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中国病理生理杂志 2005年第1期21卷 50-53页

作者：沈媛曾耀英何贤辉肇静娴江逊暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632

目的探讨髓样DC(MDC)和浆细胞淋巴样DC(PDC)在正常妊娠中母胎免疫耐受机制中的作用。方法选择正常妊娠妇女30例,分别在每个妊娠妇女早期、中期和晚期妊娠时采集外周血。应用流式细胞仪术,检测MDC和PDC占外周血单个核细胞的百分率及MDC/... 详细信息

目的探讨髓样DC(MDC)和浆细胞淋巴样DC(PDC)在正常妊娠中母胎免疫耐受机制中的作用。方法选择正常妊娠妇女30例,分别在每个妊娠妇女早期、中期和晚期妊娠时采集外周血。应用流式细胞仪术,检测MDC和PDC占外周血单个核细胞的百分率及MDC/PDC比率,正常未妊娠女性为对照组。结果与未妊娠妇女外周血中MDC和PDC的百分率(MDC,032%±008%;PDC,012%±005%)及MDC/PDC比率(296±139)相比早期妊娠妇女外周血中MDC和PDC的百分率(MDC,029%±007%;PDC,011%±004%)及MDC/PDC比率(295±085)无显著差异(P>005);中期妊娠妇女外周血中MDC和PDC的百分率(MDC,011%±006%;PDC,007%±003%)及MDC/PDC比率(152±044)降低(P<001);晚期妊娠妇女外周血中MDC和PDC的百分率(MDC,012%±006%;PDC,008%±003%)及MDC/PDC比率(154±043)降低(P<001)。与正常早期妊娠妇女外周血中MDC和PDC的百分率及MDC/PDC比率相比,中、晚期妊娠显著降低(P<001)。结论正常妊娠妇女中期和晚期妊娠时外周血中MDC和PDC的百分率及MDC/PDC比率均降低。

关键词：妊娠树突细胞免疫抑制

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槲皮素对小鼠T细胞体外活化的抑制作用

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中国病理生理杂志 2003年第4期19卷 468-471页

作者：王南曾耀英何贤辉肇静娴邱海霞暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632

目的 :通过分析槲皮素对淋巴细胞早期活化标记物CD6 9表达的影响 ,探讨其对T淋巴细胞体外活化抑制作用的机制。方法 :分离小鼠淋巴结细胞 ,加入多克隆刺激剂及槲皮素共同培养 ,分别于 2、6、2 4h收获细胞 ,进行双色免疫荧光标记 ,以流... 详细信息

目的 :通过分析槲皮素对淋巴细胞早期活化标记物CD6 9表达的影响 ,探讨其对T淋巴细胞体外活化抑制作用的机制。方法 :分离小鼠淋巴结细胞 ,加入多克隆刺激剂及槲皮素共同培养 ,分别于 2、6、2 4h收获细胞 ,进行双色免疫荧光标记 ,以流式细胞仪对T细胞的CD6 9分子表达情况进行分析并计算抑制率。结果 :槲皮素 (终浓度 10 μmol/L)对未受刺激的T细胞CD6 9表达百分率无明显影响 ,而经佛波醇酯 (PDB)及刀豆蛋白A(ConA)活化同时加入槲皮素的T细胞CD6 9表达百分率在 2h、6h及 2 4h均显著下降 (P <0 .0 1)。槲皮素对PDB的抑制率随作用时间延长而明显下降 ,对ConA的抑制率平缓而持久。结论 :槲皮素对PDB、ConA活化的T淋巴细胞均显示明显的抑制效应 ,表明该药可能作用于T细胞活化信号传递通路蛋白激酶Cθ或其下游部位 ,并且 ,这种抑制效应表现出一定的可逆性。

关键词：槲皮素小鼠 T细胞体外活化抑制作用流式细胞术

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多聚次黄苷酸-胞苷酸诱发性小鼠流产模型CD200^+CK7^+滋养层细胞分析

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中国病理生理杂志 2005年第8期21卷 1498-1502页

作者：林羿曾耀英狄静芳曾山肇静娴王通曾祥凤冯铮暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632

目的:在多聚次黄苷酸-胞苷酸[poly(I∶C)]诱发性流产小鼠模型中研究CD200+CK7+细胞与胚胎吸收的关系。方法:采用Balb/c×C57BL/6和Balb/c×Balb/c小鼠,在孕早期注射poly(I∶C)以建立诱发性流产模型,并采用流式细胞术检测胎盘CD2... 详细信息

目的:在多聚次黄苷酸-胞苷酸[poly(I∶C)]诱发性流产小鼠模型中研究CD200+CK7+细胞与胚胎吸收的关系。方法:采用Balb/c×C57BL/6和Balb/c×Balb/c小鼠,在孕早期注射poly(I∶C)以建立诱发性流产模型,并采用流式细胞术检测胎盘CD200+CK7+/CK7+细胞百分率和CD200+CK7+细胞的绝对数,采用免疫组化法对CD200+细胞在母-胎界面的分布情况进行定位检测。结果:在每例检测104个细胞的情况下,poly(I∶C)处理组上述细胞百分率和绝对数均显著低于对照组(Balb/c×C57BL/6小鼠:6·3%±6·2%vs36·1%±9·3%,P<0·01;140±111vs1941±809,P<0·01。Balb/c×Balb/c小鼠:8·5%±4·8%vs26·1%±8·0%,P<0·01;701±499vs1886±1112,P<0·05)。与此相应,poly(I∶C)处理组孕13·5d的胚胎吸收率也显著增高(Balb/c×C57BL/6小鼠:从9·1%升至37·0%,P<0·01;Balb/c×Balb/c小鼠:从5·8%升至29·0%,P<0·01)。免疫组化法检测发现,这些CD200+细胞主要分布在胎盘和子宫交界处的胎盘组织中。结论:在母-胎界面CK7+细胞群中CD200分子适当水平的表达,对于维持小鼠妊娠免疫耐受过程可能具有重要意义。

关键词：流产滋养层角蛋白

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CD4^+CD25^+调节性T细胞的发育与胸腺CD4^-CD25^+细胞关联性的探讨

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中国病理生理杂志 2005年第7期21卷 1406-1410页

作者：肇静娴曾耀英暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632

目的:探讨CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+regulatoryTcells,CD4+CD25+Tr)的发育及其与胸腺CD4-CD25+细胞的关系。方法:以流式细胞术检测小鼠从出生至发育成熟过程中,胸腺、脾脏、淋巴结和外周血中CD4+CD25+Tr比例变化,以及胸腺CD4-CD25... 详细信息

目的:探讨CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+regulatoryTcells,CD4+CD25+Tr)的发育及其与胸腺CD4-CD25+细胞的关系。方法:以流式细胞术检测小鼠从出生至发育成熟过程中,胸腺、脾脏、淋巴结和外周血中CD4+CD25+Tr比例变化,以及胸腺CD4-CD25+细胞比例变化;通过磁激活细胞分选(MACS)从小鼠淋巴结纯化CD4+CD25+T和CD4+CD25-T细胞,经CFDA-SE标记,以多种刺激形式诱导增殖。结果:小鼠出生1d到10周的发育过程中,胸腺CD4+CD25+Tr比例一直比较恒定,但在脾脏、淋巴结和外周血,随鼠龄增加而不断升高,从1d龄到1周时升高最迅速,其后的升高速度逐渐减慢,10周龄时达平台期。胸腺中CD4-CD25+细胞在出生1d的小鼠比例非常高,1d龄到1周龄期间迅速下降,10周龄时达平台期。ConA不能诱导CD4+CD25+Tr和CD4+CD25-T细胞增殖,但CD4+CD25+Tr出现一过性细胞增大;佛波醇酯加离子霉素能诱导CD4+CD25+Tr和CD4+CD25-T细胞增殖;包被的抗CD3抗体加可溶性抗CD28抗体能刺激CD4+CD25-T细胞增殖,但CD4+CD25+Tr不增殖,加入高浓度IL-2,CD4+CD25-T细胞增殖更强,CD4+CD25+Tr出现增殖。结论:胸腺CD4-CD25+细胞很有可能是CD4+CD25+Tr的前体。

关键词： CD4^+CD25^+ 调节性T细胞胸腺 CD4^-CD25^+细胞

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雌激素处理DCs在诱导小鼠同种皮肤移植免疫耐受中的作用

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中国病理生理杂志 2008年第10期24卷 2020-2024页

作者：沈媛曾耀英肇静娴暨南大学附属第一医院广东广州510632 暨南大学组织移植与免疫实验室广东广州510632

目的:研究雌二醇(17β-estradiol,E2)处理的供体骨髓来源树突细胞(dendritic cells,DCs)在诱导小鼠同种异基因皮肤移植免疫耐受中的作用。方法:体外培养小鼠骨髓来源DCs,然后用E2处理。受体小鼠在皮肤移植前经尾静脉分别输注经E2处理的... 详细信息

目的:研究雌二醇(17β-estradiol,E2)处理的供体骨髓来源树突细胞(dendritic cells,DCs)在诱导小鼠同种异基因皮肤移植免疫耐受中的作用。方法:体外培养小鼠骨髓来源DCs,然后用E2处理。受体小鼠在皮肤移植前经尾静脉分别输注经E2处理的供体小鼠DCs、供体小鼠成熟DCs以及不成熟DCs,输注PBS为对照组。1周后对受体小鼠进行同种异基因皮肤移植,手术后观察皮肤存活情况,应用流式细胞术检测手术前后受体小鼠外周血中CD4+CD25+调节性T细胞百分率的变化。结果:在同种异基因皮肤移植中,受体小鼠尾静脉输注经E2处理的DCs组与对照组和不成熟DCs组比较,移植皮肤存活时间显著延长,较不成熟DCs组存活时间平均延长10.6d(P<0.01);与对照组和不成熟DCs组比较,E2处理组外周血中CD4+CD25+调节性T细胞百分率明显升高(P<0.01)。结论:在同种异基因小鼠皮肤移植模型中,E2处理的供体小鼠DCs可以延长移植皮肤存活时间。

关键词：树突细胞雌二醇免疫耐受皮肤移植小鼠

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Jagged1(CD339)诱导调节性T细胞分化、成熟及介导免疫耐受

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细胞与分子免疫学杂志 2005年第6期21卷 798-800页

作者：于哲邢飞跃曾耀英暨南大学教育部组织移植与免疫重点实验室广东广州510632

Jagged1(新近被命名为CD339[1])是存在于哺乳动物细胞膜上Notch受体的主要配体之一,为单次跨膜糖蛋白,表达于骨髓、胎儿肝基质细胞和胸腺上皮细胞等多种组织,参与调控许多组织的生长发育,在维持正常造血前体细胞及其增殖过程中起着重要... 详细信息

Jagged1(新近被命名为CD339[1])是存在于哺乳动物细胞膜上Notch受体的主要配体之一,为单次跨膜糖蛋白,表达于骨髓、胎儿肝基质细胞和胸腺上皮细胞等多种组织,参与调控许多组织的生长发育,在维持正常造血前体细胞及其增殖过程中起着重要作用[2]。Jagged1在抗原提呈细胞(antigenpresenting cells,APC),如树突状细胞(dendritic cells,DC)、B细胞和巨噬细胞表面表达丰富,介导DC成熟和分化[3]。临床上发现,Jagged-Notch信号转导异常与类风湿性关节炎的产生密切相关[4]。近来发现,Jagged1与其受体结合后,激活Notch信号通路

关键词： Jagged1 调节性T细胞分化成熟

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转化生长因子-β与妊娠高血压综合征

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中国妇幼保健 2005年第6期20卷 765-767页

作者：沈媛曾耀英暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室 510632

转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)是一种多功能生长因子,可对众多的组织器官产生生物学效应,具有调节细胞生长、分化和免疫功能,抑制炎症,促进组织修复和胚胎发育等功能[1],尤其在滋养细胞的增殖、分化、免疫与... 详细信息

转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)是一种多功能生长因子,可对众多的组织器官产生生物学效应,具有调节细胞生长、分化和免疫功能,抑制炎症,促进组织修复和胚胎发育等功能[1],尤其在滋养细胞的增殖、分化、免疫与内分泌功能调节中具有重要意义.目前,妊高征的病因尚不明确,但其发病机制主要与滋养细胞有关[2].近年来,国外有学者将对滋养层细胞的生物学行为与功能有重要调节作用的TGF-β应用到妊高征的病因研究[3],初步证实两者之间存在密切关系.现将有关TGF-β与妊高征关系的研究综述如下.

关键词：转化生长因子-β 妊娠高血压综合征免疫功能细胞生长胚胎发育滋养细胞

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地塞米松介导胸腺细胞凋亡过程中线粒体和细胞结构蛋白的变化

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中国病理生理杂志 2005年第7期21卷 1415-1418页

作者：王通曾耀英肇静娴林羿梁佩燕暨南大学教育部组织移植与免疫重点实验室广东广州510632

目的:研究地塞米松(DEX)介导的小鼠胸腺细胞凋亡过程中线粒体质量和结构蛋白变化特点。方法:以地塞米松(DEX)诱导小鼠胸腺细胞凋亡为模型,利用AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术研究细胞凋亡和坏死,JC-1染色流式细胞术检测线粒体膜电势(△... 详细信息

目的:研究地塞米松(DEX)介导的小鼠胸腺细胞凋亡过程中线粒体质量和结构蛋白变化特点。方法:以地塞米松(DEX)诱导小鼠胸腺细胞凋亡为模型,利用AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术研究细胞凋亡和坏死,JC-1染色流式细胞术检测线粒体膜电势(△Ψm)和线粒体质量,利用CFDA-SE染色流式细胞术检测细胞结构蛋白变化。结果:在1×10-6mol/LDEX诱导下,小鼠胸腺细胞在6h凋亡比率为(51.25±5.51)%,对照组为(12.03±2.00)%,差异显著(P<0.01);DEX组坏死比率为(30.25±3.67)%,对照组为(10.11±1.11)%,差异显著(P<0.01)。DEX组在6h时点的线粒体质量显著低于对照组(P<0.01),FL1平均荧光强度分别为(561.62±54.27)和(900.25±38.80)。DEX同时引起线粒体膜电势的显著下降(P<0.01),对照组FL2平均荧光强度为(267.51±26.48),DEX组为(133.17±12.29)。成熟T细胞培养48h,CFDA-SE法仅检测到亲代单一细胞峰;而在ConA刺激条件下出现3个子代峰。对照组小鼠胸腺细胞在CFDA-SE染色培养6h条件下,存在(5.25±1.15)%的低荧光强度细胞群,而在DEX刺激下,该群细胞占(47.39±9.76)%,并且在直方图结果上形成明显的细胞峰。结论:DEX诱导小鼠胸腺细胞凋亡过程中,线粒体质量和细胞结构蛋白均有所下降;CFDA-SE染色流式细胞术可以作为基于细胞结构蛋白变化的凋亡定量检测方法。

关键词：地塞米松胸腺细胞细胞结构蛋白细胞凋亡线粒体

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寡肽VLPALPQ对小鼠妊娠耐受的免疫调节作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第10期27卷 878-882页

作者：林羿仲艳敏 Nisar Khan 刘兆宇狄静芳曾山 Robbert Benner 暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广州510632 荷兰鹿特丹Erasmus医学中心

目的观察hCG来源的寡肽缬-亮-脯-丙-亮-脯-谷胺(Val-Leu-Pro-Ala-Leu-Pro-Gln,VL- PALPQ)对双链RNA(dsRNA)诱导建立的小鼠流产模型妊娠结局的影响,并通过对淋巴细胞亚群及细胞内IL-12水平的分析研究其免疫调节机制。方法在BALB/c×c... 详细信息

目的观察hCG来源的寡肽缬-亮-脯-丙-亮-脯-谷胺(Val-Leu-Pro-Ala-Leu-Pro-Gln,VL- PALPQ)对双链RNA(dsRNA)诱导建立的小鼠流产模型妊娠结局的影响,并通过对淋巴细胞亚群及细胞内IL-12水平的分析研究其免疫调节机制。方法在BALB/c×c57BL/6小鼠孕7.5 d注射dsRNA以建立诱发性流产模型,孕期多次腹腔注射VLPALPQ进行干预,对照组以PBS代替。分别计算孕9 d和13 d胚胎吸收率,并用4色流式细胞术分析外周血和胎盘中多种淋巴细胞亚群及CD45+细胞内IL-12的变化。结果VLPALPQ处理组孕9 d时胚胎吸收率较诱发性流产组有明显下降(P<0.05),孕13 d时下降更为显著(P<0.01)。与此相应,外周血和胎盘中CD45+细胞内IL-12的表达均显著下降(P< 0.01),胎盘中活化型淋巴细胞比率也显著下降。另外,孕13 d时共刺激因子CD86的表达也明显减少。结论VLPALPQ可通过抑制免疫细胞的活性,减弱IL-12的表达,阻断dsRNA所引起的TH1型免疫反应的增强,从而降低小鼠的流产率。

关键词：动物模型免疫耐受免疫调节诱发性流产妊娠

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雌二醇、孕酮对小鼠同种异基因移植物的影响

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免疫学杂志 2006年第2期22卷 129-131页

作者：肇静娴曾耀英王青王通倪兴华狄静芳暨南大学组织移植与免疫教研室教育部重点实验室广州510630

目的通过研究雌二醇(E2)、孕酮(P4)对小鼠同种异基因移植物存活时间的影响,探讨妊娠期间母体外周血中雌、孕激素水平对母体免疫应答能力以及对母胎免疫耐受的影响。方法雌性受体小鼠通过切除双侧卵巢去势,胃饲E2或P4,使外周血E2或P4浓... 详细信息

目的通过研究雌二醇(E2)、孕酮(P4)对小鼠同种异基因移植物存活时间的影响,探讨妊娠期间母体外周血中雌、孕激素水平对母体免疫应答能力以及对母胎免疫耐受的影响。方法雌性受体小鼠通过切除双侧卵巢去势,胃饲E2或P4,使外周血E2或P4浓度达到相当于小鼠妊娠中期水平。以腹腔注射CsA的小鼠作为对照,进行耳后同种异基因半心移植,观察各组移植物存活时间,并取移植部位组织进行石蜡切片HE染色。结果同基因移植组心肌长期存活(>300 d),异基因移植对照组心肌平均存活时间为(12.8±0.8)d。与异基因移植对照组比较,CsA组心肌存活时间显著延长(>20 d),P<0.01;E2组移植心肌存活时间显著缩短(9.7±0.5)d,P<0.01;P4组心肌存活时间与对照组比较无显著差异,平均(12±0.6)d,P>0.05。结论妊娠期母体外周血中E2和P4水平对母体的系统性免疫应答无明显抑制作用,不是维持非胎盘部位母胎免疫耐受的主导性因素。

关键词：雌二醇孕酮同种异基因移植母胎耐受

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