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山西农业大学学报（自然科学版） 2023年第2期43卷 100-110页

作者：张峥孙雨晨范阔海孙娜孙盼盼孙耀贵李宏全尹伟山西农业大学动物医学学院中兽医药现代化山西省重点实验室山西晋中030801 山西农业大学实验动物管理中心山西晋中030801

[目的]本试验旨在探讨猪肺泡巨噬细胞(Porcine alveolar macrophages,PAMs)表面天然免疫粘附受体—猪I型补体受体(Porcine complement receptor 1⁃like,CR1⁃like)对猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respi⁃ratory syndrome virus,PRRSV)感染PAMs的影响,为阐述CR1⁃like在PRRSV免疫应答中的生物学功能提供理论数据。[方法]采取PRRSV减毒活疫苗免疫接种PRRSV抗体为阴性的长白仔猪20~28 d后,提取分离抗病毒血清并检测抗PRRSV血清中和效价;将抗PRRSV血清进行不同倍比稀释,制备各类PRRSV抗原抗体复合物并接种于PAMs上,建立抗体依赖性增强(Antibody⁃dependent enhancement,ADE)模型,qRT⁃PCR技术检测各时间点PRRSV N基因拷贝数变化;PRRSV感染PAMs 9 h后,将抗血清和猪新鲜血清共处理细胞,运用ELISA测定不同时间点细胞上清液中猪新鲜血清C3b、C4b、CH50总活性;将PAMs分为试验组(PRRSV感染PAMs 9 h后同时加入抗血清和猪新鲜血清)和6个对照组,采用qRT⁃PCR技术检测各组不同时间点胞内和上清中PRRSV N基因的拷贝数,确定猪新鲜血清对PRRSV感染PAMs的作用;采用免疫阻断技术将PAMs分为FcR McAb阻断组、CR1⁃like McAb阻断组、共阻断组及3个对照组,qRT⁃PCR技术检测PRRSV N基因拷贝数变化,确定免疫粘附受体CR1⁃like对PRRSV感染PAMs的影响。[结果]抗PRRSV血清在PAMs上的中和抗体效价为1∶5.37;qRT⁃PCR结果成功筛选出1:20稀释度的抗PRRSV血清对病毒的复制具有促进作用;ELISA检测猪新鲜血清C3b、C4b和CH50浓度随PRRSV感染时间延长呈降低趋势;qRT⁃PCR结果显示,猪新鲜血清可以与1∶20稀释度抗PRRSV血清协同促进PRRSV的复制;qRT⁃PCR、免疫阻断技术得出1∶20稀释度抗PRRSV血清、猪新鲜血清协同促进PRRSV感染增强不只依赖于FcR,还与CR1⁃like有关。[结论]体外条件下,PAMs表面的CR1⁃like是介导PRRSV感染PAMs过程中产生ADE效应的分子之一,可与FcR协同促进PRRSV感染PAMs。

关键词：猪CR1⁃like 猪新鲜血清免疫粘附 PRRSV PAMs

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补脾肾活血法对肾性甲旁亢大鼠血清i-PTH水平及PCNA和Bcl-2表达的影响

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中医药学报 2016年第6期44卷 32-36页

作者：王晓光李冰陈宇嘉谢增林傅江南广州中医药大学祈福医院肾病科广东广州511495 暨南大学实验动物中心广东广州511500

目的:探讨中药补脾肾活血法对肾性甲状旁腺功能亢进大鼠全段甲状旁腺激素(intact parathyroid hormone,i-PTH)水平、甲状旁腺腺体中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、凋亡相关蛋白Bcl-2的表达的影响。方法:研... 详细信息

目的:探讨中药补脾肾活血法对肾性甲状旁腺功能亢进大鼠全段甲状旁腺激素(intact parathyroid hormone,i-PTH)水平、甲状旁腺腺体中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、凋亡相关蛋白Bcl-2的表达的影响。方法:研究对象为SD雄性大鼠、5/6肾切除结合高磷饮食建立继发性甲旁亢(secondary hyperparathyroidism,SHPT)大鼠模型,分为假手术组(Sham)、模型组(Nx)、中药组(Tcm)、钙三醇组(Cal)、中药+钙三醇组(Tcm+Cal),每组各10只。各组大鼠适应性正常饮食喂养1周后,再高磷饲料喂养2周后行5/6肾切除术,高磷饲料持续喂养直到大鼠死亡。术前1周及术后7,14,21,28 d于大鼠眼眶静脉取血,检测大鼠血清中血磷(P)、i-PTH、血尿素氮(BUN)/肌酐(SCr)等指标。术后第4周实验结束时取大鼠甲状腺与甲状旁腺的复合体行病理检查,观察各组大鼠甲状旁腺PCNA和Bcl-2的表达。结果:5/6肾切除+高磷饲养后,手术组大鼠血清SCr,BUN,P,i PTH水平均显著高于假手术组(P<0.05);高磷手术组大鼠甲状旁腺明显增大,肾脏损害明显,PCNA和Bcl-2表达水平明显增高;中药+钙三醇组可以明显降低SHPT大鼠的SCr,BUN,P,i PTH水平(P<0.01),显著增加体重(P<0.01),降低甲状旁腺腺体中PCNA和凋亡相关蛋白Bcl-2水平的表达(P<0.01),中药组,钙三醇组次之。结论:中药补脾肾活血方能够降低SHPT大鼠血清Scr,BUN,P,i PTH,抑制大鼠甲状旁腺细胞过度增殖,并能够诱导增殖的甲状旁腺细胞调亡,改善大鼠一般情况,延缓SHPT的进展,提示补脾肾活血中药是防治慢性肾功能衰竭(chronic renal failuat,CRF)继发甲旁亢有效的中药制剂。

关键词：补脾肾活血中药继发性甲状旁腺功能亢进细胞因子(PCNA/Bcl-2)

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城市污水处理厂恶臭挥发性羰基化合物的排放特征

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环境科学 2011年第12期32卷 3571-3576页

作者：周咪王伯光赵德骏张春林古颖纲暨南大学环境工程系广州510632 广东省普通高校水土环境毒害性污染物防治与生物修复重点实验室广州510632 广州市水务工程建设管理中心广州510640

选取广州市猎德污水处理厂进行为期4 d的现场采样,采用PFPH衍生化-GC/MS联用技术分析恶臭挥发性羰基化合物的组成特征和含量水平,研究它们的排放特征.结果表明,在该污水处理厂共检测出18种羰基化合物,其中具有恶臭气味的组分包括15种,... 详细信息

选取广州市猎德污水处理厂进行为期4 d的现场采样,采用PFPH衍生化-GC/MS联用技术分析恶臭挥发性羰基化合物的组成特征和含量水平,研究它们的排放特征.结果表明,在该污水处理厂共检测出18种羰基化合物,其中具有恶臭气味的组分包括15种,它们在6个处理车间的浓度范围为0.39～19.92μg·m-3,总浓度均值为(68.66±10.05)μg·m-3.采取归一化方法获得了该类污染源的恶臭挥发性羰基化合物成分谱,并发现了分子标志物为甲醛、乙醛、丙醛、2-丁酮、丁醛和己醛,它们占该成分谱总含量的78.91%,其中己醛含量最高,浓度均值达到11.71μg·m-3.应用恶臭面源源强的计算方法,估算出该污水处理厂恶臭挥发性羰基化合物的年排放总量为2 302.33 kg·a-1,各车间的排放量贡献率由高至低为:生化池>浓缩池>A级曝气池>提升泵房>沉砂池>脱水机房.由于污水处理厂的恶臭污染排放过程较为复杂,因此在一定程度上影响了排放量估算的准确度.

关键词：城市污水处理厂挥发性羰基化合物恶臭污染分子标志物挥发性有机物源排放

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城市污水处理厂恶臭挥发性有机物的感官定量评价研究

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环境科学 2011年第12期32卷 3582-3587页

作者：刘舒乐王伯光何洁唐小东赵德骏郭薇暨南大学环境工程系广州510632 广东省普通高校水土环境毒害性污染物防治与生物修复重点实验室广州510632 广州市水务工程建设管理中心广州510640

采用自制低温吸附装置和臭气袋采集了广州典型城市污水厂6个处理车间的空气样品.应用热解析/气相色谱-质谱联用仪分析恶臭挥发性有机物的组成和含量,参照国标的三点比较式臭袋法测量样品的恶臭浓度,并针对恶臭挥发性有机物进行感官定量... 详细信息

采用自制低温吸附装置和臭气袋采集了广州典型城市污水厂6个处理车间的空气样品.应用热解析/气相色谱-质谱联用仪分析恶臭挥发性有机物的组成和含量,参照国标的三点比较式臭袋法测量样品的恶臭浓度,并针对恶臭挥发性有机物进行感官定量评价.结果表明,①城市污水处理厂检测出烷烃、烯烃、芳香烃等7大类共70种挥发性有机物,其中30种属于恶臭挥发性有机物,它们的浓度范围为0.37～1 872.24μg.m-3,在污泥脱水、污泥浓缩和曝气池最高;②主成分分析可以将主要恶臭挥发性有机物分为苯系物、卤代烃、醛类、碳氢化合物和含氮、硫的挥发性有机物5类;③多元线性回归分析能建立化学浓度与恶臭感官浓度的定量表达式,计算出恶臭挥发性有机物对该厂恶臭气味的贡献率占25%,感官浓度的预测值和实测值拟合良好,建立的预测方程对污水处理车间低浓度恶臭挥发性有机物的敏感度高于人鼻嗅辨的敏感度.

关键词：挥发性有机物恶臭污染感官评价城市污水处理厂主成分分析

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四君子汤及拆方对D-半乳糖诱导衰老小鼠学习记忆调节作用的影响

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中药材 2008年第7期31卷 1039-1041页

作者：成文利江振友王修银潘竞锵董军邝少松铙子亮中山大学附属第六医院广东广州510655 暨南大学医院微生物学与免疫学教研室广东广州510632 广州市中医院广东广州510130 暨南大学医学院病理生理学教研室广东广州510632 广东省医学实验动物中心广东广州510120

目的:观察党参、白术、茯苓和炙甘草及四君子汤对D-半乳糖(D-gal)诱导小鼠衰老模型学习记忆的调节作用。方法:用D-gal诱导衰老小鼠模型。采用Y型迷宫、氧化抗氧化指标的测定和跳台实验检测小鼠学习记忆能力。结果:与对照组比较,衰老模... 详细信息

目的:观察党参、白术、茯苓和炙甘草及四君子汤对D-半乳糖(D-gal)诱导小鼠衰老模型学习记忆的调节作用。方法:用D-gal诱导衰老小鼠模型。采用Y型迷宫、氧化抗氧化指标的测定和跳台实验检测小鼠学习记忆能力。结果:与对照组比较,衰老模型组小鼠跳台错误次数和迷宫错误次数明显增多(P<0.05,P<0.01);四君子汤能明显降低D-gal诱导衰老小鼠的跳台错误次数和迷宫测试潜伏期(P<0.05)。结论:D-gal能诱导小鼠出现学习记忆能力下降,四君子汤能改善衰老小鼠学习记忆能力。

关键词：四君子汤 D-半乳糖衰老小鼠学习记忆

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基于分子靶点钩钓技术鉴定苦参碱抗PRRSV作用靶点

基于分子靶点钩钓技术鉴定苦参碱抗PRRSV作用靶点

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中国畜牧兽医学会兽医外科学分会第十一次会员代表大会暨第26次学术研讨会

作者：凌小雅孙娜孙盼盼张华尹伟范阔海孙耀贵张振彪李宏全山西农业大学动物医学学院山西农业大学实验动物管理中心

(目的)由PRRSV感染引起的猪繁殖与呼吸综合征严重危害养猪业的发展,课题组前期研究表明,中药活性成分苦参碱具有抗PRRSV的作用,然而,苦参碱抗PRRSV的直接作用靶点尚不清楚。(方法)本研究利用生物素标记苦参碱作为探针,通过qPCR及Western... 详细信息

(目的)由PRRSV感染引起的猪繁殖与呼吸综合征严重危害养猪业的发展,课题组前期研究表明,中药活性成分苦参碱具有抗PRRSV的作用,然而,苦参碱抗PRRSV的直接作用靶点尚不清楚。(方法)本研究利用生物素标记苦参碱作为探针,通过qPCR及Western blot等方法评价其抗PRRSV活性及抗炎活性,利用分子靶点钩钓技术富集苦参碱在Marc-145上的结合靶蛋白,通过LC-MS/MS解析苦参碱在Marc-145细胞上的作用靶点,与网络药理学技术筛选出的苦参碱抗病毒作用靶点进行比对,挖掘苦参碱在Marc-145细胞上的抗PRRSV潜在作用靶点,通过数据库构建蛋白互作网络并对潜在靶点进行GO分析和KEGG分析,利用qPCR及Western blot方法检测苦参碱对靶蛋白的影响。(结果)结果表明,ACAT1、ALB、HMOX1、HSPA8、HSP90AB1、PARP1、STAT1为苦参碱的候选靶点,其功能与抗病毒及免疫相关,PRRSV感染诱导HSPA8和HSP90AB1表达显著增加,苦参碱可通过降低HSPA8和HSP90AB1的表达发挥抗PRRSV作用。(结论)说明苦参碱可能通过直接作用于ACAT1、ALB、HMOX1、HSPA8、HSP90AB1、PARP1、STAT1发挥抗PRRSV作用。

关键词：作用靶点 HSP 分子靶点 PRRSV 技术鉴定

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四个鸡品种GHSR基因遗传多样性分析

四个鸡品种GHSR基因遗传多样性分析

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第十四届全国家禽科学学术讨论会

作者：方梅霞聂庆华何丹琳刘满清张细权暨南大学医学院实验动物管理中心，广州 5106321 华南农业大学动物科学学院，广州 510642 华南农业大学动物科学学院，广州 510642

采用PCR-RFLP方法，对杏花鸡、泰和丝羽乌骨鸡、隐性白洛克鸡和红色原鸡GHSR基因的5个位点的遗传多样性进行研究。结果表明，5个位点的基因频率在这4个群体中分布差异很大，各位点群体杂合度在0和0.505 4之间波动。单倍型分析发现，在... 详细信息

采用PCR-RFLP方法，对杏花鸡、泰和丝羽乌骨鸡、隐性白洛克鸡和红色原鸡GHSR基因的5个位点的遗传多样性进行研究。结果表明，5个位点的基因频率在这4个群体中分布差异很大，各位点群体杂合度在0和0.505 4之间波动。单倍型分析发现，在所研究的区域，杏花鸡中位点G+264A和T+1 461C形成一个单倍型块;在来航鸡中del+3 015～+3020ins、C+3 286T与C+3 361T位点形成一单倍型块;在隐性白洛克鸡中各位点相互独立没有形成连锁的单倍型块;在红色原鸡中G+264A和T+1 461C形成一单倍型块，C+3 286T与C+3 361T形成另一单倍型块。G+264A和T+1 461C位点组成的单倍型块可能与早期生长速度有关。

关键词：鸡 CHSR基因遗传多样性单倍型分析 PCR-RFLP法

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苦参碱靶向嗜酸乳杆菌抗PCV2作用研究

苦参碱靶向嗜酸乳杆菌抗PCV2作用研究

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中国畜牧兽医学会兽医外科学分会第十一次会员代表大会暨第26次学术研讨会

作者：曹志刚孙娜孙盼盼张华尹伟范阔海孙耀贵张振彪李宏全山西农业大学动物医学学院山西农业大学实验动物管理中心

(目的)PCV2给世界养猪业的健康发展带来了严重的威胁,课题组前期研究发现苦参碱具有抗PCV2及促进昆明小鼠肠道嗜酸乳杆菌增殖的作用,研究表明PCV2感染可以导致猪肠道嗜酸乳杆菌丰度降低,且肠道菌群是中药发挥药效作用的重要靶点之一,提... 详细信息

(目的)PCV2给世界养猪业的健康发展带来了严重的威胁,课题组前期研究发现苦参碱具有抗PCV2及促进昆明小鼠肠道嗜酸乳杆菌增殖的作用,研究表明PCV2感染可以导致猪肠道嗜酸乳杆菌丰度降低,且肠道菌群是中药发挥药效作用的重要靶点之一,提示苦参碱可能靶向嗜酸乳杆菌发挥抗PCV2作用。(方法)本研究通过qPCR检测嗜酸乳杆菌、苦参碱影响的粪便菌液对肝脏和回肠PCV2 Cap基因表达量、回肠IL-1β及嗜酸乳杆菌相对表达量的影响,分析苦参碱是否通过调控肠道菌群发挥抗PCV2作用;采用多组学联合分析苦参碱促进嗜酸乳杆菌增殖的机制。(结果)粪便移植试验结果表明,苦参碱可通过调控肠道菌群发挥抗PCV2、降低IL-1β相对表达量的药理作用;从昆明小鼠粪便中分离培养的嗜酸乳杆菌具有体内抗PCV2、降低IL-1β相对表达量的作用;多组学联合分析结果显示苦参碱可通过影响氨酰tRNA生物合成通路促进嗜酸乳杆菌的增殖。(结论)综上,苦参碱可通过影响氨酰tRNA生物合成通路促进嗜酸乳杆菌增殖,进而发挥抗PCV2及其诱导的炎症反应的作用。

关键词：苦参碱肠道菌群嗜酸乳杆菌 PCV2 粪便移植

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关于生物安全实验室强制配套安全装备的探讨

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医疗卫生装备 2009年第5期30卷 40-43页

作者：马英傅江南王贵杰李勇中国动物疫病预防控制中心北京100125 暨南大学实验动物管理中心广州510632 军事医学科学院微生物与流行病研究所北京100071 北京兴原伟业管理咨询中心北京100039

随着SARS、禽流感等高致病性病原生物的传播,生物安全实验室建设引起高度重视。近几年,国内建设了大量相关等级的(BSL-2/3)实验室,为防止病原生物研究的扩散起到了积极地作用。但是,由于一些工程案例设计者和建设者对该类实验室配套设... 详细信息

随着SARS、禽流感等高致病性病原生物的传播,生物安全实验室建设引起高度重视。近几年,国内建设了大量相关等级的(BSL-2/3)实验室,为防止病原生物研究的扩散起到了积极地作用。但是,由于一些工程案例设计者和建设者对该类实验室配套设备情况不了解,不能满足此类实验室零泄漏要求等,造成严重后果并导致了巨大浪费。对生物安全实验室产生和处理固体、液体和气体废弃物的配套设备常规要求进行了阐述,并对国内近几年在生物安全实验室专用设备领域研发情况进行简单介绍。

关键词：生物安全实验室装备双扉灭菌器高效过滤器传递窗污水处理

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基因芯片法检测奶牛乳房炎主要致病菌

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中国兽医杂志 2009年第4期45卷 20-22页

作者：邢会杰师志海贾坤曹荣峰杨林林志雄李守军华南农业大学兽医学院广东广州510642 暨南大学实验动物中心广东广州510632 青岛农业大学动物科技学院山东青岛266109 中国动物疫病预防控制中心北京朝阳100026 广东进出口检验检疫局广东广州510642

奶牛乳房炎不但严重影响乳的品质,而且危害人类健康。目前已知的奶牛乳房炎致病菌大约有220多种,其中常见的有20多种^[1],基因芯片技术以其集成化、微型化、可对靶致病菌实现平行化检测的特点在动物疫病诊断方面显示出强大的优势比^[2-... 详细信息

奶牛乳房炎不但严重影响乳的品质,而且危害人类健康。目前已知的奶牛乳房炎致病菌大约有220多种,其中常见的有20多种^[1],基因芯片技术以其集成化、微型化、可对靶致病菌实现平行化检测的特点在动物疫病诊断方面显示出强大的优势比^[2-4],本试验旨在建立快速、灵敏、特异、准确检测奶牛乳房炎5种主要致病菌的基因芯片检测技术,[第一段]

关键词：基因芯片技术奶牛乳房炎检测技术致病菌人类健康疫病诊断集成化微型化

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