检索结果-内蒙古大学图书馆

暨南大学学报（自然科学与医学版） 2005年第6期26卷 734-739,745页

作者：季煜华曾耀英俞瑜暨南大学组织移植与免疫研究中心教育部重点实验室广东广州510632

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)用于无血清培养扩增软骨细胞的可行性及最适质量浓度.方法:分离、培养大鼠肋生长板软骨细胞(rat costochondral growth plate chondrocyte,RGC).细胞化学和免疫细胞化学染色的方法检测第1代RGC中... 详细信息

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)用于无血清培养扩增软骨细胞的可行性及最适质量浓度.方法:分离、培养大鼠肋生长板软骨细胞(rat costochondral growth plate chondrocyte,RGC).细胞化学和免疫细胞化学染色的方法检测第1代RGC中蛋白多糖和Ⅱ型胶原的表达.观察0.1、1.0、10.0和100.0μg/L bFGF对无血清培养RGC形态的影响,并分别用3H-TdR和3H-Proline掺入法检测上述质量浓度bFGF对无血清培养RGC增殖和胶原合成的影响.结果:第1代RGC表达蛋白多糖和Ⅱ型胶原,保持了软骨细胞的分化表型.随着bFGF质量浓度的增加RGC的形态由多角形变为梭形和圆形.与无血清对照组相比,上述4个质量浓度的bFGF均显著促进RGC的增殖和胶原合成(P＜0.05),其中1.0和10.0μg/L bFGF促RGC增殖的作用与10%胎牛血清(FBS)对照组差异无显著性意义(P＞0.05),但促胶原合成作用较弱,相当于10%FBS对照组的60%左右(P＜0.05).结论:bFGF可用于无血清扩增软骨细胞,1.0～10.0 μg/L是适宜的质量浓度范围,但其促胶原合成作用较弱,还需添加其他因子以弥补促胶原合成作用的不足.

关键词：肋生长板软骨细胞碱性成纤维细胞生长因子无血清培养

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尿酸钠对BALB/c小鼠抗体应答及树突状细胞和迟发型超敏反应的影响

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中国病理生理杂志 2010年第3期26卷 424-429页

作者：刘春永王飞鹏郭贺高琦何贤辉暨南大学组织移植与免疫实验中心广东广州510632 暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632

目的:探讨尿酸钠作为佐剂对BALB/c小鼠体液和细胞免疫应答的影响。方法:利用尿酸钠悬浮液为佐剂、天花粉蛋白(TCS)为免疫原对BALB/c小鼠进行免疫,以酶联免疫测定法检测特异性抗体IgG的效价。体外诱导小鼠树突状细胞(DC),流式细胞术分析D... 详细信息

目的:探讨尿酸钠作为佐剂对BALB/c小鼠体液和细胞免疫应答的影响。方法:利用尿酸钠悬浮液为佐剂、天花粉蛋白(TCS)为免疫原对BALB/c小鼠进行免疫,以酶联免疫测定法检测特异性抗体IgG的效价。体外诱导小鼠树突状细胞(DC),流式细胞术分析DC表型,评价尿酸钠体外对DC成熟的效应。以二硝基氟苯建立迟发型超敏反应(DTH)模型,分析尿酸钠在体内对细胞免疫应答的影响。结果:传统弗氏佐剂可极大地增强小鼠对TCS的抗体应答,尿酸钠佐剂对抗体应答不但没有促进,与单独使用免疫原相比,抗体应答反而明显降低。流式细胞术分析显示,尿酸钠对DC表达CD11c和CD83没有影响,但可明显提高MHCII的表达水平。DTH模型中,尿酸钠增强致敏原引发的耳廓肿胀程度,并促进DTH小鼠淋巴细胞的体外增殖能力。结论:尿酸钠悬浮液作为佐剂,对细胞免疫有显著增强作用,而对体液免疫应答却有一定的抑制作用,提示该佐剂在疫苗研究中有潜在应用前景。

关键词：尿酸钠体液免疫应答树突细胞迟发型超敏反应

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凋亡细胞体外抑制T细胞活化

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中国免疫学杂志 2000年第8期16卷 407-411页

作者：张雷孙尔维葛琪曾耀英高伟第一军医大学珠江医院肾移植科广州510515 暨南大学组织移植与免疫国家专业实验室广州510632

目的 :研究凋亡细胞对T细胞活化的影响。方法 :以ConA刺激小鼠脾细胞增殖体系为研究对象 ,观察凋亡细胞预处理后对ConA刺激的脾细胞CD6 9表达的影响。结果 :凋亡细胞可以抑制T细胞活化 ,而活细胞或坏死细胞却不能 ,同时抑制效果与凋亡... 详细信息

目的 :研究凋亡细胞对T细胞活化的影响。方法 :以ConA刺激小鼠脾细胞增殖体系为研究对象 ,观察凋亡细胞预处理后对ConA刺激的脾细胞CD6 9表达的影响。结果 :凋亡细胞可以抑制T细胞活化 ,而活细胞或坏死细胞却不能 ,同时抑制效果与凋亡种类及凋亡诱导方式无关 ,而与凋亡细胞数量密切相关。结论 :研究证明了凋亡细胞可以主动抑制T细胞活化 ,这一发现拓宽了目前对凋亡的认识 ,表明凋亡细胞主动调节免疫反应在一些生命的基本现象和一些疾病中有重要意义。

关键词：细胞凋亡免疫抑制 T细胞活化 CD69

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染料木黄酮抑制小鼠变应性接触性皮炎的实验研究

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中国病理生理杂志 2006年第5期22卷 885-888页

作者：丛林曾耀英蔡小嫦易敏施军暨南大学附属第一医院皮肤科暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632

目的:探讨染料木黄酮(Gen)对小鼠变应性接触性皮炎(ACD)的抑制作用。方法:建立二硝基氟苯(DNFB)诱发的小鼠ACD模型,观测不同剂量Gen对小鼠耳廓肿胀程度、鼠耳皮肤组织病理变化、体重及胸腺指数、脾指数的影响。结果:各剂量Gen组均能明... 详细信息

目的:探讨染料木黄酮(Gen)对小鼠变应性接触性皮炎(ACD)的抑制作用。方法:建立二硝基氟苯(DNFB)诱发的小鼠ACD模型,观测不同剂量Gen对小鼠耳廓肿胀程度、鼠耳皮肤组织病理变化、体重及胸腺指数、脾指数的影响。结果:各剂量Gen组均能明显抑制DNFB诱发的小鼠耳廓肿胀,抑制炎症细胞浸润,降低胸腺指数,且不影响小鼠体重增长。低剂量Gen组增加脾指数,高剂量Gen组降低脾指数。结论:Gen对DNFB诱发的小鼠ACD有明显抑制作用。

关键词：染料木黄酮变应性接触性皮炎实验

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麒麟菜中蕨藻红素抗肿瘤活性研究

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中国病理生理杂志 2002年第7期18卷 851-852页

作者：杨宜婷岑颖洲肇静娴狄静芳暨南大学化学系广东广州510632 暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632

目的 :探讨把蕨红藻素 (caulerpin)发展成为抗肿瘤药物的可能性。方法 :检测caulerpin对细胞株HL6 0的细胞毒作用及诱导细胞凋亡作用。结果 :Caulerpin对HL6 0细胞有一定的细胞毒和细胞诱导凋亡作用。结论

关键词：麒麟菜抗肿瘤活性蕨藻红素药物筛选试验细胞凋亡

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腺病毒介导ERK-2基因在生长板软骨细胞中的表达

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2006年第4期27卷 503-508页

作者：季煜华曾耀英邢飞跃俞瑜王会营江颖娟暨南大学组织移植与免疫研究中心教育部重点实验室广东广州510632

目的:构建ERK-2基因重组腺病毒载体,检测构建的腺病毒感染原代大鼠生长板软骨细胞的效率以及目的基因的表达。方法:将ERK-2 cDNA亚克隆到腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,线性化后与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共同转染***.i B J5183,将筛选... 详细信息

目的:构建ERK-2基因重组腺病毒载体,检测构建的腺病毒感染原代大鼠生长板软骨细胞的效率以及目的基因的表达。方法:将ERK-2 cDNA亚克隆到腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,线性化后与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共同转染***.i B J5183,将筛选、鉴定的重组腺病毒质粒线性化后转染HEK293细胞进行病毒颗粒的包装;流式细胞术检测不同感染复数(MO I)ERK-2重组腺病毒感染原代培养的大鼠肋生长板软骨细胞的效率,W estern b lot检测腺病毒感染的生长板软骨细胞中ERK-2蛋白的表达。结果:成功构建ERK-2重组腺病毒,MO I 50的腺病毒感染原代生长板软骨细胞的效率大于90%,感染的生长板软骨细胞中ERK-2表达显著增加。结论:构建的重组腺病毒可介导ERK-2基因在原代大鼠生长板软骨细胞中高表达。

关键词： ERK-2基因生长板软骨细胞腺病毒

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脾脏在不同种类动物前房相关免疫偏离诱导和维持中的作用

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眼科学报 1999年第4期15卷 221-224,237页

作者：李志杰彭广华李辰暨南大学组织移植与免疫实验中心眼科学教研室广州510632

目的:脾脏在小鼠前房相关免疫偏离(anterior chamber-associated immune deviation,ACAID)的诱导中起着重要的作用。在前房接种抗原4天内摘除脾脏可以消除免疫偏离而导致免疫反应。本研究旨在观察脾脏在其他种类动物ACAID的诱导和维持... 详细信息

目的:脾脏在小鼠前房相关免疫偏离(anterior chamber-associated immune deviation,ACAID)的诱导中起着重要的作用。在前房接种抗原4天内摘除脾脏可以消除免疫偏离而导致免疫反应。本研究旨在观察脾脏在其他种类动物ACAID的诱导和维持中的作用。方法:在脾脏切除和假性脾脏切除后,使用牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)作为可溶性抗原分别接种于Wistar大鼠、新西兰白兔和猕猴的眼前房。使用BSA和完全弗氏佐剂混合乳剂免疫动物。通过抗原刺激皮肤测定抗原特异性迟发型超敏反应(delayed-type hypersensitivity,DTH),并定时评估免疫偏离的维持时间。结果:假性脾脏切除眼内抗原接种组和脾脏切除眼内抗原接种组所有动物均显示抗原特异性DTH抑制,且维持时间无显著差异。相反,单纯假脾脏切除组和单纯脾脏切除组动物均显示阳性抗原特异性DTH反应。结论:脾脏对于大鼠、兔和灵长目动物ACAID的诱导和维持不具有重要作用。这些发现提示随着进化程度的进阶,脾脏的功能可能被其他的淋巴器官所代替。眼科学报1999;15:221-224。

关键词：免疫郝免前房免疫偏离迟发型超敏反应脾脏

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喜树碱诱导的HL-60细胞凋亡过程中线粒体的变化

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细胞与分子免疫学杂志 2006年第2期22卷 144-147页

作者：贺芳曾耀英王通邢飞跃林羿梁佩燕肇静娴暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫中心教育部重点实验室广东广州510632

目的:研究喜树碱(CPT)诱导的人早幼粒细胞性白血病细胞HL-60凋亡过程中线粒体的质量和膜电势的变化。方法:以CPT诱导HL-60细胞凋亡为模型,利用膜联蛋白V(annexinV)-FITC/PI双染流式细胞术,研究HL-60细胞的凋亡和坏死。用DiOC6(3)染色流... 详细信息

目的:研究喜树碱(CPT)诱导的人早幼粒细胞性白血病细胞HL-60凋亡过程中线粒体的质量和膜电势的变化。方法:以CPT诱导HL-60细胞凋亡为模型,利用膜联蛋白V(annexinV)-FITC/PI双染流式细胞术,研究HL-60细胞的凋亡和坏死。用DiOC6(3)染色流式细胞术,检测线粒体的膜电势(△ψm)。用NAO染色流式细胞术,检测线粒体的质量。结果:在4×10-6mol/LCPT的诱导下,HL-60细胞(12h)早期的凋亡率为(12.75±4.61)%,对照组为(2.88±2.49)%,二者相比较差异显著(P<0.01);CPT组坏死比率为(3.48±1.67)%,对照组为(0.71±1.10)%(P<0.01)。PI染色的结果显示,HL-60细胞(12h)晚期凋亡细胞的百分率,CPT组为(3.52±1.07)%,对照组为(0.46±1.06)%(P<0.01)。同时观察到,G2/M期细胞出现阻滞,G2/M期细胞的百分率,对照组为(22.46±2.19)%,CPT组为(13.45±1.91)%(P<0.01)。在12h时间点,CPT组线粒体的质量显著低于对照组(P<0.01),低线粒体质量的细胞所占百分率,对照组为(4.53±1.26)%,CPT组为(25.74±2.09)%。同时,CPT组线粒体的膜电势显著下降(P<0.01),CPT组线粒体膜电势降低的比率为(17.71±5.23)%,对照组为(1.64±2.00)%。结论:CPT诱导HL-60细胞凋亡过程中,线粒体的质量和膜电势均有所下降,但其去极化作用增强。

关键词：喜树碱人HL-60细胞凋亡线粒体

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免疫突触形成过程中T细胞受体的重定向运动:涡旋驱动模型

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中国免疫学杂志 2005年第11期21卷 818-821,825页

作者：刘顺会韩博平曾耀英何贤辉广东药学院广州510224 暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广州510623

目的:建立T细胞受体(TCR)在免疫突触形成过程中作重定向(reorientation)运动的机制模型.方法:基于经典流体力学环境中的双分子反应传能原理,提出了T细胞受体的涡旋驱动模型,利用免疫突触内耦合的受体或配体分子作为涡源驱动T细胞受体分... 详细信息

目的:建立T细胞受体(TCR)在免疫突触形成过程中作重定向(reorientation)运动的机制模型.方法:基于经典流体力学环境中的双分子反应传能原理,提出了T细胞受体的涡旋驱动模型,利用免疫突触内耦合的受体或配体分子作为涡源驱动T细胞受体分子的募集.结果:模型计算的结果表明,在强度及作用频率同时具备一定范围的涡旋连续驱动下,TCR重定向运动速度可达到实验测定的范围(0.04～0.1 μm/s).结论:本模型证明突触内受体/配体对耦合时通过将其结合自由能转化为细胞内外流体涡旋运动的机械能可能直接提供了TCR重定向运动的驱动力.

关键词：免疫突触 T细胞受体重定向运动涡旋

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HLA—A0201与EGFP融合蛋白表达载体的构建及其在K562细胞的表达和定位

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中国病理生理杂志 2004年第5期20卷 705-710页

作者：何贤辉徐丽慧刘毅蔡小嫦曾耀英暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室第一附属医院皮肤科广东广州510632

目的 :构建增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)与HLA -A 0 2 0 1(A 0 2 0 1)融合蛋白哺乳动物细胞表达载体 ,分析其在K5 6 2细胞中的表达和亚细胞定位。方法 :以RT -PCR方法克隆A 0 2 0 1cDNA ,构建A 0 2 0 1-EGFP融合蛋白表达载体 ,转染K5 6 2... 详细信息

目的 :构建增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)与HLA -A 0 2 0 1(A 0 2 0 1)融合蛋白哺乳动物细胞表达载体 ,分析其在K5 6 2细胞中的表达和亚细胞定位。方法 :以RT -PCR方法克隆A 0 2 0 1cDNA ,构建A 0 2 0 1-EGFP融合蛋白表达载体 ,转染K5 6 2细胞 ,以流式细胞仪和激光共聚焦显微镜分析融合蛋白的表达及其亚细胞定位。结果 :从两个HLA -A2阳性供者外周血细胞中克隆到A 0 2 0 1cDNA编码区全长序列。通过PCR方法在起始位点前加入Kozak序列并删除终止密码 ,成功构建A 0 2 0 1-EGFP融合蛋白表达载体。以该质粒转染K5 6 2细胞 ,5h后A 0 2 0 1和EGFP的表达百分率分别为 2 5 12± 2 2 6、2 7 37± 3 5 9,2 4h后表达水平无明显提高。表达的融合蛋白主要分布于细胞膜上 ,胞内分布较少。相反 ,转染空载体的细胞不表达A 0 2 0 1分子 ,仅表达EGFP ,且其在细胞内呈弥散样分布。结论 :成功构建A 0 2 0 1-EGFP融合蛋白表达载体 ,并在K5 6 2细胞中得到表达 ,表达产物主要分布于细胞膜表面 ,提示表达该融合蛋白的K5 6 2细胞是潜在的人工抗原提呈细胞。

关键词： HKA—A2抗原绿色荧光蛋白质类融合蛋白质类显微镜检查共焦

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