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氯通道ClC-2反义寡核苷酸对顺铂作用下神经胶质瘤U251细胞侵袭力的影响

吉林大学学报（医学版） 2009年第1期35卷 43-46,F0002页

作者：苏静周磊张宏宇孙连坤康劲松吉林大学基础医学院病理生理学教研室吉林长春130021

目的:探讨氯通道ClC-2反义寡核苷酸(AON)抑制ClC-2基因表达对顺铂(DDP)作用下神经胶质瘤U251细胞侵袭力的影响,为ClC-2成为神经胶质瘤综合治疗的新基因靶点提供理论依据。方法:U251细胞按处理方法不同分为对照组(转染无义寡核苷酸)、AON... 详细信息

目的:探讨氯通道ClC-2反义寡核苷酸(AON)抑制ClC-2基因表达对顺铂(DDP)作用下神经胶质瘤U251细胞侵袭力的影响,为ClC-2成为神经胶质瘤综合治疗的新基因靶点提供理论依据。方法:U251细胞按处理方法不同分为对照组(转染无义寡核苷酸)、AON组(转染ClC-2反义寡核苷酸)、DDP组(无义寡核苷酸与顺铂联用)和AON+DDP组(ClC-2反义寡核苷酸与顺铂联用)。应用RT-PCR检测相关基因ClC-2、cyclin D1、MMP-2、MMP-9 mRNA表达;Transwell小室侵袭实验检测各组细胞侵袭力;Transwell小室迁移实验检测各组细胞迁移率。结果:与对照组比较,AON组、DDP组和AON+DDP组ClC-2、cyclin D1、MMP-2、MMP-9 mRNA表达率降低(P<0.05);Transwell小室侵袭实验中对照组、AON组、DDP组和AON+DDP组侵袭细胞数分别为81.00±4.58、42.01±4.36、48.33±2.52和12.67±5.13;与对照组比较,AON组、DDP组和AON+DDP组穿透细胞数明显降低(P<0.05)。Transwell小室迁移实验中AON组、DDP组、AON+DDP组细胞迁移率(%)分别为72.40±2.20、51.48±1.29、37.87±1.50,与对照组比较均明显降低(P<0.05)。结论:①转染ClC-2反义寡核苷酸能有效抑制ClC-2 mRNA表达;②抑制ClC-2 mRNA能降低U251细胞的迁移力和侵袭力;③ClC-2 mRNA表达降低可促进顺铂对U251细胞迁移力和侵袭力的抑制作用。

关键词：氯通道ClC-2 反义寡核苷酸顺铂神经胶质瘤U251细胞肿瘤浸润

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姜黄素对LPS激活小胶质细胞条件培养基诱导损伤的海马神经元保护作用及机制

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中国病理生理杂志 2010年第4期26卷 742-747页

作者：杨丽娟董军陆大祥唐红梅暨南大学医学院病理生理学教研室广东广州510632

目的:通过脂多糖(LPS)激活小胶质细胞条件培养基(MCM)引起原代培养SD大鼠海马神经元损伤,体外模拟炎症相关性神经退行性疾病,探讨姜黄素的保护作用及机制。方法:5μg/LLPS作用于原代培养的SD大鼠小胶质细胞12h,取激活后培养基作用于原... 详细信息

目的:通过脂多糖(LPS)激活小胶质细胞条件培养基(MCM)引起原代培养SD大鼠海马神经元损伤,体外模拟炎症相关性神经退行性疾病,探讨姜黄素的保护作用及机制。方法:5μg/LLPS作用于原代培养的SD大鼠小胶质细胞12h,取激活后培养基作用于原代培养的SD大鼠海马神经元。实验分为5组:空白对照组,LPS组,姜黄素组,MCM组,姜黄素+MCM组。相差显微镜下观察海马神经元各组处理前后形态学改变,MTT法检测各组海马神经元的存活率,并通过全自动生化仪检测各组海马神经元内乳酸盐与丙酮酸盐比值来评价神经元内氧利用情况,RT-PCR法观察各组海马神经元1,4,5-三磷酸肌醇受体3个亚型(IP3R1,IP3R2,IP3R3)的表达情况。结果:LPS激活的小胶质细胞条件培养基引起海马神经元形态发生明显改变,乳酸盐与丙酮酸盐比值较空白对照组亦有明显增加;姜黄素组海马神经元形态未发生明显改变,乳酸盐与丙酮酸盐比值较MCM组降低,MCM组IP3R1及IP3R3表达明显升高,IP2R2无显著变化;姜黄素组IP3R1的表达较MCM组明显下降,但IP3R3表达无明显变化。结论:LPS激活小胶质细胞条件培养基可引起海马神经元损伤,姜黄素对该损伤海马神经元的保护性作用可能是通过增加细胞内氧利用率,降低IP3R1的表达及敏感性,从而减低神经元内钙离子浓度及细胞内钙离子超载机率而发挥作用的。

关键词：姜黄素脂多糖类小胶质细胞条件培养基海马神经元

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肺炎衣原体感染在人喉癌HEp-2细胞黏附和迁移中的作用

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中华肿瘤杂志 2011年第1期33卷 18-22页

作者：张利军洪莉陈宁沈炳玲邓艳秋权伟王蓓蓓张丽莙天津医科大学基础医学院病理生理学教研室 300070

目的探讨肺炎衣原体（***）感染在人喉癌HEp-2细胞黏附和迁移中的作用,及其在肿瘤转移中的作用及机制.方法 ***增殖培养后感染HEp-2细胞,光镜下观察细胞病变,吖啶橙染色观察细胞内***包涵体的形态特点,透射电镜观察***包涵体超微结构.... 详细信息

目的探讨肺炎衣原体（***）感染在人喉癌HEp-2细胞黏附和迁移中的作用,及其在肿瘤转移中的作用及机制.方法 ***增殖培养后感染HEp-2细胞,光镜下观察细胞病变,吖啶橙染色观察细胞内***包涵体的形态特点,透射电镜观察***包涵体超微结构.采用细胞黏附实验观察***感染对HEp-2细胞黏附能力的影响.采用创伤修复实验和Transwell实验检测***感染HEp-2细胞后,细胞迁移能力的改变.结果 ***感染HEp-2细胞72 h后,细胞内的空泡状结构（即包涵体）几乎占据整个胞浆.吖啶橙染色结果显示,细胞内的包涵体呈黄绿色葡萄串状.透射电镜观察显示,包涵体内成熟的梨形原体明显增多,而圆形的网状体则较少.细胞黏附实验结果显示,***感染HEp-2细胞2 h后,***感染组黏附细胞的吸光度（A）值为0.669±0.011,明显高于对照组的A4值（0.558±0.005,P〈0.001）,***感染组的细胞黏附率为119.9%.创伤修复实验结果显示,***感染HEp-2细胞24 h后,细胞向划痕中央迁移的距离明显长于对照组（P〈0.05）.Transwell实验结果显示,***感染HEp-2细胞12 h后,***感染组和对照组的细胞迁移数目分别为（23.40±2.41）个/视野和（10.40±1.67）个/视野,差异有统计学意义（P〈0.001）.结论 ***感染能增强HEp-2细胞的黏附能力,同时还能促进HEp-2细胞迁移,提示***感染可能在喉癌转移过程中起促进作用.

关键词：喉肿瘤衣原体肺炎细胞黏附细胞迁移肿瘤转移

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雌激素及植物雌激素对去卵巢大鼠乳腺组织形态和ERα亚型表达的影响

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中国药理学通报 2008年第4期24卷 518-522页

作者：张华李红芳杨丽娜张英福田治锋邱小青陈新年兰州大学基础医学院生理学教研室兰州大学基础医学院医学机能实验室兰州大学基础医学院病理生理学教研室甘肃兰州730000

目的探讨雌激素及植物雌激素对去卵巢大鼠乳腺组织形态和ERα亚型表达的影响,并比较雌激素和植物雌激素作用的异同。方法48只Wistar大鼠随机分为8组,分别为假手术组(Sham)、去卵巢组(Ovx)、17β-雌二醇组(Ovx+Est)、17-β雌二醇+黄体酮... 详细信息

目的探讨雌激素及植物雌激素对去卵巢大鼠乳腺组织形态和ERα亚型表达的影响,并比较雌激素和植物雌激素作用的异同。方法48只Wistar大鼠随机分为8组,分别为假手术组(Sham)、去卵巢组(Ovx)、17β-雌二醇组(Ovx+Est)、17-β雌二醇+黄体酮组(Ovx+Est+Pro)、黄体酮组(Ovx+Pro)、染料木素组(Ovx+Gen)、白黎芦醇组(Ovx+Res)、根皮素组(Ovx+Phl)。对应组给药21d后处死,取乳腺组织,用蛋白免疫印迹法观察各组大鼠乳腺ERα的表达、并利用免疫组化对其形态学变化进行观察。结果乳腺组织中的ERα主要位于乳腺导管上皮细胞的胞质和胞核内。ERα在8组中均可表达,但表达量却不同。Sham与Ovx比较,Ovx组ERα表达上调(P<0·05);Ovx与Ovx+Est、Ovx+Pro、Ovx+Gen、Ovx+Res、Ovx+Phl比较,后5组ERα表达均下调(P<0·01);Ovx与Ovx+Est+Pro比较则差异无显著性(P>0·05);大鼠卵巢切除后,乳腺明显萎缩。卵巢切除大鼠皮下分别注射Gen和Phl后,乳腺结构仍呈现出卵巢切除后的表现。皮下注射Res乳腺腺泡及其上皮细胞有不同程度的增生。皮下注射Est或Est合并Pro后,乳腺组织密度增加,乳腺上皮细胞明显增生。结论植物雌激素Gen、Phl和Res与雌激素相似,可以下调去卵巢切除大鼠乳腺组织ERα的表达;Res还可促进去卵巢切除大鼠乳腺上皮细胞增生,但作用不如雌激素强。

关键词：去卵巢大鼠雌激素植物雌激素孕激素雌激素受体免疫印迹免疫组化

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人参二醇组皂苷对内毒素休克大鼠脑皮质ⅠκBα mRNA表达的影响

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吉林大学学报（医学版） 2005年第1期31卷 42-44页

作者：王志李金成刘潇刘喜春赵雪俭孙连坤吉林大学基础医学院病理生理学教研室吉林长春130021

目的 :通过观察内毒素休克大鼠脑皮质中 L PO含量、 SOD活力和 κBα m RNA表达及人参二醇组皂苷 (PDS)对其的影响 ,探讨内毒素引起脑组织损伤的分子机制。方法 :Wistar大鼠随机分为对照组、内毒素休克 (L PS)组、地塞米松 (L PS+Dex)... 详细信息

目的 :通过观察内毒素休克大鼠脑皮质中 L PO含量、 SOD活力和 κBα m RNA表达及人参二醇组皂苷 (PDS)对其的影响 ,探讨内毒素引起脑组织损伤的分子机制。方法 :Wistar大鼠随机分为对照组、内毒素休克 (L PS)组、地塞米松 (L PS+Dex)组和人参二醇组皂苷 (L PS+PDS)组。大鼠静脉注射内毒素 (4mg· kg- 1 )4 h后测定脑组织中 L PO含量、 SOD活力及 κBα m RNA的表达。结果 :L PS+Dex组和 L PS+PDS组 L PO显著低于 L PS组 (P<0 .0 5 ) ,SOD活力明显高于 L PS组 (P<0 .0 5 )。 L PS+Dex组和 L PS+PDS组 κBαm RNA表达高于 L PS组 (P<0 .0 5 )。结论 :PDS能够上调脑组织中 κBα的表达 ,减轻内毒素引起的组织过氧化反应 ,对中枢神经系统具有保护作用 (P<0 .0 5 )。

关键词：内毒素类/副作用人参二醇/药理学休克,脓毒性/病理生理学地塞米松脂质过氧化作用

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家兔静脉灌注水杨酸钠对内毒素性发热及其脑中隔区精氨酸加压素含量的影响

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中国病理生理杂志 1997年第3期13卷 258-261页

作者：王达安董军杨皓庄李楚杰暨南大学医学院病理生理学教研室广州510632

本研究探讨了精氨酸加压素在水杨酸解热机制中的作用。实验结果表明:在静脉注射内毒素引起发热时,脑中隔区的精氨酸加压素含量明显升高(P<0.01);而静脉注射水杨酸钠1.3mol/L×2ml随后以24mmol/L×2ml/min恒速灌注,在抑制发... 详细信息

本研究探讨了精氨酸加压素在水杨酸解热机制中的作用。实验结果表明:在静脉注射内毒素引起发热时,脑中隔区的精氨酸加压素含量明显升高(P<0.01);而静脉注射水杨酸钠1.3mol/L×2ml随后以24mmol/L×2ml/min恒速灌注,在抑制发热的同时,也消除了精氨酸加压素含量的升高(P<0.01)。作者推论:脑中隔区精氨酸加压素释放的增加可能参与水杨酸的解热过程。

关键词：内毒素性发热水杨酸盐类

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TIMP-3对前列腺癌PC-3M细胞株增殖和侵袭能力的影响

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吉林大学学报（医学版） 2005年第4期31卷 516-518页

作者：林桂渺张灵赵雪俭赵丽娟吉林大学基础医学院病理生理学教研室吉林长春130021

目的:观察TIMP3对前列腺癌细胞PC3M增殖和侵袭能力的影响。方法:实验分为前列腺癌细胞PC3M组、转染空质粒PCDNA3.1的PCDNAPC3M组和转染TIMP3的PCDNATIMP3PC3M组。采用黏附实验、MTT比色法对比观察稳定转染的PCDNATIMP3PC3M与PCDNAPC3M... 详细信息

目的:观察TIMP3对前列腺癌细胞PC3M增殖和侵袭能力的影响。方法:实验分为前列腺癌细胞PC3M组、转染空质粒PCDNA3.1的PCDNAPC3M组和转染TIMP3的PCDNATIMP3PC3M组。采用黏附实验、MTT比色法对比观察稳定转染的PCDNATIMP3PC3M与PCDNAPC3M的黏附能力和增殖活力。采用单层细胞侵袭和Boyden小室侵袭实验,对比观察TIMP3对PC3M细胞体外侵袭能力的影响。结果:稳定转染TIMP3的PC3M细胞的黏附率和细胞增殖速度明显低于空质粒组和未转染组(P<0.05),稳定转染TIMP3的PC3M细胞的侵袭指数明显低于空质粒组和未转染组(P<0.05),空质粒组和未转染组间细胞增殖速度和细胞侵袭指数比较差异无显著性(P>0.05)。结论:TIMP3对前列腺癌PC3M细胞增殖和侵袭能力具有抑制作用。

关键词：肿瘤浸润前列腺肿瘤基质金属蛋白酶抑制剂-3 基质金属蛋白酶肿瘤细胞,培养的

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一种高纯度人多形核白细胞分离方法

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中国病理生理杂志 1997年第6期13卷 770-771页

作者：颜亮暨南大学医学院病理生理学教研室广州510632

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蛙皮素与体温调节

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中国病理生理杂志 1997年第4期13卷 443-447页

作者：鲁伟陆大祥暨南大学医学院病理生理学教研室广州510632

蛙皮素(bombesin,BN)是从蛙皮肤提取的含有N-末端焦谷氨酸的14肽,应用放射免疫分析和免疫组织化学方法证实在哺乳动物的胃肠和脑内大量存在,具有广泛的生理作用。本文主要就其分布和在体温调节方面的作用及其机制作一简要阐述。一、蛙... 详细信息

蛙皮素(bombesin,BN)是从蛙皮肤提取的含有N-末端焦谷氨酸的14肽,应用放射免疫分析和免疫组织化学方法证实在哺乳动物的胃肠和脑内大量存在,具有广泛的生理作用。本文主要就其分布和在体温调节方面的作用及其机制作一简要阐述。一、蛙皮素的来源和分布蛙皮素,又称羚蟾素和羚蟾肽,是由Anastasi等首先从两种欧洲蛙,即羚蟾(Bombina)和产婆蟾(Alytes)

关键词：蛙皮素体温调节

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大鼠坐骨神经损伤后所致的TRPV1过度表达干预轴突的再生修复

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中华病理学杂志 2017年第12期46卷 847-852页

作者：白娟张杨王亚芳兰婧李夏青山西医科大学基础医学院病理生理学教研室太原030001

目的探讨局部阻断瞬时受体电位阳离子通道亚家族成员V1（TRPV1）表达或功能对大鼠坐骨神经离断伤后轴突再生修复的影响.方法成年雄性SD大鼠24只,分为4组：正常对照组,单纯损伤组,损伤＋AMG-517150μg/kg组及损伤＋AMG-517300μg/kg组... 详细信息

目的探讨局部阻断瞬时受体电位阳离子通道亚家族成员V1（TRPV1）表达或功能对大鼠坐骨神经离断伤后轴突再生修复的影响.方法成年雄性SD大鼠24只,分为4组：正常对照组,单纯损伤组,损伤＋AMG-517150μg/kg组及损伤＋AMG-517300μg/kg组.在坐骨神经离断损伤的同时,行背根神经节周围注射,用药组注射不同浓度AMG-517,单纯损伤组仅注射等体积溶剂.2周后分别采用酶联免疫吸附测定、Western blot、环氧树脂-半薄切片（1μm）-甲苯胺蓝染色对脊髓后角钙调素基因相关多肽（calcitonin gene-related peptide,CGRP）释放、背根神经节局部TRPV1表达及坐骨神经轴突再生数量和局部微环境变化进行检测.结果（1）背根神经节周围注射AMG-517可有效阻断脊髓背角CGRP的释放、阻断TRPV1的功能,对照组CGRP为0.15ng/g,单纯损伤组为0.17ng/g,AMG-517150μg/kg组为0.09ng/g,AMG-517300μg/kg组为0.11ng/g（P〈0.01）;（2）局部阻断TRPV1表达或功能可促进坐骨神经损伤后近端神经轴突的再生（P〈0.01）;（3）AMG-517可使背根神经节TRPV1的表达下调（P〈0.01）.结论（1）周围神经损伤后所引起的TRPV1过度表达或激活可影响周围神经损伤后再生;（2）降低或阻断神经损伤后TRPV1的过度表达或激活有助于周围神经损伤后的修复.

关键词：创伤神经系统神经节脊神经再生 TRPV阳离子通道 TRPV1阻断剂

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