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鸡传染性法氏囊病病毒VP2与白喉毒素截短体DT390融合蛋白的真核表达及免疫原性检测

中国畜牧兽医 2021年第12期48卷 4652-4660页

作者：孟维金范阔海常熊熊尹伟李宏全王志瑞山西农业大学动物医学学院临床兽医学实验室太谷030801 山西农业大学实验动物管理中心太谷030801

为探究白喉毒素截短体DT390是否对鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)VP2蛋白具有免疫增强作用,本研究利用有白喉毒素抗性的毕赤酵母表达系统对DT390和VP2进行融合表达,用SDS-PAGE和Western blotting方法对表... 详细信息

为探究白喉毒素截短体DT390是否对鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)VP2蛋白具有免疫增强作用,本研究利用有白喉毒素抗性的毕赤酵母表达系统对DT390和VP2进行融合表达,用SDS-PAGE和Western blotting方法对表达的融合蛋白DT390-VP2进行了鉴定。将24只21日龄SPF雏鸡随机均分为4组:VP2组、DT390-VP2组、PBS(对照组)和B87组(阳性对照组),在第0和14天,分别对各组雏鸡进行免疫,在首免后第28天,每只雏鸡接种100 BID_(50)的IBDV BC6/85毒株,采用ELISA法检测免疫前后不同时间各组雏鸡血清的VP2特异性抗体水平,采用法氏囊组织切片HE染色及病理损伤评分来评价法氏囊的损伤程度,评价融合蛋白DT390-VP2在雏鸡体内的免疫原性和保护功能。SDS-PAGE和Western blotting分析结果显示,表达和提纯后的目的蛋白确为糖基化的融合蛋白DT390-VP2(91.26 ku)。体内试验结果显示,首次免疫21 d后,DT390-VP2组的VP2特异性抗体滴度分别显著和极显著高于B87组(P<0.05)和VP2组(P<0.01);首次免疫28 d后,DT390-VP2组的VP2特异性抗体滴度极显著高于VP2组(P<0.01);与VP2蛋白相比,融合蛋白DT390-VP2减轻了雏鸡法氏囊淋巴滤泡的萎缩程度。综上所述,白喉毒素截短体DT390以融合表达的方式增强了VP2的体液免疫原性,融合蛋白DT390-VP2在一定程度上减轻了IBDV BC6/85毒株造成的组织损伤。

关键词：鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV) VP2蛋白 DT390 免疫原性

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下丘脑-垂体-性腺轴上基因多态性与鸡冠高和体重的相关性分析

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广东农业科学 2011年第8期38卷 4-7页

作者：徐海平曾华周敏方梅霞沈栩张细权华南农业大学动物科学学院广东广州510642 江西教育学院生物技术研究所江西南昌330029 暨南大学医学院实验动物管理中心广东广州510632

鸡冠高及体重是优质鸡早熟性选育过程中重要的参考指标,通过研究鸡多个侯选基因上突变位点与冠高和体重的相关性,寻找可作为该性状标记辅助选择的重要标记。在GnRH-I、GnRHR、NPY、DRD2、VIP、VIPR-1和PRL这7个侯选基因上共选取了10个... 详细信息

鸡冠高及体重是优质鸡早熟性选育过程中重要的参考指标,通过研究鸡多个侯选基因上突变位点与冠高和体重的相关性,寻找可作为该性状标记辅助选择的重要标记。在GnRH-I、GnRHR、NPY、DRD2、VIP、VIPR-1和PRL这7个侯选基因上共选取了10个多态位点,采用PCR-RFLP方法对1 310只宁都三黄鸡进行了基因型检测,并对各位点与77、84、91日龄冠高和体重性状的相关性进行了分析。结果表明:NPY基因上的2个位点I31391359D及C31394761T可作为91日龄体重标记辅助选择的有效分子标记;VIPR-1基因上的位点A1661691G可作为77、84日龄冠高的有效分子标记。

关键词：鸡候选基因多态位点冠高体重

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无菌动物在肠道微生物组研究中的应用与发展

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中国实验动物学报 2023年第7期31卷 946-954页

作者：胡雅谦王珊珊张童袁嘉丽牛海涛云南中医药大学基础医学院云南省中医药学分子生物学重点实验室昆明650500 病毒致病及防控教育部重点实验室(暨南大学) 广州510632 暨南大学基础医学与公共卫生学院/暨南大学实验动物管理中心/广州市无菌动物与微生态转化重点实验室广州510632

近年来,随着宏基因组概念的提出,人类宏基因组学也成为了揭示人体发育与健康的新途径。肠道微生物组作为人体内最大的微生物区系,已经被发现在人体正常生理功能和疾病的发生发展中具有重要的作用。肠道菌群有着丰富的种类及数量,在有关... 详细信息

近年来,随着宏基因组概念的提出,人类宏基因组学也成为了揭示人体发育与健康的新途径。肠道微生物组作为人体内最大的微生物区系,已经被发现在人体正常生理功能和疾病的发生发展中具有重要的作用。肠道菌群有着丰富的种类及数量,在有关于肠道微生物组的研究中,无菌动物的应用使实验更具准确性,也更加便利,是一种比较理想的基础动物模型,不仅如此,在此基础上发展的模型也对该类研究有着重要意义。本综述就对无菌动物的认识、无菌动物在实验研究中的应用以及无菌动物模型的前景等方面,回顾无菌动物在肠道微生物组中的应用与发展。

关键词：无菌动物肠道菌群动物模型

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四个鸡品种GHSR基因遗传多样性分析

四个鸡品种GHSR基因遗传多样性分析

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第十四次全国家禽科学学术讨论会

作者：方梅霞聂庆华何丹琳刘满清张细权暨南大学医学院实验动物管理中心华南农业大学动物科学学院

采用PCR-RFLP方法,对杏花鸡、泰和丝羽乌骨鸡、隐性白洛克鸡和红色原鸡GHSR基因的5个位点的遗传多样性进行研究。结果表明,5个位点的基因频率在这4个群体中分布差异很大,各位点群体杂合度在0和0.505 4之间波动。单倍型分析发现,在所研... 详细信息

采用PCR-RFLP方法,对杏花鸡、泰和丝羽乌骨鸡、隐性白洛克鸡和红色原鸡GHSR基因的5个位点的遗传多样性进行研究。结果表明,5个位点的基因频率在这4个群体中分布差异很大,各位点群体杂合度在0和0.505 4之间波动。单倍型分析发现,在所研究的区域,杏花鸡中位点G+264A和T+1 461C形成一个单倍型块;在来航鸡中del+3 015-+3 020ins、C+3 286T与C+3 361T位点形成一单倍型块;在隐性白洛克鸡中各位点相互独立没有形成连锁的单倍型块;在红色原鸡中G+264A和T+1 461C形成一单倍型块,C+3 286T与C+3 361T形成另一单倍型块。G+264A和T+1 461C位点组成的单倍型块可能与早期生长速度有关。

关键词：鸡 GHSR基因遗传多样性单倍型分析

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基于16S rDNA测序分析腹腔注射苦参碱的昆明小鼠肠道菌群结构

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畜牧兽医学报 2022年第2期53卷 618-627页

作者：曹志刚王弘张华孙盼盼李宏全孙耀贵杨惠珍王建中尹伟范阔海孙娜山西农业大学动物医学学院太谷030801 山西农业大学体育部太谷030801 山西农业大学实验动物管理中心太谷030801

旨在通过16S rDNA测序技术分析腹腔注射苦参碱的昆明小鼠肠道菌群的结构。本研究将20只昆明小鼠随机分为2组,分别是苦参碱组(MT组)和阴性对照组(NC组),连续腹腔给药5 d,每天给药2次,收集各组粪便和各肠段组织,进行β多样性、Lefse及Meta... 详细信息

旨在通过16S rDNA测序技术分析腹腔注射苦参碱的昆明小鼠肠道菌群的结构。本研究将20只昆明小鼠随机分为2组,分别是苦参碱组(MT组)和阴性对照组(NC组),连续腹腔给药5 d,每天给药2次,收集各组粪便和各肠段组织,进行β多样性、Lefse及Metastats分析,qPCR检测差异菌种在各肠段的mRNA表达量,通过KEGG分析肠道菌群变化导致的代谢途径差异。稀释曲线结果显示,所测样本数据足以反映样品中物种多样性;β多样性分析结果显示,苦参碱可以调节肠道菌群的结构,Lefse及Metastats分析结果均显示,苦参碱显著增加了拟杆菌门(Bacteroidetes)、拟杆菌目(Bacteroidales)、Muribaculaceae、益生菌嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)的丰度,而显著减少了厚壁菌门(Firmicutes)、瘤胃菌科(Ruminococcaceae)和脱硫弧菌属(Desulfovibrio)的丰度。与Lefse及Metastats分析结果一致,qPCR结果显示苦参碱组小鼠粪便中嗜酸乳杆菌含量增加。同时,苦参碱可以增强嗜酸乳杆菌在各肠段的定植。通过KEGG分析发现,NC与MT组之间在聚糖的生物合成与代谢、运输与分解代谢等代谢途径存在显著差异。本研究结果表明,腹腔注射苦参碱可以显著改变昆明小鼠肠道菌群的结构,增加有益菌嗜酸乳杆菌在肠道中的定植,并造成了聚糖生物合成与代谢、运输与分解代谢等代谢途径的差异,为进一步揭示苦参碱发挥药效作用的机理奠定了基础。

关键词：苦参碱昆明小鼠肠道菌群 16S rDNA测序嗜酸乳杆菌

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实验动物智能化综合管理系统开发及应用

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中国比较医学杂志 2023年第2期33卷 91-98页

作者：袁进田雨光吴清洪于奎张庆岩南方医科大学实验动物管理中心广州510515 广州南方医大实验动物科技发展有限公司广州510515 中科装备(广州)生物安全科技有限公司广州511466

目的为了提高医科院校实验动物管理效率和用户体验,以探索实验动物综合管理的智能化、科学化和流程化。方法应用计算机、物联网云平台和移动通信终端等技术构建一套用于实验动物生产、销售、动物实验、数据统计与分析等环节于一体的智... 详细信息

目的为了提高医科院校实验动物管理效率和用户体验,以探索实验动物综合管理的智能化、科学化和流程化。方法应用计算机、物联网云平台和移动通信终端等技术构建一套用于实验动物生产、销售、动物实验、数据统计与分析等环节于一体的智能化综合管理系统。结果该系统经过测试和试运行,实现了实验动物综合管理系统各主要技术流程和环节的稳定运行。结论本系统运行安全稳定、性能可靠,实现智能化的管理模式,降低了运行成本,达到了系统开发的预期效果。

关键词：实验动物智能化综合管理系统

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实验动物垫料的质量与控制

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中国医科大学学报 2004年第3期33卷 286-287页

作者：于洪涛史晓萍中国医科大学房地产管理中心辽宁沈阳110001 中国医科大学实验动物部

本文详细的探讨了实验动物垫料的概念、种类、对实验动物的影响。

关键词：垫料

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苦参碱抗PCV2诱导小鼠肺炎的作用及其机制研究

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中国农业大学学报 2022年第10期27卷 142-152页

作者：孙娜张司寰岑龙座曹志刚张华孙盼盼孙耀贵范阔海尹伟李宏全山西农业大学动物医学学院/中兽医药现代化山西省重点实验室山西太谷030801 山西农业大学实验动物管理中心山西太谷030801

为探讨苦参碱在小鼠体内的抗炎作用及其机制,本研究利用猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)感染诱导小鼠肺炎模型,将32只昆明小鼠均分为空白对照组、PCV2组、苦参碱处理组(40mg/kg)和利巴韦林阳性对照组(40mg/kg)。除空白... 详细信息

为探讨苦参碱在小鼠体内的抗炎作用及其机制,本研究利用猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)感染诱导小鼠肺炎模型,将32只昆明小鼠均分为空白对照组、PCV2组、苦参碱处理组(40mg/kg)和利巴韦林阳性对照组(40mg/kg)。除空白对照组外,其他各组小鼠每只腹腔注射0.5mL PCV2,攻毒后的第5天开始腹腔注射对应药物,每天给药一次,连续给药5d。在攻毒后的第11天,观察小鼠肺脏的病理组织学变化,qPCR检测PCV2 Cap基因,IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α基因的mRNA表达,Western blot检测相应炎症因子、TLR4/MyD88/NF-κB信号通路及NLRP3炎症小体关键蛋白的表达。结果表明:1)苦参碱可显著抑制PCV2感染诱发的肺间质增宽现象。2)苦参碱可显著降低肺脏PCV2病毒载量(P<0.05)及炎症因子IL-1β(P<0.05)、IL-6(P<0.0001)、IL-8(P<0.0001)和TNF-α(P<0.0001)的mRNA和蛋白(P<0.0001)的相对表达量。3)苦参碱可显著降低TLR4(P<0.0001)、MyD88(P<0.0001)、p-IκBα(P<0.0001)、NF-κB p65(P<0.01)、NLRP3(P<0.0001)、ASC(P<0.0001)和Caspase-1(P<0.0001)的蛋白表达量,升高IκBα(P<0.001)的蛋白表达量。综上,苦参碱可通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的活化以及NLRP3炎症小体的激活,来发挥抗PCV2诱导的小鼠肺炎作用,为进一步揭示苦参碱的抗病毒抗炎作用提供数据支撑,为苦参碱作为新兽药开发奠定基础。

关键词：苦参碱猪圆环病毒2型 TLR4/MyD88/NF-κB NLRP3炎症小体

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四君子汤及其拆方对D-半乳糖诱导衰老小鼠的免疫调节作用

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中药材 2009年第9期32卷 1425-1429页

作者：成文利王修银江振友潘竞锵董军邝少松饶子亮中山大学附属第六医院广东广州510655 广州市中医医院广东广州510130 暨南大学医学院广东广州510632 广东省医学实验动物中心广东广州510180

目的:观察四君子汤及其拆方对D-半乳糖(D-gal)诱导小鼠衰老模型的免疫调节作用。方法:用D-半乳糖诱导小鼠衰老模型,采用花环和脾淋巴细胞转化试验(MTT法)测定模型小鼠红细胞免疫和T细胞免疫功能;采用试剂盒对丙二醛(MDA)、超氧化物歧化... 详细信息

目的:观察四君子汤及其拆方对D-半乳糖(D-gal)诱导小鼠衰老模型的免疫调节作用。方法:用D-半乳糖诱导小鼠衰老模型,采用花环和脾淋巴细胞转化试验(MTT法)测定模型小鼠红细胞免疫和T细胞免疫功能;采用试剂盒对丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等氧化抗氧化指标进行检测。结果:四君子汤能显著提高D-半乳糖诱导衰老小鼠的T淋巴细胞转化能力(P<0.05),显著提高C3b花环率(P<0.05),显著降低IC花环率(P<0.05),并能显著提高其血清SOD及GSH-Px活性(P<0.01),显著降低血清MDA含量(P<0.05)。结论:四君子汤党参、白术对D-半乳糖(D-gal)诱导衰老模型小鼠有免疫调节作用,而茯苓、甘草无明显作用。

关键词：四君子汤 D-半乳糖免疫调节

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在反复自然流产模型CBA/J×DBA/2小鼠血清中未检测出抗精子抗体

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2002年第3期23卷 121-124页

作者：林羿曾耀英曾山詹美意关洁宾狄静芳冯铮全世明暨南大学组织移植与免疫研究中心广东广州510632 暨南大学病理教研室广东广州510632 暨南大学实验动物中心广东广州510632

目的 :评价抗精子抗体 (anti -spermantibody ,AsAb)与反复自然流产 (recurrentspontaneousabortion ,RSA)小鼠模型CBA/J×DBA/ 2生殖力特点的关系 .方法 :对CBA/J×DBA/ 2小鼠的生殖力特点做为期 6 0d的观察 ,与生殖力正常的BA... 详细信息

目的 :评价抗精子抗体 (anti -spermantibody ,AsAb)与反复自然流产 (recurrentspontaneousabortion ,RSA)小鼠模型CBA/J×DBA/ 2生殖力特点的关系 .方法 :对CBA/J×DBA/ 2小鼠的生殖力特点做为期 6 0d的观察 ,与生殖力正常的BALB/c×DBA/ 2小鼠进行比较 ,并检测上述雌鼠血清AsAb水平 .结果 :CBA/J×DBA/ 2小鼠平均每窝产仔数和雌雄同笼至第 1窝鼠仔出生的平均时间均与BALB/c×DBA/ 2小鼠有显著差异 ,分别为 (3 0± 1 1)只与 (6 1± 1 6 )只 ,P <0 0 0 1,和 (33 5± 7 1)d与 (2 5 8± 3 2 )d ,P <0 0 1.在这些CBA/J×DBA/ 2和BALB/c×DBA/ 2组合的雌鼠血清中均未检测出AsAb .结论 :CBA/J×DBA/

关键词： CBA/J×DBA/2 小鼠反复自然流产抗精子抗体动物模型血清检测生殖力发病机制

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