检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病理生理杂志 2011年第9期27卷 1790-1795页

作者：李红阳李晓霞余榕捷刘晓飞王静静苏航陈建苏暨南大学第一临床医学院广东广州510632 暨南大学医学院眼科广东广州510632 暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632 暨南大学生物工程研究所广东广州510632

目的:重组蛋白构建细胞转录因子PTD-Oct4。方法:利用重叠延伸PCR法重组目的基因构建质粒pKYB-PTD-Oct4,并转染至*** ER2566。镍柱纯化重组蛋白并用Western bloting对其进行鉴定。用异硫氰酸荧光素(FITC)标记PTD-Oct4,检测其穿透中国仓... 详细信息

目的:重组蛋白构建细胞转录因子PTD-Oct4。方法:利用重叠延伸PCR法重组目的基因构建质粒pKYB-PTD-Oct4,并转染至*** ER2566。镍柱纯化重组蛋白并用Western bloting对其进行鉴定。用异硫氰酸荧光素(FITC)标记PTD-Oct4,检测其穿透中国仓鼠卵巢(CHO)细胞膜的能力;用荧光共振能量转移(FRET)检测重组融合蛋白PTD-Oct4结合目的DNA的活性。结果:成功获得目的蛋白PTD-Oct4,其可以成功进入细胞,定位于细胞核内,穿膜效率为(28.3±2.4)%,并具有与目标DNA序列特异结合的能力。结论:制备重组PTD-Oct4为外源蛋白诱导多能干细胞(IPSCs)奠定基础。

关键词： Oct4 诱导全能干细胞

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TIM-3、LAG-3和BTLA介导的血液肿瘤免疫耐受及其逆转研究

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中国实验血液学杂志 2016年第5期24卷 1594-1597页

作者：陈少华查显丰李扬秋暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632 暨南大学第一附属医院检验科广东广州510632 暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632

近年来认为肿瘤免疫抑制最为重要的原因,是免疫细胞异常表达一些T细胞免疫抑制受体所介导的T细胞功能耗竭,与肿瘤的发生发展密切相关,而阻断这些免疫负调控受体通路可以使T细胞部分或全部恢复功能。本文就近年来新近发现的T细胞免疫抑... 详细信息

近年来认为肿瘤免疫抑制最为重要的原因,是免疫细胞异常表达一些T细胞免疫抑制受体所介导的T细胞功能耗竭,与肿瘤的发生发展密切相关,而阻断这些免疫负调控受体通路可以使T细胞部分或全部恢复功能。本文就近年来新近发现的T细胞免疫抑制受体T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(TIM-3)、淋巴细胞活化基因-3(LAG3)和B和T淋巴细胞弱化子(BTLA)在血液肿瘤介导T细胞免疫耐受中的作用及其靶向治疗研究进展作一综述,旨在为血液肿瘤的免疫靶向治疗提供新的思路。

关键词：血液肿瘤细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3 淋巴细胞活化基因-3 B和T淋巴细胞弱化子靶向治疗

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Transwell 接触共培养促进单散iPSCs 生长及分化

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中国病理生理杂志 2014年第8期30卷 1404-1409页

作者：刘庆郭永龙郭晓令连瑞玲陈建苏暨南大学附属第一医院眼科广东广州510632 暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632 医学院眼科研究所广东广州510632

目的：观察Transwell接触共培养促进单散人诱导多能干细胞（inducedpluripotentstemcells， iPSCs）生长及分化的作用。方法：将1～2代牛角膜内皮细胞（corneal endothelial cells， CECs）接种在Transwell 小室底面培养8 h后，应用Accu... 详细信息

目的：观察Transwell接触共培养促进单散人诱导多能干细胞（inducedpluripotentstemcells， iPSCs）生长及分化的作用。方法：将1～2代牛角膜内皮细胞（corneal endothelial cells， CECs）接种在Transwell 小室底面培养8 h后，应用Accutase消化及40μm过滤处理获得单散iPSCs，将其接种到已有CECs的Transwell小室内共培养14 d，前3 d使用mTeSR1培养基，第4天开始用含10％胎牛血清的低糖DMEM培养基。分别进行实时荧光定量聚合酶链式反应（ real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction ， qPCR ）、免疫荧光、死活细胞染色及碱性磷酸酶（ alkaline phosphatase ， ALP）染色，对iPSCs多能特性表达及分化进行鉴定。设定单散iPSCs共培养组为实验组，常规培养iPSCs组为对照组（一），非共培养单散iPSCs组为对照组（二）。结果：培养牛CECs形态呈典型的六边形铺路石样外观。人iPSCs呈克隆样生长，共培养3 d后iPSCs贴壁呈单散细胞生长，免疫荧光检测未分化标志Nanog和Oct4呈阳性。 qPCR检测Nanog、Oct4和Sox2 mRNA表达，实验组与对照组（一）比较差异无统计学意义（P＞0.05）。死活细胞染色显示，实验组死细胞明显减少，与对照组（二）比较差异有统计学意义（P＜0.01）。共培养14 d后，人iPSCs形态比较均一，呈多边形，体积增大，无明显克隆团块；ALP染色阴性；免疫荧光染色ZO-1、AQP1和CD31表达阳性，CD34和CD133表达阴性。 qPCR检测Oct4、Nanog和Sox2 mRNA表达明显下调，与对照组（一）比较差异有统计学意义（P＜0．01）。结论：与牛CECs共培养可增强人单散iPSCs活性，使iPSCs形态上向内皮样细胞转化，表达部分CECs的标志。 Transwell接触共培养模型可以促进单散iPSCs生长及分化。

关键词：诱导多能干细胞角膜内皮细胞 Transwell接触共培养

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Maxadilan对人脂肪干细胞的影响

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中国病理生理杂志 2015年第3期31卷 475-480页

作者：连瑞玲郭晓令郭永龙刘庆陈建苏暨南大学附属第一医院眼科广东广州510632 暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632 医学院眼科研究所广东广州510632

目的:探讨垂体腺苷酸环化酶激活肽Ⅰ型受体(PAC1受体)特异激动剂maxadilan对人脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ASCs)的增殖、凋亡和分化潜能的作用。方法:取人脂肪组织通过酶消化法分离培养ASCs。流式细胞术鉴定ASCs表面标志物... 详细信息

目的:探讨垂体腺苷酸环化酶激活肽Ⅰ型受体(PAC1受体)特异激动剂maxadilan对人脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ASCs)的增殖、凋亡和分化潜能的作用。方法:取人脂肪组织通过酶消化法分离培养ASCs。流式细胞术鉴定ASCs表面标志物,并进行ASCs向成骨成脂定向诱导。CCK-8法和流式细胞术检测maxadilan对ASCs活性的影响。采用波长为254 nm的紫外线(ultraviolet C,UVC)照射ASCs,CCK-8法测定不同剂量的UVC诱导ASCs凋亡后的吸光度。选择剂量为702 J/m2的UVC照射ASCs 24 h后,用流式细胞术和caspase 3和caspase 9试剂盒检测maxadilan对ASCs凋亡的影响。结果:流式细胞术检测表明细胞CD29、CD44、CD59和CD105表面抗原阳性,证实所提取的细胞是ASCs。CCK-8法检测发现80 nmol/L浓度的maxadilan对ASCs促增殖作用最强,流式细胞术分析也证实80 nmol/L maxadilan处理显著促进ASCs的增殖,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。与仅被702 J/m2UVC照射的ASCs比较,80 nmol/L maxadilan显著抑制同等剂量UVC照射ASCs所诱导的、与caspase 3和caspase 9活性相关的细胞凋亡,2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。同时,2组细胞成骨和成脂的诱导分化均为阳性。结论:Maxadilan促进ASCs增殖,抑制ASCs凋亡,且不改变细胞向成骨和成脂诱导分化的潜能。Maxadilan有利于ASCs的体外生长与扩增。

关键词： Maxadilan 短波紫外线脂肪干细胞

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急性髓性白血病患者异基因造血干细胞移植后γδT细胞免疫功能重建分析

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免疫学杂志 2016年第11期32卷 966-971页

作者：陈洁金真伊王欣玉罗强陈少华杨力建吴秀丽朱康儿李扬秋暨南大学第一附属医院血液科广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广州510632 暨南大学再生医学教育部重点实验室广州510632

目的系统分析急性髓性白血病(AML)患者接受异基因造血干细胞移植前后γδT细胞免疫功能重建情况。方法利用反转录-多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测12例AML患者移植前后外周血γδT细胞TRGV和TRDV各亚家族的谱系分布情况,进一步应用基因扫... 详细信息

目的系统分析急性髓性白血病(AML)患者接受异基因造血干细胞移植前后γδT细胞免疫功能重建情况。方法利用反转录-多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测12例AML患者移植前后外周血γδT细胞TRGV和TRDV各亚家族的谱系分布情况,进一步应用基因扫描分析各亚家族基因的互补决定区3(CDR3)的克隆性增殖情况。同时,采用实时荧光定量PCR方法对患者外周血γδT细胞的3个TRGV亚家族基因表达水平进行定量检测。收集8例健康成人外周血样作为对照。结果移植前后患者的TRGV亚家族谱系表达以及T细胞克隆性增殖情况无明显变化。移植前患者TRDV亚家族谱系存在明显限制性利用,部分亚家族不表达;其中TRDV3、TRDV4和TRDV8亚家族出现克隆性增殖,而移植后患者γδT细胞的TRDV亚家族谱系限制性利用情况虽有所改善,但TRDV3、TRDV4、TRDV5、TRDV6和TRDV8亚家族仍存在克隆性增殖情况。移植前后患者TRGVⅡ亚家族的表达水平均显著低于正常对照组;移植后患者的TRGV亚家族表达模式(TRGVⅠ>TRGVⅢ>TRGVⅡ)发生了明显改变,以TRGVⅠ亚家族的表达占优势。移植后无发生GVHD患者的TRGVⅠ亚家族的表达水平显著高于发生GVHD患者的TRGVⅠ亚家族的表达水平。结论移植后TRGVⅡ亚家族的免疫重建恢复较慢,且移植后TRGVⅠ亚家族表达水平较高提示较好的γδT细胞免疫重建。移植后克隆性增殖的γδT细胞可能是机体体内相关抗原的刺激下产生的反应性增殖性T细胞。

关键词：异基因造血干细胞移植 γδT细胞免疫重建

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B细胞非霍奇金淋巴瘤患者TCR ζ基因的表达特点

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肿瘤防治研究 2010年第5期37卷 547-550页

作者：李菊香陈少华杨力建林春兰李扬秋暨南大学附属第一医院临床医学检验中心广州510632 暨南大学医学院血液病研究所暨南大学医学院生化教研室暨南大学再生医学教育部重点实验室

目的分析B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)患者外周血中T细胞信号转导分子TCRζ基因的表达特点。方法采用SYBRGreenⅠ实时定量RT-PCR和相对定量分析法检测17例B-NHL患者外周血单个核细胞(PBMCs)中TCRζ基因的表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M... 详细信息

目的分析B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)患者外周血中T细胞信号转导分子TCRζ基因的表达特点。方法采用SYBRGreenⅠ实时定量RT-PCR和相对定量分析法检测17例B-NHL患者外周血单个核细胞(PBMCs)中TCRζ基因的表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,采用相对定量公式:2-△Ct×100%,计算TCRζ基因的相对mRNA表达量,17例健康成人作为对照。结果全部B-NHL样本均全部表达TCRζ基因,但其表达水平显著低于对照组(P=0.000),健康人PBMCs的TCRζ基因mRNA的表达水平为B-NHL患者的3.26倍。B-NHL患者TCRζ基因表达水平与患者的年龄无相关性。结论 B-NHL患者中TCRζ基因的mRNA表达水平明显下调,可能是其细胞免疫功能缺陷的原因之一。

关键词： TCRζ基因非霍奇金淋巴瘤实时定量RT-PCR

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PACAP38对兔角膜瓣术后三叉神经节细胞及角膜神经生长的影响

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眼科研究 2010年第8期28卷 694-698页

作者：赵秀丽陈建苏余榕捷丁勇郑佩娥李晓霞田振彩戴静暨南大学附属第一医院眼科暨南大学医学院眼科研究室再生医学教育部重点实验室广州510632 暨南大学生物医学工程系广州510632

目的观察垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP38)对培养的兔三叉神经节细胞及角膜瓣术后角膜神经生长的影响。方法从2周龄新西兰白兔中分离三叉神经节细胞,并在神经元基础培养液中进行培养。培养24h后在培养液中分别加入1μmol/LPACAP38(A组)... 详细信息

目的观察垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP38)对培养的兔三叉神经节细胞及角膜瓣术后角膜神经生长的影响。方法从2周龄新西兰白兔中分离三叉神经节细胞,并在神经元基础培养液中进行培养。培养24h后在培养液中分别加入1μmol/LPACAP38(A组)、0.1μmol/LPACAP38(B组),C组培养液中加入PBS。1周后行抗神经纤维丝蛋白(NF200)免疫荧光染色鉴别培养的三叉神经节细胞。27只新西兰白兔右眼行角膜瓣手术,并分为3组,术后1d分别以10μmol/LPACAP38、5μmol/LPACAP38或PBS点眼,共8周,行角膜敏感度测定和NF200免疫荧光染色,评价术后不同时间角膜神经的修复情况。结果 PACAP38培养的三叉神经节细胞有较多神经细胞存活,伸出突触并交织呈网状,A组神经细胞存活最多。角膜瓣手术的3个组角膜敏感度随着术后时间的延长逐渐增加(Ftime=58.196,P=0.00),10μmol/LPACAP38点眼组角膜敏感度恢复最快。10μmol/LPACAP38点眼组和5μmol/LPACAP38点眼组角膜敏感度值明显高于PBS点眼组,差异均有统计学意义(P=0.000,P=0.005)。角膜神经染色示10μmol/LPACAP38点眼组角膜神经密度较5μmol/LPACAP38点眼组和PBS点眼组高,神经干短端多膨大,以出芽方式发出细微的新生神经纤维芽。结论 PACAP38能促进兔三叉神经节细胞增生及诱导神经突形成,可促进角膜敏感性恢复及角膜神经修复再生。

关键词：垂体腺苷酸环化酶激活肽细胞增生分化神经再生角膜

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有序排列微模板培养角膜基质细胞及其细胞生物学变化

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眼科研究 2010年第8期28卷 699-702页

作者：田振彩陈建苏周平李沁华李晓霞戴静赵秀丽暨南大学附属第一医院眼科暨南大学医学院眼科研究室再生医学教育部重点实验室广州510632 暨南大学生物医学工程系广州510632

目的探讨CO2激光打标机处理的有序排列微模板培养兔角膜基质细胞的生长特征及其细胞生物学变化。方法用CO2激光打标机刻制的聚苯乙烯有序排列微模板培养兔角膜基质细胞,模板沟槽划线间隔距离0.25mm者为窄间隔组,间隔距离1mm者为宽间隔组... 详细信息

目的探讨CO2激光打标机处理的有序排列微模板培养兔角膜基质细胞的生长特征及其细胞生物学变化。方法用CO2激光打标机刻制的聚苯乙烯有序排列微模板培养兔角膜基质细胞,模板沟槽划线间隔距离0.25mm者为窄间隔组,间隔距离1mm者为宽间隔组,平板组作为对照组。将角膜基质细胞悬液以1×105/mL细胞密度接种于培养板中,倒置显微镜下观察细胞生长情况,苏木精-伊红染色观察细胞排列的形态学差异,免疫荧光法检测培养板上细胞的波形蛋白,实时监测显微镜下观察24h窄间隔组细胞的接触指引特性及细胞的动态生长过程。结果培养第1天倒置显微镜下见3组培养细胞贴壁生长状态无明显区别,窄间隔组和宽间隔组细胞逐渐围绕沟槽接触指引生长,表现为有序排列,且窄间隔组较宽间隔组明显。苏木精-伊红染色和免疫荧光染色显示培养的细胞在窄间隔组沟槽的接触指引下呈有序排列,呈现10余层细胞排列的平行板层结构。3组细胞波形蛋白免疫荧光染色均呈阳性反应。实时监测显微镜下可见窄间隔组细胞体部首先贴壁,在接触指引下生长,而细胞在干燥环境下的凋亡始于细胞伪足突起处。结论利用CO2激光打标机制备的有序排列微模板可获得有序排列的角膜基质细胞,有利于在接近生理状态条件下角膜基质层的构建。

关键词：角膜基质细胞有序排列细胞培养微纹理细胞生物学

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TCRζ缺陷的急性髓细胞白血病病人T细胞中Elf-1、Zap-70和FcεR Iγ基因的表达特点

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免疫学杂志 2012年第9期28卷 825-828页

作者：史丽陈少华杨力建吴秀丽李萡卢育洪郁志沈琦闫小娟李扬秋暨南大学医学院血液病研究所广州510632 暨南大学医学院第一附属医院血液科广州510632 暨南大学医学院再生医学教育部重点实验室广州510632

目的了解TCRζ缺陷的急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)病人外周血T细胞中Elf-1、Zap-70和FcεR Iγ基因的表达特点。方法采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测10例TCRζ缺陷的AML病人外周血CD3+T细胞中Zap-70... 详细信息

目的了解TCRζ缺陷的急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)病人外周血T细胞中Elf-1、Zap-70和FcεR Iγ基因的表达特点。方法采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测10例TCRζ缺陷的AML病人外周血CD3+T细胞中Zap-70、Elf-1和FcεR Iγ基因的表达情况。以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,10例健康成人作为对照;采用相对定量公式:2-△Ct×100%,计算Zap-70、Elf-1和FcεR Iγ基因的表达水平。结果 TCRζ缺陷的AML病人外周血T细胞中Elf-1基因的表达水平(中位数8.526%)明显低于健康对照组(中位数33.237%)(P<0.001),而FcεR Iγ基因的表达水平(中位数2.571%)则高于健康对照组(中位数0.958%)(P=0.019),Zap-70基因在两组中的表达水平没有显著性差异,但均与TCRζ基因的表达水平呈正相关。结论 TCRζ缺陷的AML病人T细胞中Elf-1基因的低表达可能是导致AML病人TCRζ基因缺陷性表达的原因之一,而FcεR Iγ基因的高表达则可能是在一定程度上缓解了TCRζ基因缺陷性表达所带来的T细胞免疫异常。

关键词： TCRζ缺陷急性髓细胞白血病 Elf-1 Zap-70 FcεR Iγ

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银离子敷料在糖尿病合并慢性创面治疗中的应用价值

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中华糖尿病杂志 2021年第6期13卷 603-609页

作者：周景祺唐佳俊管皓楠董炜陆树良上海交通大学医学院附属瑞金医院创面修复中心 200025 暨南大学附属第一医院整形外科暨南大学整形外科新技术研究所再生医学教育部重点实验室广州510630

目的:探讨银离子敷料治疗糖尿病合并慢性难愈性创面的临床疗效。方法:回顾性分析上海交通大学医学院附属瑞金医院及合作单位于2018年2月至2019年2月使用银离子敷料或磺胺嘧啶银治疗的60例糖尿病合并慢性难愈性创面患者。根据创面使用治... 详细信息

目的:探讨银离子敷料治疗糖尿病合并慢性难愈性创面的临床疗效。方法:回顾性分析上海交通大学医学院附属瑞金医院及合作单位于2018年2月至2019年2月使用银离子敷料或磺胺嘧啶银治疗的60例糖尿病合并慢性难愈性创面患者。根据创面使用治疗方法分为试验组(银离子敷料组)和对照组(磺胺嘧啶银组)。采用Bates-Jensen伤口评价工具(BWAT)对两组患者的创面愈合情况、感染情况及愈合时间进行评分,并采用Mann-Whitney U检验、独立样本t检验、χ2或Fisher精确检验进行比较。结果:(1)创面情况:试验组和对照组第7、14天的BWAT评分差异均无统计学意义,第21天试验组的BWAT评分明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组第7天的创面变化率(BWAT%)差异无统计学意义(P>0.05),第14、21天,试验组BWAT%评分分值明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)创面感染情况:两组患者第1、7天在BWAT中选出反映创面感染情况的6个条目进行的评分(BWAT-I评分)分值差异有统计学意义(P<0.05),试验组高于对照组;第14天和第21天两组的BWAT-I评分差异无统计学意义。两组第7、14、21天的创面感染变化率(BWAT-I%)试验组均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)创面愈合时间:试验组创面愈合时间明显短于对照组,分别为34.50(22.75,57.25)和46.50(37.75,64.75)d,差异有统计学意义(Z=-2.191,P<0.05)。结论:在彻底清创的基础上,糖尿病合并慢性创面局部使用银离子敷料,可以有效减轻、控制创面感染,加快创面修复进程。

关键词：糖尿病足银离子敷料磺胺嘧啶银慢性难愈性创面

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