检索结果-内蒙古大学图书馆

中国现代医学杂志 2005年第23期15卷 3576-3579,3582页

作者：裴瑞杨红梅陈洁陈晓玲杨萍赵国强河南职工医学院实验中心河南郑州450003 河南职工医学院病理生理学教研室河南郑州450003 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室河南郑州450052

目的克隆人MAGE-3基因片段,以构建真核重组表达质粒pcDNA3.1-MAGE-3,为制备以MAGE-3基因片段为基础的核酸疫苗及探讨相关的肿瘤免疫治疗提供实验依据。方法RT-PCR法从肝癌组织制备出含BamHI、EcoRI酶切位点的MAGE-3基因片段,pGEM-TEasy... 详细信息

目的克隆人MAGE-3基因片段,以构建真核重组表达质粒pcDNA3.1-MAGE-3,为制备以MAGE-3基因片段为基础的核酸疫苗及探讨相关的肿瘤免疫治疗提供实验依据。方法RT-PCR法从肝癌组织制备出含BamHI、EcoRI酶切位点的MAGE-3基因片段,pGEM-TEasy为克隆载体,pcDNA3.1为真核表达载体,采用DNA重组技术,将目的基因先克隆至pGEM-TEasy载体再亚克隆至pcDNA3.1载体上,然后,据氨苄青酶素(Amp)抗性、蓝白筛选实验、克隆鉴定引物T7/SP6PCR扩增方法鉴定阳性克隆,并对阳性克隆pcDNA3.1-MAGE-3中的插入序列进行DNA测序。结果扩增出了MAGE-3目的基因片段;经蓝白筛选实验、克隆鉴定引物扩增方法鉴定得到重组子pGEM-T-MAGE-3;引物扩增方法鉴定得到重组子pcD-NA3.1-MAGE-3;DNA测序后与GenBank中MAGE-3相应序列比较,结果完全一致。结论成功构建了重组pcDNA3.1-MAGE-3肿瘤核酸疫苗,为肿瘤免疫治疗提供了条件。

关键词： MAGE-3克隆 RT-PCR重组质粒肿瘤免疫治疗

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线粒体一氧化氮合酶与炎症和脓毒性休克

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感染．炎症．修复 2005年第4期6卷 233-235,257页

作者：阚文宏南方医科大学基础医学院病理生理学教研室广州510515

炎症的特征性临床症状是：血管舒张(红)、水肿(肿)、发热、痛、功能障碍,这些症状与多种细胞活化后向炎症病灶转移有关,此时体液中含有大量一氧化氮(NO)和炎症细胞因子(白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等)。其中NO是... 详细信息

炎症的特征性临床症状是：血管舒张(红)、水肿(肿)、发热、痛、功能障碍,这些症状与多种细胞活化后向炎症病灶转移有关,此时体液中含有大量一氧化氮(NO)和炎症细胞因子(白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等)。其中NO是体内重要的生理递质和细胞间、细胞内的化学信使,在炎症反应中扮演了重要的角色。NO可影响炎症的很多方面：根据NO的浓度、NO的潜在形式、病变部位以及靶细胞的反应的不同,既可以促进炎症的发生和发展,也具有抗炎作用。

关键词：脓毒性休克骨骼肌低血压线粒体呼吸链一氧化氮合酶炎症病理

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病理妊娠与细胞凋亡

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新疆医科大学学报 2005年第3期28卷 274-276页

作者：赵珍张建龙新疆医科大学基础医学院病理生理学教研室新疆乌鲁木齐830054

细胞凋亡(apoptosis)是一种由基因控制的细胞自主性死亡方式,又叫细胞程序性死亡(programmed cell death, PCD).它是由膜受体和细胞浆蛋白所执行的一系列级联反应事件,于1972年由Kerr等[1]首次提出这个概念.目前人们对凋亡的认识已经达... 详细信息

细胞凋亡(apoptosis)是一种由基因控制的细胞自主性死亡方式,又叫细胞程序性死亡(programmed cell death, PCD).它是由膜受体和细胞浆蛋白所执行的一系列级联反应事件,于1972年由Kerr等[1]首次提出这个概念.目前人们对凋亡的认识已经达到分子和基因水平,涉及凋亡的分子和基因繁多,调控机制复杂.细胞凋亡与组织器官的发育和机体正常生理活动的维持有关,在正常妊娠孕卵的着床和胚胎的发育方面起着重要作用.已有研究表明,细胞凋亡的出现及异常表达可能导致病理妊娠,如妊娠高血压综合征(pregnancy-induced hypertention, PIH)、流产、胎儿宫内发育迟缓(intrauterine growth retardation, IUGR)等[2].本文就细胞凋亡与妊娠之间的关系综述如下.

关键词：细胞凋亡病理妊娠胞浆级联反应首次正常膜受体细胞程序性死亡基因控制分子

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VR1012-TCRγV_1真核表达载体的构建

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郑州大学学报（医学版） 2005年第2期40卷 291-293页

作者：宗红李建生赵国强董子明王瑞林郑州大学第一附属医院消化内科郑州450052 郑州大学基础医学院免疫学教研室郑州450052 郑州大学基础医学院病理生理学教研室郑州450052 郑州大学第一附属医院肿瘤内科郑州450052

目的:构建含TCRγV1基因的重组表达载体。方法:从人淋巴瘤Jurkat细胞中提取总RNA,反转录合成 cDNA克隆入VR1012质粒;转化感受态细菌***5α,以通用引物PCR扩增筛选阳性克隆,并双酶切鉴定;小量提取质粒进行测序。结果:测序结果证实... 详细信息

目的:构建含TCRγV1基因的重组表达载体。方法:从人淋巴瘤Jurkat细胞中提取总RNA,反转录合成 cDNA克隆入VR1012质粒;转化感受态细菌***5α,以通用引物PCR扩增筛选阳性克隆,并双酶切鉴定;小量提取质粒进行测序。结果:测序结果证实重组载体中的外源片段序列与GenBank中TCRγV1序列完全相符。结论:成功构建了含TCRγV1基因的重组表达载体。

关键词： TCRγ 真核表达载体基因疫苗

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卵巢癌组织中EphA2与ERβ的表达

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郑州大学学报（医学版） 2005年第4期40卷 672-674页

作者：韩丽萍董子明乔玉环 Jahn M.Nesland 索振河郑州大学第一附属医院妇产科郑州450052 郑州大学基础医学院病理生理学教研室郑州450052 挪威奥斯陆大学肿瘤医院病理科

目的:探讨卵巢癌组织中EphA2与雌激素受体ERβ的表达及相关性。方法:应用免疫组化法对118例卵巢癌组织进行EphA2、ERβ检测,对其中10例EphA2及ERβ阳性表达的冰冻组织标本,应用激光捕获显微切割技术(LCM)捕获卵巢癌细胞,应用Western印... 详细信息

目的:探讨卵巢癌组织中EphA2与雌激素受体ERβ的表达及相关性。方法:应用免疫组化法对118例卵巢癌组织进行EphA2、ERβ检测,对其中10例EphA2及ERβ阳性表达的冰冻组织标本,应用激光捕获显微切割技术(LCM)捕获卵巢癌细胞,应用Western印迹分析方法检测其中EphA2及ERβ蛋白表达水平。结果:卵巢癌组织中ERβ及EphA2阳性率分别为99.2%(117/118)和90.7%(107/118);EphA2表达与卵巢癌患者的年龄、组织学类型及残余肿瘤大小无关(P>0.05),而与FIGO分期、组织分化程度有关(P<0.05);ERβ表达与卵巢癌患者的年龄、组织学类型、FIGO分期、残余肿瘤大小无关(P>0.05),与组织分化程度有关(P<0.05);ERβ与EphA2的表达有相关性(rs=0.184,P<0.05)。Western印迹分析,EphA2蛋白和ERβ蛋白条带强度一致。结论:ERβ与E-phA2蛋白可能与卵巢癌的进展有关。

关键词：卵巢肿瘤 EphA2 雌激素受体癌

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脑胶质瘤组织中DNA聚合酶β基因突变检测

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郑州大学学报（医学版） 2005年第4期40卷 605-608页

作者：高丽赵国强史锡文何炜董子明河南省人民医院儿科郑州450003 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室郑州450052 河南省人民医院神经外科郑州450003 郑州大学基础医学院病理生理学教研室郑州450052

目的:研究人脑胶质瘤组织中DNA聚合酶β基因(polβ)的突变情况。方法:应用RT-PCR及SSCP检测22例脑胶质瘤、4例脑膜瘤、3例垂体瘤及1例肺部转移性鳞癌标本中polβ的表达,利用DNASIS、OMIGA软件及Chou&Fasman算法对扩增产物进行序列... 详细信息

目的:研究人脑胶质瘤组织中DNA聚合酶β基因(polβ)的突变情况。方法:应用RT-PCR及SSCP检测22例脑胶质瘤、4例脑膜瘤、3例垂体瘤及1例肺部转移性鳞癌标本中polβ的表达,利用DNASIS、OMIGA软件及Chou&Fasman算法对扩增产物进行序列分析及蛋白质二、三级结构分析。结果:脑胶质瘤组织中DNApolβ突变率为6/22,共8个突变位点,2例发生504位A→G(131位Lys→Glu)、748位A→G(212位His→Arg)突变,2者蛋白质二级结构亦明显改变;598位T→C(162位Val→Ala)突变2例,但2者蛋白质二级结构无明显改变;2例Ⅲ级星形细胞瘤分别有2个和3个突变位点,但其各有1个相应的氨基酸未发生变异。Ⅱ级以下脑胶质瘤及脑膜瘤、垂体瘤等良性脑肿瘤组织均未发现DNApolβ基因突变。1例肺癌脑部转移性鳞状细胞癌DNApolβ基因出现5个突变位点,737位A→C(208位Pro未变异)、744位T→G(211位Lue→Val)、830位C→G(239位Cys→Trp)、866位A→C(251位Pro未变异)、870位A→C(253位Arg未变异),但蛋白质二级结构未改变。蛋白质三维结构图显示脑胶质瘤组织中6个氨基酸变异位点中,5个位于掌部,1个位于拇指部。结论:脑胶质瘤细胞中存在DNApolβ基因突变,且这些突变位点均为DNApolβ基因(尤其是掌部)活化结构域。提示脑胶质瘤的发生和发展可能与DNApolβ基因突变有关。

关键词： DNA聚合酶β 脯肿瘤胶质瘤基因突变序列测定

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鼻咽癌组织DNA聚合酶β基因突变与EBV感染相关

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第四军医大学学报 2005年第19期26卷 1790-1791页

作者：郑红李明善赵国强董子明宋宝义河南大学医学院口腔系河南开封475001 郑州大学基础医学院病理生理学教研室河南郑州450052 解放军155医院五官科河南开封475003

目的:研究探讨鼻咽癌中DNA聚合酶β(DNA pol-ym erase,βpolβ)的变异情况及与EBV感染有无相关关系.方法:采用RT-PCR法(逆转录-DNA聚合酶链反应)、PCR-SSCP(聚合酶链-单链构象多态性分析)、DNA序列分析法对26例鼻咽癌组织及癌旁组织标... 详细信息

目的:研究探讨鼻咽癌中DNA聚合酶β(DNA pol-ym erase,βpolβ)的变异情况及与EBV感染有无相关关系.方法:采用RT-PCR法(逆转录-DNA聚合酶链反应)、PCR-SSCP(聚合酶链-单链构象多态性分析)、DNA序列分析法对26例鼻咽癌组织及癌旁组织标本进行polβ基因突变研究.用特异性EBV引物PCR扩增法检测EB病毒,分析出现EBV-PCR阳性与polβ突变及鼻咽癌发生之间的相关性.结果:polβ-SSCP结果显示癌旁组织标本中polβ无突变;26例鼻咽癌组织标本中存在polβ基因变异的有8例,突变率为30.8%.polβ基因变异的鼻咽癌标本测序结果显示:核苷酸序列有多种形式的改变.提取DNA用EBV引物进行扩增,26例鼻咽癌标本中出现阳性的有24例,阳性率为92.3%.结论:首次发现在鼻咽癌中存在多种形式的polβ突变,有polβ突变的病例均有EBV感染.

关键词： DNA聚合酶β 鼻咽肿瘤基因,突变 EB病毒

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脑胶质瘤组织中DNA聚合酶β、Fas、p53基因mRNA的表达

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郑州大学学报（医学版） 2005年第4期40卷 608-610页

作者：高丽赵国强史锡文董子明河南省人民医院儿科郑州450003 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室郑州450052 河南省人民医院神经外科郑州450003 郑州大学基础医学院病理生理学教研室郑州450052

目的:研究脑胶质瘤组织中DNA聚合酶β(polβ)、Fas、p53基因mRNA的表达。方法:采用RT-PCR扩增及半定量分析方法,对22例脑胶质瘤、7例良性脑肿瘤及其相应瘤旁正常脑组织中DNApolβ、Fas、p53基因mR-NA进行检测。结果:与相应瘤旁正常脑组... 详细信息

目的:研究脑胶质瘤组织中DNA聚合酶β(polβ)、Fas、p53基因mRNA的表达。方法:采用RT-PCR扩增及半定量分析方法,对22例脑胶质瘤、7例良性脑肿瘤及其相应瘤旁正常脑组织中DNApolβ、Fas、p53基因mR-NA进行检测。结果:与相应瘤旁正常脑组织相比,脑胶质瘤及良性脑肿瘤组织中DNApolβ、Fas基因mRNA高表达,p53基因mRNA低表达(P均<0.01)。脑肿瘤组织中DNApolβ与Fas基因mRNA的表达呈正相关((r=0.611,P<0.05)),与p53基因mRNA的表达无关;p53与Fas基因mRNA的表达亦无关。结论:p53基因mRNA低表达及DNApolβ和Fas基因mRNA高表达与脑肿瘤的发生发展及恶性程度有关。

关键词：胶质瘤 DNA聚合酶β Fas P53 mRNA

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m_5 AChR-G_(11)融合蛋白筛选m_5受体配体的研究

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中国医科大学学报 2005年第5期34卷 396-398页

作者：王海波秦兴军郭政东杨君兰中国医科大学基础医学院病理生理学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学附属第一医院口腔颌面外科中国医科大学基础医学院药理学教研室辽宁省疾病预防控制中心

目的:以m5AChR-G11融合蛋白为工具,筛选m5受体亚型特异性配体,并且探讨m5AChR-G11融合蛋白中两组分相互作用的机制。方法:采用杆状病毒Sf 9细胞表达系统,制备m5AChR-G11融合蛋白;通过[3H]QNB放射配体结合实验和[35S]GTPγS替代结合实验... 详细信息

目的:以m5AChR-G11融合蛋白为工具,筛选m5受体亚型特异性配体,并且探讨m5AChR-G11融合蛋白中两组分相互作用的机制。方法:采用杆状病毒Sf 9细胞表达系统,制备m5AChR-G11融合蛋白;通过[3H]QNB放射配体结合实验和[35S]GTPγS替代结合实验,检测m5AChR-G11融合蛋白的功能。结果:m5AChR-G11融合蛋白的表达水平为(60.39±1.95)***-1蛋白。不同配体存在时使融合蛋白中G11与GDP的亲和力发生变化,ace-tylcholine,M cN-A-343,AF-102B,R-(+)-hyoscyam ine,trop icam ide,alcuron ium和atrop ine存在时以及无配体时,GDP的IC50值分别是134.90,46.77,38.02,10.00,13.80,18.62,5.89,23.40μmol/L。结论:杆状病毒Sf 9细胞表达系统表达的m5AChR-G11融合蛋白具备m受体配体结合特性和两组分间的偶联功能。乙酰胆碱是m5受体的完全激动剂,M cN-A-343和AF-102B是部分激动剂,R-(+)-hyoscyam ine,trop icam ide,alcuron ium和阿托品是拮抗剂。

关键词：融合蛋白毒蕈碱乙酰胆碱受体 G蛋白偶联受体兴奋剂拮抗剂

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超抗原SEB和SEC诱导的树突状细胞对T细胞的影响

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中国病理生理杂志 2005年第6期21卷 1171-1176页

作者：邢飞跃李明申志华李岩暨南大学教育部组织移植与免疫重点实验室广东广州510632 四川大学华西医学中心感染免疫研究室四川成都610041 广东医学院病理生理学教研室广东湛江524023

目的:阐明超抗原葡萄球菌肠毒素B(SEB)和葡萄球菌肠毒素C(SEC)诱导树突状细胞(dendriticcells,DC)促进T细胞活化、增殖、分泌及其对肝癌HcaF细胞的杀伤作用。方法:以SEB或SEC诱导DC刺激T细胞,免疫组化染色检测DC表达S-100蛋白;流式细胞... 详细信息

目的:阐明超抗原葡萄球菌肠毒素B(SEB)和葡萄球菌肠毒素C(SEC)诱导树突状细胞(dendriticcells,DC)促进T细胞活化、增殖、分泌及其对肝癌HcaF细胞的杀伤作用。方法:以SEB或SEC诱导DC刺激T细胞,免疫组化染色检测DC表达S-100蛋白;流式细胞术检测DC表达I-Eκ和CD80分子水平,检测T细胞受刺激后CD69的表达、IL-2和TNF-α的生成;用MTT法检测T细胞增殖及其对HcaF细胞的杀伤效应。结果:体外试验表明,DC高表达S-100蛋白,SEB或SEC诱导的DC高表达I-Eκ和CD80分子;SEB或SEC能诱导DC促进T细胞活化,其浓度以100μg/L时作用最强;SEB或SEC能诱导DC促进T细胞增殖、大量分泌IL-2和TNF-α,被激活的T细胞对HcaF细胞的杀伤率高达83.2%±12.8%,明显优于肿瘤抗原诱导的DC所激活的T细胞对HcaF细胞的杀伤作用;SEB与SEC的诱导作用无明显差异。结论:超抗原SEB或SEC能诱导DC显著增强T细胞活化、增殖、分泌和杀伤肿瘤细胞,并优于肿瘤抗原的诱导作用,SEB和SEC的作用相似,为超抗原SEB或SEC与DC联合应用于临床肿瘤的治疗提供了证据。

关键词：葡萄球菌肠毒素类树突状细胞 T淋巴细胞 HeaF细胞

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