检索结果-内蒙古大学图书馆

中华实用诊断与治疗杂志 2010年第5期24卷 426-428,432页

作者：刘毅徐丽慧何贤辉孙建方中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所南京市210042 暨南大学生命科学技术学院生物工程研究所广州市510632 暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫实验中心广州市510632

目的:构建负载人恶性黑素瘤相关抗原gp100抗原肽的HLA-A*2402四聚体并进行鉴定,为分析gp100抗原肽诱发的特异性细胞免疫应答创造条件。方法:以羧基端融合生物素化酶BirA底物肽的HLA-A*2402重链胞外域融合蛋白、人β2-微球蛋白、gp100 VY... 详细信息

目的:构建负载人恶性黑素瘤相关抗原gp100抗原肽的HLA-A*2402四聚体并进行鉴定,为分析gp100抗原肽诱发的特异性细胞免疫应答创造条件。方法:以羧基端融合生物素化酶BirA底物肽的HLA-A*2402重链胞外域融合蛋白、人β2-微球蛋白、gp100 VYFFLPDHL抗原肽、PE-链亲和素为材料,制备HLA-A*2402/VYF四聚体;非还原SDS-PAGE鉴定四聚体四聚化程度;三色免疫荧光标记流式细胞术分析HLA-A*2402+健康志愿者外周血gp100特异性CD8+T细胞的频率。结果:HLA-A*2402/VYF四聚体形成率为83%,所制备的四聚体具有与HLA-A*2402+供者抗原特异性CD8+T细胞的结合活性,特异性CD8+T细胞的频率为外周血总CD8+T细胞的0.02%～0.06%。结论:成功制备HLA-A*2402/VYF四聚体并用于检测gp100特异性CD8+T细胞,为研究HLA-A*2402+黑素瘤患者免疫治疗的机制及疗效监测创造了条件。

关键词：恶性黑素细胞瘤 MHC四聚体 HLA-A^＊2402 gp100

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橙皮素对小鼠T淋巴细胞体外活化与增殖的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2009年第4期25卷 315-318页

作者：周玉英曾耀英黄秀艳宋兵暨南大学组织移植与免疫研究中心广东广州510632

目的：研究橙皮素（Hes）对小鼠T细胞体外活化和增殖的影响，并探讨其作用机制。方法：用ConA刺激小鼠淋巴结来源的淋巴细胞，以不同终浓度Hes与T细胞共培养，利用荧光标记抗体双染色结合流式细胞术（FCM），检测各药物浓度Hes对ConA诱... 详细信息

目的：研究橙皮素（Hes）对小鼠T细胞体外活化和增殖的影响，并探讨其作用机制。方法：用ConA刺激小鼠淋巴结来源的淋巴细胞，以不同终浓度Hes与T细胞共培养，利用荧光标记抗体双染色结合流式细胞术（FCM），检测各药物浓度Hes对ConA诱导的小鼠T细胞表达早期活化抗原CD69的作用；以酶标仪结合MTT比色法检测Hes药物的细胞毒性和对ConA诱导的小鼠淋巴结来源的淋巴细胞增殖的影响；以羧基荧光素乙酰乙酸（CFDA—SE）染色结合FCM检测Hes对ConA诱导的小鼠T细胞增殖的作用，并应用ModFit软件分析其增殖指数（PI）。结果：淋巴细胞的存活率说明0．2mT／LDMSO和25～75μmol／L范围内的Hes对小鼠T淋巴细胞无毒副作用；MTT法、CFDA—SE法、双抗体染色法检测Hes对ConA诱导的小鼠T淋巴细胞的增殖和活化结果均显示，终浓度为25、50、75μmol／L的Hes对ConA诱导的小鼠T淋巴细胞的增殖和活化均有抑制作用且呈剂量依赖关系。结论：有望通过进一步的研究将Hes发展为免疫抑制药物。

关键词：橙皮素 T淋巴细胞活化增殖

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Forskolin对小鼠T淋巴细胞体外活化和增殖的影响

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现代免疫学 2009年第1期29卷 19-24页

作者：宋兵曾耀英黄秀艳李林滕菲杨志姚满林暨南大学组织移植与免疫中心广州510632

通过研究Forskolin对刀豆蛋白A(ConA)刺激的小鼠体外CD3+T淋巴细胞活化、细胞因子(IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10和TNF-α及增殖的影响,初步探讨其免疫调节作用机制。无菌分离小鼠淋巴结并制备单个淋巴细胞悬液,与不同浓度的Forskolin孵育... 详细信息

通过研究Forskolin对刀豆蛋白A(ConA)刺激的小鼠体外CD3+T淋巴细胞活化、细胞因子(IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10和TNF-α及增殖的影响,初步探讨其免疫调节作用机制。无菌分离小鼠淋巴结并制备单个淋巴细胞悬液,与不同浓度的Forskolin孵育,用流式细胞术结合双色荧光抗体染色技术来检测CD3+T细胞中期、晚期活化标志CD25、CD71的表达水平;LuminexTM100检测晚期活化淋巴细胞培养上清中5种细胞因子的变化;羧基荧光素已酰已酸(CFDA-SE)染色技术结合流式细胞术和CELLQuest、ModFitLT软件,分析CD3+T细胞增殖情况。结果显示,终浓度为10-7、10-6、10-5mol/L的Forskolin均能降低CD3+T细胞中CD25、CD71的表达水平和平均荧光强度(mean fluorescence intensity,MFI),还能抑制IL-10、IL-2、TNF-α的产生和淋巴细胞的增殖,但能促进IFN-γ的产生,对IL-4的影响却不大。表明Forskolin在一定浓度范围内通过改变T淋巴细胞细胞因子的表达水平,进而抑制T淋巴细胞的活化和增殖,发挥免疫抑制作用。

关键词： Forskolin 活化细胞因子增殖

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黄芩苷对小鼠T淋巴细胞体外增殖和细胞周期的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2009年第1期25卷 75-78页

作者：李林曾耀英黄秀艳宋兵杨志滕菲姚满林暨南大学组织移植与免疫中心广东广州510632

目的:分析黄芩苷(BA)对小鼠T淋巴细胞体外增殖和细胞周期的影响,探讨其免疫抑制作用的机制。方法:无菌分离小鼠淋巴结,制备淋巴细胞悬液,以羧基荧光素双醋酸盐琥珀酰脂(CFDA-SE)染色,不同终浓度的BA预孵育4h,加入刀豆蛋白(ConA)或佛波... 详细信息

目的:分析黄芩苷(BA)对小鼠T淋巴细胞体外增殖和细胞周期的影响,探讨其免疫抑制作用的机制。方法:无菌分离小鼠淋巴结,制备淋巴细胞悬液,以羧基荧光素双醋酸盐琥珀酰脂(CFDA-SE)染色,不同终浓度的BA预孵育4h,加入刀豆蛋白(ConA)或佛波醇酯类多克隆刺激剂PDB和离子霉素Ion进行刺激,以流式细胞术(FCM)结合荧光抗体染色技术检测黄芩苷对CD3+T细胞增殖率的影响;以碘化丙锭(PI)染色结合FCM分析其细胞周期分布。结果:BA(10、15、20、25mg/L)对ConA或PDB和Ion诱导的小鼠CD3+T细胞增殖均有明显的抑制作用(P<0.05),且呈浓度依赖性。对细胞周期分析表明,BA能使ConA或PDB和Ion刺激的小鼠淋巴细胞停滞于G0/G1期、S期,阻止其进入G2/M期,阻止作用随浓度的增加而增强。结论:BA对ConA或PDB和Ion诱导的小鼠CD3+T细胞增殖有明显抑制作用,能够将淋巴细胞阻滞在G0/G1期和S期,表现出明显的周期特异性。本研究提示黄芩苷有发展成免疫抑制剂的潜力。

关键词：黄芩苷 T细胞细胞增殖细胞周期

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米诺环素对DNFB诱导的小鼠迟发型超敏反应的抑制作用

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现代免疫学 2009年第2期29卷 134-138页

作者：姚满林曾耀英狄静芳黄秀艳杨志宋兵暨南大学组织移植与免疫中心广州510632

为了分析MNC对二硝基氟苯(DNFB)诱导的小鼠迟发型超敏反应(DTH)的药理效应,探讨其在体内免疫抑制作用的机制,我们采用0.5%DNFB腹部致敏,耳廓激发的方法建立小鼠DTH模型。激发后48 h,取小鼠双耳称重分析MNC对DTH模型小鼠耳组织肿胀、炎... 详细信息

为了分析MNC对二硝基氟苯(DNFB)诱导的小鼠迟发型超敏反应(DTH)的药理效应,探讨其在体内免疫抑制作用的机制,我们采用0.5%DNFB腹部致敏,耳廓激发的方法建立小鼠DTH模型。激发后48 h,取小鼠双耳称重分析MNC对DTH模型小鼠耳组织肿胀、炎性细胞浸润度和胸腺指数、脾脏指数的影响;光学显微镜下观察小鼠耳廓组织学变化;噻唑兰(MTT)法检测淋巴结淋巴细胞和脾脏淋巴细胞增殖情况。双耳称重结果显示,MNC(70 mg/ml)处理组与DTH组相比,能明显抑制DNFB引起的炎症反应(P<0.05);耳廓局部组织学检测也表明,MNC能够抑制DNFB诱导的DTH,明显减少淋巴细胞的浸润;MNC能降低DTH小鼠胸腺指数和脾脏指数,抑制淋巴结淋巴细胞(P<0.05)和脾脏淋巴细胞的增殖(P<0.05)。实验结果提示,MNC可显著抑制DTH小鼠耳组织肿胀和淋巴细胞浸润程度,降低胸腺和脾脏指数,抑制淋巴细胞的增殖可能是其作用机制之一。

关键词：米诺环素 DNFB 迟发型超敏反应淋巴细胞增殖

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PKC抑制剂Bis Ⅷ对小鼠T淋巴细胞体外活化及增殖的影响

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现代免疫学 2009年第3期29卷 218-222页

作者：赵晓慧曾耀英黄秀艳慕静静暨南大学组织移植与免疫中心广州510632

研究Bis Ⅷ对小鼠T淋巴细胞体外活化及增殖的影响,并对其免疫调节作用进行初步探讨。分离小鼠淋巴结细胞,制备细胞悬液;以双色荧光抗体染色技术结合流式细胞术检测在ConA的刺激下,Bis Ⅷ对T淋巴细胞早期活化抗原CD69的表达的影响;用羧... 详细信息

研究Bis Ⅷ对小鼠T淋巴细胞体外活化及增殖的影响,并对其免疫调节作用进行初步探讨。分离小鼠淋巴结细胞,制备细胞悬液;以双色荧光抗体染色技术结合流式细胞术检测在ConA的刺激下,Bis Ⅷ对T淋巴细胞早期活化抗原CD69的表达的影响;用羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)染色结合流式细胞术检测在ConA或者PMA和Ion的刺激下,Bis Ⅷ对所分离的T淋巴细胞增殖的影响。终浓度为1μmol/L、3μmol/L、5μmol/L的Bis Ⅷ对ConA刺激的早期活化抗原CD69的表达具有明显的抑制作用(P<0.01);对ConA或者PMA和Ion刺激的T淋巴细胞增殖具有明显的抑制作用(P<0.05),且呈剂量依赖性。Bis Ⅷ对小鼠淋巴细胞的体外活化及增殖均具有明显的抑制作用,是一种潜在的免疫抑制剂。

关键词： Bis ⅧI 活化增殖流式细胞术

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茴香霉素对Jurkat T细胞生物学行为的影响

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现代免疫学 2009年第1期29卷 11-18页

作者：潘山邢飞跃暨南大学组织移植与免疫研究中心广州510632

探讨茴香霉素对Jurkat T细胞活化、增殖、周期及凋亡的影响。应用双荧光抗体标记结合流式细胞仪检测茴香霉素对豆蔻酰佛波醇乙酯(PMA)和离子霉素(Ion)诱导Jurkat T细胞表面分子CD69和CD25的表达;利用倒置显微镜和噻唑蓝(MTT)比色法观察... 详细信息

探讨茴香霉素对Jurkat T细胞活化、增殖、周期及凋亡的影响。应用双荧光抗体标记结合流式细胞仪检测茴香霉素对豆蔻酰佛波醇乙酯(PMA)和离子霉素(Ion)诱导Jurkat T细胞表面分子CD69和CD25的表达;利用倒置显微镜和噻唑蓝(MTT)比色法观察茴香霉素对Jurkat T细胞的集落形成和增殖影响;采用碘化丙锭(PI)染色检测茴香霉素对Jurkat T细胞周期的影响;应用Annexin V-FITC和PI双染色检测茴香霉素对Jurkat T细胞凋亡的影响。结果表明,在PMA和Ion共同刺激下随茴香霉素剂量上升CD69和CD25的表达量逐渐下降;随着茴香霉素剂量增高,Jurkat T细胞的集落形成减小,其对细胞增殖的抑制率最高可达74.29%,使细胞周期停滞于G0/G1期之前;当茴香霉素剂量为40.0~160.0 ng/ml时能明显促进Jutkat T细胞凋亡。结果提示,茴香霉素能明显抑制PMA和Ion刺激下的Jurkat T细胞早期和中期活化,抑制Jurkat T细胞的增殖,使细胞周期停滞于G0/G1期之前,并能促进Jurkat T细胞凋亡。

关键词：茴香霉素 Jurkat T细胞活化增殖周期凋亡

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nmhaFGF对大鼠缺血再灌注损伤心肌的保护作用

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中国药科大学学报 2009年第2期40卷 161-165页

作者：许华李校堃黄亚东郑青苏志坚吴晓萍赵专友暨南大学药学院广州510632 暨南大学医药生物技术研究开发中心广州510632 暨南大学组织移植与免疫实验中心广州510632 天津药物研究院药理室天津300193

目的:研究非促分裂型酸性成纤维细胞生长因子(nmhaFGF)对缺血再灌注损伤心肌的保护作用。方法:大鼠冠脉左前降支闭塞30min后再灌注3h,再灌注前10min尾静脉注射不同剂量nmhaFGF。测定各组大鼠室性心动过速(VT)和心室颤动(VF)的潜伏期、... 详细信息

目的:研究非促分裂型酸性成纤维细胞生长因子(nmhaFGF)对缺血再灌注损伤心肌的保护作用。方法:大鼠冠脉左前降支闭塞30min后再灌注3h,再灌注前10min尾静脉注射不同剂量nmhaFGF。测定各组大鼠室性心动过速(VT)和心室颤动(VF)的潜伏期、持续时间和发生率,评定心律失常分数;再灌注24h后,测定血清AST、LDH、CK-MB含量,并计算大鼠心肌梗死面积。结果:静脉注射nmhaFGF(20,40,80μg/kg)能明显抑制缺血再灌注引起的心肌损伤。和模型组相比,nmhaFGF各组大鼠的VT和VF发生率减少,出现心律失常的潜伏期延迟,持续时间缩短;另外心肌梗死区占左室面积的百分比及梗死区占危险区百分比均有所降低;此外,血清心肌酶含量AST、LDH、CK-MB显著降低;以80μg/kgnmhaFGF作用较明显,其作用强度与8mg/kg普萘洛尔相当。结论:nmhaFGF对大鼠缺血再灌损伤心肌具有保护作用。

关键词： nmhaFGF 缺血再灌注心肌损伤

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棉酚对小鼠淋巴细胞体外增殖和凋亡作用的影响

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现代免疫学 2009年第2期29卷 111-116页

作者：许文彬卢宏松徐丽慧施焕敬刘春永何贤辉暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫实验中心广州510632

研究棉酚(gossypol)对小鼠淋巴细胞体外增殖和凋亡作用的影响及作用机制。分离小鼠淋巴结细胞,以CFSE染色,加入佛波醇酯(PDB)和离子霉素(Ion)进行刺激,以流式细胞仪分析棉酚对淋巴细胞增殖率的影响;以MTS检测淋巴细胞的增殖情况;以Annex... 详细信息

研究棉酚(gossypol)对小鼠淋巴细胞体外增殖和凋亡作用的影响及作用机制。分离小鼠淋巴结细胞,以CFSE染色,加入佛波醇酯(PDB)和离子霉素(Ion)进行刺激,以流式细胞仪分析棉酚对淋巴细胞增殖率的影响;以MTS检测淋巴细胞的增殖情况;以Annexin V-PE染色分析细胞凋亡;用Hoechst33342染色观察细胞核形态。CFSE染色分析显示,棉酚对PDB+Ion诱导的小鼠淋巴细胞增殖,具有明显的抑制作用(P<0.01),且呈剂量依赖性。以MTS分析细胞增殖情况,也获得相似的结果。终浓度为4、8和16μmol/L的棉酚处理8 h后的细胞凋亡率分别为4.39%、6.57%和12.14%,PDB+Ion对照组凋亡率为2.13%。凋亡率随着棉酚作用时间的增加而上升,存在时间和剂量依赖关系。高浓度棉酚作用后大量细胞核呈现染色质固缩、核碎裂和致密浓染等凋亡特征。研究表明,棉酚能有效抑制小鼠淋巴细胞体外增殖和诱导其发生凋亡,并呈现出时间和剂量依赖关系。

关键词：棉酚淋巴细胞增殖凋亡流式细胞术

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孕酮处理树突状细胞诱导同种移植免疫耐受的研究

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生殖与避孕 2009年第4期29卷 201-205页

作者：沈媛曾耀英肇静娴暨南大学附属第一医院妇产科广州510630 暨南大学组织移植与免疫中心广州510632

目的:探讨孕酮(P4)处理的树突状细胞(dendritic cell,DC)在诱导同种异基因移植免疫耐受中的作用。方法:实验小鼠分为4组,每组动物供体为C57BL/6雄性小鼠8只,受体为BALB/c雄性小鼠8只。体外培养供体小鼠骨髓来源DC,然后用P4处理。受体小... 详细信息

目的:探讨孕酮(P4)处理的树突状细胞(dendritic cell,DC)在诱导同种异基因移植免疫耐受中的作用。方法:实验小鼠分为4组,每组动物供体为C57BL/6雄性小鼠8只,受体为BALB/c雄性小鼠8只。体外培养供体小鼠骨髓来源DC,然后用P4处理。受体小鼠在皮肤移植前经尾静脉分别输注体外培养且经P4处理的供体小鼠DC、供体小鼠成熟DC以及不成熟DC,输注磷酸盐缓冲液为对照组。1周后受体小鼠进行同种异基因皮肤移植,手术后观察皮肤存活情况,应用流式细胞术检测手术前后受体小鼠外周血中CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+T)百分率的变化。结果:在同种异基因皮肤移植中,受体小鼠尾静脉输注经P4处理的DC组分别与成熟DC组、不成熟DC组和对照组比较,移植皮肤存活时间显著延长(P<0.01);与成熟DC组、不成熟DC组和对照组比较,P4处理组外周血中CD4+CD25+T百分率显著升高(P<0.01)。结论:P4处理的DC可以延长同种异基因移植物存活时间。

关键词：树突状细胞(DC) 孕酮(P4) 母-胎免疫耐受皮肤移植小鼠

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