检索结果-内蒙古大学图书馆

免疫学杂志 2011年第12期27卷 1019-1024页

作者：王晓东曾耀英宋兵暨南大学组织移植与免疫研究中心广州510632

目的银杏内酯B(GB)是已知的天然而强效的血小板激活因子(PAF)受体(PAFR)拮抗剂,本文研究GB对小鼠T淋巴细胞活化、增殖及凋亡3大体外行为的影响,初步探讨其潜在的免疫调节作用与机制,从而为临床应用提供可靠的实验依据。方法分离小鼠淋... 详细信息

目的银杏内酯B(GB)是已知的天然而强效的血小板激活因子(PAF)受体(PAFR)拮抗剂,本文研究GB对小鼠T淋巴细胞活化、增殖及凋亡3大体外行为的影响,初步探讨其潜在的免疫调节作用与机制,从而为临床应用提供可靠的实验依据。方法分离小鼠淋巴细胞,培养前以不同浓度的GB预孵;以刀豆蛋白A(Con A)诱导细胞的活化与增殖,以荧光抗体双色标记(anti-CD3 mAb-PE/anti-CD69 mAb-FITC、anti-CD3 mAb-PE/anti-CD25 mAb-FITC)结合流式细胞术分别检测T淋巴细胞早、中期活化标志--表面抗原CD69与CD25的表达,以活体荧光染料CFDA-SE标记结合流式细胞术检测细胞增殖并用MTT法佐证;以地塞米松(Dex)诱导细胞的凋亡,以荧光染料双色标记[DiOC6(3)/PI]结合流式细胞术区别凋亡、死亡与活细胞群。结果 Con A刺激后6 h和24 h,T细胞早期活化标志CD69和中期活化标志CD25分别大量表达,Con A刺激后48 h活化的T细胞增殖至第4代,而经终浓度为5、10、20μmol/L GB在Con A刺激前对细胞进行4 h预孵处理可以显著下调T细胞表面抗原CD69、CD25的表达并能有效抑制细胞增殖。Dex诱导后12 h细胞凋亡和死亡群显著增大,而经同样的GB预孵处理可以在一定程度上抑制细胞的凋亡进程,对细胞凋亡显示出一定的保护作用。结论 GB能有效抑制小鼠T淋巴细胞的活化与增殖,并且对细胞凋亡起到一定的保护作用,凭借GB对T细胞此3大行为出色的调节作用,理应将其作为天然的免疫抑制剂候选者进行更深入的研究。

关键词：银杏内酯B T淋巴细胞活化增殖凋亡

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华蟾素对乳腺癌细胞株MCF-7的杀伤作用研究

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中国药理学通报 2011年第1期27卷 37-41页

作者：马丽娜宋兵金花彭元蔡继业暨南大学光电信息与传感技术重点实验室广东广州510632 暨南大学化学系广东广州510632 暨南大学组织移植与免疫实验中心广东广州510632

目的研究华蟾素诱导人类乳腺癌MCF-7细胞的凋亡作用。方法利用CCK-8法检测华蟾素对乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制作用;用流式细胞术检测细胞的凋亡抑制率;利用倒置荧光显微镜观察细胞整体形态的变化;利用原子力显微镜(AFM)高分辨率、高灵... 详细信息

目的研究华蟾素诱导人类乳腺癌MCF-7细胞的凋亡作用。方法利用CCK-8法检测华蟾素对乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制作用;用流式细胞术检测细胞的凋亡抑制率;利用倒置荧光显微镜观察细胞整体形态的变化;利用原子力显微镜(AFM)高分辨率、高灵敏度的特点,从纳米尺度上进一步观察细胞形貌及超微结构的变化。结果 CCK-8结果显示,华蟾素对MCF-7细胞的生长有明显的抑制作用,且随着剂量的增加(6.25～50 mg.L-1)而增大,当浓度为50 mg.L-1时,抑制率达到(68.40±1.02)%。采用流式细胞术对细胞凋亡的检测结果也表明华蟾素浓度为50 mg.L-1时,细胞晚期凋亡率最大,可达到(55.5±1.2)%。AFM与对照组相比,药物作用后,细胞开始坍塌变矮、细胞变小,周围呈月牙状或环状,浓度最大时,细胞中间出现较大孔洞。结论华蟾素能有效抑制MCF-7细胞的生长增殖并诱导其凋亡。利用AFM在单细胞水平上分析华蟾素对MCF-7细胞的作用,使分析结果更加全面。

关键词：原子力显微镜华蟾素乳腺癌MCF-7细胞细胞凋亡超微结构单细胞水平高分辨率

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不同培养体系对鼠表皮干细胞增殖和分化的影响

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中华生物医学工程杂志 2012年第1期18卷 11-15页

作者：李孝建沈雁李延仓曾耀英戴丽冰杨小红暨南大学附属广州市红十字会医院烧伤科广州510220 暨南大学附属广州市红十字会医院创伤外科研究所广州510220 暨南大学组织移植与免疫中心郑州市第一人民医院烧伤科

目的探讨不同培养体系对表皮干细胞增殖、分化的影响，建立理想的调控表皮干细胞增殖、分化的培养体系。方法酶消化和Ⅳ型胶原快速黏附法获取鼠表皮干细胞。分别在普通培养皿培养、与几丁质膜生物支架材料共培养及以几丁质膜生物支架材... 详细信息

目的探讨不同培养体系对表皮干细胞增殖、分化的影响，建立理想的调控表皮干细胞增殖、分化的培养体系。方法酶消化和Ⅳ型胶原快速黏附法获取鼠表皮干细胞。分别在普通培养皿培养、与几丁质膜生物支架材料共培养及以几丁质膜生物支架材料作为载体植入裸鼠体内培养等不同培养体系下观察表皮干细胞生长情况。普通培养和与几丁质膜生物支架材料共培养4周后，对比表皮干细胞克隆形成率的差异。免疫组织化学染色观察表皮干细胞以几丁质膜为载体植入裸鼠体内后4周表皮干细胞的增殖、分化情况。结果表皮干细胞在普通培养皿培养3d左右，细胞开始克隆增殖；12d左右融合成片；传代培养后增殖能力逐渐减低，融合成片时间逐渐延长，传代培养3～4代后细胞终末分化，失去增殖能力。几丁质膜生物支架材料培养表皮干细胞，2周后呈棋盘式集落生长，几丁质膜生物支架材料上有大量的表皮干细胞小集落，集落上有大量的增殖细胞附着生长，扫描电镜下见几丁质膜生物支架材料纤维直径约10μm，以纤维为主，上下两层呈纵横排列成十字孔，孔间有大量表皮干细胞集落。几丁质膜生物支架材料培养表皮干细胞4周后，其克隆形成率明显高于普通培养皿培养[（12．6±2．7）％比（5．7±1．1）％，P〈0．05]。表皮干细胞几丁质膜生物支架材料植入裸鼠体内培养4周后，细胞大量增殖形成巢状排列，在表皮干细胞巢周围，可见有类似皮肤附件结构。结论表皮干细胞在体外普通培养皿培养可增殖生长，但维持增殖时间较短；与几丁质膜生物支架材料共培养，可较长时间地维持表皮干细胞的增殖特性；植入体内后表皮干细胞大量增殖。

关键词：表皮干细胞壳多糖细胞,培养的细胞分化细胞增殖

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细胞自噬与高迁移率族蛋白B-1(HMGB1)介导肿瘤耐药的研究进展

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2011年第2期32卷 126-130,140页

作者：何贤辉欧阳东云暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫实验中心广东广州510632

恶性肿瘤可通过多种细胞机制,产生对抗癌药物和放疗的抗性,即所谓耐药现象。细胞自噬是肿瘤细胞耐药的一个重要原因。高迁移率族蛋白B-1(HMGB1)是高度保守的非组蛋白DNA结合蛋白,在DNA结构、基因转录、基因重组、DNA损伤修复以及细胞存... 详细信息

恶性肿瘤可通过多种细胞机制,产生对抗癌药物和放疗的抗性,即所谓耐药现象。细胞自噬是肿瘤细胞耐药的一个重要原因。高迁移率族蛋白B-1(HMGB1)是高度保守的非组蛋白DNA结合蛋白,在DNA结构、基因转录、基因重组、DNA损伤修复以及细胞存活等方面发挥重要的调控作用;HMGB1在细胞内的功能,与其氧化还原状态和细胞定位息息相关;在应激条件下,可从核内转位至胞质,启动细胞自噬,介导肿瘤细胞对抗癌药物和放疗的抗性。因此,HMGB1是克服肿瘤细胞耐药的潜在靶标。

关键词：细胞自噬高迁移率族蛋白B-1 抗癌药物肿瘤耐药氧还应激

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黄连素对脑缺血再灌注小鼠胸腺细胞的保护作用

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2011年第6期32卷 584-588页

作者：宋兵王晓东黄秀艳曾耀英暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫实验中心广东广州510632

目的:研究黄连素(Ber)对脑缺血再灌注(MCAO/R)小鼠胸腺细胞的保护作用。方法:用线栓法建立小鼠脑缺血再灌注(MCAO/R)模型,缺血1 h,再灌注24 h,实验动物共分为3组:正常组、手术组和给药组(腹腔注射黄连素质量分数为5 mg/kg),缺血0.5 h和... 详细信息

目的:研究黄连素(Ber)对脑缺血再灌注(MCAO/R)小鼠胸腺细胞的保护作用。方法:用线栓法建立小鼠脑缺血再灌注(MCAO/R)模型,缺血1 h,再灌注24 h,实验动物共分为3组:正常组、手术组和给药组(腹腔注射黄连素质量分数为5 mg/kg),缺血0.5 h和再灌注12 h各给药1次。24 h后取小鼠胸腺计算其胸腺指数,并取胸腺细胞利用SYTOX Green染色法联合荧光酶标仪检测细胞活性;AFM检测细胞形貌的变化;流式细胞仪结合Calcein/CoCl2或JC-1染色检测早期细胞凋亡率。结果:MCAO/R可引起胸腺明显萎缩;SYTOX Green染色结果显示MCAO/R损伤引起细胞高死亡率(P<0.05);AFM结果表明细胞表面形态发生显著变化(细胞高度差显著减小(P<0.01);粗糙度变大(P<0.05);Calcein/CoCl2和JC-1结果显示脑缺血再灌注后小鼠胸腺细胞的凋亡率显著增高(P<0.01),而黄连素能显著改善胸腺的萎缩(P<0.01),降低细胞的死亡率(P<0.05),改善MCAO/R引起的细胞高度(P<0.01)、粗糙度的变化(P<0.05)和降低细胞的凋亡率(P<0.05)。结论:黄连素可能通过抑制胸腺细胞的凋亡而发挥对脑缺血再灌注的保护作用。

关键词：黄连素脑缺血再灌注胸腺细胞凋亡

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大豆异黄酮对卵巢切除大鼠糖脂代谢和血清瘦素、抵抗素表达的影响

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2011年第3期32卷 324-327,338页

作者：龚华芳张亚兴王晓东曾耀英暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫实验中心广东广州510632

为探讨大豆异黄酮对卵巢切除大鼠糖脂代谢和血清瘦素、抵抗素表达的影响,将12周SD大鼠分成3组,假手术(Sham)组、卵巢切除(OVX)组和大豆异黄酮(OVX+Gen)组,每组7只,卵巢切除术后10 d,OVX组和Sham组大鼠每天腹腔注射生理盐水0.1 ml/只,OVX... 详细信息

为探讨大豆异黄酮对卵巢切除大鼠糖脂代谢和血清瘦素、抵抗素表达的影响,将12周SD大鼠分成3组,假手术(Sham)组、卵巢切除(OVX)组和大豆异黄酮(OVX+Gen)组,每组7只,卵巢切除术后10 d,OVX组和Sham组大鼠每天腹腔注射生理盐水0.1 ml/只,OVX+Gen组每天注射大豆异黄酮0.2 mg/只,连续注射30 d后处死取血,检测子宫病理改变、血糖血脂和胰岛素水平、血清瘦素和抵抗素含量.结果发现卵巢切除后大鼠总胆固醇、HDL和LDL均增加(P<0.05),但胰岛素、血糖、甘油三酯、血清瘦素和抵抗素水平变化不明显(P>0.05);卵巢切除后补充大豆异黄酮,可促进子宫内膜上皮部分增生,但胰岛素、血糖、总胆固醇、甘油三酯、LDL和HDL、血清瘦素和抵抗素水平均无明显变化(与OVX组相比,P>0.05),结果提示大豆异黄酮对卵巢切除大鼠糖脂代谢参数和血清瘦素、抵抗素水平影响不大.

关键词：卵巢切除大豆异黄酮血糖血脂瘦素抵抗素

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华蟾素对MDA-MB-231细胞线粒体膜电位及活性氧的影响

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生物技术 2011年第6期21卷 35-38页

作者：马丽娜刘志刚宋兵彭元蔡继业金花陈辉暨南大学化学系广东广州510632 暨南大学水生生物研究所广东广州510632 暨南大学组织移植与免疫实验中心广州广东510632

目的:研究华蟾素诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡过程中,细胞内活性氧(ROS)及线粒体膜电位(△Ψm)的变化,探讨华蟾素对乳腺癌细胞的作用机制。方法:用不同浓度的华蟾素作用于MDA-MB-231细胞24h后,分别用荧光探针罗丹明123和荧光探针DCFH-D... 详细信息

目的:研究华蟾素诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡过程中,细胞内活性氧(ROS)及线粒体膜电位(△Ψm)的变化,探讨华蟾素对乳腺癌细胞的作用机制。方法:用不同浓度的华蟾素作用于MDA-MB-231细胞24h后,分别用荧光探针罗丹明123和荧光探针DCFH-DA进行荧光染色,用流式细胞仪检测细胞内线粒体膜电位和活性氧的变化。结果:不同浓度的华蟾素作用于MDA-MB-231细胞后,随着药物浓度的增加(0、12.5、25、37.5、50μg/ml),细胞内的ROS水平显著升高,荧光强度从3 609±24上升为6 263±35;同时,线粒体膜电位(△Ψm)显著下降,荧光强度从242±6降低到173±4。结论:华蟾素作用细胞后,使得细胞内活性氧水平显著升高,同时,线粒体膜电位显著下降,推测华蟾素对MDA-MB-231细胞通过线粒体途径诱发细胞凋亡。

关键词：华蟾素 MDA-MB-231细胞活性氧(ROS) 线粒体膜电位凋亡

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子痫前期患者血清中H2O2与中性粒细胞及T淋巴细胞活化的关系

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中华妇产科杂志 2011年第8期46卷 613-615页

作者：钱中清曾耀英王才智汪洪涛姚春艳蚌埠医学院免疫学教研室 233003 蚌埠医学院第一附属医院产科 233003 暨南大学组织移植与免疫实验中心

大量研究证实，子痫前期孕妇存在系统性的高氧化应激状态及炎症性免疫活化。研究发现，子痫前期孕妇血清中存在高水平的氧化应激产物H2O2，其可能来源于氧化应激性胎盘组织及外周大量活化的中性粒细胞。血管内皮细胞损伤和功能紊乱被认... 详细信息

大量研究证实，子痫前期孕妇存在系统性的高氧化应激状态及炎症性免疫活化。研究发现，子痫前期孕妇血清中存在高水平的氧化应激产物H2O2，其可能来源于氧化应激性胎盘组织及外周大量活化的中性粒细胞。血管内皮细胞损伤和功能紊乱被认为是子痫前期疾病进展中的关键环节，

关键词： T淋巴细胞活化中性粒细胞子痫前期孕妇血清 H2O2 血管内皮细胞损伤患者氧化应激

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丙戊酸钠对人外周血T淋巴细胞细胞因子表达的影响(英文)

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中国病理生理杂志 2011年第6期27卷 1199-1205页

作者：耿梅王飞鹏欧阳东云徐丽慧陈清张延亭何贤辉暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫实验中心广东广州510632 暨南大学生命科学技术学院再生医学教育部重点实验室广东广州510632

目的:研究丙戊酸钠(VPA)对人外周血T淋巴细胞的活化、凋亡及细胞因子表达的影响。方法:双色荧光抗体染色结合流式细胞术分析VPA对多克隆刺激剂二丁酸佛波酯(PDB)和离子霉素(Ion)刺激下的人外周血T细胞CD69表达的影响,DiOC6(3)染色检测VP... 详细信息

目的:研究丙戊酸钠(VPA)对人外周血T淋巴细胞的活化、凋亡及细胞因子表达的影响。方法:双色荧光抗体染色结合流式细胞术分析VPA对多克隆刺激剂二丁酸佛波酯(PDB)和离子霉素(Ion)刺激下的人外周血T细胞CD69表达的影响,DiOC6(3)染色检测VPA对T细胞凋亡的影响。利用胞内细胞因子染色检测T细胞IL-2、IL-4、IFN-γ和TNF-α的表达,以探讨VPA的保护机制。结果:VPA(1和5 mmol/L)对PDB和Ion诱导的人外周血T细胞CD69的表达具有明显的促进作用(P<0.01)。DiOC6(3)染色结果表明VPA(1和5 mmol/L)可以增强线粒体膜电势,抑制T细胞活化诱导的凋亡,高浓度则作用相反。胞内细胞因子染色分析显示,VPA在低浓度时能明显促进IL-2表达而高浓度时则抑制。同时,VPA能显著促进IFN-γ和TNF-α的表达(P<0.05),并呈剂量依赖性,而对IL-4表达的影响较小。结论:VPA对多克隆刺激剂诱导的人外周血T细胞的活化和凋亡具有双向调节作用,诱导IL-2、IFN-γ和TNF-α的表达。

关键词：丙戊酸 CD69 细胞凋亡细胞因子类淋巴细胞

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去乙酰化酶抑制剂TSA对间充质干细胞C3H10T1/2增殖和成脂分化的影响

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2011年第3期32卷 328-333页

作者：吴伟季菊玲王奎栋李智耀龚雨琴季煜华暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫实验中心广东广州510632 南通大学医学院病理教研室江苏南通226001

采用MTT和流式细胞术分别检测不同浓度的TSA对C3H10T1/2细胞活性和细胞周期分布的影响;油红O染色检测TSA对其成脂分化的影响,实时定量PCR检测TSA对成脂分化的关键转录因子PPAR-γ,以及成脂分化标志物Fabp4和Adipoq mRNA转录的影响.研究... 详细信息

采用MTT和流式细胞术分别检测不同浓度的TSA对C3H10T1/2细胞活性和细胞周期分布的影响;油红O染色检测TSA对其成脂分化的影响,实时定量PCR检测TSA对成脂分化的关键转录因子PPAR-γ,以及成脂分化标志物Fabp4和Adipoq mRNA转录的影响.研究去乙酰化酶抑制剂TSA对间充质干细胞C3H10T1/2增殖和成脂分化的影响及其可能的作用机制.结果显示TSA浓度为1、10和30 nmol/L呈浓度依赖性地抑制C3H10T1/2细胞活性,改变细胞形态,并将其细胞周期抑制在G0/G1期;TSA浓度为10nmol/L明显抑制C3H10T1/2细胞的成脂分化作用,并呈浓度依赖性地抑制PPAR-γ、Fabp4和Adipoq mRNA的转录.表明TSA呈剂量依赖性地抑制间充质干细胞C3H10T1/2的增殖和成脂分化,除转录水平调控外,非组蛋白如细胞骨架相关蛋白可能也参与TSA的抑制作用.

关键词：曲古抑菌素A 间充质干细胞成脂分化增殖

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