研究背景:白血病病人常伴有严重的T细胞免疫缺陷,我们的前期研究显示急性髓细胞白血病(AML)病人T细胞亚家族存在明显缺失,胸腺近期输出功能低下,T细胞受体(TCR)信号传导分子TCRζ等表达低下。目的:了解TCRζ缺陷的AML病人外周血T细胞中Elf-1、Zap-70和Fcε R Iγ基因的表达特点。方法采用SYB R GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测10例TCRζ缺陷的AML病人外周血CD3+T细胞中Zap-70、Elf-1和Fcε R Iγ基因的表达情况。以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,10例健康成人作为对照;采用相对定量公式:2-△Ct×100%,计算Zap-70、Elf-1和Fcε R Iγ基因的表达水平。结果:所有样本均表达Elf-1、Zap-70和Fcε R Iγ基因,健康成人在所有基因中的表达水平比较集中,而AML病人的样本在同一基因中的表达水平差异较大;TCRζ缺陷的AML病人外周血T细胞中Elf-1基因的表达水平(中位数8.526%)明显低于健康对照组(中位数:33.237%)(P=0.000),Fcε R Iγ基因的表达水平(中位数:2.571%)则高于健康对照组(中位数:0.958%)(P=0.019),而在健康对照组中,Fcε R Iγ基因表达水平明显低于TCRζ基因的表达水平(P=0.000)。Zap-70基因在两组中的表达水平没有显著性差异(中位数:0.479%和0.781%;P=0.247);进一步采用相关性分析显示:在健康对照组中,Elf-1基因与TCRζ基因表达水平呈正相关(rs=0.636,P=0.048),在AML病人中,Elf-1基因与相对应的TCRζ基因表达水平也呈正相关趋势,但尚未有统计学意义(rs=0.624,P=0.054),Elf-1与Fcε R Iγ、Fcε R Iγ基因与TCRζ基因的表达水平在AML和健康组的相关性未有统计学意义,而Zap-70基因与TCRζ基因的表达水平在两组中则均呈正相关(rs=0.661,P=0.038;rs=0.697,P=0.025)结论:TCRζ缺陷的AML病人T细胞中Elf-1基因的低表达可能是导致AML病人TCRζ基因缺陷性表达的原因之一,而Fcε R Iγ基因的高表达则可能是在一定程度上缓解了TCRζ基因缺陷性表达所带来的T细胞免疫异常。
目的扩增弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)相关抗原特异T细胞克隆的全长TCRα和β链基因序列,并对其三维空间结构进行预测。方法从已鉴定的2例伴有克隆性增殖TCR Vα6和Vβ13亚家族T细胞的DLBCL患者外周血中克...
详细信息
目的扩增弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)相关抗原特异T细胞克隆的全长TCRα和β链基因序列,并对其三维空间结构进行预测。方法从已鉴定的2例伴有克隆性增殖TCR Vα6和Vβ13亚家族T细胞的DLBCL患者外周血中克隆全长TCRα和β基因序列,利用Primer Premier 5.0分析软件推算其相应的氨基酸序列,并通过自动化蛋白质模建服务器SWISS-MODEL进行三维空间结构预测。然后利用蛋白质三维图像分析软件Rasmol对所获得的TCR三维空间结构进行显示和分析。结果获得DLBCL相关抗原特异TCRα6和β13全长基因序列及其氨基酸序列。2例患者的TCR Vα6的空间结构与PDB ID:3ffcD模型相似,序列同源性分别为92.16%和91.71%;而2个TCR Vβ13也均具有同一个空间结构模型PDB ID:2ialD,序列同源性分别为92.95%和92.18%。结论来自不同DLBCL患者外周血中克隆性增殖的TCR Vα6或Vβ13亚家族T细胞的TCR具有高度同源性的空间结构,提示其可能识别相同的肿瘤抗原表位。
暂无评论