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齐齐哈尔医学院学报 2016年第9期37卷 1127-1129页

作者：钟鸣骆建民王俐汕头大学医学院第一附属医院广东515041 汕头大学医学院病理生理学教研室

目的通过脂质体瞬时转染含MMP-9启动子荧光素报告基因质粒于人皮肤成纤维细胞,研究聚肌胞[poly（I：C）]对基质金属蛋白酶9（MMP-9）启动子活性影响。方法 PCR扩增克隆人MMP-9基因5＇侧翼序列（-1169~0）,经限制性内切酶Kpn I和Sma I酶... 详细信息

目的通过脂质体瞬时转染含MMP-9启动子荧光素报告基因质粒于人皮肤成纤维细胞,研究聚肌胞[poly（I：C）]对基质金属蛋白酶9（MMP-9）启动子活性影响。方法 PCR扩增克隆人MMP-9基因5＇侧翼序列（-1169~0）,经限制性内切酶Kpn I和Sma I酶切后,插入p GL3-Basic载体质粒中。重组质粒酶切、PCR和测序鉴定后,脂质体瞬时共转染p GL3-Basic-MMP-9-promoter重组质粒和pRL-TK内参质粒到原代人皮肤成纤维细胞中,给予不同浓度（0.1~10μg/ml）的poly（I：C）分别处理24 h,48h后,进行双荧光素酶检测。结果成功构建p GL3-Basic-MMP-9-promoter荧光素酶重组质粒。用poly（I：C）处理24 h,48 h后,明显抑制MMP-9启动子的活性（P〈0.01或0.001）。结论 Poly（I：C）可抑制人皮肤成纤维细胞中MMP-9基因启动子的活性,在转录水平下调MMP-9的表达。

关键词：人真皮成纤维细胞 MMP-9 荧光素酶报告基因聚肌胞

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丁基苯酞对帕金森模型小鼠中脑黑质多巴胺能神经元数及TH、TNF-α蛋白表达的影响

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中风与神经疾病杂志 2016年第3期33卷 245-247页

作者：耿海威马丽丽王欲立杨洋王占友聂莹雪开封市中心医院神经内科河南开封475000 中国医科大学第一附属医院神经内科辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院病理生理学教研室辽宁沈阳110001

目的研究丁基苯酞(dl-3n-butylphthalide,NBP)对由MPTP诱导的C57BL/6小鼠帕金森模型中脑黑质多巴胺能神经元数及TH、TNF-α蛋白表达的影响,进一步探讨其保护机制。方法 24只C57BL/6小鼠,随机分成3组:正常对照组,MPTP组,NBP治疗组。MPTP... 详细信息

目的研究丁基苯酞(dl-3n-butylphthalide,NBP)对由MPTP诱导的C57BL/6小鼠帕金森模型中脑黑质多巴胺能神经元数及TH、TNF-α蛋白表达的影响,进一步探讨其保护机制。方法 24只C57BL/6小鼠,随机分成3组:正常对照组,MPTP组,NBP治疗组。MPTP腹腔注射法制备帕金森模型,免疫组织化学法观察中脑黑质TH阳性神经元细胞数,蛋白质印迹法观察中脑黑质TH、TNF-α蛋白含量的变化。结果 (1)与正常对照组比较,MPTP组可见帕金森病小鼠中脑黑质TH阳性神经元明显减少(P<0.01);与MPTP组比较,NBP治疗组帕金森病小鼠中脑黑质TH阳性神经元数目明显增加(P<0.01);(2)与正常对照组比较,MPTP组帕金森病模型小鼠中脑黑质TH蛋白表达减少(P<0.01),而TNF-α蛋白表达增加(P<0.05);(3)与MPTP组比较,NBP治疗组帕金森病模型小鼠中脑黑质TH蛋白表达明显增加(P<0.01),而TNF-α蛋白表达减少(P<0.05)。结论丁基苯酞可能通过提高中脑黑质中TH的含量及减少TNF-α炎性介质表达发挥对MPTP所致C57BL/6小鼠帕金森模型的神经元保护作用。

关键词：丁基苯酞 MPTP TH TNF-α

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微课在病理生理学教学中的应用

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西北医学教育 2016年第5期24卷 769-770页

作者：王爽高捷郭玉芳赵妍王军西安医学院病理生理学教研室陕西西安710021 西安交通大学第一附属医院急诊科陕西西安710061

微课在高等医学教育中的作用目前还处于研究阶段,但作为传统教育模式的有力补充手段已经被越来越多地广泛应用。对于医学基础课中难度较大的病理生理学,传统教学方法的局限性明显。本文就微课在病理生理学教学上的优点进行探讨。

关键词：微课病理生理学教学

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siRNA干扰AT1R基因调控链脲佐菌素诱导NIT-1细胞凋亡的实验研究

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广东医学 2016年第11期37卷 1593-1597页

作者：莫丽雯梁杏欢邝晓聪李海滨李励蔡劲薇卢德成广西医科大学第一附属医院内分泌科南宁530021 广西医科大学病理生理学教研室南宁530021 中国人民解放军第三0三医院移植医学研究院南宁530021

目的用siRNA干扰技术沉默小鼠胰岛素瘤NIT-1细胞血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)基因,探讨其对链脲佐菌素(STZ)诱导的胰岛素瘤细胞凋亡的影响。方法针对小鼠AT1R基因,设计并合成3对siRNA序列,脂质体法转染至NIT-1细胞,荧光显微镜观察荧光强... 详细信息

目的用siRNA干扰技术沉默小鼠胰岛素瘤NIT-1细胞血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)基因,探讨其对链脲佐菌素(STZ)诱导的胰岛素瘤细胞凋亡的影响。方法针对小鼠AT1R基因,设计并合成3对siRNA序列,脂质体法转染至NIT-1细胞,荧光显微镜观察荧光强度检测转染效率,Real-time PCR检测AT1R mRNA表达量判断不同干扰序列及干扰时间的基因沉默效果;分4组:空白组不予任何干预,STZ组予5 mmo L/L STZ干预30 min,si-AT1R组予40 nmol/L si-AT1R转染24 h,si-AT1R+STZ组予40 nmo L/L si-AT1R转染24 h后5mmo L/L STZ干预30 min;Real-time PCR检测Caspase-3 mRNA表达量,Hoechst33342染色荧光显微镜和Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡率。结果 40 nmol/L siRNA转染的荧光强度最强,转染后AT1R mRNA表达量明显下降,si-AT1R-2转染24 h的沉默效果最佳(92.20%);Caspase-3 mRNA表达量:STZ组与空白组比增加了2.37倍(P<0.05),si-AT1R+STZ组与STZ组比减少了11.28%,但差异无统计学意义;细胞凋亡率:STZ组与空白组比增加了3.27倍(P<0.05),si-AT1R+STZ组与STZ组比减少了26.82%(P<0.05)。结论本研究建立了稳定的胰岛细胞AT1R基因沉默模型;RNA干扰沉默胰岛细胞AT1R基因可通过下调Caspase-3mRNA表达量降低STZ诱导的细胞凋亡率,提示AT1R介导了STZ诱导的胰岛细胞凋亡过程。

关键词： RNA干扰胰岛素瘤细胞细胞血管紧张素Ⅱ1型受体链脲佐菌素凋亡

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无花果水提取液对抑制肿瘤细胞增殖作用的初步研究

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新疆医科大学学报 2016年第1期39卷 42-47页

作者：周宁陈江涛于文燕新疆医科大学附属肿瘤医院消化内科乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院骨科中心乌鲁木齐830054 新疆医科大学病理生理学教研室乌鲁木齐830011

目的探讨无花果水提取液(fig extract,FE)对宫颈癌细胞细胞(Hella)及肝癌细胞(Hepg2)增殖的影响及其机制。方法采用人外周血的单核细胞系(Thp-1)作为Hella细胞对照组;HepG2细胞对照组为正常肝细胞(7702),细胞分别给予PBS处理和无花果水... 详细信息

目的探讨无花果水提取液(fig extract,FE)对宫颈癌细胞细胞(Hella)及肝癌细胞(Hepg2)增殖的影响及其机制。方法采用人外周血的单核细胞系(Thp-1)作为Hella细胞对照组;HepG2细胞对照组为正常肝细胞(7702),细胞分别给予PBS处理和无花果水提液处理;3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐法(MTT)检测不同浓度无花果提取液对细胞增殖的影响,荧光显微镜观察细胞形态改变,流式细胞术检测细胞凋亡变化。结果经无花果水提液处理后,Thp-1细胞细胞活性及形态无明显改变;随着提取液浓度的增加,Hella细胞细胞活性逐渐降低,细胞凋亡的数量逐渐增加,细胞固缩失去正常形态。无花果水提液对人肝癌细胞和正常肝细胞增殖均有抑制作用,随着剂量增加,增殖抑制作用增强,呈剂量效应关系(P=0.006),无花果水提液0.06 g/mL时,人肝癌细胞和正常肝细胞增殖率差异有统计学意义(P=0.021);无花果水提液处理肝癌细胞后,随着无花果水提液浓度增加凋亡细胞显著增加。当剂量<0.08 g/mL时对正常细胞以及肝癌细胞形态无明显影响,当剂量>0.08 g/mL时Hepg2细胞变形固缩,失去正常形态。结论无花果水提取液可能通过影响细胞凋亡而抑制肿瘤细胞增殖。

关键词：无花果宫颈癌细胞肝癌细胞细胞凋亡

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小檗碱降低高脂模型大鼠血脂及可能机制

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解剖科学进展 2016年第3期22卷 245-248页

作者：池志宏张莲芝王占友刘海波王雪梅张萍中国医科大学病理生理教研室沈阳110001 中国医科大学第一附属医院泌尿外科沈阳110001 中国医科大学附属口腔医院修复科沈阳110001 锦州医科大学组胚教研室辽宁锦州121000

目的研究小檗碱(BBr)对高脂模型大鼠血脂的影响及其可能机制。方法采用灌胃脂肪乳剂一个月的大鼠为高脂动物模型。实验分组:正常对照组;(B)模型组;(C)非诺贝特组(100mg/kg灌胃);(D)小檗碱低剂量组(50mg/kg);(E)小檗碱中剂量组(100mg/kg)... 详细信息

目的研究小檗碱(BBr)对高脂模型大鼠血脂的影响及其可能机制。方法采用灌胃脂肪乳剂一个月的大鼠为高脂动物模型。实验分组:正常对照组;(B)模型组;(C)非诺贝特组(100mg/kg灌胃);(D)小檗碱低剂量组(50mg/kg);(E)小檗碱中剂量组(100mg/kg);(F)小檗碱高剂量组(200mg/kg);(G)小檗碱注射组(3mg/kg)。全自动生化分析检测各组大鼠血脂变化;Western-blot检测各组大鼠肝脏PPARα、骨骼肌PPARδ和脂肪组织PPARγ水平;Western blot及RT-PCR技术检测大鼠小肠载脂蛋白apoB以及脂酰COA合成酶的表达变化。结果与模型组比较,3个剂量小檗碱口服组及小檗碱注射组大鼠血清总胆固醇(TC)以及甘油三酯(TG)水平明显下降,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和载脂蛋白AI(Apo AI)水平则明显上升。与模型组比较,非诺贝特组、小檗碱三个剂量口服组和小檗碱注射组大鼠肝组织PPARα表达水平明显上调,而骨骼肌PPARδ和脂肪组织PPARγ表达水平无明显差异。小檗碱中、高剂量灌胃组大鼠小肠脂酰CoA合成酶m RNA水平较模型组显著下降。结论小檗碱降低大鼠高血脂作用可能与降低脂代谢相关因子载脂蛋白apoB以及脂酰COA合成酶含量相关。

关键词：小檗碱血脂过氧化物酶体增殖物激活受体脂酰CoA合成酶大鼠

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泛素-蛋白酶体系统在心肌肥厚中的研究进展

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医学综述 2016年第17期22卷 3329-3333页

作者：鄢雯李囡刘立新王红霞李汇华首都医科大学燕京医学院生物化学教研室辽宁大连116044 首都医科大学燕京医学院形态教研室北京101300 首都医科大学基础医学院病理生理教研室北京100069 大连医科大学第一附属医院心血管研究所辽宁大连116044

泛素-蛋白酶体系统(UPS)是真核细胞内蛋白质降解的主要途径之一。UPS参与真核细胞的许多生物学功能(如炎症、细胞信号转导、转录调控以及细胞凋亡等)。心肌肥厚是导致多种心血管疾病发病率和病死率升高的独立危险因素之一。心肌肥厚的... 详细信息

泛素-蛋白酶体系统(UPS)是真核细胞内蛋白质降解的主要途径之一。UPS参与真核细胞的许多生物学功能(如炎症、细胞信号转导、转录调控以及细胞凋亡等)。心肌肥厚是导致多种心血管疾病发病率和病死率升高的独立危险因素之一。心肌肥厚的发生机制极其复杂,蛋白酶体可在心肌肥厚模型中被激活,而蛋白酶体抑制剂能阻止或逆转心肌肥厚。

关键词：心肌肥厚泛素-蛋白酶体系统蛋白酶体抑制剂

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代谢综合征合并哮喘患者TNF-α mRNA表达基因多态性的相关性分析

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贵州医药 2016年第1期40卷 25-27页

作者：巩雪俐马琦孙湛新疆医科大学基础医学院病理生理学教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院机能中心新疆乌鲁木齐830011

目的探讨代谢综合征(MS)合并哮喘患者TNF-αmRNA表达及其基因多态性分析。方法选取119例代谢综合征患者作为研究对象,其中合并哮喘的患者有47例(MS哮喘组)、单纯代谢综合症患者72例(单纯MS组),以同期健正常人群60例作为对照,比较各组间T... 详细信息

目的探讨代谢综合征(MS)合并哮喘患者TNF-αmRNA表达及其基因多态性分析。方法选取119例代谢综合征患者作为研究对象,其中合并哮喘的患者有47例(MS哮喘组)、单纯代谢综合症患者72例(单纯MS组),以同期健正常人群60例作为对照,比较各组间TNF-α-308位点基因多态性,并分析其与患者的代谢指标间的关系。结果 (1)病例组中GG、GA+AA等位基因G、A组间分布无显著差异。MS哮喘组患者的GA+AA基因型分布显著的高于对照组(P<0.05),单纯MS组与MS哮喘组及对照组间GG、GA+AA、G、A无显著差异。(2)MS哮喘组WHR、BMI、TG、LDL-C、FBG、HOMA-IR、FINS、CRP、TNF-ɑ、TNF-ɑmRNA水平均显著的高于单纯MS组患者,FEV1、FEV1/FVC均低于单纯MS组(P<0.05);其中,与单纯MS组相比,MS哮喘组GA+AA基因型患者的差异较MS哮喘组GG基因型患者更为显著。(3)TNF-ɑmRNA与WHR、BMI、TG、LDL-C、FBG、HOMA-IR、FINS、CRP水平呈显著的正相关、与FEV1、FEV1/FVC显著的负相关。结论 MS合并哮喘患者的代谢指标与单纯MS患者有显著的差异,可能与TNF-α-308位点A等位基因的携带、TNF-αmRNA表达有关。

关键词：代谢综合征哮喘肿瘤坏死因子-α 基因多态性

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利用基因芯片技术筛选食管癌细胞侵袭转移的相关分子靶标

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中国老年学杂志 2015年第8期35卷 2148-2152页

作者：张琪琪张志强温浩李秀娟新疆医科大学第一附属医院消化科新疆乌鲁木齐830054 新疆医科大学第一附属医院肝胆外科新疆医科大学病理生理学教研室

目的探讨应用基因芯片技术筛选食管癌侵袭转移相关基因的相关机制。方法利用Transwell侵袭小室技术建立具有不同侵袭转移潜能的人食管鳞癌Eca109和Eca109-T4细胞株;分别提取Eca109和Eca109-T4的总RNA,用转录Cy5和Cy3荧光标记成c DNA探针... 详细信息

目的探讨应用基因芯片技术筛选食管癌侵袭转移相关基因的相关机制。方法利用Transwell侵袭小室技术建立具有不同侵袭转移潜能的人食管鳞癌Eca109和Eca109-T4细胞株;分别提取Eca109和Eca109-T4的总RNA,用转录Cy5和Cy3荧光标记成c DNA探针,再与Affymetrix基因芯片杂交,杂交信号用GenechipScanner 3000扫描,SAM 3.0软件分析和处理数据;运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术对CXCR7、SDC2、HSP90α1、TNFRSF10D基因进行验证。结果筛选出Eca109和Eca109-T4差异基因有80个:与母系比较,在Eca109-T4中上调表达的基因有34个,下调表达的基因有46个。经qRT-PCR验证:CXCR7在Eca109-T4中的mRNA表达量(9.86±1.38)显著高于Eca109(6.04±1.88,P<0.05),SDC2在Eca109-T4中的mRNA表达量(0.07±0.006 7)显著高于Eca109(0.04±0.003 7,P<0.05),HSP90α1在Eca109-T4中的mRNA表达量(0.18±0.046 0)显著高于Eca109(0.05±0.009 8,P<0.05),TNFRSF10D在Eca109-T4中的mRNA表达量(0.009±0.000 6)与Eca109(0.005±0.004 0,P>0.05)无明显差异。结论基因芯片技术是一高效筛选食管癌侵袭转移相关基因的方法,CXCR7、SDC2、HSP90α1等基因可能与食管癌侵袭转移机制相关。

关键词：食管癌转移基因芯片差异基因

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Foxp3及NFAT1在再生障碍性贫血患儿中的检测及意义

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中国当代儿科杂志 2015年第3期17卷 258-261页

作者：曹祎明王西阁陈平焉文海赵晓明郑州市妇幼保健院儿科河南郑州450012 郑州大学第三附属医院小儿血液科河南郑州450052 郑州大学医学院病理生理教研室河南郑州450001 郑州大学第一附属医院小儿血液病实验室河南郑州450052

目的研究再生障碍性贫血(简称再障)患儿治疗前后外周血中Foxp3及NFAT1蛋白表达水平的变化,探讨其在再障发病中的作用。方法提取60例正常儿童(对照组)和68例治疗有效的再障患儿治疗前后外周血中的单个核细胞,采用免疫印迹法检测Foxp3、NF... 详细信息

目的研究再生障碍性贫血(简称再障)患儿治疗前后外周血中Foxp3及NFAT1蛋白表达水平的变化,探讨其在再障发病中的作用。方法提取60例正常儿童(对照组)和68例治疗有效的再障患儿治疗前后外周血中的单个核细胞,采用免疫印迹法检测Foxp3、NFAT1蛋白的表达,并分析Foxp3、NFAT1蛋白表达的相关性及其与外周血血红蛋白(Hb)、白细胞(WBC)及血小板(PLT)数量的相关性。结果再障组患儿治疗前(发病期)外周血中Foxp3、NFAT1蛋白的表达较对照组明显降低(P<0.05);治疗后(恢复期)的表达较发病期明显升高(P<0.05)。Foxp3与NFAT1蛋白的表达呈正相关(r=0.812,P<0.05)。再障组患儿治疗后恢复期的Foxp3和NFAT1蛋白表达水平均与外周血Hb、WBC及PLT数量呈正相关(P<0.05)。结论再障患儿外周血中Foxp3、NFAT1蛋白表达水平降低,提示其在再障的发病过程中起重要作用;外周血Foxp3、NFAT1蛋白表达水平在一定程度上可以提示病情的变化。

关键词：再生障碍性贫血 Foxp3 NFAT1 儿童

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