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第七次全国中西医结合基础理论研究学术研讨会

作者：刘吉勇朱惠斌陈懿王国佐葛金文湖南中医药大学病理生理学实验室湖南长沙 410208 湖南中医药大学第一附属医院检验科湖南长沙 410208 湖南中医药大学基础医学院生理学教研室湖南长沙 410208 湖南中医药大学中西医结合学院湖南长沙 410208 湖南中医药大学科技处湖南长沙 410208

目的探讨脑泰方(NTF)对家兔动脉粥样硬化的治疗作用。方法健康日本大白耳兔96只。随机分为空白对照组(CG)、模型组(MG)、降脂宁颗粒组(JG)、阿托伐他汀组(AG)、脑泰方低剂量组(LNG)、脑泰方中剂量组(MNG)、脑泰方高剂量组(HNG)。通过... 详细信息

目的探讨脑泰方(NTF)对家兔动脉粥样硬化的治疗作用。方法健康日本大白耳兔96只。随机分为空白对照组(CG)、模型组(MG)、降脂宁颗粒组(JG)、阿托伐他汀组(AG)、脑泰方低剂量组(LNG)、脑泰方中剂量组(MNG)、脑泰方高剂量组(HNG)。通过从兔耳缘静脉注射牛血清白蛋白进行血管内皮免疫刺激及高脂饲料喂养方法,复制兔动脉粥样硬化模型。连续灌胃1月。测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量,计算主动脉粥样斑块厚度及面积,镜下观察主动脉病理形态学变化。结果与CG组比较,MG组、JG组、AG组、LNG组、MNG组、HNG组的TC、HDL-C、LDL-C含量均有升高,斑块厚度增高及面积增大(P＜0.01);与MG组比较,JG组、AG组、LNG组、MNG组、HNG组TC、HDL-C、LDL-C有明显下降,斑块厚度及面积均有所下调(P＜0.01)。结论脑泰方对动脉粥样硬化有明显的治疗作用,其机制有待进一步探讨。

关键词：脑泰方动脉粥样硬化血脂形态学血管形态学动物实验

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B细胞非霍奇金淋巴瘤患者TCR ζ基因的表达特点

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肿瘤防治研究 2010年第5期37卷 547-550页

作者：李菊香陈少华杨力建林春兰李扬秋暨南大学附属第一医院临床医学检验中心广州510632 暨南大学医学院血液病研究所暨南大学医学院生化教研室暨南大学再生医学教育部重点实验室

目的分析B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)患者外周血中T细胞信号转导分子TCRζ基因的表达特点。方法采用SYBRGreenⅠ实时定量RT-PCR和相对定量分析法检测17例B-NHL患者外周血单个核细胞(PBMCs)中TCRζ基因的表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M... 详细信息

目的分析B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)患者外周血中T细胞信号转导分子TCRζ基因的表达特点。方法采用SYBRGreenⅠ实时定量RT-PCR和相对定量分析法检测17例B-NHL患者外周血单个核细胞(PBMCs)中TCRζ基因的表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,采用相对定量公式:2-△Ct×100%,计算TCRζ基因的相对mRNA表达量,17例健康成人作为对照。结果全部B-NHL样本均全部表达TCRζ基因,但其表达水平显著低于对照组(P=0.000),健康人PBMCs的TCRζ基因mRNA的表达水平为B-NHL患者的3.26倍。B-NHL患者TCRζ基因表达水平与患者的年龄无相关性。结论 B-NHL患者中TCRζ基因的mRNA表达水平明显下调,可能是其细胞免疫功能缺陷的原因之一。

关键词： TCRζ基因非霍奇金淋巴瘤实时定量RT-PCR

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姜黄素对TNF-α损伤大鼠海马神经元的功能性保护作用及机制

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中国病理生理杂志 2010年第7期26卷 1390-1394页

作者：郭鲁燕涂荣波董军陆大祥潘锐暨南大学医学院病理生理教研室国家中医药管理局重点实验室暨大港大脑功能与健康联合室暨南大学第一附属医院骨科广东广州510632

目的:观察姜黄素对TNF-α损伤大鼠海马神经元的功能性保护作用并探讨其机制。方法:应用离体脑片记录技术,记录大鼠海马CA1区的兴奋性突触后电位(EPSP),给予Schaffer侧支高频刺激(HFS)诱发长时程增强(LTP),观察不同药物处理组EPSP起始斜... 详细信息

目的:观察姜黄素对TNF-α损伤大鼠海马神经元的功能性保护作用并探讨其机制。方法:应用离体脑片记录技术,记录大鼠海马CA1区的兴奋性突触后电位(EPSP),给予Schaffer侧支高频刺激(HFS)诱发长时程增强(LTP),观察不同药物处理组EPSP起始斜率的变化情况。结果:与对照组相比,TNF-α和NMDA(N-甲基D-天冬氨酸)对大鼠海马脑片LTP产生明显的抑制作用(P<0.05);而姜黄素可以部分拮抗TNF-α和NMDA对海马脑片LTP的抑制作用,与对照组相比无显著差异(P>0.05);TNF-α、姜黄素和NMDA对大鼠海马神经元的基础突触传递没有显著影响。结论:姜黄素对TNF-α损伤的大鼠海马神经元有功能性保护作用,其机制可能是姜黄素部分拮抗TNF-α诱导的神经元细胞膜上的NMDA受体过度激活,维持神经元的长时程增强。

关键词： HIV-1相关性痴呆姜黄素肿瘤坏死因子 N-甲基-D-天冬氨酸

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脑淋巴引流阻滞对缺血大鼠脑组织谷氨酸、Ca^(2+)含量和NMDAR1表达的影响

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神经解剖学杂志 2010年第4期26卷 384-390页

作者：司金超范天黎夏作理许予明郑州大学医学院生理教研室郑州450052 郑州大学医学院药理教研室郑州450052 山东大学医学院生理研究所济南251012 郑州大学第一附属医院神经内科郑州450052

目的:探讨脑梗塞后给予大鼠颈淋巴管阻塞对缺血侧大脑皮质脑含水量、Ca2+和谷氨酸含量、脑梗塞体积以及N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NMDAR1)表达水平等的影响。方法:用线栓法复制大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,以及行大鼠大脑中动脉阻塞15mi... 详细信息

目的:探讨脑梗塞后给予大鼠颈淋巴管阻塞对缺血侧大脑皮质脑含水量、Ca2+和谷氨酸含量、脑梗塞体积以及N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NMDAR1)表达水平等的影响。方法:用线栓法复制大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,以及行大鼠大脑中动脉阻塞15min后摘除双侧颌下腺的颈浅和颈深淋巴结,制成脑梗塞后颈淋巴管阻塞(MCAO+CLB)模型,检测缺血侧大脑皮质脑含水量、Ca2+和谷氨酸含量、脑梗塞体积以及NMDAR1mRNA表达水平和免疫活性的变化。结果:在不同的时间点,MCAO+CLB组大鼠上述各指标要比MCAO组明显升高(P<0.05)。结论:颈淋巴管阻塞通过提高脑含水量、Ca2+和谷氨酸含量、脑梗塞体积以及上调NMDAR1表达水平而加重脑梗塞。

关键词：大脑中动脉阻塞颈淋巴管阻塞 Ca2+ 谷氨酸 N-甲基D-天冬氨酸受体1 大鼠

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同型半胱氨酸对血管内皮细胞骨架与内皮细胞功能的影响

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临床心血管病杂志 2010年第11期26卷 859-863页

作者：彭红艳常青唐海兰李自成武汉科技大学附属天佑医院超声影像科武汉430064 暨南大学医学院组胚教研室暨南大学实验技术中心暨南大学第一临床学院心内科

目的:通过动态观察同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)作用后的血管内皮细胞功能的变化,以及对内皮细胞骨架肌动蛋白G-actin和F-actin的定量分析,探讨骨架肌动蛋白在Hcy损伤内皮中的作用及机制。方法:将体外培养的人脐静脉内皮细胞株(ECV-3... 详细信息

目的:通过动态观察同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)作用后的血管内皮细胞功能的变化,以及对内皮细胞骨架肌动蛋白G-actin和F-actin的定量分析,探讨骨架肌动蛋白在Hcy损伤内皮中的作用及机制。方法:将体外培养的人脐静脉内皮细胞株(ECV-304)分为正常对照组、低剂量Hcy组(0.1mmol/L)、中剂量Hcy组(0.5mmol/L)和高剂量Hcy组(1.0mmol/L),观察各组细胞培养24h时其细胞骨架和相关功能的变化;中剂量Hcy组及高剂量Hcy组还观察了6h、12h时的相应变化。分别采用硝酸还原酶法、硫代巴比妥酸法检测各组条件培养基中一氧化氮(NO)、脂质过氧化代谢产物丙二醛(MDA)的含量。用Rhodamine-Phalloidin标记纤维状肌动蛋白(F-actin),Alexa Flour488-DnaseⅠ标记球状肌动蛋白单体(G-actin),激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)检测内皮细胞骨架G-actin、F-actin含量,并计算G/F比值。结果:随着Hcy作用时间的延长或剂量的增大,NO含量总体呈下降趋势,而MDA含量增高;G-actin、F-actin总体含量及G/F比值上升,并呈一定的时间、剂量相关性。结论:Hcy可通过改变骨架蛋白G-actin和F-actin含量,以及G/F比值引致内皮细胞功能的损伤,这也可能是其诱导动脉粥样硬化早期变化的重要机制之一。

关键词：细胞骨架内皮,血管同型半胱氨酸肌动蛋白定量分析

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参芪扶正注射液对血液恶性肿瘤化疗患者造血功能和免疫功能的影响

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中国中西医结合杂志 2010年第2期30卷 205-207页

作者：朱小玉张祥忠钟雪云林旭滨陈运贤中山大学附属第一医院血液内科广州510080 安徽医科大学附属省立医院血液内科合肥231000 暨南大学医学院病理教研室中山大学附属肿瘤医院化疗科

目的研究参芪扶正注射液对血液系统恶性肿瘤化疗患者造血功能和免疫功能的影响。方法80例均处于初治诱导缓解治疗阶段的血液肿瘤患者,分为治疗组和对照组,治疗组在化疗的同时给予参芪扶正注射液250mL/(g.d),共14天,对照组单用化疗,两组... 详细信息

目的研究参芪扶正注射液对血液系统恶性肿瘤化疗患者造血功能和免疫功能的影响。方法80例均处于初治诱导缓解治疗阶段的血液肿瘤患者,分为治疗组和对照组,治疗组在化疗的同时给予参芪扶正注射液250mL/(g.d),共14天,对照组单用化疗,两组其他支持治疗相同。观察两组化疗后缓解率,化疗前后血常规、T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD4+/CD8+)和B淋巴细胞(CD3-CD1+9)的水平。结果化疗后缓解率治疗组[90.0%(36/40)]与对照组[82.5%(33/40)]比较,差异无统计学意义(P>0.05);化疗后治疗组外周血白细胞计数和血红蛋白均高于对照组(P<0.05);CD3+、CD4+及CD4+/CD8+水平均明显高于对照组(P<0.05),CD3-CD1+9两组比较差异无统计学意义。结论参芪扶正注射液能减轻化疗对血液肿瘤患者骨髓造血功能的抑制,并能促进化疗患者骨髓造血功能的恢复;提高化疗患者的细胞免疫功能;改善血液肿瘤化疗患者的生活质量。

关键词：参芪扶正注射液血液肿瘤化疗造血功能免疫功能

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DNA聚合酶β靶向siRNA真核表达载体的构建和鉴定

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郑州大学学报（医学版） 2010年第6期45卷 999-1001页

作者：赵春临王志举樊红琨赵国强董子明郑州大学第一附属医院普外科郑州450052 郑州大学基础医学院生理学教研室郑州450001 郑州大学基础医学院病理生理学教研室郑州450001

目的:构建DNA聚合酶β(polβ)靶向的小干扰RNA(siRNA)真核表达载体。方法:根据GenBank中人DNApolβ基因(M13140)的全长序列,利用设计分析软件设计2个DNApolβ靶向发卡样siRNA结构,退火后形成双链,克隆入表达载体pslience2.0-GFP,得到重... 详细信息

目的:构建DNA聚合酶β(polβ)靶向的小干扰RNA(siRNA)真核表达载体。方法:根据GenBank中人DNApolβ基因(M13140)的全长序列,利用设计分析软件设计2个DNApolβ靶向发卡样siRNA结构,退火后形成双链,克隆入表达载体pslience2.0-GFP,得到重组质粒pslience2.0-GFP-sipolβ1和pslience2.0-GFP-sipolβ2。通过限制性核酸内切酶酶切和DNA序列测定对重组质粒进行鉴定。结果:经酶切鉴定寡核苷酸已成功插入表达载体pslience2.0-GFP,DNA序列分析表明插入片段序列与合成的siRNA序列相同。结论:成功构建了靶向DNApolβsiRNA真核表达载体。

关键词： DNA聚合酶β RNA干扰真核表达载体

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不同时限单眼斜视大鼠的视觉诱发电位观察

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立体定向和功能性神经外科杂志 2010年第3期23卷 164-166页

作者：刘珏陈剑周清黄佳王彦平暨南大学附属第一医院眼科广州510630 暨南大学医学院病理生理教研室广州510630

目的探讨视觉发育可塑期内（P25,P35,P45）及可塑期后（P120）单眼斜视（monocular strabismus,MS）大鼠视觉系统的电生理学变化,为临床防治儿童斜视性弱视提供临床参考。方法将40只大鼠随机分为正常（N）和单眼斜视（MS）各4个不同时限... 详细信息

目的探讨视觉发育可塑期内（P25,P35,P45）及可塑期后（P120）单眼斜视（monocular strabismus,MS）大鼠视觉系统的电生理学变化,为临床防治儿童斜视性弱视提供临床参考。方法将40只大鼠随机分为正常（N）和单眼斜视（MS）各4个不同时限共8组。对视觉发育关键期[14~15]）前的幼龄大鼠制作单眼斜视动物模型。应用视觉诱发电位仪GT-2000NV（重庆国特医疗设备有限公司）检测正常发育（N）,发育可塑期内（P25,P35,P45）及可塑期后（P120）大鼠的闪光视觉诱发电位变化（flash visual evoked potential,F-VEP）。结果对侧健眼与正常组F-VEP各值比较无异;②各时限斜视眼与对侧健眼及斜视眼与正常组比较：N1P1、P1N2振幅在斜视眼表现较大幅下降,差异有统计学意义（P〈0.05）;③斜视眼F-VEP的下降从可塑期内较早时限（P25）开始,一直持续至可塑期后（P120）,各时限之间比较无明显统计学差异。结论视觉发育关键期（P14-P15）内的斜视（视觉异常）可导致大鼠发生弱视;单眼斜视大鼠斜视眼的视觉电生理在视觉发育可塑期内较早时限即表现出异常。

关键词：视觉发育单眼斜视斜视性弱视视觉诱发电位 F-VEP

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干细胞迁移机理的近场扫描光学显微术研究

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分析测试学报 2010年第6期29卷 548-552页

作者：陈家楠潘运龙丁晖覃莉蔡继业暨南大学生命科学技术学院生物纳米技术实验室广东广州510632 暨南大学附属第一医院普外科广东广州510632 暨南大学医学院组织胚胎学教研室广东广州510632

将内皮细胞生长因子(VEGF)置于甲基纤维素碟中形成VEGF的浓度梯度分布,并将人脐带间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)于此浓度梯度中培养,观察VEGF能否诱导MSCs定向迁移。应用近场扫描光学显微术(Near-field scanning optical m... 详细信息

将内皮细胞生长因子(VEGF)置于甲基纤维素碟中形成VEGF的浓度梯度分布,并将人脐带间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)于此浓度梯度中培养,观察VEGF能否诱导MSCs定向迁移。应用近场扫描光学显微术(Near-field scanning optical microscopy,NSOM)同时获取了VEGF诱导前后的MSCs的形貌和光学信息。结果表明,近场光学图观测到形貌图上所没有的黑色斑点,分析认为这些黑斑为细胞的黏着斑。近场光学图显示经过VEGF诱导后细胞的黏着斑数量明显增加。同时,对诱导前后干细胞的骨架蛋白进行免疫荧光标记并用共聚焦显微镜进行观察,结果表明细胞骨架由诱导前的无序状态转变为诱导后的有序状态,说明诱导后的干细胞处于迁移状态。光学超微结构图则显示了诱导后干细胞表面的光学细节比诱导前细胞大量增加,出现了大量直径约200 nm的光斑,这是由于细胞表面大量分泌黏附分子等蛋白分子引起的,这些结果为VEGF能够诱导MSCs进行定向迁移提供了实验依据和可视化证明。也表明NSOM不但能提供高分辨的光学分辨率,还可提供生物细胞精细结构的更深层次的光学信息。

关键词：近场光学显微镜间充质干细胞黏着斑

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蛋白酶激活受体激活对A549细胞IL-28和IL-29 mRNA表达的影响

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免疫学杂志 2010年第10期26卷 833-837,841页

作者：张慧云王海燕马文静何韶衡海南医学院病理生理学教研室海口571101 南京医科大学第一附属医院临床实验研究中心 210029

目的用蛋白酶和蛋白酶激活受体激动肽(PAR-AP)刺激A549细胞后检测细胞中白细胞介素IL-28和IL-29 mRNA表达情况以分析蛋白酶激活受体激活对人肺上皮细胞IL-28和IL-29基因表达的影响。方法用最佳工作浓度的凝血酶、胰蛋白酶、类胰蛋白酶... 详细信息

目的用蛋白酶和蛋白酶激活受体激动肽(PAR-AP)刺激A549细胞后检测细胞中白细胞介素IL-28和IL-29 mRNA表达情况以分析蛋白酶激活受体激活对人肺上皮细胞IL-28和IL-29基因表达的影响。方法用最佳工作浓度的凝血酶、胰蛋白酶、类胰蛋白酶及蛋白酶激活受体-1,2,3,4的激动肽刺激A549细胞后,分别在第2、8、16h收集细胞,用实时定量逆转录聚合酶链式反应(q-RT-PCR)方法分析A549细胞内IL-28和IL-29 mRNA表达。结果凝血酶作用A549后,细胞内IL-29 mRNA表达增强,高达对照组9.6倍;而细胞内IL-28 mRNA表达无明显变化。胰蛋白酶作用A549细胞后,细胞内IL-29和IL-28 mRNA表达增强,分别为对照组6.1倍和4.4倍。类胰蛋白酶作用A549细胞后,细胞内IL-29和IL-28 mRNA表达增强分别高达对照组的3.1倍和2.1倍。弹性蛋白酶作用A549细胞后,细胞内IL-29 mRNA表达增强高达对照组5.1倍而IL-28 mR-NA无明显变化。PAR-1AP(SFLLR)作用后,A549细胞内IL-29 mRNA表达增强为对照组1.7倍而IL-28 mRNA表达无明显变化。PAR-2AP(SLIGKV及tc-LIGRLO)作用后,A549细胞内IL-29和IL-28 mRNA表达增强分别为对照组4.9倍和2.4倍。PAR-3AP(TFRGAP)作用后,A549细胞内IL-29和IL-28 mRNA表达无明显变化。PAR-4AP(GYPGQV)作用后A549细胞内IL-29和IL-28 mRNA表达增强高达对照组4.1倍和5.5倍。结论 A549细胞蛋白酶激活受体的激活可以上调细胞内IL-29和IL-28 mRNA表达。

关键词：人肺上皮细胞癌A549 白细胞介素-29 白细胞介素-28 蛋白酶蛋白酶激活受体

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