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郑州大学学报（医学版） 2002年第3期37卷 268-273页

作者：张明智赵国强李继昌董子明李学民郑州大学第一附属医院肿瘤科郑州450052 郑州大学基础医学院免疫学教研室郑州450052 郑州大学第一附属医院消化内科郑州450052 郑州大学基础医学院病理生理学教研室郑州450052 郑州大学第一附属医院检验科郑州450052

目的:构建重组质粒TCR Vβ8/pcDNA3．1。方法;从人淋巴瘤 Jurkat细胞中提取 mRNA,经 RT－PCR法获取 TCR Vβ8基因;将表达质粒 pcDNA3．l和 TCR Vβ8基因行 BamHI和 HindⅢ双酶切、低熔点胶纯化、连接酶切产物、转化DH5a感受态细菌、筛... 详细信息

目的:构建重组质粒TCR Vβ8/pcDNA3．1。方法;从人淋巴瘤 Jurkat细胞中提取 mRNA,经 RT－PCR法获取 TCR Vβ8基因;将表达质粒 pcDNA3．l和 TCR Vβ8基因行 BamHI和 HindⅢ双酶切、低熔点胶纯化、连接酶切产物、转化DH5a感受态细菌、筛选菌落和测序鉴定。结果:电泳获得 523 bp的 TCR Vβ8预期条带,测序证实为正确的 TCR Vβ8目的基因序列。结论:测序是构建TCR Vβ8/pcDNA3．l重组质粒的重要步骤。

关键词：淋巴瘤 TCR 独特型重组质粒 DNA疫苗

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下调Mcl-1表达对H37Rv感染小鼠模型调控作用研究

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中国病原生物学杂志 2018年第7期13卷 709-713,718页

作者：王新敏王小芳卢洋杨菩韩玲王英姿张万江章乐石河子大学医学院第一附属医院泌尿外科新疆石河子832002 石河子大学医学院病理生理学教研室

目的用不同阻断剂下调调控抗凋亡蛋白Mcl-1表达信号通路,探讨下调Mcl-1表达对结核杆菌感染小鼠腹腔巨噬细胞凋亡和炎症反应的影响。方法制备结核分枝杆菌国际标准强H37Rv菌株菌悬液,感染BALB/c小鼠,再分别腹腔注射Mcl-1信号通路阻断剂AG... 详细信息

目的用不同阻断剂下调调控抗凋亡蛋白Mcl-1表达信号通路,探讨下调Mcl-1表达对结核杆菌感染小鼠腹腔巨噬细胞凋亡和炎症反应的影响。方法制备结核分枝杆菌国际标准强H37Rv菌株菌悬液,感染BALB/c小鼠,再分别腹腔注射Mcl-1信号通路阻断剂AG490、PD98059、LY294002,同时设立对应的对照组。应用ELISA筛选不同阻断剂处理小鼠的最佳剂量,采用TUNEL试剂盒检测阻断剂应用后小鼠腹腔巨噬细胞凋亡率,透射电镜观察阻断剂应用后宿主巨噬细胞的形态学变化,HE染色分析应用阻断剂后小鼠肝、肺、脾、肾脏器的病理损伤情况。结果阻断剂处理H37Rv感染组小鼠巨噬细胞凋亡率与空白对照组均有不同程度的增高,其中PD98059处理组显著高于其他处理组(P<0.05);阻断剂PD98059处理组小鼠巨噬细胞感染H37Rv数量明显减少,且出现核固缩和凋亡。H37Rv感染小鼠肝、肺、脾、肾脏器出现严重病理损伤,而阻断剂应用后的病理损害程度明显减轻(P<0.05)。结论应用阻断剂下调Mcl-1的表达可促进结核杆菌感染小鼠腹腔巨噬细胞的凋亡,减少巨噬细胞内潜伏H37Rv数量,减轻结核感染对小鼠脏器的病理损伤。作用效果以MAPK信号通路阻断剂PD98059强于JAK/STAT和PI3K信号通路阻断剂AG490和PD98059。

关键词：结核 Mcl-1信号通路腹腔巨噬细胞细胞凋亡

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内源性硫化氢的中枢心血管效应与KATP通道开放机制有关

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中国组织工程研究与临床康复 2009年第33期13卷 6527-6530页

作者：刘文庆柴琛曹农徐敬东程军胜豆兴成鲁彦兰州大学第一附属医院普外科甘肃省兰州市730000 首都医科大学基础医学院生理学教研室北京市100069 兰州大学基础医学院生理学教研室甘肃省兰州市730000 解放军第一医院检验科甘肃省兰州市730030

背景:硫化氢具有舒张离体血管平滑肌、促进下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素和细胞膜超极化的作用。中枢内硫化氢是否参与心血管活动的调节目前尚未得到充分的研究。目的:观察中枢内源性硫化氢的心血管效应及其机制。设计、时间及地点:... 详细信息

背景:硫化氢具有舒张离体血管平滑肌、促进下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素和细胞膜超极化的作用。中枢内硫化氢是否参与心血管活动的调节目前尚未得到充分的研究。目的:观察中枢内源性硫化氢的心血管效应及其机制。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-10/2008-10在解放军第一医院检验科完成。材料:清洁级雄性SD大鼠40只,体质量200～250g;S-腺苷蛋氨酸,KATP通道阻断剂格列苯脲为Sigma公司产品。方法:40只大鼠随机被分为6组:①对照组6只,注射人工脑脊液。②S-腺苷蛋氨酸低剂量组6只注射S-腺苷蛋氨酸5μmol、中剂量组5只注射S-腺苷蛋氨酸10μmol、高剂量组7只注射S-腺苷蛋氨酸20μmol。③预先注射人工脑脊液8只或格列苯脲格列苯脲8只,40min后注射10μmolS-腺苷蛋氨酸。将大鼠固定于立体定位仪,进行侧脑室注射。主要观察指标:①侧脑室注射不同剂量S-腺苷蛋氨酸后对血压及心率的影响。②侧脑室注射KATP通道阻断剂格列苯脲对侧脑室注射S-腺苷蛋氨酸中枢心血管效应的影响。结果:侧脑室注射S-腺苷蛋氨酸能够显著降低麻醉大鼠的血压,减慢大鼠的心率。侧脑室注射人工脑脊液不影响麻醉大鼠的血压和心率。格列苯脲预处理能显著减弱侧脑室10μmolS-腺苷蛋氨酸产生的降低血压效应,与人工脑脊液预处理组比较差异有显著性意义(P<0.05),格列苯脲+S-腺苷蛋氨酸组和对照组比较差异无显著性意义(P>0.05)。结论:侧脑室注射S-腺苷蛋氨酸增加内源性硫化氢产生的中枢性降低血压、减慢心率的作用可能与KATP通道开放有关。

关键词：硫化氢 KATP 通道大鼠血压心率

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5-HT_(2C)受体对帕金森病模型大鼠外侧缰核谷氨酸能神经元电活动的影响

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陕西师范大学学报（自然科学版） 2016年第4期44卷 70-76页

作者：韩玲娜王春雷刘小静长治医学院生理学教研室山西长治046000 长治医学院生物医学工程系山西长治046000 西安交通大学第一附属医院陕西西安710061

为探讨帕金森病(PD)模型大鼠外侧缰核(LHb)中谷氨酸能神经元的电活动变化及其对5-羟色胺2C(5-HT_(2C))受体刺激的反应,阐明LHb和5-HT_(2C)受体在PD神经生物学机制中发挥的作用,通过6-羟多巴胺(6-OHDA)损毁单侧黑质致密部(substantia nig... 详细信息

为探讨帕金森病(PD)模型大鼠外侧缰核(LHb)中谷氨酸能神经元的电活动变化及其对5-羟色胺2C(5-HT_(2C))受体刺激的反应,阐明LHb和5-HT_(2C)受体在PD神经生物学机制中发挥的作用,通过6-羟多巴胺(6-OHDA)损毁单侧黑质致密部(substantia nigra pars compacta,SNc)建立PD模型,采用细胞外记录的方法,观察假手术组与单侧SNc损毁组大鼠LHb中谷氨酸能神经元的电活动。结果显示:与假手术组大鼠相比,损毁组大鼠LHb中谷氨酸能神经元的电活动增强,表现为爆发式放电活动增强(P<0.05);LHb中局部注射5-HT_(2C)受体激动剂Ro60-0175后,两组大鼠的神经元放电频率虽均升高(P<0.05),但损毁组大鼠LHb中谷氨酸能神经元放电频率升高持续时间显著长于假手术组,且给药前后神经元的放电形式更趋向于爆发式活动(P<0.05),变异系数明显升高(P<0.05)。结果提示单侧SNc损毁使LHb中谷氨酸能神经元爆发式电活动增强,可能与PD相关抑郁行为发生有关,5-HT_(2C)受体参与了对LHb中谷氨酸能神经元电活动的调节。

关键词：帕金森病外侧缰核谷氨酸能神经元 5-HT2C受体

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结核分枝杆菌Rv1733c蛋白的生物信息学分析

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中国病原生物学杂志 2021年第3期16卷 274-281页

作者：刘静吴芳张杰董江涛柳小玲吴江东章乐赵海军张万江石河子大学医学院病理生理学教研室/"新疆地方与民族高发病"教育部重点实验室新疆石河子832002 石河子大学医学院第一附属医院急诊外科石河子大学医学院第一附属医院神经外科石河子大学医学院第一附属医院检验科

目的应用生物信息学软件预测分析结核分枝杆菌潜伏感染相关蛋白Rv1733c的结构和功能。方法采用生物信息学软件ORF Finder、Interproscan、SOSUI、Protpapram、ProtScale、Signal IP、Tmpred、TMHMM、NetNGlyc、NetPhos 3.1 Servera、PSORT、WoLF PSORT、TargetP-2.0-CBS、NLStradamus、SOMPA、IEDB、SYFPEITHI、RANKPEP、NetMHCIIpan、BLAST、STRING等对结核分枝杆菌Rv1733c蛋白的理化性质、亲疏水性、信号肽、跨膜区、信号肽、糖基化及磷酸化位点、亚细胞定位、二级结构、B细胞与T细胞抗原表位以及蛋白质的相互作用进行预测分析。结果Rv1733c蛋白由210个氨基酸组成,分子式为C_(988)H_(1620)N_(298)O_(289)S_(5),原子总数3200,其编码基因全长633 bp,等电点10.31,不稳定性指数34.84,脂肪族氨基酸指数102.76,平均疏水性0.14。该蛋白有跨膜区无信号肽,有2个糖基化位点和13个磷酸化位点。该蛋白二级结构以α-螺旋(占41.90%)为主,结构较松散。其亚细胞定位于细胞质,非分泌蛋白,属于稳定的疏水性蛋白。Rv1733c蛋白含有7个B细胞抗原表位,多个T细胞表位。其互作蛋白分别为Rv2628、Rv1734c、Rv2627c、Rv0079、Rv1733c、hrp1、esxA,并参与多种生物学过程。结论生物信息学分析Rv1733c为稳定疏水性胞浆蛋白,含有多个T、B细胞抗原表位,能够磷酸化并与多种蛋白相互作用,可作为抗结核多肽疫苗的候选蛋白。

关键词：结核分枝杆菌 Rv1733c 生物信息学结构

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TSG101在食管癌、胃癌及结直肠癌中的表达

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肿瘤防治研究 2006年第6期33卷 433-435页

作者：陈艳宇曾子华郑佩娥李红方力郭莉康小玲蒋光愉暨南大学医学院病理学教研室广州510632 暨南大学第一附属医院(广州市华侨医院)病理科暨南大学第四附属医院(广州市红十字会医院)病理科

目的探讨TSG101在人消化道恶性上皮性肿瘤中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学方法检测TSG101在食管癌、胃癌及结直肠癌石蜡包埋组织中的表达。结果TSG101蛋白在25例食管癌、32例胃癌及40例结直肠癌中表达阳性率分别为52.0%(13/25),... 详细信息

目的探讨TSG101在人消化道恶性上皮性肿瘤中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学方法检测TSG101在食管癌、胃癌及结直肠癌石蜡包埋组织中的表达。结果TSG101蛋白在25例食管癌、32例胃癌及40例结直肠癌中表达阳性率分别为52.0%(13/25),28.1%(9/32),62.5%(25/40),三组之间差异无显著性;各组TSG101蛋白表达率随着肿瘤级别的增高而降低。结论TSG101的表达与人消化道恶性上皮性肿瘤的分化程度有关,其表达率与肿瘤级别呈负相关。

关键词： TSG101 食管肿瘤胃肿瘤结肠直肠肿瘤免疫组织化学

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雌激素减轻H_2O_2诱导PC12细胞凋亡

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基础医学与临床 2008年第8期28卷 850-854页

作者：张梅李卫冯鉴强广州医学院广州蛇毒研究所广东广州510082 暨南大学第一附属医院脑外科广东广州510630 中山大学中山医学院生理教研室广东广州510080

目的观察雌激素对H2O2诱导细胞凋亡的作用,探讨雌激素保护作用机制。方法在PC12细胞建立H2O2诱导细胞凋亡的实验模型。用MTT法检测细胞存活率,比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)活性,Hoechst染色检测细胞凋亡,碘化丙啶(PI)染色流式细胞术检测... 详细信息

目的观察雌激素对H2O2诱导细胞凋亡的作用,探讨雌激素保护作用机制。方法在PC12细胞建立H2O2诱导细胞凋亡的实验模型。用MTT法检测细胞存活率,比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)活性,Hoechst染色检测细胞凋亡,碘化丙啶(PI)染色流式细胞术检测细胞凋亡率,比色法测定caspase-3活性。结果H2O2明显降低PC12细胞的存活率,使LDH释放增加,促进细胞凋亡,并能明显地升高caspase-3的活性。雌激素能显著地减轻上述变化。结论雌激素对抗H2O2诱导的细胞凋亡,抑制caspase-3的激活是其细胞保护机制之一。

关键词：雌激素过氧化氢凋亡 caspase-3

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钙激活氯通道TMEM16A在大鼠心房和心室中的表达差异

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中国全科医学 2016年第36期19卷 4495-4498页

作者：张爱梅姜晓霞陈鑫官晓筠万慧娟李丽马克涛司军强石河子大学医学院生理学教研室新疆地方与民族高发病教育部重点实验室新疆石河子市832002 石河子大学医学院第一附属医院

目的探究钙激活氯通道(Ca CCs)TMEM16A在大鼠心房和心室组织中的表达情况,为临床治疗心肌缺血、心律失常以及心力衰竭等疾病提供新的治疗靶点。方法 2014年10月—2015年9月,将18只清洁级SpragueDawley大鼠适应性饲养1周,采用10%水合氯... 详细信息

目的探究钙激活氯通道(Ca CCs)TMEM16A在大鼠心房和心室组织中的表达情况,为临床治疗心肌缺血、心律失常以及心力衰竭等疾病提供新的治疗靶点。方法 2014年10月—2015年9月,将18只清洁级SpragueDawley大鼠适应性饲养1周,采用10%水合氯醛溶液腹腔注射麻醉后取心脏,分离心房和心室组织进行实验。采用Western blotting法和实时荧光定量反转录PCR(RT-q PCR)法分别检测大鼠心房和心室组织中TMEM16A及其mRNA水平。结果大鼠心房和心室组织TMEM16A水平分别为(0.46±0.02)和(0.33±0.03),心房和心室组织TMEM16A mRNA水平分别为(3.55±0.17)和(1.00±0.03),大鼠心房组织中TMEM16A及其mRNA水平高于心室组织(P<0.01)。结论 Ca CCs TMEM16A在大鼠心房和心室组织中均有表达,其在心房组织中的水平高于心室组织。

关键词： TMEM16A 钙激活氯通道心房心室

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生物信息学预测与肝细胞肝癌患者预后相关的免疫相关基因

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细胞与分子免疫学杂志 2022年第9期38卷 769-775页

作者：席子涵田济铭张玄黄启超陶开山空军军医大学第一附属医院肝胆外科陕西西安710032 兰州大学第一临床医学院妇产科甘肃兰州730000 空军军医大学基础医学院生理与病理生理学教研室陕西西安710032

目的通过生物信息学分析预测肝细胞肝癌(HCC)患者预后免疫相关基因并建立预后预测模型。方法通过差异分析鉴定HCC组织中的免疫相关基因,使用单因素、多因素比例风险回归模型(Cox)、套索算法(LASSO)建立风险预后预测模型。使用C指数、受... 详细信息

目的通过生物信息学分析预测肝细胞肝癌(HCC)患者预后免疫相关基因并建立预后预测模型。方法通过差异分析鉴定HCC组织中的免疫相关基因,使用单因素、多因素比例风险回归模型(Cox)、套索算法(LASSO)建立风险预后预测模型。使用C指数、受试者工作特征(ROC)曲线、校准曲线和决策曲线评价预后模型的预测效能。此外,将风险评分用于患者分层进而评估不同风险水平患者的预后差异。结果通过生物信息学分析,发现HCC患者至少存在1403个免疫相关基因,主要集中在免疫反应、适应性免疫反应、免疫球蛋白产生等生物过程以及细胞因子相互作用、趋化因子信号通路和同种异体移植排斥等通路。单因素Cox分析发现,53个免疫相关基因与预后相关,进一步通过LASSO和多因素Cox回归分析筛选出8个预后免疫相关基因,包括长链非编码RNA AC125238.1、细胞色素P450氧化酶1A2(CYP1A2)、纤胶凝蛋白3(FCN3)、肝癌衍生生长因子样蛋白1(HDGFL1)、脂质运载蛋白2(LCN2)、线粒体编码的细胞色素C氧化酶Ⅱ假基因12(MTCO2P12)、肽基精氨酸脱亚氨酶3(PADI3)和G蛋白信号调节因子16(RGS16),同时建立了以风险评分为主的预后列线图。ROC曲线、校准曲线和决策曲线证实该模型具有良好的区分度、准确度和临床价值。此外,通过分层分析表明,风险评分较高的患者具有较差的预后。结论本研究建立了一个基于8个免疫相关基因的预后列线图,有望成为预测HCC患者预后的可靠工具。

关键词：肝细胞肝癌免疫相关基因列线图预后

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原发性高血压患者血浆ghrelin水平的改变及其影响因素

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中山大学学报（医学科学版） 2011年第5期32卷 606-611页

作者：许志威张媛媛陶军吴伟康蓝涛华中山大学中山医学院病理生理学教研室广东广州510080 中山大学第一附属医院高血压血管病科广东广州510080

【目的】研究原发性高血压患者血浆生长激素促分泌素受体(GHSR)的内源性配体ghrelin水平的改变及抗高血压药物治疗对血浆ghrelin水平的影响。【方法】入选41例健康志愿者作为对照组,37例原发性高血压患者并实施降压治疗,采用酶联免疫法... 详细信息

【目的】研究原发性高血压患者血浆生长激素促分泌素受体(GHSR)的内源性配体ghrelin水平的改变及抗高血压药物治疗对血浆ghrelin水平的影响。【方法】入选41例健康志愿者作为对照组,37例原发性高血压患者并实施降压治疗,采用酶联免疫法测定健康对照组和原发性高血压患者治疗前后血浆ghrelin水平及其它内皮相关指标,并分析血浆ghrelin与血压(BP)、体质量指数(BMI)、腰围、腰臀比、血脂、空腹血糖、同型半胱氨酸(Hcy)、内皮素(ET-1)、NO、vWF之间的关系。【结果】原发性高血压患者血浆ghrelin水平较健康对照组明显升高(P<0.01),而血浆Hcy、NO水平与对照组比较无明显差异(P>0.05)。该组经降压治疗9个月后患者BP、BMI、血脂及血浆ghrelin、ET-1、vWF水平均降低(P<0.01),且血浆Hcy、NO水平无显著变化(P>0.05)。相关性分析表明血浆ghrelin水平与ET-1呈显著正相关(r=0.37,P<0.01),而与血糖、BMI呈负相关(r=-0.29,P<0.01;r=-0.26,P<0.05)。多元线性逐步回归分析提示ET-1是影响血浆ghrelin水平的独立相关因素。【结论】高血压患者血浆ghrelin水平的显著升高可能与高血压患者血浆中高水平的ET-1刺激了机体自身的ghrelin的代偿分泌有关。

关键词： ghrelin 原发性高血压血管内皮内皮素

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