检索结果-内蒙古大学图书馆

郑州大学学报（医学版） 2005年第4期40卷 581-583页

作者：汤黎明赵勤何炜朱涵王志举张文豪赵国强董子明郑州大学基础医学院病理生理学教研室郑州450052 郑州大学基础医学院生物化学教研室郑州450052 郑州大学基础医学院生理学教研室郑州450052 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室郑州450052

目的:构建人CD154基因真核表达质粒pcDNA3.1-CD154,初步观察转染该质粒后Eca109细胞的细胞生物学特性。方法:人外周血单个核细胞体外经PHA激活后提取总RNA,用RT-PCR技术扩增人CD154cDNA全长并构建真核表达质粒pcDNA3.1-CD154。用Lipofec... 详细信息

目的:构建人CD154基因真核表达质粒pcDNA3.1-CD154,初步观察转染该质粒后Eca109细胞的细胞生物学特性。方法:人外周血单个核细胞体外经PHA激活后提取总RNA,用RT-PCR技术扩增人CD154cDNA全长并构建真核表达质粒pcDNA3.1-CD154。用LipofectamineTM2000介导pcDNA3.1-CD154质粒转染食管癌Eca109细胞株,RT-PCR检测转染细胞中CD154mRNA的表达,观察细胞生长特征。结果:用T7/SP6通用引物测序证实重组质粒中插入片段为正向插入的人CD154基因。pcDNA3.1-CD154转染Eca109细胞后细胞异型性明显改善,生长速率减慢。结论:pcDNA3.1-CD154构建成功;转染该质粒的Eca109细胞生物学特性发生改变。

关键词： CD154 真核表达载体 Eca109细胞

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人野生型DNA聚合酶β在NIH3T3细胞中的定位

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郑州大学学报（医学版） 2005年第4期40卷 596-597页

作者：赵军赵勤赵国强秦冰路静宋谦崔自由赵继敏杨红艳黄幼田汤黎明董子明郑州大学基础医学院病理生理学教研室郑州450052 郑州大学基础医学院生物化学教研室郑州450052 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室郑州450052 郑州大学基础医学院生理学教研室郑州450052

目的:研究人野生型DNA聚合酶β(wtDNApolβ)在NIH3T3细胞内的定位。方法:将携带人wtDNApolβ的真核绿色荧光表达载体pEGFP-C3-polβ,用脂质体介导的方法转染NIH3T3细胞株,用荧光倒置显微镜观察转染细胞,观察wtpEGFP-C3-polβ融合基因表... 详细信息

目的:研究人野生型DNA聚合酶β(wtDNApolβ)在NIH3T3细胞内的定位。方法:将携带人wtDNApolβ的真核绿色荧光表达载体pEGFP-C3-polβ,用脂质体介导的方法转染NIH3T3细胞株,用荧光倒置显微镜观察转染细胞,观察wtpEGFP-C3-polβ融合基因表达。以转染空质粒pEGFP-C3的NIH3T3细胞为对照。结果:转染细胞均有GFP表达,说明转染成功。转染pEGFP-C3-polβ的细胞胞核荧光强度较胞浆强,而空质粒转染细胞胞浆胞核荧光强度无差别。结论:wtDNApolβ在NIH3T3细胞中定位于胞核内。

关键词：野生型DNA聚合酶β 转染蛋白质定位 NIH3T3细胞

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食管正常、癌前及癌变组织中DNA聚合酶βmRNA检测

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郑州大学学报（医学版） 2005年第4期40卷 603-605页

作者：赵国强王涛赵明耀何炜杨红艳王明臣汤黎明赵继敏赵勤董子明郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室郑州450052 郑州大学基础医学院病理生理学教研室郑州450052 郑州大学基础医学院生理学教研室郑州450052 郑州大学基础医学院生物化学教研室郑州450052

目的:观察不同演进过程食管组织中DNA聚合酶β(polβ)mRNA的表达。方法:采用含有内对照的半定量RT-PCR方法,检测31例食管浸润癌(鳞癌27例,腺癌4例)、4例原位癌、6例不典型增生以及31例正常食管黏膜组织中polβmRNA的表达。结果:食管浸... 详细信息

目的:观察不同演进过程食管组织中DNA聚合酶β(polβ)mRNA的表达。方法:采用含有内对照的半定量RT-PCR方法,检测31例食管浸润癌(鳞癌27例,腺癌4例)、4例原位癌、6例不典型增生以及31例正常食管黏膜组织中polβmRNA的表达。结果:食管浸润癌、原位癌和不典型增生组织中polβmRNA的表达水平差异无统计学意义(P>0.05),但均高于正常食管黏膜组织中的表达水平(P均<0.05)。食管鳞癌和腺癌组织中polβmR-NA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结果:在食管癌组织中存在着polβ的高表达,且发生于癌变早期。

关键词： DNA聚合酶β 食管肿瘤癌

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应用流式细胞术动态观测小鼠树突状细胞诱导的T细胞增殖的变化

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郑州大学学报（医学版） 2005年第5期40卷 822-824页

作者：崔自由黄幼田赵继敏赵军路静赵国强赵明耀董子明郑州大学基础医学院病理生理学教研室郑州450052 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室郑州450052

目的:运用流式细胞术(FCM)分析小鼠混合淋巴细胞反应(MLR)中T细胞增殖的动态变化。方法:把分别经脂多糖(LPS)和生理盐水(NS)刺激的小鼠树突状细胞(DC)经H22肿瘤细胞抗原肽冲击后,以1:50的比例与小鼠T细胞(TC)进行同种MLR,分别作为LPS+DC... 详细信息

目的:运用流式细胞术(FCM)分析小鼠混合淋巴细胞反应(MLR)中T细胞增殖的动态变化。方法:把分别经脂多糖(LPS)和生理盐水(NS)刺激的小鼠树突状细胞(DC)经H22肿瘤细胞抗原肽冲击后,以1:50的比例与小鼠T细胞(TC)进行同种MLR,分别作为LPS+DC+TC组和NS+DC+TC组,同时设LPS+TC组和空白TC对照组。经体外培养,分别于反应的第0d、1d、2d、3d、4d、5d、6d收集TC,FCM检测TC细胞周期。结果:随培养时间的延长,LPS+DC+TC组、NS+DC+TC组S期细胞及细胞增殖指数均先增后减、LPS+TC组和空白TC对照组则呈下降趋势(P<0.05),各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:FCM可以从单细胞水平客观、准确地反映淋巴细胞增殖的动态变化。

关键词：混合淋巴细胞反应流式细胞术细胞周期树突状细胞小鼠

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人B7-2基因修饰的食管癌细胞瘤苗抗肿瘤的免疫效应

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郑州大学学报（医学版） 2005年第4期40卷 588-590页

作者：赵国强汤黎明路静赵军宋谦崔自由杨洪艳赵继敏黄幼田董子明郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室郑州450052 郑州大学基础医学院病理生理学教研室郑州450052

目的:研究人B7-2基因修饰的食管癌细胞作为瘤苗的抗肿瘤作用。方法:将真核荧光表达载体pEGFP-C3-B7-2,通过脂质体转染技术转染人食管癌细胞株EC9706。外周血来源的树突状细胞(DC)负载肿瘤抗原后,与自体T淋巴细胞共培养3d,获得细胞毒性T... 详细信息

目的:研究人B7-2基因修饰的食管癌细胞作为瘤苗的抗肿瘤作用。方法:将真核荧光表达载体pEGFP-C3-B7-2,通过脂质体转染技术转染人食管癌细胞株EC9706。外周血来源的树突状细胞(DC)负载肿瘤抗原后,与自体T淋巴细胞共培养3d,获得细胞毒性T淋巴细胞(CTL)。用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测CTL对转染和未转染pEGFP-C3-B7-2的人食管癌细胞EC9706的杀伤活性。结果:CTL对转染pEGFP-C3-B7-2的肿瘤细胞的杀伤活性大于转染pEGFP-C3和未转染细胞的杀伤活性(P<0.05)。结论:人B7-2基因修饰的EC9706肿瘤细胞瘤苗,可诱导出明显的抗EC9706细胞的免疫效应。

关键词：人B7-2 绿色荧光蛋白肿瘤疫苗免疫效应

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BSO对内皮细胞氧化还原状态的影响

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中国药理学通报 2005年第4期21卷 450-453页

作者：刘漪沦王树人丁怡王秋林吴琛珩乔小蓉四川大学华西基础医学与法医学院病理生理学教研室四川大学分析测试中心四川成都610041

目的　探讨人脐静脉血管内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcells, HUVEC)在慢性髓性白血病细胞株K562细胞条件培养基作用下氧化还原状态的变化与其增殖活性间的关系,观察谷胱甘肽合成抑制剂丁胱亚磺酰亚胺(buthioninesulfoxine, B... 详细信息

目的　探讨人脐静脉血管内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcells, HUVEC)在慢性髓性白血病细胞株K562细胞条件培养基作用下氧化还原状态的变化与其增殖活性间的关系,观察谷胱甘肽合成抑制剂丁胱亚磺酰亚胺(buthioninesulfoxine, BSO)在上述条件下对HUVECs的作用,为探索相应的抗肿瘤血管生成治疗策略提供新思路。方法　用K562细胞条件培养基、谷胱甘肽合成抑制剂共同或单独处理HUVEC,检测HUVEC细胞内氧化还原状态以及细胞活力的改变。结果　K562细胞条件培养基明显促进内皮细胞的增殖,并促进内皮细胞氧化型与还原型谷胱甘肽(GSSG与GSH)、辅酶Ⅱ(NADP+与NADPH)两对氧化和还原性物质同时增高,但GSSG/GSH、NADP+ /NADPH比值未变。BSO显示出对HUVEC生长的明显抑制,引起HUVEC中GSH、NADPH含量明显降低、GSSG/GSH、NADP+ /NADPH比值升高;在K562细胞条件培养基的同时作用下,BSO对HUVEC的生长抑制作用增强, 使细胞内GSSG/GSH、NADP+ /NADPH比值进一步提高。结论　慢性髓性白血病细胞条件培养基使得血管内皮细胞对BSO的生长抑制作用更加敏感,其机制与内皮细胞氧化还原状态的改变密切相关。

关键词：氧化还原状态谷胱甘肽合成抑制剂人脐静脉血管内皮细胞白血病,髓性,慢性条件培养基

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IL-6下调血管内皮细胞组织因子抑制物表达

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第二军医大学学报 2005年第2期26卷 147-150页

作者：唐小龙江振友蔡淑玉董军肖瑞卢燕茹暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632 安徽理工大学医学院淮南232001 暨南大学医学院病理生理学教研室广州510632

目的:观察IL-6对脐静脉内皮细胞(HUVECs)表达组织因子途径抑制物(TFPI)的影响.方法:应用胰酶消化HUVECs并进行传代培养,用生长良好的第2、3代细胞进行试验.同时应用CCK-8测定不同浓度的IL-6(0.125～2.0 ng/ml,实验组)刺激后细胞活性变化... 详细信息

目的:观察IL-6对脐静脉内皮细胞(HUVECs)表达组织因子途径抑制物(TFPI)的影响.方法:应用胰酶消化HUVECs并进行传代培养,用生长良好的第2、3代细胞进行试验.同时应用CCK-8测定不同浓度的IL-6(0.125～2.0 ng/ml,实验组)刺激后细胞活性变化,对照组给予培养液;应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测细胞内TFPI mRNA水平.结果:与对照组相比,IL-6(0.125～0.5 ng/ml)对细胞活性没有显著影响(P>0.05);IL-6增加到1 ng/ml后,作用12 h后细胞活力开始下降.IL-6(0.5 ng/ml)作用6～24 h显著下调细胞TFPI mRNA表达(P<0.05),6 h时抑制效果最强(TFPI mRNA/GAPDH mRNA均值仅为0.191),以后抑制效应渐减弱,48 h达到正常水平(TFPI mRNA/GAPDH mRNA均值为0.399).结论:提示IL-6(0.5 ng/ml)对HUVECs的活性不造成直接的影响,同时IL-6(0.5 ng/ml)在6～24 h内可抑制HUVECs的TFPI mRNA表达而诱发凝血系统失衡,这可能与急性炎性反应时相的血液凝固和血栓形成有关.

关键词：白细胞介素6 组织因子抑制物脐静脉内皮细胞逆转录聚合酶链反应

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嗅鞘细胞移植促进神经修复的研究与进展

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中国康复医学杂志 2005年第10期20卷 787-789页

作者：朱文标邓宇斌沈慧勇中山大学基础医学院病理生理学教研室广州510080 中山大学附属二院骨科

嗅鞘细胞（olfactory ensheathing ***）是分布于嗅觉系统嗅球和嗅上皮基底膜的一种特殊的胶质细胞，研究表明，嗅鞘细胞在中枢和周围神经系统内均能够促进损伤神经轴突的再生和类髓鞘的形成，促进受损神经功能的修复，[第一段]

关键词：嗅鞘细胞移植神经修复周围神经系统上皮基底膜 cells 胶质细胞嗅觉系统神经轴突神经功能

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稳定表达缺失型DNA聚合酶β的CHO细胞系的建立

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郑州大学学报（医学版） 2005年第5期40卷 817-818页

作者：赵继敏杨洪艳赵国强黄幼田郑智敏金戈董子明郑州大学基础医学院病理生理学教研室郑州450052 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室郑州450052 郑州大学基础医学院生物化学教研室郑州450052

目的:建立稳定表达缺失型DNA聚合酶β(polβ)的细胞系。方法:将已构建的缺失型polβ的真核表达载体pcDNA3.1-polβ用脂质体法转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO),经G418筛选后得到稳定转染的细胞株,用RT-PCR方法鉴定细胞缺失型polβmRNA的表达... 详细信息

目的:建立稳定表达缺失型DNA聚合酶β(polβ)的细胞系。方法:将已构建的缺失型polβ的真核表达载体pcDNA3.1-polβ用脂质体法转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO),经G418筛选后得到稳定转染的细胞株,用RT-PCR方法鉴定细胞缺失型polβmRNA的表达。结果与结论:成功转染和筛选出表达缺失型polβ的细胞株CHO-polβ,建立了稳定表达缺失型polβ的CHO细胞株。

关键词： DNA聚合酶β 细胞转染基因缺失

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乳癌组织中基质金属蛋白酶-2与微血管密度测定

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郑州大学学报（医学版） 2005年第1期40卷 110-113页

作者：刘真真张恒伟崔树德董子明河南省肿瘤医院乳腺科郑州450008 郑州大学基础医学院病理生理学教研室郑州450052

　　　目的:探讨乳癌组织中基质金属蛋白酶 -2 (MMP -2 )的表达水平与肿瘤血管形成及预后的关系。方法:采用SP免疫组化方法,分别应用抗MMP- 2及CD34单克隆抗体检测 68例乳癌组织中MMP- 2的表达和微血管密度(MVD),另选 10例乳腺良性病变... 详细信息

　　　目的:探讨乳癌组织中基质金属蛋白酶 -2 (MMP -2 )的表达水平与肿瘤血管形成及预后的关系。方法:采用SP免疫组化方法,分别应用抗MMP- 2及CD34单克隆抗体检测 68例乳癌组织中MMP- 2的表达和微血管密度(MVD),另选 10例乳腺良性病变作对照,并与组织学分级、腋窝淋巴结转移及 5a生存率进行相关分析。结果: 乳癌组织中MMP 2的阳性表达率为 76. 5%,对照组表达率 10%, 2组间差异有统计学意义 (P<0. 001);乳癌组织中MVD为 56. 84±15. 57,对照组为 34. 52±9. 57, 2组间差异有统计学意义 (P<0. 01)。MMP 2及MVD表达与乳癌组织学分级呈正相关(r分别为 0. 729, 0. 528,P均 <0. 01 );也与腋窝淋巴结转移相关 (r分别 0. 759, 0. 448P<0. 05); MMP- 2阳性表达率与 5a生存率呈负相关 (P<0. 05 ); MMP- 2高表达组MVD值大于MMP 2低表达组(P<0. 05)。结论:MMP -2的表达与肿瘤血管形成及乳癌患者预后关系密切。

关键词：乳腺肿瘤金属蛋白酶类微血管密度预后

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