检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞与分子免疫学杂志 2004年第2期20卷 135-139页

作者：何贤辉徐丽慧刘毅蔡小嫦曾耀英暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632 暨南大学第一附属医院皮肤科广东广州510632

目的 :构建增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)与CTLA4融合蛋白真核表达载体 ,分析其在K562细胞中的表达和亚细胞定位。方法 :以RT PCR方法克隆人CTLA4基因 ,构建CTLA4 EGFP融合蛋白的表达载体。以其转染K562细胞后 ,以流式细胞仪和激光共聚焦... 详细信息

目的 :构建增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)与CTLA4融合蛋白真核表达载体 ,分析其在K562细胞中的表达和亚细胞定位。方法 :以RT PCR方法克隆人CTLA4基因 ,构建CTLA4 EGFP融合蛋白的表达载体。以其转染K562细胞后 ,以流式细胞仪和激光共聚焦显微镜分析融合蛋白的表达及其亚细胞定位。结果 :从人外周血细胞中克隆到CTLA4基因的cDNA。通过PCR方法在起始位点前加入Kozak序列并删除终止密码 ,成功地构建CTLA4 EGFP融合蛋白表达载体。以该质粒转染K562细胞 2 4h后 ,CTLA4和EGFP双阳性细胞的百分率为 16%。表达的融合蛋白主要分布于胞内 ,细胞膜上分布较少。相反 ,转染空载体的细胞仅表达EGFP ,且其在细胞内呈弥散样分布。以佛波醇酯加离子霉素刺激后 ,CTLA4 EGFP融合蛋白在细胞表面表达水平升高到 2 9% ,且分布于胞内的融合蛋白向细胞膜靠近并与质膜融合 ;而转染空载体的细胞内EGFP的分布无明显改变。结论 :成功地构建CTLA4 EGFP融合蛋白表达载体 ,并在K562细胞中得到表达。

关键词： CTLA4 绿色荧光蛋白融合蛋白共聚焦显微术

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华蟾素对乳腺癌细胞株MCF-7的杀伤作用研究

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中国药理学通报 2011年第1期27卷 37-41页

作者：马丽娜宋兵金花彭元蔡继业暨南大学光电信息与传感技术重点实验室广东广州510632 暨南大学化学系广东广州510632 暨南大学组织移植与免疫实验中心广东广州510632

目的研究华蟾素诱导人类乳腺癌MCF-7细胞的凋亡作用。方法利用CCK-8法检测华蟾素对乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制作用;用流式细胞术检测细胞的凋亡抑制率;利用倒置荧光显微镜观察细胞整体形态的变化;利用原子力显微镜(AFM)高分辨率、高灵... 详细信息

目的研究华蟾素诱导人类乳腺癌MCF-7细胞的凋亡作用。方法利用CCK-8法检测华蟾素对乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制作用;用流式细胞术检测细胞的凋亡抑制率;利用倒置荧光显微镜观察细胞整体形态的变化;利用原子力显微镜(AFM)高分辨率、高灵敏度的特点,从纳米尺度上进一步观察细胞形貌及超微结构的变化。结果 CCK-8结果显示,华蟾素对MCF-7细胞的生长有明显的抑制作用,且随着剂量的增加(6.25～50 mg.L-1)而增大,当浓度为50 mg.L-1时,抑制率达到(68.40±1.02)%。采用流式细胞术对细胞凋亡的检测结果也表明华蟾素浓度为50 mg.L-1时,细胞晚期凋亡率最大,可达到(55.5±1.2)%。AFM与对照组相比,药物作用后,细胞开始坍塌变矮、细胞变小,周围呈月牙状或环状,浓度最大时,细胞中间出现较大孔洞。结论华蟾素能有效抑制MCF-7细胞的生长增殖并诱导其凋亡。利用AFM在单细胞水平上分析华蟾素对MCF-7细胞的作用,使分析结果更加全面。

关键词：原子力显微镜华蟾素乳腺癌MCF-7细胞细胞凋亡超微结构单细胞水平高分辨率

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人PD-L1 cDNA的克隆及其胞外区蛋白在大肠杆菌中的表达

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细胞与分子免疫学杂志 2004年第6期20卷 659-663页

作者：何贤辉徐丽慧刘毅蔡小嫦曾耀英暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632 暨南大学生物工程研究所广东广州510632

目的 :克隆人PD L1基因的cDNA并构建PD L1胞外区基因的原核表达载体 ,在大肠杆菌中进行表达。方法 :以RT PCR法从活化的人淋巴细胞总RNA中 ,扩增并克隆PD L1的cDNA ,构建PD L1胞外区基因的原核表达载体 ,在大肠杆菌BL2 1(ED3)中进行表... 详细信息

目的 :克隆人PD L1基因的cDNA并构建PD L1胞外区基因的原核表达载体 ,在大肠杆菌中进行表达。方法 :以RT PCR法从活化的人淋巴细胞总RNA中 ,扩增并克隆PD L1的cDNA ,构建PD L1胞外区基因的原核表达载体 ,在大肠杆菌BL2 1(ED3)中进行表达并鉴定。结果 :克隆到PD L1cDNA编码区的全长序列 ,经DNA测序证明其与已报道的序列一致。同时构建了在羧基端带有His6标签的PD L1胞外区基因的原核表达载体 ,并在大肠杆菌中表达。免疫印迹分析表明 ,在IPTG诱导后表达的PD L1胞外区蛋白 ,相对分子质量 (Mr)为 2 50 0 0 ,与理论值的大小相符。该重组蛋白能与抗His6标签的单抗 (mAb)特异性反应。结论 :成功地克隆PD L1基因 ,其胞外区蛋白在大肠杆菌中获得表达 ,为利用PD L1转基因修饰移植物或以PD

关键词： PD-L1 cDNA克隆淋巴细胞重组蛋白

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小鼠同种异基因皮肤移植模型的建立

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2005年第2期26卷 221-223页

作者：刘德许曾耀英狄静芳王曦林弈季煜华暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632

目的:为移植免疫及药物免疫机理研究建立小鼠同种异基因皮肤移植动物模型。方法:受体BALB/c分为A～E共5组,即对照组,5 0、7 5、10、2 0mg/kg环孢菌素A(CsA)剂量组,通过背-背法进行C5 7BL/ 6的全厚皮皮片移植,以探求通过较小剂量CsA及... 详细信息

目的:为移植免疫及药物免疫机理研究建立小鼠同种异基因皮肤移植动物模型。方法:受体BALB/c分为A～E共5组,即对照组,5 0、7 5、10、2 0mg/kg环孢菌素A(CsA)剂量组,通过背-背法进行C5 7BL/ 6的全厚皮皮片移植,以探求通过较小剂量CsA及优化实验条件和护理方式建立供免疫机理研究的动物试验平台。结果:5 0、7 5、10mg/kg组相对于对照组皮片排斥时间无明显差别,而2 0mg/kg组植皮能较长时间存活。结论:2 0mg/kg的CsA剂量可以经济。

关键词：同种异基因皮片移植环孢菌素A

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重组人bFGF的原核表达及其高效价抗血清的制备

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免疫学杂志 2005年第3期21卷 186-189页

作者：徐丽慧洪岸何贤辉汪炬暨南大学生物工程研究所暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室

目的以重组人碱性成纤维生长因子为免疫原,制备高效价抗hbFGF抗血清。方法通过PCR方法改造5’编码区的12个密码子,构建hbFGF原核表达载体并在大肠杆菌(***)中表达,以纯化的hbFGF免疫新西兰兔,制备高效价抗血清,用于重组hbFGF的免疫印迹... 详细信息

目的以重组人碱性成纤维生长因子为免疫原,制备高效价抗hbFGF抗血清。方法通过PCR方法改造5’编码区的12个密码子,构建hbFGF原核表达载体并在大肠杆菌(***)中表达,以纯化的hbFGF免疫新西兰兔,制备高效价抗血清,用于重组hbFGF的免疫印迹分析。结果经过改造的hbFGF基因在***中获得较高水平表达。从可溶性部分纯化得到纯度95%以上的重组hbFGF,以该重组蛋白免疫兔子,在二次加强后以间接ELISA检测抗血清效价可达1∶512000。免疫印迹分析显示该抗血清与***中表达的重组hbFGF和标准hbFGF均有特异性反应,但与某些细菌蛋白存在弱交叉反应,经***菌体蛋白吸附的抗血清,与菌体蛋白的弱交叉反应消失。结论以纯化的重组hbFGF为免疫原制备了高效价的特异性抗血清,经菌体蛋白吸附可消除存在的交叉反应性。

关键词：碱性成纤维生长因子可溶性表达抗血清交叉反应性

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胸腺保护与抗衰老

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中国临床康复 2005年第23期9卷 164-166页

作者：王通曾耀英暨南大学教育部组织移植与免疫重点实验室广东省广州市510632

目的:本文通过分析胸腺的中枢耐受和退化,探讨胸腺保护与机体抗衰老的关系。资料来源:应用计算机检索美国NCBIPubmed数据库1980-01/2004-02关于胸腺保护和机体抗衰老的文章,主要检索主题词包括“thymus,toler-ance,involution,aging”,... 详细信息

目的:本文通过分析胸腺的中枢耐受和退化,探讨胸腺保护与机体抗衰老的关系。资料来源:应用计算机检索美国NCBIPubmed数据库1980-01/2004-02关于胸腺保护和机体抗衰老的文章,主要检索主题词包括“thymus,toler-ance,involution,aging”,语言设为英语。资料选择:选取报道胸腺细胞表达自身抗原、胸腺细胞凋亡和退化影响因素的原创实验性文章以及2001年以来权威期刊关于胸腺中枢耐受和衰老的相关综述文章。纳入标准:①具有原创性,论点论据可靠的实验文章。②观点明确,分析全面的综述文章。③文献主体内容与本课题联系紧密的文章。排除标准:具有明显实验设计和结果错误的文章及观点模糊的综述。质量评价主要考察资料的真实性、实施过程是否严密。资料提炼:共检索到关于胸腺保护和机体抗衰老的文献40篇,25篇文献符合纳入标准。排除的15篇文献均为重复性文章。资料综合:25篇文献分别阐明了中枢耐受、机体衰老和胸腺退化的影响因素问题。胸腺执行着重要的T细胞中枢耐受。该耐受过程伴随着动态的正负选择,正选择保持抗原特异性T细胞输出。保护胸腺是目前惟一能够维持输出抗原特异性T细胞的手段。保护胸腺的前提是从根本上了解胸腺退化的具体影响因素。结论:胸腺表达了几乎所有外周自身抗原,不但可以维持免疫系统特异性T细胞的输出,同时对避免自身免疫疾病及免疫缺陷病有着重要的意义。物理化学、激素、疾病、药物和年龄等因素引起的胸腺退化过程往往伴随者正负选择平衡的打破。胸腺衰老即指示人体衰老,保护胸腺实际上就是一种抗衰老策略。

关键词：胸腺免疫耐受衰老

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中药喘可治对小鼠胸腺细胞抗凋亡作用研究

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辽宁中医杂志 2005年第5期32卷 490-491页

作者：王通曾耀英俞渝暨南大学教育部组织移植与免疫重点实验室广东广州510630

目的:研究中药喘可治(CKZ)对小鼠胸腺细胞的抗凋亡作用。方法:以地塞米松(DEX )诱导小鼠胸腺细胞凋亡建模,以CKZ保护小鼠胸腺细胞;6h时点以AnnexinV -FITC/PI双染流式细胞术检测早期凋亡和坏死细胞、以PI染色流式细胞术检测晚期凋亡。结... 详细信息

目的:研究中药喘可治(CKZ)对小鼠胸腺细胞的抗凋亡作用。方法:以地塞米松(DEX )诱导小鼠胸腺细胞凋亡建模,以CKZ保护小鼠胸腺细胞;6h时点以AnnexinV -FITC/PI双染流式细胞术检测早期凋亡和坏死细胞、以PI染色流式细胞术检测晚期凋亡。结果:CKZ +DEX组早期凋亡比率(3 5 2 9±2 73 ) %显著低于DEX组(4 5 97±1 3 9) %(P <0 0 1) ;该两组坏死细胞比率差异不显著。DEX +CKZ组晚期凋亡百分率为(17 2 6±4 5 8) % ,显著低于CKZ组(3 3 88±5 61) % (P <0 0 1)。上述各组数据与对照组差异显著(P <0 0 1)。

关键词：喘可治地塞米松抗凋亡流式细胞术动物实验

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Jagged1在树突状细胞诱导免疫耐受中的作用

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细胞生物学杂志 2006年第4期28卷 535-538页

作者：滕振平邢飞跃于哲曾耀英暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广州510632

Jagged1是Notch信号通路中的一个配体,近来许多研究表明,它能诱导树突状细胞的成熟,并通过促使T淋巴细胞分化成调节性T细胞或II型T辅助细胞,从而诱导免疫耐受。

关键词： Jagged1 树突状细胞免疫耐受

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GM-CSF在登革病毒感染人单核细胞中的作用

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中华微生物学和免疫学杂志 1997年第4期17卷 302-304页

作者：曹艳英郭辉玉暨南大学组织移植与免疫实验中心中山医科大学微生物教研室

以正常人外周血和脐带血单核细胞作为登革Ⅱ型病毒（Ｄ２Ｖ）感染的靶细胞，研究了粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）对Ｄ２Ｖ复制的影响以及单核细胞感染Ｄ２Ｖ后ＧＭ－ＣＳＦ产生能力的变化。结果表明，ＧＭ－ＣＳＦ能增加... 详细信息

以正常人外周血和脐带血单核细胞作为登革Ⅱ型病毒（Ｄ２Ｖ）感染的靶细胞，研究了粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）对Ｄ２Ｖ复制的影响以及单核细胞感染Ｄ２Ｖ后ＧＭ－ＣＳＦ产生能力的变化。结果表明，ＧＭ－ＣＳＦ能增加Ｄ２Ｖ的复制，Ｄ２Ｖ感染能引起人单核细胞产生ＧＭ－ＣＳＦ，它们的量与Ｄ２Ｖ感染量呈正相关。结果提示，ＧＭ－ＣＳＦ在病毒感染过程中起重要作用。

关键词：登革Ⅱ型病毒人单核细胞 GM-CSF

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小檗碱对DNFB诱导的小鼠迟发型超敏反应的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2005年第4期21卷 418-421页

作者：杜丽蕊何贤辉徐丽慧曾耀英暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632 暨南大学生物工程研究所广东广州510632

目的:研究小檗碱(Ber)对二硝基氟苯(DNFB)诱导的小鼠迟发型超敏反应(DTH)的影响,探讨其免疫抑制作用的机制。方法:BALB/c小鼠分为对照组、DTH组与Ber处理的DTH组。对照组以不含DNFB的溶剂处理,DTH组以5g/LDNFB腹部致敏、耳廓激发的方法... 详细信息

目的:研究小檗碱(Ber)对二硝基氟苯(DNFB)诱导的小鼠迟发型超敏反应(DTH)的影响,探讨其免疫抑制作用的机制。方法:BALB/c小鼠分为对照组、DTH组与Ber处理的DTH组。对照组以不含DNFB的溶剂处理,DTH组以5g/LDNFB腹部致敏、耳廓激发的方法建立模型,Ber处理的DTH组每天腹腔注射(i.p)Ber,连续7d,总剂量为30mg/kg体质量。激发后48h,取小鼠双耳称重了解Ber对炎症抑制率的影响。镜下观察耳廓局部组织的变化;以结晶紫法检查Ber对脾脏T淋巴细胞与细胞外基质(ECM)黏附作用的影响;以膜联蛋白V(AnnexinV)染色检查淋巴结细胞的凋亡率。结果:双耳称重的结果显示,Ber处理的DTH组与DTH组具有显著的差异(P<0.05),能明显抑制DNFB引起的炎症反应;耳廓局部组织学检测也表明,Ber能够抑制DNFB诱导的DTH,明显减少淋巴细胞的浸润。Ber处理的DTH组的T细胞与ECM的黏附能力明显降低(P<0.05)。Ber处理的DTH组与DTH组和对照组的细胞凋亡率均无明显差异(P>0.05)。结论:Ber对DNFB诱导的小鼠DTH具有明显的抑制作用,降低小鼠T细胞与ECM的黏附能力可能是其抑制DTH的机制之一。

关键词：小檗碱淋巴细胞细胞黏附迟发型超敏反应

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