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Polo样蛋白激酶1抑制剂BI-2536对人肝癌SNU-423细胞增殖及侵袭的影响

中国生物制品学杂志 2020年第5期33卷 527-529,534页

作者：陈虹瑛王鑫昕王瑜茹张思敏于保锋山西医科大学第一临床医学院山西太原030001 山西医科大学公共卫生学院山西太原030001 山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室山西太原030001

目的探讨Polo样蛋白激酶1(Polo-like protein kinase 1,PLK1)抑制剂BI-2536对人肝癌SNU-423细胞增殖及侵袭的影响。方法体外培养人肝癌SNU-423细胞,采用不同浓度梯度的BI-2536作用于SNU-423细胞,同时设对照组(未加BI-2536),MTT法检测BI-2536对人肝癌SNU-423细胞的抑制率,划痕试验检测BI-2536对人肝癌SNU-423细胞侵袭和迁移能力的影响。结果SNU-423细胞经BI-2536处理48 h后的IC50为5.036μmol/L。SNU-423细胞的增殖抑制率随BI-2536浓度的增加明显上升(P<0.01);经BI-2536作用的SNU-423细胞迁移率明显低于对照组(P<0.01),随药物浓度的增高,SNU-423细胞出现凋亡现象。结论BI-2536可抑制人肝癌SNU-423细胞的增殖及迁移能力,PLK1可作为肝癌治疗中的新靶点。

关键词： Polo样蛋白激酶1 抑制剂 BI-2536 肝癌 SNU-423细胞细胞增殖细胞侵袭

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细胞自噬与原发性肝癌相关研究进展

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临床与实验病理学杂志 2020年第8期36卷 943-946页

作者：王阳阳周铖晁旭冯雪松马文军黄峰陕西中医药大学第一临床医学院咸阳712000 陕西中医药大学基础医学院病理学教研室咸阳712046 陕西中医药大学基础医学院生物化学教研室咸阳712046 陕西中医药大学附属医院肝病科咸阳712000

细胞自噬是一种“自我进食”现象,通过分解受损和多余的细胞蛋白、细胞器和其他细胞质成分,从而在细胞和组织的更新中起重要作用。细胞自噬与原发性肝癌的发生、发展密切相关,不仅参与原发性肝癌的癌前病变,而且在原发性肝癌的进展中起... 详细信息

细胞自噬是一种“自我进食”现象,通过分解受损和多余的细胞蛋白、细胞器和其他细胞质成分,从而在细胞和组织的更新中起重要作用。细胞自噬与原发性肝癌的发生、发展密切相关,不仅参与原发性肝癌的癌前病变,而且在原发性肝癌的进展中起双重作用。该文主要阐述了细胞自噬的发生机制,及其在肝癌进展中的作用和自噬参与肝癌的治疗。

关键词：肝肿瘤细胞自噬原发性双重作用文献综述

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小白菊内酯对Kaposi肉瘤相关疱疹病毒感染细胞的影响

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石河子大学学报（自然科学版） 2020年第1期38卷 104-108页

作者：李英李洁康唐慧张晓艳马凌波徐慧玲李冬妹石河子大学医学院生物化学教研室/新疆地方与民族高发病教育部重点实验室新疆石河子832002 石河子大学科研处新疆石河子832002 石河子市妇幼保健院新疆石河子832000 兰州大学第一临床医学院甘肃兰州73000

目的为了探讨小白菊内酯(Parthnolide,PTL)对Kaposi肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi’s Sarcoma associated Herpesvirus,KSHV)感染细胞islk.219、SK-RG、BCBL-1增殖的影响。方法测定小白菊内酯对不同的KSHV感染细胞的半数抑制浓度(IC 50)。同时显微镜下观察不同浓度的小白菊内酯处理KSHV感染细胞24 h和48 h后细胞的形态变化。采用CCK-8、集落形成实验检测不同浓度的小白菊内酯处理KSHV感染细胞后的增殖能力。采用Western blot检测Bcl-2和Cyclin D1的蛋白表达情况。结果小白菊内酯处理islk.219、SK-RG、BCBL-1的IC 50浓度分别为21.08μmol/L、10.75μmol/L、13.65μmol/L,随着小白菊内酯浓度和处理时间的增加,islk.219、SK-RG、BCBL-1细胞增殖能力下降,克隆数明显减少(P<0.05),并使Bcl-2和Cyclin D1蛋白的表达水平降低。结论小白菊内酯能够抑制KSHV感染细胞系islk.219、SK-RG、BCBL-1细胞的增殖,可能作为治疗KSHV感染的候选药物。

关键词： Kaposi肉瘤相关疱疹病毒小白菊内酯增殖

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盐酸哈尔酚骆驼蓬碱对人肝癌细胞生长的影响与自噬诱导作用的研究

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食品安全质量检测学报 2020年第8期11卷 2603-2608页

作者：古丽努尔·阿不力米提伊利亚·阿洪江伊力亚斯·艾萨雷秀英陈倩冯学召米娜新疆医科大学基础医学院生物化学教研室乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院乌鲁木齐830011

目的探讨低剂量盐酸哈尔酚骆驼蓬碱(harmol hydrochloride dihydrate,HHD)对肝癌细胞株HepG2生长的影响及其自噬诱导作用。方法用不同浓度的HHD作用于肝癌细胞株HepG224 h后四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细... 详细信息

目的探讨低剂量盐酸哈尔酚骆驼蓬碱(harmol hydrochloride dihydrate,HHD)对肝癌细胞株HepG2生长的影响及其自噬诱导作用。方法用不同浓度的HHD作用于肝癌细胞株HepG224 h后四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞活力,用流式细胞仪检测细胞凋亡,用Hoechst和PI双重染色方法观察细胞凋亡,用蛋白质印迹(western blotting,WB)的方法检测LC-3Ⅱ表达水平。结果MTT检测结果显示不同浓度的HHD作用于HepG2细胞24 h后,细胞活力随HHD浓度升高而降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。0、0.005、0.01 mg/mL HHD作用于HepG2细胞24 h后,细胞凋亡率均明显高于空白对照组(P<0.05)。0.01 mg/mL的HHD处理HepG2细胞24 h后,凋亡小体的形成明显增多(P<0.05)。Western blotting法检测发现0.01 mg/mL HHD作用细胞24 h后自噬标记蛋白LC-3Ⅱ表达显著升高。结论HHD抑制肝癌细胞株HepG2在体外生长,其诱导细胞自噬可能是抑制作用机制之一。

关键词：盐酸哈尔酚骆驼蓬碱肝癌细胞HepG2 凋亡自噬

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MYO1D对自噬溶酶体生成机制的研究

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新疆医科大学学报 2020年第9期43卷 1154-1158页

作者：冯学召伊力亚斯·艾萨雷秀英陈倩古丽努尔·阿不力米提米娜新疆医科大学基础医学院生物化学教研室乌鲁木齐830011 新疆医科大学药学院药理学教研室乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院乌鲁木齐830011

目的探讨肌球蛋白1D(myosin 1d,MYO1D)对自噬溶酶体形成的影响及其作用机制。方法免疫荧光观察大鼠肾上皮(normal rat kidney,NRK)细胞内MYO1D蛋白质与自噬体标志性蛋白质微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light Ch... 详细信息

目的探讨肌球蛋白1D(myosin 1d,MYO1D)对自噬溶酶体形成的影响及其作用机制。方法免疫荧光观察大鼠肾上皮(normal rat kidney,NRK)细胞内MYO1D蛋白质与自噬体标志性蛋白质微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light Chain 3,LC3)的共定位关系;CRISPR-Cas9技术敲除NRK细胞中MYO1D基因,并分为MYO1D基因未敲除组,即NC组(non-specific control,NC)与MYO1D基因敲除组,即KO组(myosin1d knockout,KO);免疫荧光观察两组细胞中LC3与溶酶体关联膜蛋白1(lysosomal associated membrane protein 1,LAMP1)的共定位关系;蛋白质免疫印迹检测两组细胞自噬底物蛋白P62(p62/sequestosom-1,p62)的表达水平;对两组细胞进行荧光融合蛋白GFP-RFP-LC3(GFP-RFP-LC3)转染,在激光共聚焦显微镜下示踪自噬溶酶体的形成,并利用溶酶体标记探针(lyso-tracker red)检测溶酶体活性的变化。结果在NRK细胞中,可观察到MYO1D与LC3存在显著的共定位关系;激光共聚焦显微镜下可观察到KO组中自噬溶酶体的形成受阻,荧光拟合程度降低;与NC组比较KO组P62蛋白表达水平显著升高,差异具有统计学意义(P<0.01);KO组内绿色荧光与红色荧光共同标记的自噬体比例升高;与NC组比较KO组溶酶体活性增强,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论MYO1D参与并影响自噬溶酶体的生成过程,其作用机制可能是MYO1D参与了自噬体转运至溶酶体并与之融合。

关键词：细胞自噬肌球蛋白1D 自噬溶酶体

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乳源六肽预防和降低小鼠急性酒精性肝损伤及其机制

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安徽医科大学学报 2019年第10期54卷 1546-1551页

作者：席浩刘沁雪陈曦王鹏李敬文姚晓炜吕志昊许尹秦宜德安徽医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室合肥230032 安徽医科大学第一临床医学院合肥230032 安徽医科大学药学院合肥230032

目的研究乳源六肽(PGPIPN)在降低小鼠酒精性肝损伤方面的作用及其机制。方法建立小鼠急性酒精肝损伤的动物模型,健康雄性昆明种小鼠60只,体质量18~22 g,动物预饲养1周后分成6组:对照组、模型组、PGPIPN L组、PGPIPN M组、PGPIPN H组和... 详细信息

目的研究乳源六肽(PGPIPN)在降低小鼠酒精性肝损伤方面的作用及其机制。方法建立小鼠急性酒精肝损伤的动物模型,健康雄性昆明种小鼠60只,体质量18~22 g,动物预饲养1周后分成6组:对照组、模型组、PGPIPN L组、PGPIPN M组、PGPIPN H组和谷胱甘肽(GSH)组,每组10只小鼠。为了制作小鼠急性酒精性肝损伤的动物模型,实验最后3 d,PGPIPN低、中、高剂量组、GSH组和模型对照组以56°红星二锅头酒灌胃,对照组使用等量蒸馏水灌胃,建立小鼠的急性酒精性肝损伤的对照模型。12 h后,将小鼠颈椎脱臼处死,取材检测相关指标。在实验结束时,将小鼠称重并麻醉,收集血清和肝脏样品,取肝脏称重后保存,计算出肝脏指数。同时,测定小鼠血清中天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)含量,血清和肝匀浆中三酰甘油(TG)和总胆固醇(TC)的含量。取肝脏组织制作成病理切片,观察肝脏细胞的病理学变化。原代细胞培养,流式细胞术检测肝脏组织的凋亡状况。结果生化分析显示模型组小鼠血清TG、TC和肝脏TG(肝匀浆中TG的浓度)高于对照组,PGPIPN H剂量组、PGPIPN M剂量组和PGPIPN L剂量组血清中ALT、AST含量与模型组相比降低,PGPIPN高剂量组中TNF-α含量较模型组也有减少。对照组中,肝细胞结构完整,凋亡指数为3.61%。而模型组中肝索结构紊乱,液泡数目增加,肝脏细胞的边界不清晰,细胞核消失,细胞皱缩,凋亡指数为36.87%,出现了明显的细胞凋亡状态。PGPIPN L组细胞出现凋亡状态,而PGPIPN H组细胞状态良好,无凋亡现象发生。流式细胞术检测细胞凋亡,对照组为4.558%,模型组为31.50%。结论PGPIPN能够预防和降低小鼠急性酒精性肝损伤。

关键词：乳源六肽小鼠急性酒精肝损伤保护机制

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脱氢弯孢霉菌素对脂多糖诱导的巨噬细胞炎症研究

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生物资源 2020年第2期42卷 248-253页

作者：钟静赵群李玉兰余贤军邓张双三峡大学生物与制药学院湖北宜昌443002 湖北医药学院基础医学院生物化学教研室湖北十堰442000 宜昌市中心人民医院三峡大学第一临床医学院湖北宜昌443003

研究脱氢弯孢酶菌素(Dehydrocurvularin,DCV)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠腹腔(peritoneal macrophages,PMs)和骨髓来源的巨噬细胞(bone-marrow-derived macrophages,BMDMs)的影响。MTT方法筛选最佳药物浓度处理不同来源的巨噬细胞,采用Western blot方法检测诱导型一氧化氮合酶(induceble nitric oxide synthase,iNOS)、环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)及炎性信号通路NF-κB和MAPK的相关蛋白的表达。结果显示,脱氢弯孢酶菌素可显著抑制LPS诱导的iNOS、COX-2的表达,且呈剂量依赖性。NF-κB和MAPK信号通路相关的蛋白激活也受到了明显的抑制。结果表明,脱氢弯孢酶菌素可显著抑制LPS诱导的不同来源的免疫细胞的炎症。

关键词：脱氢弯孢霉菌素炎症 NF⁃κB通路 MAPK通路

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HIF-1α对大鼠内皮细胞通透性的影响及作用机制

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安徽医科大学学报 2019年第7期54卷 1061-1065页

作者：蒋智永胡子健孟承颖黄海良段声梁蒋薇王欢余又新孙业祥方林森胡德林安徽医科大学第一附属医院烧伤科合肥230022 安徽医科大学第一临床医学院合肥230022 安徽医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室合肥230022

目的探讨低氧诱导因子-1 (HIF-1α)对大鼠主动脉内皮细胞通透性的影响及作用机制。方法构建HIF-1α干扰及过表达载体,应用Lipofectamine 2000转染原代大鼠主动脉内皮细胞,浓度为200μg/ml遗传霉素(G418)筛选稳转细胞株,实时荧光定量PCR(... 详细信息

目的探讨低氧诱导因子-1 (HIF-1α)对大鼠主动脉内皮细胞通透性的影响及作用机制。方法构建HIF-1α干扰及过表达载体,应用Lipofectamine 2000转染原代大鼠主动脉内皮细胞,浓度为200μg/ml遗传霉素(G418)筛选稳转细胞株,实时荧光定量PCR(RT-PCR)和Western blot检测HIF-1α、内皮素-1(ET-1)、内皮素受体A(ETA)、内皮素受体B(ETB)和闭锁小带(ZO-1)的表达;应用ET-1信号通路抑制剂BQ123及BQ788预处理HIF-1α过表达细胞株1 h,RT-PCR和Western blot检测HIF-1α、ET-1、ETA、ETB和ZO-1的表达,细胞膜通透性实验检测单层内皮细胞膜通透系数变化。结果与转染短发夹RNA-阴性对照组(shRNA-NC组)相比,转染shRNA-Ⅱ组HIF-1α、ET-1、ETA、ETB mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.01),ZO-1的表达则明显升高(P<0.01)。与转染GV230组比较,稳转GV230/HIF-1α组HIF-1α、ET-1、ETA、ETB mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.01),ZO-1的表达则明显降低(P<0.01);同时细胞膜通透性系数亦明显升高(P<0.01);应用BQ123和BQ788处理能够抑制HIF-1α诱导的ETA和ETB表达、增强ZO-1的表达,同时细胞膜通透性系数明显降低(P<0.01)。结论 HIF-1α可通过上调ET-1的表达进而增加大鼠主动脉内皮细胞的通透性,HIF-1α/ET-1信号轴在调控烧伤大鼠血管通透性方面具有重要作用。

关键词：大鼠内皮细胞血管通透性缺氧诱导因子-1α

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烧伤大鼠血清对血管内皮细胞通透性的影响

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安徽医科大学学报 2019年第6期54卷 930-933页

作者：段声梁胡子健孟承颖黄海良蒋智永蒋薇王欢余又新孙业祥方林森胡德林安徽医科大学第一附属医院烧伤科合肥230022 安徽医科大学第一临床医学院合肥230022 安徽医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室合肥230022

目的探讨烧伤大鼠血清对血管内皮细胞(EC)通透性的影响及作用机制。方法将原代培养的大鼠主动脉EC根据是否应用烧伤血清干预分为正常组和血清干预组,血清干预组应用烧伤12h大鼠血清干预大鼠主动脉内皮细胞24h,应用细胞通透性实验检测单... 详细信息

目的探讨烧伤大鼠血清对血管内皮细胞(EC)通透性的影响及作用机制。方法将原代培养的大鼠主动脉EC根据是否应用烧伤血清干预分为正常组和血清干预组,血清干预组应用烧伤12h大鼠血清干预大鼠主动脉内皮细胞24h,应用细胞通透性实验检测单层细胞膜通透性变化,实时荧光定量PCR(RT-PCR)和Western blot分别检测细胞通透性相关基因内皮素-1(ET-1)、内皮因子受体A(ETA)、ETB和带状闭合蛋白1(ZO-1)的mRNA和蛋白表达的变化。结果与正常组相比,烧伤大鼠血清干预组EC通透性系数明显升高(P<0.01),血清干预组ET-1、ETA和ETB的mRNA和蛋白表达均显著升高(P<0.01)、ZO-1的mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.01)。结论烧伤大鼠血清可引起血管EC通透性的增加,通透性增加可能与ET-1、ET-A、ET-B表达升高和ZO-1表达降低有关。

关键词：烧伤内皮细胞血管通透性 ET-1 ZO-1

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细胞焦亡与原发性肝癌研究进展

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临床与实验病理学杂志 2019年第8期35卷 941-944页

作者：殷宏振郭化磊裴颖晁旭黄峰冯雪松陕西中医药大学第一临床医学院中医系咸阳712046 陕西中医药大学基础医学院病理学教研室咸阳712046 陕西中医药大学附属医院肝病科咸阳712000 陕西中医药大学基础医学院生物化学教研室咸阳712046

细胞焦亡是一种不同于凋亡、自噬的程序性细胞死亡方式。其特征是在Gasdermin介导下,细胞膜发生破裂,之后释放细胞内容物和促炎因子,进而导致细胞死亡。细胞焦亡炎症通路包括由Caspase-1活化的经典通路和Caspase-4/-5/-11介导的非经典... 详细信息

细胞焦亡是一种不同于凋亡、自噬的程序性细胞死亡方式。其特征是在Gasdermin介导下,细胞膜发生破裂,之后释放细胞内容物和促炎因子,进而导致细胞死亡。细胞焦亡炎症通路包括由Caspase-1活化的经典通路和Caspase-4/-5/-11介导的非经典通路。细胞焦亡与原发性肝癌(primary liver cancer,PLC)的发生、发展联系密切,该文就细胞焦亡的发生机制及其在PLC的早期诊断、治疗、预后及药物开发等相关领域中的研究进展作简要综述。

关键词：原发性肝癌细胞焦亡炎症小体 GSDMD 文献综述

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