检索结果-内蒙古大学图书馆

中国免疫学杂志 2006年第5期22卷 445-448页

作者：李海仙曾耀英肇静娴曾祥凤李孝建暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广州510632

目的:研究相当于妊娠后外周血和胎盘局部浓度的孕酮(P4)体外对HIV-1感染及复制的影响。方法:检测终浓度为10-6mol/L(相当于妊娠妇女外周血水平)和10-5mol/L(相当于母胎界面局部浓度)的P4对HIV-1介导细胞融合的影响;ELISA法检测感染HIV的... 详细信息

目的:研究相当于妊娠后外周血和胎盘局部浓度的孕酮(P4)体外对HIV-1感染及复制的影响。方法:检测终浓度为10-6mol/L(相当于妊娠妇女外周血水平)和10-5mol/L(相当于母胎界面局部浓度)的P4对HIV-1介导细胞融合的影响;ELISA法检测感染HIV的MT-2细胞培养上清p24抗原含量来探讨对HIV-1复制的影响;流式细胞术检测对淋巴细胞活化后CD69表达的影响和3H-TdR掺入法检测对淋巴细胞增殖的影响。结果:10-5mol/L的P4可以明显抑制HIV-1介导的细胞融合,并且降低感染细胞培养上清中p24抗原含量,两种浓度对淋巴细胞的活化和增殖都有抑制作用。结论:相当于妊娠后母胎界面局部浓度的P4体外可以抑制HIV-1感染和复制,其机制与抑制淋巴细胞活化和增殖有关。

关键词：妊娠孕酮人类免疫缺陷病毒细胞融合活化

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脐血和外周血单个核细胞培养上清影响HIV-1感染的体外实验研究

引用

中国病理生理杂志 2006年第4期22卷 638-641页

作者：李海仙曾耀英曾祥凤肇静娴李孝建王通暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632

目的:体外研究脐血和外周血单个核细胞(CBMC和PBMC)培养上清对HIV-1感染的影响,为发现抗HIV-1的可溶性因子奠定基础。方法:PHA刺激CBMC和PBMC后5h和12h收集上清,加入荧光标记的HIV-1ⅢB/H9和MT-2细胞培养体系中,2h后在倒置荧光显微镜下... 详细信息

目的:体外研究脐血和外周血单个核细胞(CBMC和PBMC)培养上清对HIV-1感染的影响,为发现抗HIV-1的可溶性因子奠定基础。方法:PHA刺激CBMC和PBMC后5h和12h收集上清,加入荧光标记的HIV-1ⅢB/H9和MT-2细胞培养体系中,2h后在倒置荧光显微镜下观察其对细胞融合的影响;用Luminex100TM分析仪检测收集上清中细胞因子含量。结果:PHA刺激CBMC和PBMC后5h和12h的上清均可抑制HIV-1ⅢB/H9和MT-2细胞融合,同一时间收集的PBMC和CBMC上清对HIV-1ⅢB/H9和MT-2细胞融合的抑制作用无差异,但5h上清的抑制作用强于12h的上清;CBMC5h上清中促炎症细胞因子比PBMC5h上清为低,而CCR5配体MIP-1α和RANTES则比PBMC5h上清高,差异显著(P<0·05)。结论:通过脐血和外周血单个核细胞可以制备有效抗HIV感染的可溶性因子,可能为艾滋病治疗药物提供新的来源。

关键词：胎血单核细胞细胞因子类 HIV-1

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MLR中刺激细胞活化状态对应答T细胞CD69表达的影响

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中国病理生理杂志 2002年第8期18卷 913-917页

作者：肇静娴曾耀英何贤辉狄静芳曾山王南暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632

目的 :研究混合淋巴细胞反应 (MLR)中刺激细胞的活化状态对应答T细胞活化的影响 ,为指导临床的组织器官移植提供一定理论依据。方法 :混合淋巴细胞培养 (MLC)前对刺激细胞进行不同预处理以改变其功能状态 ,利用单克隆抗体与流式细胞术 ... 详细信息

目的 :研究混合淋巴细胞反应 (MLR)中刺激细胞的活化状态对应答T细胞活化的影响 ,为指导临床的组织器官移植提供一定理论依据。方法 :混合淋巴细胞培养 (MLC)前对刺激细胞进行不同预处理以改变其功能状态 ,利用单克隆抗体与流式细胞术 ,在混合培养后不同时点对各组应答T细胞活化表面分子CD69的表达程度进行分析。结果 :在培养 2 4h、48h和 72h后 ,MLCa组 (刺激细胞经预先活化组 )应答T细胞的CD69表达百分率均明显高于MLC组 (刺激细胞未经预先活化组 ) ,分别为 5 2 1 %± 0 2 4 %vs 1 98%± 0 33 % ,2 9 81 %± 0 85 %vs 2 0 65 %±1 0 0 %和 39 61 %± 1 62 %vs 1 3 49%± 0 60 % ,(P <0 0 1 )。结论

关键词：刺激细胞 T细胞混合淋巴细胞培养试验活化分析流式细胞术器官移植移植免疫

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卵巢切除对成年小鼠免疫系统淋巴细胞亚群组成的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2005年第2期21卷 254-255页

作者：赵莉曾耀英罗璐俞瑜王青狄静芳暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632

　目的: 研究卵巢切除对成年小鼠胸腺和外周淋巴器官淋巴细胞亚群组成的影响。方法: 用双色免疫荧光结合流式细胞仪, 检测成年小鼠双侧卵巢切除 14d后, 胸腺、脾脏和腹腔淋巴细胞亚群的比例。结果: 与伪手术组相比较, 卵巢切除的成年小... 详细信息

　目的: 研究卵巢切除对成年小鼠胸腺和外周淋巴器官淋巴细胞亚群组成的影响。方法: 用双色免疫荧光结合流式细胞仪, 检测成年小鼠双侧卵巢切除 14d后, 胸腺、脾脏和腹腔淋巴细胞亚群的比例。结果: 与伪手术组相比较, 卵巢切除的成年小鼠胸腺CD4+ CD8+ T细胞的比率显著升高(P<0. 05), CD4- CD8- T细胞和CD4+ CD8- T细胞的比率显著降低(P<0. 05); 脾脏和淋巴结中CD4+ CD8- T细胞的比率显著降低(P<0. 05)。结论: 成年小鼠切除卵巢后, 可明显影响免疫系统淋巴细胞亚群的组成; 对于胸腺T细胞的发育及向外周输出也有一定的影响。

关键词：卵巢切除胸腺细胞流式细胞术

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同种异基因移植引流淋巴结及外周血T细胞活化分析

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中国病理生理杂志 2003年第2期19卷 203-206页

作者：肇静娴曾耀英何贤辉王南曾山狄静芳暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632

目的 :研究同种异基因移植早期局部引流淋巴结和外周血T细胞的活化情况。方法 :以小鼠前臂皮下非血管化心肌移植为模型 ,利用流式细胞术分析前臂引流淋巴结及外周血不同T细胞亚群的CD69表达水平。结果 :同种异基因移植后 72h,引流淋巴结... 详细信息

目的 :研究同种异基因移植早期局部引流淋巴结和外周血T细胞的活化情况。方法 :以小鼠前臂皮下非血管化心肌移植为模型 ,利用流式细胞术分析前臂引流淋巴结及外周血不同T细胞亚群的CD69表达水平。结果 :同种异基因移植后 72h,引流淋巴结CD4+ T细胞和CD8+ T细胞的CD69表达百分率均明显高于移植前 (P <0 0 1 ) ,且CD8+ T细胞的表达水平高于CD4+ T细胞 (P <0 0 1 ) ;各组外周血CD4+ T细胞和CD8+ T细胞的CD69表达百分率均无显著差异 ;局部应用弗氏完全佐剂和全身应用CsA可分别增强和抑制同种异基因移植后CD4+ T细胞和CD8+ T细胞的CD69表达 (P <0 0 5或P <0 0 1 )。结论

关键词：同种异基因移植 T淋巴细胞活化分析

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天花粉蛋白诱导人类白血病细胞株HL-60细胞凋亡的研究

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中国病理生理杂志 2001年第3期17卷 200-203,T001页

作者：何贤辉曾耀英孙荭曾洁铭徐丽慧狄静芳暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632

目的 :研究单链核糖体失活蛋白天花粉蛋白 (TCS)诱导人类白血病细胞株HL - 6 0细胞发生凋亡的作用及放线菌酮 (CHX)对此作用的影响。方法 :采用流式细胞术分析及荧光显微镜观察研究TCS诱导HL - 6 0细胞发生凋亡的情况。结果 :流式细胞... 详细信息

目的 :研究单链核糖体失活蛋白天花粉蛋白 (TCS)诱导人类白血病细胞株HL - 6 0细胞发生凋亡的作用及放线菌酮 (CHX)对此作用的影响。方法 :采用流式细胞术分析及荧光显微镜观察研究TCS诱导HL - 6 0细胞发生凋亡的情况。结果 :流式细胞术分析表明TCS能够诱导HL - 6 0细胞发生明显的凋亡现象 ,TCS (2 0mg/L)处理48h细胞凋亡百分率为 48 7%± 2 3% ( x±s) ,明显高于对照组的凋亡率 (6 3%± 1 0 % ) (P <0 0 5 ) ,而CHX (5mg/L)相同条件下诱导的凋亡率为 6 5 3%± 3 9%。TCS诱导的凋亡现象进一步为荧光显微镜的观察及DNA凝胶电泳所证实 ,TCS处理的细胞中有许多细胞呈现典型的凋亡细胞核形态改变 ,如染色体凝缩、核碎裂等 ;DNA凝胶电泳显示TCS处理的细胞呈典型的梯级格局。进一步研究表明预先以低浓度CHX (0 2mg/L)处理可显著加强TCS的作用 ,而在这个浓度下单独CHX并不诱导明显的细胞凋亡。TCS诱导HL - 6 0细胞的凋亡呈时间和剂量依赖关系。结论 :TCS能够诱导HL - 6 0细胞发生明显的凋亡 ,CHX可加强这种作用。

关键词：天花粉素放线菌酮细胞凋亡流式细胞术白血病 HL-60细胞

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喘可治延长小鼠异基因移植皮片存活时间与CD4^+CD25^+调节性T细胞相关性研究

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中国病理生理杂志 2005年第4期21卷 765-767页

作者：王幼萍曾耀英肇静娴赵莉邢飞跃狄静芳江逊李海仙暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632

目的:研究喘可治抑制小鼠异基因皮片移植排斥作用与小鼠体内CD4 + CD2 5 + 调节性T细胞(CD4 +CD2 5 + Tr)变化的相关性。方法:建立小鼠同种异基因与同基因皮片移植模型,通过腹腔注射给药喘可治(CKZ)观察其对皮片移植存活时间的影响,并利... 详细信息

目的:研究喘可治抑制小鼠异基因皮片移植排斥作用与小鼠体内CD4 + CD2 5 + 调节性T细胞(CD4 +CD2 5 + Tr)变化的相关性。方法:建立小鼠同种异基因与同基因皮片移植模型,通过腹腔注射给药喘可治(CKZ)观察其对皮片移植存活时间的影响,并利用3色免疫荧光标记和流式细胞术分析受鼠外周血CD4 + CD2 5 + Tr变化规律。结果:同种异基因移植CKZ组的移植皮片存活时间显著长于同种异基因移植对照组,分别为(19 .5±2 .3)d和(10 . 2±2 .2 )d ,P <0 . 0 1;在同种异基因皮片移植后,受体外周血CD4 + CD2 5 + Tr占CD4 + T细胞百分率明显升高,术后8d达到高峰(P <0 . 0 1) ,然后出现下降趋势,其中同种异基因移植对照组在术后13d时已回落至正常水平,而同种异基因移植CKZ组在术后2 3d时仍维持在高于移植前水平;在同基因皮片移植后,CKZ组与对照组外周血CD4 + CD2 5 +Tr水平均无明显升高(P >0 . 0 5 )。结论:喘可治可延长小鼠同种异基因移植皮片存活时间,通过升高CD4 + CD2 5 + Tr水平而发挥免疫抑制效应可能是其机制之一。

关键词：喘可治 CD4^+CD25^+调节性T细胞移植,皮肤流式细胞术

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人EGF受体L2结构域在大肠杆菌中表达、包涵体柱上复性及纯化

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生物工程学报 2005年第4期21卷 597-603页

作者：徐丽慧洪岸何贤辉暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广州510632 暨南大学生物工程研究所

以PCR方法从克隆的EGFR胞外区cDNA中扩增编码EGFR_L2结构域的DNA片段,在其3′端加入编码His6标签的序列,与pET_3c连接构建EGFR_L2原核表达载体。该蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达,免疫印迹分析表明表达产物全部以包涵体形式存在... 详细信息

以PCR方法从克隆的EGFR胞外区cDNA中扩增编码EGFR_L2结构域的DNA片段,在其3′端加入编码His6标签的序列,与pET_3c连接构建EGFR_L2原核表达载体。该蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达,免疫印迹分析表明表达产物全部以包涵体形式存在,分步透析法和稀释法都不能获得可溶性复性产物,而Ni2+_NTA柱上复性法不仅能够获得可溶性的EGFR_L2蛋白,而且产物同时得到高度纯化,纯度>95%,复性的EGFR_L2与其配基EGF具有特异性的结合活性,但亲和力较低。这表明His6标签不但便于纯化目标蛋白,而且可利用Ni2+_NTA柱进行柱上复性,适用于不易通过常规方法复性的重组蛋白的制备。

关键词：表皮生长因子受体 L2结构域原核表达包涵体重折叠

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环孢菌素A对小鼠T细胞活化影响的血清免疫药理学评价

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细胞与分子免疫学杂志 2002年第3期18卷 225-227页

作者：全世明曾耀英何贤辉曾山狄静芳肇静娴暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632

目的　应用血清免疫药理学技术 ,探讨环孢菌素A(CsA)对T细胞体外活化的影响 ,以进一步揭示CsA免疫调节的分子机制 ,为临床用药提供理论依据。方法　分离小鼠淋巴结细胞 ,分别与CsA、5 %CsA血清预孵后 ,加入多克隆刺激剂继续培养共 2 4h... 详细信息

目的　应用血清免疫药理学技术 ,探讨环孢菌素A(CsA)对T细胞体外活化的影响 ,以进一步揭示CsA免疫调节的分子机制 ,为临床用药提供理论依据。方法　分离小鼠淋巴结细胞 ,分别与CsA、5 %CsA血清预孵后 ,加入多克隆刺激剂继续培养共 2 4h。收获细胞 ,进行双色免疫荧光标记 ,以流式细胞术分析T细胞上CD6 9分子的表达情况。结果　在CsA和 5 %CsA血清作用下 ,ConA活化的T细胞CD6 9表达的百分率分别为 (2 4 15± 3 38) %和 (2 3 6 8±6 89) % ,与相应对照组 [分别为 (6 4 6 7± 5 88) %和 (6 4 35± 10 13) % ]相比较均有显著差异 (P <0 0 1) ;在CsA和5 %CsA血清作用下 ,PDB活化的T细胞CD6 9表达的百分率分别为 (78 86± 7 70 ) %和 (80 0 5± 9 91) % ,与相应对照组 [分别为 (84 79± 6 87) %和 (79 6 8± 4 17) % ]相比较均无显著差异 (P >0 0 5 )。结论　CsA(410nmol/L)和含CsA血清均可强烈抑制ConA刺激的T细胞活化 ,而对PDB刺激的T细胞活化无抑制效应。 5 %CsA血清与CsA单纯药物体外实验的结果相一致。

关键词：环孢菌素A CD69 T淋巴细胞血清免疫药理学

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Delta 1与Jagged 1在诱导T细胞分化中的不同作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2006年第6期26卷 574-577页

作者：于哲邢飞跃曾耀英暨南大学教育部组织移植与免疫重点实验室广州510632

Delta 1（又称delta—like 1或DⅡ 1）与Jagged 1（又称Serrate 1）是脊椎动物Notch的两个配体，它们与相同或不同的Notch受体结合激活Notch信号通路，决定细胞分化的命运，参与调控许多组织的生长发育。单独敲除Delta1或Jagged 1小鼠... 详细信息

Delta 1（又称delta—like 1或DⅡ 1）与Jagged 1（又称Serrate 1）是脊椎动物Notch的两个配体，它们与相同或不同的Notch受体结合激活Notch信号通路，决定细胞分化的命运，参与调控许多组织的生长发育。单独敲除Delta1或Jagged 1小鼠呈现不同的表型，提示这两个配体具有非重叠作用。Delta 1与Jagged 1在T细胞、抗原提呈细胞（antigen presenting cells，APC）如树突状细胞、B细胞和巨噬细胞等表面均有表达，在诱导T细胞分化中起着重要作用。近来发现，Delta 1可以诱导外周T细胞向1型辅助性T细胞（helper T cell 1，TH 1）分化，而Jagged 1诱导其向TH 2分化；

关键词： T细胞分化 Delta Notch cells 抗原提呈细胞辅助性T细胞 delta 树突状细胞脊椎动物信号通路

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