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水蒸气蒸馏提取和超临界CO 2流体萃取艾叶挥发油抗特应性皮炎的药效成分和作用靶点的对比分析

暨南大学学报(自然科学与医学版) 2025年第1期46卷 82-97页

作者：周贝王伟雄赵子博郭玉英胡裕泽王一飞暨南大学药学院广东广州511436 暨南大学生命科学技术学院细胞生物学系广东广州510632 天然产物化妆品原料创新技术研究重点实验广东广州510632 广州暨南生物医药研究开发基地有限公司广东广州510632 国家中药现代化工程技术研究中心艾草分中心广东广州510632

目的:基于网络药理学和细胞体外实验,对比分析水蒸气蒸馏提取和超临界CO 2流体萃取艾叶挥发油抗特应性皮炎的药效成分和作用机理,为以艾叶挥发油为基础开发抗特应性皮炎的药物提供理论依据。方法:分别使用水蒸气蒸馏法和超临界CO 2流体... 详细信息

目的:基于网络药理学和细胞体外实验,对比分析水蒸气蒸馏提取和超临界CO 2流体萃取艾叶挥发油抗特应性皮炎的药效成分和作用机理,为以艾叶挥发油为基础开发抗特应性皮炎的药物提供理论依据。方法:分别使用水蒸气蒸馏法和超临界CO 2流体萃取法提取艾叶挥发油,使用气相色谱-质谱法测定其化学成分。使用网络药理学方法分析2种艾叶挥发油抗特应性皮炎的相关靶点和通路,并使用脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的RAW264.7细胞炎症模型探究2种挥发油抗特应性皮炎的活性。结果:水蒸气蒸馏法提取挥发油(Artemisia argyi essential oil obtained by steam distillation,AEOSD)中有65种化合物,超临界CO 2流体萃取挥发油(Artemisia argyi essential oil obtained by supercritical fluid extraction,AEOSFE)中有89种化合物,有44种化合物同时存在于2种挥发油中。网络药理学分析发现,桉叶油醇、α-蛇麻烯是AEOSD抗特应性皮炎的主要潜在药效成分,丁香酚、桉叶油醇、α-蒎烯是AEOSFE抗特应性皮炎的主要潜在药效成分;AEOSD可能通过调控一氧化氮(nitric oxide,NO)的生物合成过程、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)正向调节生物过程、NOD样受体信号通路等来影响特应性皮炎的进展,而AEOSFE可能通过调控NO的生物合成过程、辅助性T细胞17(T helper cell 17,Th17)的分化、PI3K-Akt信号通路及炎症介质调节TRP通道等来影响特应性皮炎的进展。体外实验结果表明,AEOSD和AEOSFE均能降低LPS诱导的RAW264.7细胞的NO过度释放,可分别减少靶点炎症因子IL-1β、IL-6、TNF和IL-1β、IL-6、PTGS2的表达。结论:AEOSD和AEOSFE在化学成分组成和抗特应性皮炎的作用靶点通路上有所不同,但对RAW264.7细胞的抗炎活性均较好。

关键词：艾叶挥发油特应性皮炎网络药理学水蒸气蒸馏超临界CO 2流体萃取

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pQE-hbFGF表达系统的构建及其蛋白质的表达和纯化

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中国药学杂志 2005年第4期40卷 308-310,318页

作者：刘秋英王一飞熊盛胡红梅钱垂文张美英冉延超袁茵吴志聪暨南大学生物医药研究开发基地广东广州510632

目的　构建pQE hishbFGF表达载体 ,通过一步纯化得到 6×HishbFGF蛋白质。方法　用PCR扩增目的基因hbFGF ,连接到pQE4 0载体上 ,转化到Top10菌株筛选重组子 ,经测序后将质粒转化到表达菌M15上 ,经IPTG诱导表达 ,超声波破菌后通过镍... 详细信息

目的　构建pQE hishbFGF表达载体 ,通过一步纯化得到 6×HishbFGF蛋白质。方法　用PCR扩增目的基因hbFGF ,连接到pQE4 0载体上 ,转化到Top10菌株筛选重组子 ,经测序后将质粒转化到表达菌M15上 ,经IPTG诱导表达 ,超声波破菌后通过镍离子螯合层析一步纯化得 6×HishbFGF蛋白质 ,ELISA鉴定产物 ,用MTT法检测产物促细胞增殖的生物活性。结果　hbFGF基因插入pQE载体中 ,在M15中 6×HishbFGF的表达量达到 2 0 % ,且为可溶性表达。经一步纯化后得到N端带 6个组氨酸的hbFGF蛋白 ,纯度为 96 % ,6×HishbFGF具有免疫原性及促进NIH3T3细胞增殖的活性。结论　 6×HishbFGF蛋白质在M15中可溶性地高效表达 ,并经一步亲和层析得到纯度高活性高的产物 ,降低了生产成本。

关键词：人碱性成纤维细胞生长因子 pQE表达系统可溶性表达镍离子螯合层析

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nm23-H1与白血病和淋巴瘤的预后关系

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生理科学进展 2003年第1期34卷 74-77页

作者：李海燕刘洁生王一飞暨南大学生物医药研究开发基地广州510632

肿瘤转移相关蛋白nm2 3 H1/NDPK A在某些癌症中与肿瘤转移潜能呈负相关 ,另一方面它又是多种血液肿瘤的分化抑制因子。大量临床病例的研究表明nm 2 3 H1在急性髓性白血病和非霍奇金淋巴瘤中具有预后作用。本文主要就nm2 3 H1/NDPK

关键词：核苷二磷酸激酶-A 急性髓性白血病非霍奇金淋巴瘤预后

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siRNA分析nm23-H1基因与人慢性髓性白血病的关系

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生物工程学报 2006年第3期22卷 403-407页

作者：陈宇霞张美英熊盛钱垂文王一飞暨南大学生物医药研究开发基地广州510632

设计并筛选靶向nm23-H1基因的siRNAs序列,探讨nm23-H1基因与人慢性髓性白血病之间的关系。依据siRNA设计原则,设计3条siRNA序列。将不同靶点的siRNA用lipofectamine2000转染人慢性髓性白血病细胞株K562。转染后24h RTPCR检测nm23-H1mRN... 详细信息

设计并筛选靶向nm23-H1基因的siRNAs序列,探讨nm23-H1基因与人慢性髓性白血病之间的关系。依据siRNA设计原则,设计3条siRNA序列。将不同靶点的siRNA用lipofectamine2000转染人慢性髓性白血病细胞株K562。转染后24h RTPCR检测nm23-H1mRNA水平变化;转染后48h免疫细胞化学法检测nm23-H1蛋白表达。MTT法检测转染后24h、48h和72h有效siRNA对K562细胞生长的影响。3条siRNA中,siNM526能有效地抑制K562细胞nm23-H1基因表达,转染siNM526的K56细胞生长受到抑制。说明下调nm23-H1基因的表达有抑制K562细胞增殖的作用,即降低了K562细胞的恶性程度。nm23-H基因有可能成为白血病治疗潜在的分子靶点。

关键词： nm23-H1基因,siRNA,人慢性髓性白血病 K562细胞

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裙带菜茎中硫酸多糖的分离纯化及分析鉴定

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中药材 2005年第9期28卷 769-771页

作者：康琰琰王一飞朱良门晓缓暨南大学生物医药研究开发基地广州510632

用热水从裙带菜茎中提取多糖,乙醇沉淀,Sevag法除蛋白,并采用DEAE-52和Sephadex G-200柱对其进行分离纯化,得到三种多糖纯品F_2、F_3和F_4,纯度鉴定为均一组分。紫外光谱显示不含蛋白质、多肽及核酸,通过硅胶G色谱分析,F_2、F_3和F_4中... 详细信息

用热水从裙带菜茎中提取多糖,乙醇沉淀,Sevag法除蛋白,并采用DEAE-52和Sephadex G-200柱对其进行分离纯化,得到三种多糖纯品F_2、F_3和F_4,纯度鉴定为均一组分。紫外光谱显示不含蛋白质、多肽及核酸,通过硅胶G色谱分析,F_2、F_3和F_4中的单糖有半乳糖、岩藻糖、甘露糖、葡萄糖醛酸,F_2中除这四种单糖外,还含有葡萄糖和鼠李糖。

关键词：裙带菜多糖分离纯化鉴定硫酸多糖纯度鉴定 Sephadex 葡萄糖醛酸 Sevag法乙醇沉淀

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抵抗素对人肝脏细胞过氧化物酶增殖激活受体γ和葡萄糖转运子2基因表达的影响

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中华肝脏病杂志 2007年第9期15卷 703-704页

作者：赵嘉咏王一飞刘秋英胡红梅暨南大学生物医药研究开发基地广州510632

抵抗素为脂肪组织特异性分泌的小分子蛋白质（114个氨基酸，分子量1．25×10^4）。它是继瘦素之后在脂肪组织中发现的又一种重要激素。现有的研究已经证实其阻碍了脂肪细胞对葡萄糖的摄取，并可能在胰岛素抵抗的信号分子传导过程中... 详细信息

抵抗素为脂肪组织特异性分泌的小分子蛋白质（114个氨基酸，分子量1．25×10^4）。它是继瘦素之后在脂肪组织中发现的又一种重要激素。现有的研究已经证实其阻碍了脂肪细胞对葡萄糖的摄取，并可能在胰岛素抵抗的信号分子传导过程中起重要作用。本研究以人肝脏细胞为研究对象，考察抵抗素对葡萄糖转运子2（GLUT2）和过氧化物酶体增殖激活受体γ（PPARγ）基因转录的影响，为研究其对人体葡萄糖代谢调控的影响，阐明引发胰岛素抵抗的分子机制，探讨腹型肥胖与Ⅱ型糖尿病的关系。

关键词：胰岛素抵抗抵抗素葡萄糖转运子2 过氧化物酶增殖激活受体γ 真核表达

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裙带菜茎中褐藻糖胶的组成及生物活性研究

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中国药学杂志 2006年第22期41卷 1748-1750页

作者：康琰琰王一飞熊盛邢少璟张美英朱艳梅广州暨南大学生物医药研究开发基地广州510632

目的从褐藻裙带茎中分离纯化得到褐藻糖胶UPPSⅡ,并研究其组成性质及生物活性。方法热水提取粗褐藻糖胶,采用DEAE-52和Sephadex G-200柱分离纯化得到纯褐藻糖胶UPPSⅡ,GC-MS分析多糖组成,凝胶色谱法测定其相对分子质量,红外光谱测定其... 详细信息

目的从褐藻裙带茎中分离纯化得到褐藻糖胶UPPSⅡ,并研究其组成性质及生物活性。方法热水提取粗褐藻糖胶,采用DEAE-52和Sephadex G-200柱分离纯化得到纯褐藻糖胶UPPSⅡ,GC-MS分析多糖组成,凝胶色谱法测定其相对分子质量,红外光谱测定其糖苷键构型,并研究其对酪氨酸酶活性的抑制作用。结果UPPSⅡ由岩藻糖、甘露糖、木糖、葡萄糖、半乳糖以β-糖苷键构成。相对分子质量为1.7×105。其对酪氨酸酶活性呈浓度依赖性抑制。结论UPPSⅡ为首次从裙带菜茎中分离得到,主要成分为岩藻糖,并具有抑制酪氨酸酶活性的作用。

关键词：裙带菜褐藻糖胶酪氨酸酶生物活性

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核苷二磷酸激酶A亚基的纯化、鉴定及其对顺铂抗癌作用的增强

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中国药理学与毒理学杂志 2003年第1期17卷 40-43页

作者：王一飞邢少璟张美英钱垂文林锋罗勇李久香暨南大学生物医药研究开发基地广东广州510632

目的　了解核苷二磷酸激酶A亚基 (NDPK A)能否提高顺铂的抗癌效果。方法　利用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和Western印迹杂交来监测和鉴定目标蛋白NDPK A ,利用离子交换、亲和层析结合高效液相色谱纯化分离目标蛋白 ... 详细信息

目的　了解核苷二磷酸激酶A亚基 (NDPK A)能否提高顺铂的抗癌效果。方法　利用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和Western印迹杂交来监测和鉴定目标蛋白NDPK A ,利用离子交换、亲和层析结合高效液相色谱纯化分离目标蛋白 ;MTT比色法测定药物对细胞生长抑制率的影响。结果　获得NDPK A单体蛋白 ,酶比活为 8mmol·min- 1·g- 1蛋白质 ;细胞生长抑制率显示 ,NDPK A单独处理细胞时未见明显的细胞毒性 ,但与顺铂联合处理却能大大加强后者对鼠肺腺癌细胞LA795和人喉癌细胞Hep 2的细胞毒性。结论　NDPK A与顺铂联用能增强顺铂对体外培养的鼠肺腺癌细胞LA795和人喉癌细胞Hep

关键词：核苷二磷酸激酶类顺铂癌 LA795 癌 Hep-2 化学治疗

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苦丁茶多糖抗氧化活性研究

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食品与发酵工业 2008年第2期34卷 34-36页

作者：吴晓鹏王一飞刘秋英杨珂暨南大学生物医药研究开发基地

采用清除超氧阴离子自由基、清除羟自由基、清除DPPH自由基、双氧水诱导红细胞氧化溶血、红细胞自氧化溶血实验,对A、K_1、K_3三个苦丁茶多糖组分的抗氧化活性进行了研究,并与Vc进行了比较,结果表明:苦丁茶多糖对羟自由基、超氧阴离子... 详细信息

采用清除超氧阴离子自由基、清除羟自由基、清除DPPH自由基、双氧水诱导红细胞氧化溶血、红细胞自氧化溶血实验,对A、K_1、K_3三个苦丁茶多糖组分的抗氧化活性进行了研究,并与Vc进行了比较,结果表明:苦丁茶多糖对羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基具有一定的清除作用;对H_2O_2诱导红细胞氧化溶血反应、对红细胞自氧化溶血反应都有显著的抑制作用。

关键词：苦丁茶多糖自由基抗氧化活性

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超声波法提取裙带菜中褐藻多糖硫酸酯的工艺研究

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食品与发酵工业 2006年第1期32卷 115-117页

作者：谭洁怡王一飞钱垂文广州暨南大学生物医药研究开发基地

利用超声波法从裙带菜(Undaria pinnatifida)中提取褐藻多糖硫酸酯(FSP),以多糖提取率为指标,通过单因素和正交优化实验确立了提取FSP的最佳工艺条件,并与传统热水提取法进行了比较。结果表明,100倍加水量、在1 000 W功率下超声处理20 ... 详细信息

利用超声波法从裙带菜(Undaria pinnatifida)中提取褐藻多糖硫酸酯(FSP),以多糖提取率为指标,通过单因素和正交优化实验确立了提取FSP的最佳工艺条件,并与传统热水提取法进行了比较。结果表明,100倍加水量、在1 000 W功率下超声处理20 min能得到最大的多糖提取率。采用优化工艺,FSP得率(16.87%)、纯度(74.19%)和硫酸基含量(10.22%)比传统水提法分别提高了23.59%、30.92%和13.94%,色素和蛋白等杂质的析出减少,是一种良好的提取多糖方法。

关键词：超声提取褐藻多糖硫酸酯裙带菜正交实验

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