均存在交互作用(细胞增殖抑制:F1,25-(OH)2D3×DEX=11.017,P=0.003;F1,25-(OH)2D3×时间=3.668,P=0.041;FDEX×时间=7.887,P=0.002。G0/G1期细胞比率:F1,25-(OH)2D3×DEX=12.381,P=0.002;F1,25-(OH)2D3×时间=6.583,P=0.005;FDEX×时间=5.096,P=0.014),且两药间提示存在拮抗作用。未发现3因素之间存在交互作用(细胞增殖抑制:F1,25-(OH)2D3×DEX×时间=0.512,P=0.606。G0/G1期细胞比率:F1,25-(OH)2D3×DEX×时间=0.410,P=0.668)。结论:DEX和1,25-(OH)2D3单独及联合使用能对EC1细胞增殖起抑制作用,且使EC1细胞周期阻滞在G0/G1期。

关键词：地塞米松 1 25-(OH)2D3 EC1细胞细胞周期食管肿瘤鳞状细胞癌

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DNA聚合酶β靶向siRNA对PC3细胞生物学行为的影响

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郑州大学学报（医学版） 2011年第3期46卷 372-375页

作者：王明臣蒋薇薇张善锋王好东宋宇赵勤董子明郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室郑州450001 郑州大学基础医学院病理生理学教研室郑州450001

目的:观察DNA聚合酶(pol)β靶向siRNA表达载体转染人前列腺癌PC3细胞对细胞生物学行为的影响。方法:采用已构建的DNA polβ靶向siRNA真核表达载体(pSUPERneoGFP-PS1、pSUPERneoGFP-PS2和pSU-PERneoGFP-CS),利用脂质体包裹转染PC3细胞,... 详细信息

目的:观察DNA聚合酶(pol)β靶向siRNA表达载体转染人前列腺癌PC3细胞对细胞生物学行为的影响。方法:采用已构建的DNA polβ靶向siRNA真核表达载体(pSUPERneoGFP-PS1、pSUPERneoGFP-PS2和pSU-PERneoGFP-CS),利用脂质体包裹转染PC3细胞,并设未转染组和转染空pSUPERneoGFP组。观察各组DNA polβmRNA和蛋白的表达及相应的细胞周期和自发突变率等细胞生物学行为的变化。结果:转染pSUPERneoGFP-PS1和pSUPERneoGFP-PS2可沉默PC3细胞DNA polβ蛋白的表达。5组间DNA polβmRNA表达的比较,差异有统计学意义(F=126.264,P<0.001);转染pSUPERneoGFP-PS1和pSUPERneoGFP-PS2组细胞较未转染、转染空pSU-PERneoGFP和转染pSUPERneoGFP-CS组显著降低(P<0.05)。5组间S期细胞比例和自发突变率比较,差异有统计学意义(F=72.501和6.860,P<0.05);转染pSUPERneoGFP-PS2组细胞S期比例及自发突变率较对照组显著降低,而转染pSUPERneoGFP-PS1细胞S期比例及自发突变率显著高于对照组(P<0.05)。结论:适宜的DNA polβ低水平表达是PC3细胞遗传稳定性维持所依赖的。

关键词：前列腺癌 DNA聚合酶β RNA干扰 PC3细胞系细胞周期自发突变率

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同型半胱氨酸对人血管平滑肌细胞MTHFR基因mRNA表达的影响及叶酸的拮抗效应

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中国老年学杂志 2011年第9期31卷 1605-1606页

作者：王丽珍杨志甫王树人包头医学院病理学教研室内蒙古包头014010 包头医学院第一附属医院神经内科四川大学华西基础医学与法医学院病理生理学教研室

目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)对人血管平滑肌细胞(HVSMCs)5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因mRNA表达的影响及叶酸(FA)可能的干预作用。方法正常人脐动脉血管平滑肌细胞(HVSMCs)体外培养,在培养基中加入临床相关浓度(30、100、200、50... 详细信息

目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)对人血管平滑肌细胞(HVSMCs)5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因mRNA表达的影响及叶酸(FA)可能的干预作用。方法正常人脐动脉血管平滑肌细胞(HVSMCs)体外培养,在培养基中加入临床相关浓度(30、100、200、500、1 000μmol/L Hcy,100μmol/L Hcy+100μmol/L FA,500μmol/L Hcy+100μmol/L FA,100μmol/L FA)的干预液,并孵育72 h。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定MTHFR mRNA的表达水平。结果不同浓度Hcy处理HVSMCs后,MTHFR mRNA表达增加,其mRNA表达水平在100μmol/L Hcy时达到高峰,直至极高浓度Hcy时仍刺激MTHFR mRNA呈高表达,与对照组相比有显著差异。而FA能明显抑制Hcy所引起的MTHFR mRNA高表达,对正常细胞无显著差异。结论 Hcy可促进人血管平滑肌细胞MTHFR mRNA表达增加。由于MTHFR是促使Hcy转化的关键酶,高Hcy诱导的MTHFR基因mRNA表达增加的效应应是一种代偿性的调节反应。FA可一定程度的拮抗这种效应。

关键词：同型半胱氨酸 5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶动脉粥样硬化

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REIC/Dkk-3蛋白在肿瘤发生发展中的作用

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中国生物化学与分子生物学报 2011年第9期27卷 808-811页

作者：徐小燕夏蒲杨雪聂小毳郑华川中国医科大学基础医学院病理生理学教研室沈阳110001 中国医科大学基础医学院病理与病理生理研究所沈阳110001 中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室沈阳110001

REIC基因在永生化的细胞系和部分肿瘤细胞系中发现并且表达下调,在许多人的肿瘤组织中表达也减少.目前研究认为,REIC/Dkk-3表达下调可能与启动子的甲基化有关.异常REIC/Dkk-3表达所致细胞表型异常在恶性肿瘤发生和演进过程中发挥重要作... 详细信息

REIC基因在永生化的细胞系和部分肿瘤细胞系中发现并且表达下调,在许多人的肿瘤组织中表达也减少.目前研究认为,REIC/Dkk-3表达下调可能与启动子的甲基化有关.异常REIC/Dkk-3表达所致细胞表型异常在恶性肿瘤发生和演进过程中发挥重要作用.细胞浆型和分泌型REIC与靶蛋白作用后启动细胞信号传导,但是REIC/Dkk-3的生物学功能尚未深入阐述.对REIC/Dkk-3的研究在理论上可以大大推动肿瘤病因学的发展,为肿瘤的诊断和治疗提供一个新的分子靶点,对提高肿瘤患者生存率和生存质量具有很大的促进作用.如果能研发REIC/Dkk-3抗肿瘤重组多肽及增强REIC/Dkk-3作用的化疗药物,也将为肿瘤患者治疗开辟新的途径和思路.本文就REIC/Dkk-3蛋白在肿瘤发生发展中作用进行综述.

关键词： REIC/Dkk-3蛋白肿瘤甲基化分子靶点

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ER-α36对胃癌SGC7901细胞在裸鼠体内生长的影响

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世界华人消化杂志 2011年第28期19卷 2919-2924页

作者：王绪明刘晶晶邓昊陈莹刘丽江武汉大学基础医学院湖北省武汉市43007 江汉大学医学院病理学与病理生理学教研室湖北省武汉市430056

目的:观察ER-α36分子对人胃癌细胞SGC7901在裸鼠体内生长的影响.方法:利用慢病毒转染技术构建稳定高表达和低表达ERα-36分子的重组人胃癌SGC7901细胞株.实验分为空白对照组(SGC7901-Control)、ER-α36低表达组(SGC7901-Low36)和ER-α3... 详细信息

目的:观察ER-α36分子对人胃癌细胞SGC7901在裸鼠体内生长的影响.方法:利用慢病毒转染技术构建稳定高表达和低表达ERα-36分子的重组人胃癌SGC7901细胞株.实验分为空白对照组(SGC7901-Control)、ER-α36低表达组(SGC7901-Low36)和ER-α36高表达组(SGC7901-High36),每组各3只雄性裸鼠.将上述细胞(5×106个/mL)接种裸鼠皮下,建立裸鼠荷瘤模型,连续观测30d.采用瘤结节体积测量和称质量、瘤组织HE染色及免疫组织化学法检测Ki67指数和E-cadherin蛋白表达等方法,鉴定各组细胞生长的情况.结果:全组实验动物均出现移植瘤.第16天开始,SGC7901-High36组裸鼠肿瘤的体积>SGC7901-Control组裸鼠肿瘤的体积>SGC7901-Low36组裸鼠肿瘤的体积,两两之间有显著性差异(P<0.05).第30天,SGC7901-High36组肿瘤的质量(2.58g±0.014g),明显大于SGC7901-Control组(1.32g±0.0245g)和SGC7901-Low36组(0.471g±0.021g),两两之间有显著性差异(P<0.05).SGC7901-High36组肿瘤细胞的核分裂数(42.33±6.33),明显高于SGC7901-Control组(28.5±0.35)和SGC7901-Low36组(12.5±2.5),两两之间有显著性差异(P<0.05).ki67阳性细胞计数,SGC7901-High36组(86.35±5.23),明显高于SGC7901-Control组(65.44±4.56)和SGC7901-Low36组(18.25±2.56),两两之间有显著性差异(P<0.05).SGC7901-High36组肿瘤细胞几乎不表达E-cadherin蛋白,明显低于SGC7901-Control组和SGC7901-Low36组.结论:ER-α36分子在胃癌细胞的生长与增殖中具有重要作用,并可能通过靶向肿瘤细胞的粘附分子而促进肿瘤的侵袭与转移.

关键词：雌激素受体-α36 胃癌 SGC7901

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黄芩提取物联合顺铂对人卵巢癌细胞株SKOV-3凋亡的研究

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中国妇幼保健 2011年第10期26卷 1529-1532页

作者：李婷婷徐红梅梁作文钟加滕何津吉林大学第一医院妇产科吉林长春130021 吉林大学基础医学院病理生理学教研室

目的:探讨黄芩提取物(Scutellaria Baicalensis)与顺铂(cisplatin,DDP)联合应用对卵巢癌细胞系SKOV-3增殖及凋亡的影响。方法:采用MTT比色法检测***与DDP联合应用对SKOV-3细胞增殖的影响,吖啶橙染色观察诱导细胞凋亡情况,流式细胞仪分... 详细信息

目的:探讨黄芩提取物(Scutellaria Baicalensis)与顺铂(cisplatin,DDP)联合应用对卵巢癌细胞系SKOV-3增殖及凋亡的影响。方法:采用MTT比色法检测***与DDP联合应用对SKOV-3细胞增殖的影响,吖啶橙染色观察诱导细胞凋亡情况,流式细胞仪分析细胞周期及凋亡并计算细胞平均凋亡率,Westernblot技术观察细胞内p53、ERK1/2、p-STAT3的表达。结果:300μg/***联合5μg/ml DDP给药:①48h后可使肿瘤细胞抑制率由单独应用DDP的15.8%提高到37.3%;②吖啶橙荧光染色可见细胞呈现明显凋亡形态,其凋亡率与10μg/ml DDP组相当;③流式细胞检测结果显示,可使细胞凋亡率从15.1%提高到42.2%(P<0.05);④westernblot结果显示,p53、ERK1/2、p-STAT3表达较5μg/ml DDP组单独给药组降低(P<0.05)。结论:***与DDP联合应用增强对卵巢癌细胞株SKOV-3的致凋亡效应,联合应用可达到减毒增效的效果。

关键词：黄芩提取物顺铂细胞凋亡卵巢肿瘤

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牛膝多糖联合5-氟尿嘧啶对食管癌的作用及相关机制的探讨

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重庆医科大学学报 2011年第5期36卷 531-534页

作者：冯婷刘霞赵明耀程慧敏郑州大学护理学院基础教研室郑州450052 徐州医学院附属第三医院病理科徐州221003 郑州大学基础医学院病理生理学教研室郑州450052

目的:探讨牛膝多糖(Achyranthesbidentatapolysaccharides,ABPS)及其联合5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-Fu)对食管癌EC9706细胞的作用及可能机制。方法:通过MTT法检测ABPS(3个浓度100、200、300μg/ml)及联合5-Fu对食管癌细胞的增殖的作用;用流式细胞术检测细胞周期改变及凋亡率,Western blot检测ABPS对食管癌细胞周期相关基因p21和p27表达的影响;免疫细胞化学检测凋亡相关基因bax、bcl-2的表达。结果:(1)ABPS可以抑制食管癌EC9706细胞的增殖;ABPS与5-Fu联合应用对食管癌细胞的增殖抑制作用强于两者单用;(2)ABPS作用后的EC9706出现了G0/G1期的阻滞和早期凋亡;其机制可能分别涉及p21和p27基因表达的增加以及bax基因表达的增加和bcl-2基因表达的减少。结论:ABPS对食管癌细胞的增殖有抑制作用;ABPS与5-Fu联合使用具有协同抗肿瘤作用。

关键词：牛膝多糖 5-氟尿嘧啶 EC9706 协同抗肿瘤作用

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胃癌组织来源的突变型DNA聚合酶β的碱基切除修复功能

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西安交通大学学报（医学版） 2011年第6期32卷 672-676页

作者：张成娟赵四敏赵国强董子明河南省肿瘤医院病理科河南郑州450003 郑州大学基础医学院病理生理学教研室河南郑州450001 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室河南郑州450001

目的研究胃癌组织中野生型和突变型DNA聚合酶β在DNA修复过程中的作用,为进一步探讨肿瘤的病因发病学奠定基础。方法采用聚合酶链反应(PCR)和分子克隆技术,以野生型和突变型DNA聚合酶β基因为模板,扩增后构建pGEM-T-polβ克隆载体,经PC... 详细信息

目的研究胃癌组织中野生型和突变型DNA聚合酶β在DNA修复过程中的作用,为进一步探讨肿瘤的病因发病学奠定基础。方法采用聚合酶链反应(PCR)和分子克隆技术,以野生型和突变型DNA聚合酶β基因为模板,扩增后构建pGEM-T-polβ克隆载体,经PCR筛选,亚克隆于pET28a(+)表达载体中,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细菌,经诱导剂异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后,通过镍柱亲和层析法纯化蛋白。设计3条单链DNA引物,退火合成含有单碱基缺失的DNA底物,与纯化蛋白共做碱基切除修复(BER)实验,最后琼脂糖凝胶电泳鉴定。结果成功构建了pET28a(+-)polβ重组表达载体;在BER实验中,野生型DNA聚合酶β能够在DNA底物的酶切位点处将其切开,突变型DNA聚合酶β不能或部分将其切开。结论野生型DNA聚合酶β能够修复单碱基缺失的DNA底物,而突变型DNA聚合酶β在碱基缺失修复过程中的作用丧失或减弱。

关键词：胃癌 dna聚合酶β iptg诱导镍柱亲和层析碱基切除修复

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survivin和GRIM-19在前列腺癌组织中的表达

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中华男科学杂志 2011年第1期17卷 21-26页

作者：刘艳波沈维高葛贺盖晓东芦丽莉赵雪俭北华大学基础医学院病理生理学教研室吉林吉林132013 吉林大学前列腺疾病防治研究中心吉林长春132001

目的:探讨survivin和GRIM-19在前列腺癌组织中的表达及意义。方法:应用免疫组化、RT-PCR和Western印迹法检测survivin和GRIM-19在正常前列腺(NP)组织、良性前列腺增生(BPH)组织和前列腺癌(PCa)组织中的表达情况。结果:免疫组化结果显示s... 详细信息

目的:探讨survivin和GRIM-19在前列腺癌组织中的表达及意义。方法:应用免疫组化、RT-PCR和Western印迹法检测survivin和GRIM-19在正常前列腺(NP)组织、良性前列腺增生(BPH)组织和前列腺癌(PCa)组织中的表达情况。结果:免疫组化结果显示survivin在NP、BPH和PCa组织中的表达率分别为6.25%、18.18%和90.62%(P<0.01);GRIM-19的表达率分别为87.50%、81.82%和9.37%(P<0.01)。半定量RT-PCR结果显示,在NP和BPH组织未检测到survivinmRNA表达,而PCa组织可检测到survivinmRNA高表达。Western印迹结果证实,在NP和BPH组织中有微量的survivin蛋白表达;而PCa组织可检测到survivin蛋白高表达;在NP和BPH组织中GRIM-19蛋白表达强阳性,而PCa组织中只有微量表达,两者比较差异均有显著性(P<0.01)。结论:survivin和GRIM-19的表达可能与PCa的发生密切相关。

关键词： survivin GRIM-19 前列腺癌免疫组化 Western印迹

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