检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学通报 2025年第5期 2203-2215页

作者：谢春芳李菲菲蒋天扬姚冬生暨南大学生物科学与技术系暨南大学生物医药研究院广东省生物工程药物重点实验室教育部基因组药物工程研究中心

【背景】黄曲霉毒素B1（aflatoxin B1,AFB1）是迄今为止发现的毒性最强的生物毒素之一，它通过污染花生、玉米、棉花和辣椒等不同作物，对人类和动物健康造成严重威胁。由于醛酮还原酶能够将多种醛酮类物质还原为毒性更小的醇类物质从... 详细信息

【背景】黄曲霉毒素B1（aflatoxin B1,AFB1）是迄今为止发现的毒性最强的生物毒素之一，它通过污染花生、玉米、棉花和辣椒等不同作物，对人类和动物健康造成严重威胁。由于醛酮还原酶能够将多种醛酮类物质还原为毒性更小的醇类物质从而发挥解毒作用，所以推测醛酮还原酶可能具有转化AFB1的可能。【目的】克隆了假蜜环菌（Armillariella tabescens）中的醛酮还原酶AtAKR297，以研究醛酮还原酶AtAKR297对AFB1的转化作用。【方法】使用TRIzol法提取假蜜环菌的总RNA，根据蛋白质谱获取的肽段信息及c DNA末端快速克隆（rapid-amplification of cDNA ends,RACE）技术获取醛酮还原酶AtAKR297基因全长序列；构建醛酮还原酶AtAKR297的表达系统，用亲和层析对蛋白进行纯化，并进行酶活力检测及酶学性质分析。在p H 8.0缓冲体系中，将醛酮还原酶AtAKR297与AFB1反应12 h，用高效液相色谱仪对残余的AFB1进行检测，并用高分辨率液相色谱-质谱仪对转化产物进行鉴定。【结果】成功克隆出假蜜环菌的全长AtAKR297基因，基因长度为894 bp，共编码297个氨基酸；p ET28a（+）-AtAKR297质粒转入大肠杆菌（Escherichia coli） BL21（DE3）宿主菌中，实现诱导表达并对酶学性质进行分析。AtAKR297的最适反应温度为20℃，最适反应p H值为8.0；在15-50℃具有较好的稳定性，孵育30 min酶活可维持60%以上；在pH 5.0–8.0具有较好的稳定性，孵育2 h酶活可维持75%以上。醛酮还原酶AtAKR297与AFB1的相互作用质谱鉴定结果显示AtAKR297能作用于AFB1（依赖NADPH），将AFB1还原为毒性降低的黄曲霉毒醇（aflatoxicol,AFL），该产物分子式为C17H14O6。【结论】成功从假蜜环菌中克隆出醛酮还原酶基因AtAKR297，并构建了具有醛酮还原酶活性的AtAKR297的原核表达系统。AtAKR297在NADPH的存在下能将AFB1还原为毒性降低的AFL。

关键词：醛酮还原酶黄曲霉毒素转化产物

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复方人参对机体缺氧损伤的保护作用及其分子机制研究

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天然产物研究与开发 2025年第1期37卷 27-39页

作者：陈卉郭衬衬潘雅琪边爽吉文鑫龙超良石永平汪海江苏师范大学健康科学学院江苏省内皮细胞靶向性心血管药物创制工程研究中心徐州221116 北京赛德维康医药研究院北京100039 江苏师范大学生命科学学院徐州221116

探究复方人参(compound ginseng,CGS)的抗缺氧作用及其分子机制。构建小鼠密闭缺氧模型、亚硝酸钠中毒模型、急性脑缺血模型以及全心缺血缺氧模型,观察CGS对小鼠的存活时间、喘气时间、喘气次数、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、超... 详细信息

探究复方人参(compound ginseng,CGS)的抗缺氧作用及其分子机制。构建小鼠密闭缺氧模型、亚硝酸钠中毒模型、急性脑缺血模型以及全心缺血缺氧模型,观察CGS对小鼠的存活时间、喘气时间、喘气次数、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性、乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)活力和肌酸激酶(creatine kinase,CK)活力。利用网络药理学预测CGS的抗缺氧相关机制,并采用分子对接方法验证网络药理学筛选所得CGS活性成分与机体靶点之间的亲和性,检测小鼠体内缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)mRNA表达量。结果显示,CGS可以显著延长密闭缺氧实验、亚硝酸钠中毒实验和全心缺血缺氧实验小鼠的存活时间以及急性脑缺血实验的喘气时间和喘气次数;CGS能够降低小鼠血清中的MDA含量、LDH和CK活力,提升SOD、GSH-Px活性。采用网络药理学预测出226条CGS抗缺氧通路,其中关键通路有HIF-1α通路;密闭缺氧实验结果证实CGS可以显著提升HIF-1α表达,下调VEGF表达。综上,CGS具有耐缺氧作用,其作用可能与激活HIF-1α/VEGF通路,提高血液携氧能力和氧利用率,增强抗氧化活性有关。

关键词：复方人参抗缺氧缺血性缺氧氧化应激

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甲氧基肉桂酸乙基己酯(EHMC)对河口鱼类诸氏鲻虾虎鱼(Mugilogobius chulae)胚胎的毒理学影响及全球河口生态风险评估

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生态毒理学报 2025年

作者：任瑾芝孙晨阳佘禄杭张义宁李建军高彩霞聂湘平彭颖北京师范大学自然科学高等研究院流域环境生态工程研发中心中国科学研究院广州地球化学研究所暨南大学生态系广东省生物技术研究院(广东省实验动物监测中心)

河口生态系统面临新污染物的严重威胁，有机紫外线过滤剂甲氧基肉桂酸乙基己酯（2-Ethylhexyl 4-methoxycinnamate，EHMC）已在全球河口及沿海地区广泛检出，具有生物积累和生物放大潜力，亟需评估EHMC对河口鱼类早期生命阶段的影响及... 详细信息

河口生态系统面临新污染物的严重威胁，有机紫外线过滤剂甲氧基肉桂酸乙基己酯（2-Ethylhexyl 4-methoxycinnamate，EHMC）已在全球河口及沿海地区广泛检出，具有生物积累和生物放大潜力，亟需评估EHMC对河口鱼类早期生命阶段的影响及生态风险。本文首先综述了EHMC在全球河口环境与生物体的检出情况，评估了EHMC对河口底栖鱼类诸氏鲻虾虎鱼（Mugilogobius chulae）胚胎发育和内分泌相关基因的影响，并初步评估了全球河口环境EHMC暴露对诸氏鲻虾虎鱼的生态风险。综述发现EHMC在全球38个河口均有检出，其中在地表水中检出的最高浓度为4043 ng·L-1，在沉积物和生物体中的浓度分别高达456 ng·g-1和3400 ng·g-1脂重，河口区域的工业化集中区、热门旅游景点和沿海水上娱乐活动区需要重点关注。120 h的EHMC暴露(1–10 mg·L-1)对诸氏鲻虾虎鱼胚胎无显著影响，仅在高浓度暴露时(8–10 mg·L-1)显著降低胚胎心率（p<0.01），表明EHMC可能会对诸氏鲻虾虎鱼的心脏发育产生不利影响。环境浓度下EHMC暴露(4、40和400 μg·L-1)会显著抑制类固醇激素合成相关基因（CYP19a1、17β-HSD12和VTG）和甲状腺激素合成相关基因（TPO和TG）的表达（p<0.05），长期环境浓度EHMC暴露可能会导致河口鱼类雌激素和甲状腺激素水平下降并最终影响其种群生殖力。初步评估表明全球18.2%的河口水环境中的EHMC对鱼类具有低生态风险。研究结果可为EHMC对河口及海洋鱼类生命早期的毒理学效应与生态风险评估提供基础数据。

关键词：甲氧基肉桂酸乙基己酯诸氏鲻虾虎鱼(Mugilogobius chulae) 胚胎发育毒性河口生态健康有机紫外线过滤剂

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人脸视频中心率变异性参数估计方法综述

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中国图象图形学报 2025年第4期30卷 953-976页

作者：周才英占新龙魏远旺张先超李永刚王超超叶晓朗江西理工大学理学院赣州341000 嘉兴大学浙江省医学电子与数字健康重点实验室嘉兴314001 嘉兴大学生命健康智能感知浙江省工程研究中心嘉兴314001 嘉兴大学信息网络与智能研究院嘉兴314001 嘉兴大学全省多模态感知与智能系统重点实验室嘉兴314001

本综述探讨了基于人脸视频的心率变异性(heart rate variability,HRV)估计技术,突出了其在健康监测和疾病诊断中的无创性和实时监控的优势。首先,解析了HRV的生理学基础和核心参数的定义,阐明了其在医疗保健领域的应用潜力。接着,详细... 详细信息

本综述探讨了基于人脸视频的心率变异性(heart rate variability,HRV)估计技术,突出了其在健康监测和疾病诊断中的无创性和实时监控的优势。首先,解析了HRV的生理学基础和核心参数的定义,阐明了其在医疗保健领域的应用潜力。接着,详细介绍了人脸视频采集的技术细节、数据预处理流程,重点讨论了多种HRV参数估计方法,包括传统信号处理技术和深度学习算法。分析表明,深度学习技术在HRV估计方面因其强大的模式识别能力,能够有效提取复杂视觉特征和处理非线性生理信号,在提高估计精度方面展现出显著优势。本综述还对比了传统方法和深度学习方法在不同应用场景中的表现,指出了各自的优势与局限性,并总结了基于人脸视频HRV估计技术的实际应用案例,如健康评估、情绪识别、精神压力评估、疲劳检测和心血管疾病早期预警等。因此,本综述提出了未来研究的方向,包括降低头部运动和环境光变化的干扰、优化模型选择及减少对训练数据的依赖等,以促进HRV估计技术的发展。本综述旨在提供基于人脸视频的HRV估计技术的全面视角,为学术界和工业界的技术创新和应用拓展提供重要参考。

关键词：心率变异性(HRV) 人脸视频生理监测信号处理深度学习

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含铁蛋白介导的铁转运分子机制

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化学进展 2007年第12期19卷 1986-1990页

作者：孙雪松何庆瑜暨南大学生命与健康工程研究院广州510632

铁是生命体必需的微量元素,因为它是一些重要功能酶的协同因子。这些功能酶有着广泛的功能,从呼吸作用到核酸的复制。但是,当铁含量多于细胞稳态时,它将产生对机体有毒的羟基。生物体已经发展了自身的调控机制,包括铁的摄取、存储和输... 详细信息

铁是生命体必需的微量元素,因为它是一些重要功能酶的协同因子。这些功能酶有着广泛的功能,从呼吸作用到核酸的复制。但是,当铁含量多于细胞稳态时,它将产生对机体有毒的羟基。生物体已经发展了自身的调控机制,包括铁的摄取、存储和输出来控制细胞内的铁处于平衡态。二价阳离子转运蛋白、铁输出蛋白和hephaestin参与小肠吸收。转铁蛋白和转铁蛋白受体参与铁的摄取和转运,铁蛋白可以存储铁,铁调控蛋白的功能是调节铁代谢。本综述着重阐述了含铁蛋白介导的铁传递机制。

关键词：转铁蛋白转铁蛋白受体二价阳离子转运蛋白铁蛋白铁调控蛋白

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酵母多基因表达载体在纤维素生物转化中应用

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深圳大学学报（理工版） 2010年第1期27卷 82-87页

作者：龚映雪台艳肖文娟王峻梅唐根云全艳彩刘泽寰暨南大学生命与健康工程研究院广州510632

构建含酿酒酵母组成型强启动子PGK、G418抗性基因及rDNA片段的整合型载体pScIKP,利用rDNA多个同源重组位点,将外源基因以多拷贝整合到酵母染色体上,无需诱导即可持续表达;利用载体位于表达盒两端同尾酶,可插入多个基因表达盒,实现多基... 详细信息

构建含酿酒酵母组成型强启动子PGK、G418抗性基因及rDNA片段的整合型载体pScIKP,利用rDNA多个同源重组位点,将外源基因以多拷贝整合到酵母染色体上,无需诱导即可持续表达;利用载体位于表达盒两端同尾酶,可插入多个基因表达盒,实现多基因稳定共表达.为检验共表达情况,反转录从绿色木霉中获得纤维素酶基因eg3和cbh2,克隆并转化获得重组酵母菌株***-ec.该重组酵母能降解羧甲基纤维素形成水解圈;用羧甲基纤维素还原糖法和滤纸酶活力法测定酶活力,其最适温度和最适pH值与所表达单酶相似,表明共表达未影响两种酶的生物学特性;且双酶具有协同作用,能更有效降解非结晶纤维素.pScIKP载体能成功用于多个外源基因共表达和产物协同作用的研究,为构建能直接降解纤维素的酿酒酵母菌株,实现纤维素可再生能源的生物利用奠定了基础.

关键词：基因工程可再生能源纤维素生物转化酿酒酵母多基因共表达绿色木霉内切葡聚糖酶纤维二糖水解酶

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小鼠骨髓来源巨噬细胞的SILAC代谢标记及生物质谱分析

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中国药理学通报 2012年第6期28卷 881-884页

作者：王通郭嘉慧陈智鹏银兴峰马文心崔毅峙暨南大学生命与健康工程研究院广东广州510632

目的作为模型细胞之一,小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMM)是药理学、药效学研究的重要工具和对象。然而,由于巨噬细胞增殖能力较弱,代谢标记细胞内蛋白一直是巨噬细胞生物学中的一个难题。因此,本研究以SILAC(stable i-sotope labeling with am... 详细信息

目的作为模型细胞之一,小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMM)是药理学、药效学研究的重要工具和对象。然而,由于巨噬细胞增殖能力较弱,代谢标记细胞内蛋白一直是巨噬细胞生物学中的一个难题。因此,本研究以SILAC(stable i-sotope labeling with amino acids in cell culture)方法标记BMM。方法小鼠骨髓细胞的分离,以M-CSF诱导6 d并制备BMM,同时,SILAC标记细胞内蛋白;进而,裂解细胞并收集蛋白质,以SDS-PAGE进行初步分离,经胶内酶解成肽段,再通过质谱分析测定,统计得其标记效率。结果小鼠骨髓细胞在分化6 d时点成熟BMM可占细胞总数的0.965。以70 ku条带为研究对象,d 6、8和d 10鉴定到重链赖氨酸标记蛋白数分别为18、12和13个。其中,有8个蛋白在该3个时点中均被检出。统计结果表明3个时点的重链赖氨酸蛋白标记效率分别为(90.62±0.03)%、(90.23±0.03)%和(90.40±0.02)%,达到了SILAC研究的要求。结论该方法解决了BMM的SILAC标记问题,可为以巨噬细胞为研究对象的药理学研究提供有效的研究手段。

关键词：小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMM) SILAC 质谱标记效率蛋白质组定量

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利用IMAC与LC-MS/MS技术分离和鉴定化脓链球菌中的锌结合蛋白

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中国生物工程杂志 2011年第2期31卷 30-37页

作者：阳小燕银兴峰张留辉贺翔孙雪松暨南大学生命与健康工程研究院广州510632

化脓链球菌是一种革兰氏阳性致病菌,能引起一系列疾病。运用固定化金属离子亲和层析技术(IMAC)富集化脓链球菌中锌结合蛋白,进行溶液酶解,利用先进的LC-MS/MS技术对富集的锌结合蛋白进行质谱分析。鉴定到48个在化脓链球菌中与锌结合相... 详细信息

化脓链球菌是一种革兰氏阳性致病菌,能引起一系列疾病。运用固定化金属离子亲和层析技术(IMAC)富集化脓链球菌中锌结合蛋白,进行溶液酶解,利用先进的LC-MS/MS技术对富集的锌结合蛋白进行质谱分析。鉴定到48个在化脓链球菌中与锌结合相关蛋白,这些蛋白主要涉及到蛋白翻译、糖代谢、金属转运、氧化等重要生理过程。这些结果对于深入研究化脓链球菌的致病机制,寻找新的抗菌药物作用靶点和疫苗候选物具有重要意义。

关键词： LC—MS/MS 化脓链球菌锌结合蛋白 IMAC

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肺炎链球菌去信号肽脂蛋白PsaA锌离子结合特性的初步表征

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中国生物工程杂志 2011年第12期31卷 27-32页

作者：李楠王南杰王红翠李慧詹胜阳小燕孙雪松暨南大学生命与健康工程研究院广州510632

肺炎链球菌是细菌性肺炎的主要病原体。PsaA是各种肺炎链球菌共有的遗传保守的特异性表面金属结合脂蛋白。通过PCR扩增肺炎链球菌D39不含信号肽的PsaA基因片段,将其通过T4连接酶连接至含6His标签的表达载体PBAD/HisA中,转化表达宿主大... 详细信息

肺炎链球菌是细菌性肺炎的主要病原体。PsaA是各种肺炎链球菌共有的遗传保守的特异性表面金属结合脂蛋白。通过PCR扩增肺炎链球菌D39不含信号肽的PsaA基因片段,将其通过T4连接酶连接至含6His标签的表达载体PBAD/HisA中,转化表达宿主大肠杆菌Top-10后用L(+)-阿拉伯糖诱导重组蛋白的表达。重组蛋白经亲和镍柱纯化以后,用外切酶-重组肠激酶(REK)去除6His标签。感应偶合电浆质谱(ICP-MS)测得纯化的PsaA蛋白以1∶1比例结合金属锌离子。进而,通过圆二色谱法分析金属离子的结合对蛋白二级结构中α-螺旋和β-片层含量的影响,荧光光谱研究蛋白结合锌离子的解离常数及结合当量,为进一步研究该蛋白在体外的金属结合特性及细菌的金属运输及毒力机制提供理论基础。

关键词：肺炎链球菌 PsaA 圆二色谱法 ICP-MS 荧光光谱

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化脓链球菌中铁结合蛋白MtsA二级结构的研究

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中国生物工程杂志 2012年第12期32卷 13-19页

作者：王红翠张静徐倩许丽娜王南杰孙雪松暨南大学生命与健康工程研究院广州510632

化脓性链球菌是一种革兰氏阳性人类致病菌,其生长和感染离不开铁离子。MtsA是化脓链球菌中直接结合铁离子的一个脂蛋白。通过PCR扩增化脓性链球菌MGAS5005中的MtsA基因,构建高效表达质粒pGEX-MtsA,将其转化到大肠杆菌BL21中并用IPTG进... 详细信息

化脓性链球菌是一种革兰氏阳性人类致病菌,其生长和感染离不开铁离子。MtsA是化脓链球菌中直接结合铁离子的一个脂蛋白。通过PCR扩增化脓性链球菌MGAS5005中的MtsA基因,构建高效表达质粒pGEX-MtsA,将其转化到大肠杆菌BL21中并用IPTG进行诱导表达。利用亲和层析方法纯化表达产物。通过多序列比对分析了MtsA铁结合中心的保守性,利用定点突变技术将MtsA的结合配体单位点及多位点进行突变,结合圆二色谱分析这些氨基酸突变后蛋白二级结构的变化。多序列比对结果表明MtsA结合铁离子的氨基酸位点是保守的,4个关键氨基酸位点处于蛋白空间的凹陷处。通过比较空载及饱和铁离子的野生型蛋白以及突变体蛋白的圆二色吸收光谱,发现野生型MtsA结合铁离子后结构更加紧密,H68A,E206A和D281A则比野生型的二级结构松散,而H140A的二级结构和野生型的几乎没有差别。对MtsA 4个结合配体突变后其二级结构变化的研究,为进一步研究细菌中的铁转运机理及开发疫苗候选药物和药靶奠定了一定的理论依据。

关键词：化脓链球菌MtsA定点突变多序列比对圆二色谱法

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