为探讨帕金森病(PD)模型大鼠外侧缰核(LHb)中谷氨酸能神经元的电活动变化及其对5-羟色胺2C(5-HT_(2C))受体刺激的反应,阐明LHb和5-HT_(2C)受体在PD神经生物学机制中发挥的作用,通过6-羟多巴胺(6-OHDA)损毁单侧黑质致密部(substantia nigra pars compacta,SNc)建立PD模型,采用细胞外记录的方法,观察假手术组与单侧SNc损毁组大鼠LHb中谷氨酸能神经元的电活动。结果显示:与假手术组大鼠相比,损毁组大鼠LHb中谷氨酸能神经元的电活动增强,表现为爆发式放电活动增强(P<0.05);LHb中局部注射5-HT_(2C)受体激动剂Ro60-0175后,两组大鼠的神经元放电频率虽均升高(P<0.05),但损毁组大鼠LHb中谷氨酸能神经元放电频率升高持续时间显著长于假手术组,且给药前后神经元的放电形式更趋向于爆发式活动(P<0.05),变异系数明显升高(P<0.05)。结果提示单侧SNc损毁使LHb中谷氨酸能神经元爆发式电活动增强,可能与PD相关抑郁行为发生有关,5-HT_(2C)受体参与了对LHb中谷氨酸能神经元电活动的调节。
目的研究茶多酚（TP）对心脏骤停（CA）后心肺复苏（CPR）大鼠脑神经细胞凋亡的影响。方法健康SD大鼠随机分为假手术（SH）组、生理盐水（NS）组、茶多酚（TP）组，除SH组外，其他组均经食道交流电刺激诱发心室颤动，5min后行CPR，待自主循环恢复（ROSC）后即刻给予TP或生理盐水，ROSC后12、24、48、72h取各组大鼠的皮层和海马。分别检测各时间点原位末端转移酶标记技术（TdT—mediated dUTP nick end labeling）和caspase3荧光密度及caspase12的Westernblotting表达。结果TP组和NS组72h时TUNEL和caspase3荧光密度均大于SH组（P〈0．05），而TP组Tunnel和caspase3荧光密度均小于Ns组（P〈0．05）。与Ns组和SH组比较，TP组48、72hcaspase12表达明显减少（P〈0．05），NS组的表达高于SH组（P〈0．05）。结论TP可抑制心肺复苏后缺血再灌注引起的神经细胞凋亡，与其降低caspase12和caspase3的激活有关。
目的构建细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)转化生长因子βⅡ型受体胞外域(Extracellular Domain of Transforming Growth Factor beta type Ⅱ receptor of Eg,EgTβRⅡ-E)原核表达载体,诱导表达融合蛋白并制备其特异性抗体。方...
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目的构建细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)转化生长因子βⅡ型受体胞外域(Extracellular Domain of Transforming Growth Factor beta type Ⅱ receptor of Eg,EgTβRⅡ-E)原核表达载体,诱导表达融合蛋白并制备其特异性抗体。方法采集羊源Eg原头蚴,Trizol法提取总RNA,RT-PCR扩增EgTβRⅡ-E基因,构建pET28a-EgTβRⅡ-E原核表达载体,PCR、限制性内切酶双酶切和测序鉴定正确的阳性质粒转入***感受态细胞,IPTG诱导EgTβRⅡ-E融合蛋白表达并免疫小鼠,制备抗血清。结果成功构建pET28a-EgTβRⅡ-E原核表达载体,经0.6mmol/L IPTG诱导表达18ku的EgTβRⅡ-E融合蛋白。用融合蛋白免疫小鼠,获得高效价(1∶256 000抗血清)。结论制备的EgTβRⅡ-E融合蛋白具有抗原性,免疫小鼠获得高效价的抗血清,为研究EgTβRⅡ的生物学功能奠定了基础。
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