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健康之友 2020年第24期 102-103页

作者：刘丽艳张萧萧黄宁陈军利四川大学华西基础医学与法医学院病理生理学教研室四川成都 610041

为了检测4-氨基喹啉对α2A-AR的别构调节作用,我们在COS-7细胞,通过DEAE-Dextran方法瞬时转染了载有α2A-AR的质粒(pcDNA3.1),并通过受体表达实验检测α2A-AR的活性及表达量,然后通过配体受体解离动力学实验检测4-氨基喹啉对3H-RX82100... 详细信息

为了检测4-氨基喹啉对α2A-AR的别构调节作用,我们在COS-7细胞,通过DEAE-Dextran方法瞬时转染了载有α2A-AR的质粒(pcDNA3.1),并通过受体表达实验检测α2A-AR的活性及表达量,然后通过配体受体解离动力学实验检测4-氨基喹啉对3H-RX821002解离速度的影响.结果显示,α2A-AR具有较高的活性和表达量;4-氨基喹啉对3H-RX821002的解离速度没有影响,提示,4-氨基喹啉对3H-RX821002不具有别构调节作用.

关键词： 4-氨基喹啉别构调节 alpha2肾上腺素受体

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基础医学整合课程联合两种教学方法对医学生批判性思维能力影响的研究

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中华医学教育杂志 2020年第3期40卷 183-186页

作者：张彩华关莉莉李骢任翔孔力马海英大连医科大学基础医学院病理生理学教研室 116044 大连医科大学基础医学院生理学教研室 116044 大连医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室 116044

目的探讨基础医学系统整合联合基于问题学习、基于案例学习教学(以下简称系统整合教学)对医学生批判性思维能力的影响。方法2018年6月以大连医科大学五年制临床医学专业184名学生为研究对象,将其分为试验组和对照组,试验组89名学生实施&... 详细信息

目的探讨基础医学系统整合联合基于问题学习、基于案例学习教学(以下简称系统整合教学)对医学生批判性思维能力的影响。方法2018年6月以大连医科大学五年制临床医学专业184名学生为研究对象,将其分为试验组和对照组,试验组89名学生实施"卓越医生新模式培养计划",进行基础医学系统整合教学,对照组95名学生实施以学科为中心的传统教学。采用中文版批判性思维量表(Critical Thinking Disposition Inventory-Chinese Version,CTDI-CV)评价基础医学系统整合教学对医学生批判性思维能力的培养效果。结果试验组的批判性思维能力总分明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。试验组的开放思想、分析能力、认知成熟度、求知欲4个维度评分高于对照组[(42.03±5.60)分比(39.98±5.47)分、(41.69±6.27)分比(39.43±5.89)分、(42.16±6.93)分比(39.61±8.13)分、(43.74±7.74)分比(40.32±5.63)分],差异均有统计学意义(均P<0.05)。在70个题目中,17个题目两组间差异具有统计学意义(P<0.05)。结论在临床医学专业学生基础医学教学中,系统整合教学能有效促进医学生批判性思维能力的提高。

关键词：基础医学系统整合教学医学生批判性思维能力教学方法

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高通量测序分析类风湿关节炎患者外周血单个核细胞circRNAs表达谱差异

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免疫学杂志 2019年第3期35卷 262-268页

作者：杨旋张梦洁张蓓青岛大学基础医学院免疫学系陆军军医大学病理生理学教研室

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中环状RNA (circRNA)表达谱的差异,并结合临床验证筛选出可辅助RA诊断的分子标志物。方法采用高通量测序技术,检测4例RA患者和3例健康对照者PBMCs中circRNA和mRNA表达;基因聚类分... 详细信息

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中环状RNA (circRNA)表达谱的差异,并结合临床验证筛选出可辅助RA诊断的分子标志物。方法采用高通量测序技术,检测4例RA患者和3例健康对照者PBMCs中circRNA和mRNA表达;基因聚类分析差异表达的circRNAs,KEGG pathway分析差异表达的mRNAs;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法在32例RA患者和20例健康对照者中验证部分差异表达circRNAs,结合ROC曲线分析其作为RA诊断分子标志物的潜力。结果高通量测序结果显示,RA组和健康对照组中共有71种显著差异表达的circRNAs,其中41种上调,30种下调,生物信息学分析显示,涉及的通路多与炎症和转录活性相关。多样本qRT-PCR验证结果显示hsa_circ_0000396和hsa_circ_0130438在RA患者PBMCs中的表达水平显著低于健康对照组(P<0.05),ROC曲线分析进一步表明显示hsa_circ_0000396有望成为RA诊断分子标志物。结论在RA患者PBMCs中存在差异表达的circRNAs,它们在RA的发生发展过程中可能起调控作用,其中hsa_circ_0000396有成为RA诊断分子标志物的潜能。

关键词：高通量测序类风湿关节炎环状RNA 外周血单个核细胞 hsa_circ_0000396

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阿米洛利对α2C肾上腺素受体别构调节作用的研究

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四川生理科学杂志 2020年第4期42卷 383-387页

作者：张萧萧刘若凡刘丽艳黄宁陈军利四川大学华西基础医学与法医学院病理生理学教研室四川成都610041

目的:探索阿米洛利类化合物与α2C-AR的作用位点及别构调节作用。方法:采用分子对接方法,预测阿米洛利类化合物与α2C-AR的潜在结合位点;采用受体表达实验检测α2C-AR的活性及表达量;通过配体受体解离动力学实验检测阿米洛利类化合物对3... 详细信息

目的:探索阿米洛利类化合物与α2C-AR的作用位点及别构调节作用。方法:采用分子对接方法,预测阿米洛利类化合物与α2C-AR的潜在结合位点;采用受体表达实验检测α2C-AR的活性及表达量;通过配体受体解离动力学实验检测阿米洛利类化合物对3H-RX821002解离速度的影响。结果:阿米洛利的作用位点包括Glu377和Phe380;Benzamil的作用位点包括Asn160和Thr241。阿米洛利和Benzamil对3H-RX821002的解离速度均没有影响。结论:阿米洛利和Benzamil对α2C-AR不具有别构调节作用。

关键词：别构调节 α2肾上腺素受体阿米洛利 Benzamil

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微小RNA-153在砷致肝细胞凋亡过程中的表达变化及其调控作用

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中华地方病学杂志 2020年第10期39卷 703-709页

作者：杨毅刘丽谢汝佳汤雷郑璐蔡爽陈雨丝粱猜郭怡歆杨勤韩冰贵州医科大学基础医学院病理生理学教研室贵州省常见慢性疾病发病机制及药物研究重点实验室贵阳550000 贵州医科大学公共卫生教研室贵阳550000

目的探讨砷诱导内质网应激致肝细胞凋亡过程中微小RNA-153(miR-153)表达变化及调控组蛋白H3第4位赖氨酸(H3K4)甲基转移酶(SET7/9)和组蛋白H3K4一甲基化(H3K4me1)水平变化的机制。方法体外培养人正常肝细胞(L-02细胞),根据不同处理方式... 详细信息

目的探讨砷诱导内质网应激致肝细胞凋亡过程中微小RNA-153(miR-153)表达变化及调控组蛋白H3第4位赖氨酸(H3K4)甲基转移酶(SET7/9)和组蛋白H3K4一甲基化(H3K4me1)水平变化的机制。方法体外培养人正常肝细胞(L-02细胞),根据不同处理方式分为对照、砷处理、砷+阴性转染、砷+miR-153上调和砷+miR-153下调组,其中砷+阴性转染、砷+miR-153上调和砷+miR-153下调组转染质粒与转染试剂均按照3μg∶8μl进行转染。24 h后,砷处理、砷+阴性转染、砷+miR-153上调和砷+miR-153下调组再以100μmol/L亚砷酸钠(NaAsO2)作为终浓度处理24 h;对照组加入与NaAsO2等体积的磷酸盐缓冲液(PBS)处理24 h。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测各组细胞miR-153表达水平;流式细胞术检测各组细胞凋亡和周期情况;实时无标记细胞动态分析(RTCA)仪检测细胞增殖情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞内质网标志蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、SET7/9及H3K4me1蛋白表达水平。结果各组细胞miR-153表达水平比较,差异有统计学意义(F=10.73,P<0.05)。与对照组[(41.10±6.08)%]比较,砷处理组miR-153表达水平[(4.35±0.20)%]明显降低(P<0.05);与砷+阴性转染组[(10.00±2.40)%]比较,砷+miR-153上调组miR-153表达水平[(157.70±42.70)%]明显升高(P<0.05),砷+miR-153下调组miR-153表达水平[(4.20±0.28)%]明显降低(P<0.05)。各组细胞总凋亡率、G1期细胞比例比较,差异有统计学意义(F=29.69、104.32,P均<0.05)。与对照组比较,砷处理、砷+miR-153上调、砷+miR-153下调组细胞总凋亡率、G1期细胞比例明显升高(P均<0.05);与砷+阴性转染组比较,砷+miR-153上调组细胞总凋亡率、G1期细胞比例明显下降(P均<0.05),砷+miR-153下调组细胞总凋亡率、G1期细胞比例明显升高(P均<0.05)。各组细胞增殖率比较差异有统计学意义(F=799.35,P<0.05)。与对照组比较,砷处理、砷+miR-153上调、砷+miR-153下调组细胞增殖率明显下降(P均<0.05);与砷+阴性转染组比较,砷+miR-153上调组细胞增殖率升高(P<0.05),砷+miR-153下调组细胞增殖率下降(P<0.05)。各组细胞SET7/9、GRP78和H3K4me1蛋白表达水平比较,差异有统计学意义(F=78.52、52.13、54.32,P均<0.05)。与对照组比较,砷处理组SET7/9、GRP78和H3K4me1蛋白表达水平明显升高(P均<0.05);与砷+阴性转染组比较,砷+miR-153上调组SET7/9、GRP78和H3K4me1蛋白表达水平明显下降(P均<0.05),砷+miR-153下调组SET7/9、GRP78和H3K4me1蛋白表达水平明显升高(P均<0.05)。结论miR-153在砷诱导内质网应激致肝细胞凋亡过程中具有重要作用,其表达和调控与SET7/9和H3K4me1水平变化有关。

关键词：砷中毒细胞凋亡微小RNA-153 组蛋白H3第4位赖氨酸甲基转移酶组蛋白H3第4位赖氨酸一甲基化

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棕榈酸激活人脐静脉内皮细胞PP2C降低eNOS Ser1177的磷酸化

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细胞与分子免疫学杂志 2020年第6期36卷 520-526页

作者：王敬杰张倩秦思骆妍蓓于敏丁菁陆德琴贵州医科大学基础医学院病理生理学教研室贵州贵阳550025 贵州医科大学贵州省常见慢性疾病发病机制及药物研究重点实验室贵州贵阳550025

目的探讨棕榈酸(PA)激活人脐静脉内皮细胞(HUVEC)蛋白磷酸酶2C(PP2C)对内皮一氧化氮合酶第1177位丝氨酸(eNOS Ser1177)磷酸化的调控作用。方法HUVEC随机分为对照组、PA组、特异性PP2C抑制剂血根碱(San)联合PA组以及转染PP2Cα特异性小干... 详细信息

目的探讨棕榈酸(PA)激活人脐静脉内皮细胞(HUVEC)蛋白磷酸酶2C(PP2C)对内皮一氧化氮合酶第1177位丝氨酸(eNOS Ser1177)磷酸化的调控作用。方法HUVEC随机分为对照组、PA组、特异性PP2C抑制剂血根碱(San)联合PA组以及转染PP2Cα特异性小干扰RNA(siRNA)组。采用Western blot法检测eNOS总蛋白、eNOS Ser1177磷酸化水平和PP2Cα蛋白水平,二氨基荧光素-FM二乙酸酯(DAF-FM DA)负载法检测细胞内一氧化氮(NO)含量,免疫共沉淀法观察eNOS与PP2C之间的共定位关系。结果与对照组相比,PA处理组eNOS Ser1177磷酸化水平及NO含量均降低,San预处理组可逆转以上变化。敲低PP2Cα蛋白表达水平后,eNOS Ser1177磷酸化水平增加。eNOS与PP2C在细胞内共定位。结论PA通过激活HUVEC的PP2C引起eNOS Ser1177磷酸化水平降低。

关键词：棕榈酸(PA) 蛋白磷酸酶2C(PP2C) 内皮一氧化氮合酶(eNOS) 人脐静脉内皮细胞(HUVEC)

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4-氨基喹啉类化合物对α2A肾上腺素受体选择性的作用机制探讨

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中国保健营养 2020年第35期30卷 292-293页

作者：刘丽艳刘若凡张萧萧李在兵黄宁陈军利四川大学华西基础医学与法医学院病理生理学教研室四川成都 610041

目的进一步验证C10与α2A-AR相互作用的分子机制.方法采用基因定点突变对R187和V197进行突变,然后通过放射性配体受体结合实验检测R187和V197突变对C10与α2A-AR亲和力的影响.结果 R187和V197突变对C10与α2A-AR亲和力无明显影响.结论... 详细信息

目的进一步验证C10与α2A-AR相互作用的分子机制.方法采用基因定点突变对R187和V197进行突变,然后通过放射性配体受体结合实验检测R187和V197突变对C10与α2A-AR亲和力的影响.结果 R187和V197突变对C10与α2A-AR亲和力无明显影响.结论 R187和V197可能不是C10与α2A-AR相互作用的位点,或者不是唯一位点.

关键词： α2A肾上腺素受体 4-氨基喹啉类化合物分子机制

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多烯紫杉醇对前列腺癌细胞基因SPC24表达的影响

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蛇志 2020年第2期32卷 146-149页

作者：陈穗霞刘承武广西医科大学基础医学院病理生理学教研室广西南宁530021

目的前列腺癌在中国的发病率逐年上升,其致病诱因包括种族、年龄、饮食、遗传等。SPC24是核分裂周期80(NDC80)复合物的亚基之一,参与细胞有丝分裂中的着丝点-纺锤体微管精准耦合、染色体精确均分等过程。目前前列腺癌的发病机制是否与基... 详细信息

目的前列腺癌在中国的发病率逐年上升,其致病诱因包括种族、年龄、饮食、遗传等。SPC24是核分裂周期80(NDC80)复合物的亚基之一,参与细胞有丝分裂中的着丝点-纺锤体微管精准耦合、染色体精确均分等过程。目前前列腺癌的发病机制是否与基因SPC24表达的相关研究鲜有报道。本研究探究多烯紫杉醇(docetaxel,DT)对前列腺癌细胞基因SPC24表达的影响,探讨其成为潜在前列腺癌潜在治疗的生物标志物可能性。方法体外培养前列腺癌细胞DU145,随机分成实验组和阴性对照组。其中实验组加入含不同浓度DT(10^-8 mol/L、10^-7 mol/L、10^-6 mol/L、10^-5 mol/L)的培养基,阴性对照组加入等体积培养液。经干预24、48、72、96 h后,采用Cell Counting Kit-8(CCK8)法检测DT对前列腺癌细胞DU145增殖的影响,利用RT-qPCR和Western blotting检测技术分别检测SPC24 mRNA和SPC24蛋白的表达水平。结果DT可显著抑制DU145细胞增殖,且随DT浓度的增加抑制率逐渐升高,于72 h达到最高。选取抑制效果最佳的10^-5 mol/L浓度的DT作用72 h后,SPC24 mRNA表达水平显著降低(P<0.05),SPC24蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论DT能抑制前列腺癌细胞DU145增殖,其作用机制可能与SPC24表达下调有关,SPC24可能是前列腺癌治疗的潜在靶点。

关键词：多烯紫杉醇前列腺癌 SPC24

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HIF-1介导的自噬在心脏疾病中的研究进展

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基础医学与临床 2021年第8期41卷 1186-1189页

作者：张刘杰李静吴博哈尔滨医科大学基础医学院病理生理学教研室黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学附属第二医院老年病科黑龙江哈尔滨150081

低氧诱导因子1(HIF-1)通过调控靶基因表达维持机体供氧和需氧平衡,保持细胞氧稳态,并调节缺血心肌自噬水平,其靶基因表达产物BNIP3蛋白参与此调节过程。

关键词：低氧诱导因子1 低氧自噬心脏

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小鼠急性肝损伤对棕色脂肪组织功能的影响及机制研究

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中国比较医学杂志 2020年第4期30卷 63-69页

作者：冯妙卜浩林李丽红郭林芝苗宇船郭建红山西医科大学病理生理学教研室太原030001 山西医科大学形态学实验室太原030001 山西中医药大学基础医学院山西晋中030619

目的探讨四氯化碳(CCl4)诱导的急性肝损伤小鼠在不同时间点对棕色脂肪组织的影响及相关机制。方法18只8周龄C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组、CCl42周组、CCl44周组,每组6只,CCl4组注射CCl42次,对照组给予同剂量橄榄油。称重棕色脂肪组织... 详细信息

目的探讨四氯化碳(CCl4)诱导的急性肝损伤小鼠在不同时间点对棕色脂肪组织的影响及相关机制。方法18只8周龄C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组、CCl42周组、CCl44周组,每组6只,CCl4组注射CCl42次,对照组给予同剂量橄榄油。称重棕色脂肪组织;HE染色观察肝和棕色脂肪组织的病理变化;免疫组织化学和实时定量PCR检测棕色脂肪组织解偶联蛋白1(UCP1)的表达;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;Pearson法检验Ucp1 mRNA水平与TNF-α含量间的关系。结果与对照组相比,CCl42周组血清ALT、AST含量增多(P<0.01),棕色脂肪组织重量减少(P<0.05),UCP1蛋白表达减少(P<0.05),Ucp1 mRNA表达减少(P<0.05),血清中TNF-α含量增多(P<0.001);与CCl42周组相比,CCl44周组血清中ALT、AST含量减少(P<0.05),棕色脂肪组织重量增加(P<0.05),Ucp1 mRNA表达增多(P<0.01),血清中TNF-α含量减少(P<0.001);CCl42周组和CCl44周组Ucp1 mRNA水平与TNF-α含量均呈显著负相关(r=-0.950,P<0.01;r=-0.859,P<0.05)。结论急性肝损伤可导致棕色脂肪组织功能下降,机体产热减少,从而影响代谢稳态,机制可能与TNF-α含量升高有关。

关键词：棕色脂肪组织解偶联蛋白1 肝损伤肿瘤坏死因子-α

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