检索结果-内蒙古大学图书馆

生物化学与生物物理进展 2007年第2期34卷 117-123页

作者：陈笛邢飞跃暨南大学组织移植与免疫中心广州510632

ERK3是ERK家族中结构较为独特的成员,尤其在分子生物学特征上与ERK家族其他成员明显不同,如基因结构中外显子之间的大内含子、蛋白质结构中活化环的丝氨酸单磷酸化位点以及激酶C端的延伸序列等.ERK3具有独特的丝氨酸单磷酸化位点,导致... 详细信息

ERK3是ERK家族中结构较为独特的成员,尤其在分子生物学特征上与ERK家族其他成员明显不同,如基因结构中外显子之间的大内含子、蛋白质结构中活化环的丝氨酸单磷酸化位点以及激酶C端的延伸序列等.ERK3具有独特的丝氨酸单磷酸化位点,导致所有以苏氨酸/酪氨酸双磷酸化位点为磷酸化靶点的MEK分子均不能活化***3的C端延伸序列能与细胞周期蛋白D3结合并调控ERK3的亚细胞定位,从而影响ERK3对细胞周期的调节.据目前文献推测,ERK3调控细胞周期的信号通路可能为:Ras→B-Raf→ERK3激酶→ERK3→G1期CDK复合物减少→S期抑制因子增多→细胞增殖阻滞于S期→细胞停止增殖,进入分化.此外,ERK3信号通路的活化与细胞分化、胚胎发育、胰岛素分泌以及肿瘤的发生密切相关.

关键词：细胞外信号调节激酶3 信号通路细胞周期

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氯化钴对人eNOS基因启动子SP3替换改构体转录活性的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2010年第8期26卷 754-757页

作者：龙宇天邢飞跃暨南大学组织移植与免疫中心

目的：构建改造的人血管内皮细胞一氧化氮合酶基因启动子，利用氯化钴诱导的人脐静脉血管内皮细胞-12缺氧模型研究其基因启动子活性变化。方法：含SP1替换SP3突变序列的引物通过PCR构建突变启动子pGL2-eNOS-repSP3载体，将已经构建好的p... 详细信息

目的：构建改造的人血管内皮细胞一氧化氮合酶基因启动子，利用氯化钴诱导的人脐静脉血管内皮细胞-12缺氧模型研究其基因启动子活性变化。方法：含SP1替换SP3突变序列的引物通过PCR构建突变启动子pGL2-eNOS-repSP3载体，将已经构建好的pGL2-eNOS—repSP3载体和pGL2-eNOS分别转染HUVEC-12细胞，并以之前构建的SP1插入eNOS启动子改构体pGL2-eNOS—insSP1为阳性对照，通过双荧光素酶报告基因技术检测并比较不同浓度氯化钴刺激下eNOS启动子转录活性的变化。结果：成功构建了含SP1替换SP3突变序列的eNOS启动子改构体。氯化钴刺激后转染细胞，改构体eNOS启动子活性在一定范围内呈现随氯化钴剂量增加而升高的趋势；SP1替换SP3的eNOS启动子转录活性与SP1插入的eNOS启动子之间无显著差异。结论：pGL2-eNOS—rep—SP3和pGL2-eNOS—insSP1两种改造方法在转录活性上没有显著差别。

关键词：一氧化氮合酶转染启动子内皮细胞氯化钴

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c—Jun氨基末端激酶在小鼠T细胞增殖中的作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第3期27卷 254-259页

作者：于哲邢飞跃王通曾耀英暨南大学组织移植与免疫中心广州510632

目的研究c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase，INK）在小鼠T细胞增殖中的作用。方法以活体染料羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯（CFSE）染色，建立了在多克隆刺激剂刀豆蛋白A（ConA）刺激下评价小鼠T细胞增殖的模型，通过流式... 详细信息

目的研究c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase，INK）在小鼠T细胞增殖中的作用。方法以活体染料羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯（CFSE）染色，建立了在多克隆刺激剂刀豆蛋白A（ConA）刺激下评价小鼠T细胞增殖的模型，通过流式细胞术分析JNK的一种新的特异性抑制剂SP600125在不同剂量、不同时间对T细胞增殖的影响，并应用CellQuest软件分析增殖细胞各代所占比例和增殖指数（PI）及抑制指数（HI）。采用碘化丙锭染色分析不同剂量SP600125对ConA或佛波醇酯（PDB）加离子霉素（Ion）刺激的小鼠T细胞周期变化的作用。结果随着SP600125浓度从1．0μmol／L逐渐增至16．0μmol／L，ConA对T细胞的促增殖作用逐渐减弱，以8．0～16．0μmol／L的抑制作用最为明显，呈剂量依赖关系（r=0．98，P〈0．01）；选择最佳剂量8．0μmol／L，SP600125对T细胞增殖的抑制作用随时间从24h递增至96h而逐渐增强；进一步发现SP600125能使PDB加Ion刺激的小鼠T细胞停滞于G0/G1期，阻止其进入S期和c2，M期，且阻止作用随上述浓度的增加而增强，呈明显剂量依赖关系（S期：r=-0．98，P〈0．01；G2／M期：r=-0．88，P〈0．05）；SP600125也呈剂量依赖性地使ConA诱导的T细胞停滞于G0/G1期，阻止其进入S期（r=-0．90，P〈0．05）。结论JNK信号通路的活化在小鼠T细胞增殖中可能起着重要作用。

关键词： c-Jun氨基末端激酶 T细胞增殖细胞周期

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可溶性Jagged-1/Fc嵌合蛋白诱导淋巴结细胞向CD4^＋CD25^＋T细胞分化

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生物化学与生物物理进展 2008年第6期35卷 676-683页

作者：邢飞跃刘静于哲季煜华暨南大学组织移植与免疫研究中心暨南大学医学院广州510632

直接用可溶性Jagged-1/Fc嵌合蛋白(Jagged-1/Fc)在体外诱导小鼠淋巴结细胞向CD4+CD25+T细胞分化.通过荧光标记单克隆抗体染色结合流式细胞术,观察不同剂量Jagged-1/Fc在不同时间对淋巴结细胞向CD4+CD25+T细胞分化的影响,观察Jagged-1/F... 详细信息

直接用可溶性Jagged-1/Fc嵌合蛋白(Jagged-1/Fc)在体外诱导小鼠淋巴结细胞向CD4+CD25+T细胞分化.通过荧光标记单克隆抗体染色结合流式细胞术,观察不同剂量Jagged-1/Fc在不同时间对淋巴结细胞向CD4+CD25+T细胞分化的影响,观察Jagged-1/Fc诱导T细胞内细胞因子的变化;藉ELISA法检测Jagged-1/Fc诱导分化的T细胞分泌TGF-β1、IL-4和IL-10的水平.结果显示,超过500.0μg/L剂量的Jagged-1/Fc使CD4+CD25+T细胞百分比明显增高,诱导时间需要4～6天,抗Jagged-1单抗能抵消Jagged-1/Fc的诱导作用,用DAPT阻断Notch信号通路的活化也能抑制Jagged-1/Fc的诱导作用,Jagged-1/Fc诱导分化的T细胞培养上清中IL-4和IL-10的水平明显增高,TGF-β1无明显变化,胞内IL-4,IL-10,IL-2和TNF-α的水平也呈增高趋势.上述结果表明,可溶性Jagged-1/Fc嵌合蛋白在体外可诱导小鼠淋巴结细胞向CD4+CD25+调节性T细胞分化.

关键词： Jagged-1 淋巴结细胞调节性T细胞分化

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茴香霉素在小鼠淋巴细胞增殖和活化中的作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第10期27卷 888-892页

作者：于哲邢飞跃王通陈笛陈玲暨南大学组织移植与免疫中心广州510632

目的研究茴香霉素在小鼠淋巴细胞增殖和活化中的作用。方法以活体染料羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰业胺酯染色,建立了在多克隆刺激剂刀豆蛋白A(Con A)刺激下评价小鼠淋巴细胞增殖的模型,通过流式细胞术及MTT法分析茴香霉素在不同剂量下对... 详细信息

目的研究茴香霉素在小鼠淋巴细胞增殖和活化中的作用。方法以活体染料羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰业胺酯染色,建立了在多克隆刺激剂刀豆蛋白A(Con A)刺激下评价小鼠淋巴细胞增殖的模型,通过流式细胞术及MTT法分析茴香霉素在不同剂量下对淋巴细胞增殖的作用;采用碘化丙锭染色分析茴香霉素对Con A或佛波醇酯(PDB)加离子霉素(Ion)刺激的小鼠淋巴细胞周期变化的作用;利用荧光标记的单克隆抗体双染技术结合流式细胞仪检测茴香霉素对小鼠CD3+淋巴细胞早期及中期活化标志分子CD69和CD25表达的影响。结果随着茴香霉素浓度从1.0 ng/ml逐渐增至25.0 ng/ml,Con A对淋巴细胞的促增殖作用逐渐减弱,以10.0 ng/ml和25.0 ng/ml茴香霉素的抑制作用最为明显,呈剂量依赖关系(r=-0.96,P<0.01)。进一步发现,1.0～25.0 ng/ml茴香霉素能够使Con A或PDB加Ion诱导的淋巴细胞停滞于G0/G1期,阻止其进入S期,且阻止作用随上述浓度的增加而增强,呈明显剂量依赖关系(r=-0.97,P<0.01和r=-0.98,P<0.01)。据此选用最佳剂量10.0 ng/ml,茴香霉素能够明显抑制淋巴细胞表面分子CD69和CD25的表达(P均<0.01)。结论茴香霉素能明显抑制小鼠淋巴细胞的增殖和活化。

关键词：茴香霉素淋巴细胞增殖细胞周期活化

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淋巴细胞免疫治疗对小鼠自然流产模型母胎界面CD80^+表达及妊娠结局的影响

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生殖与避孕 2002年第6期22卷 332-337,T002页

作者：林羿曾耀英何贤辉曾山詹美意关洁宾狄静芳肇静娴全世明暨南大学组织移植与免疫中心

目的:评价CBA/J×DBA/2小鼠配对组合作为反复自然流产模型的生殖力特点,及其与母胎交界CD80表达间的关系,并研究淋巴细胞免疫治疗(lymphocyte immunotherapy,LIT)对CD80表达水平的影响。方法:对CBA/J×DBA/2小鼠的生殖力特点进... 详细信息

目的:评价CBA/J×DBA/2小鼠配对组合作为反复自然流产模型的生殖力特点,及其与母胎交界CD80表达间的关系,并研究淋巴细胞免疫治疗(lymphocyte immunotherapy,LIT)对CD80表达水平的影响。方法:对CBA/J×DBA/2小鼠的生殖力特点进行为期120d的观察,并与生殖力正常的4种对照组进行比较。另计算15对CBA/J×DBA/2小鼠孕13d的胚胎吸收率,并用CD80-FITC和CD45-PE双色流式细胞术检测CD80细胞在母胎交界面的构成比。为了明确CD80^+细胞的身份,检测了CD3、DX5(NK细胞)和MHC-Ⅱ在CD80细胞群中的表达水平。此外,检测LIT组与未治疗组CBA/J×DBA/2小鼠胚胎吸收率和CD80细胞的阳性率。结果:CBA/J×DBA/2小鼠的流产特点是为孕10d左右的反复流产。CBA/J×DBA/2小鼠孕13d的胚胎吸收率显著高于BALB/c×DBA/2小鼠(30.8％±16.6％vs.7.7％±6.7％,P

关键词：小鼠反复自然流产淋巴细胞 CD80 母胎交界面动物模型

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人参皂苷Rb_1对小鼠T淋巴细胞体外活化、增殖及凋亡的影响

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中草药 2011年第4期42卷 743-748页

作者：吕梦捷曾耀英宋兵暨南大学组织移植与免疫中心广东广州510632

目的研究人参皂苷Rb1对小鼠T淋巴细胞体外活化及增殖的影响,并对其免疫调节作用进行初步探讨。方法分离制备小鼠淋巴结细胞悬液;以双色荧光抗体染色技术结合流式细胞术检测在刀豆蛋白A(ConA)的刺激下,人参皂苷Rb1对早期活化标志CD3/CD6... 详细信息

目的研究人参皂苷Rb1对小鼠T淋巴细胞体外活化及增殖的影响,并对其免疫调节作用进行初步探讨。方法分离制备小鼠淋巴结细胞悬液;以双色荧光抗体染色技术结合流式细胞术检测在刀豆蛋白A(ConA)的刺激下,人参皂苷Rb1对早期活化标志CD3/CD69和调节T淋巴细胞标志CD4/CD25表达的影响;用羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)染色结合流式细胞术和MTT法检测在ConA的刺激下,人参皂苷Rb1对T淋巴细胞增殖的影响;DIOC/PI双染技术检测在H2O2作用下,人参皂苷Rb1对淋巴细胞凋亡进程的影响。结果终浓度为5、10、20μmol/L的人参皂苷Rb1对ConA刺激的调节T淋巴细胞CD4+/CD25+的表达具有促进作用,而CD3+/CD69+的表达明显下调(P<0.01);对ConA刺激的T淋巴细胞增殖具有明显的抑制作用(P<0.05),且呈剂量依赖性;人参皂苷Rb1显著抑制H2O2诱导的淋巴细胞的凋亡进程(P<0.05)。结论人参皂苷Rb1对小鼠淋巴细胞的体外活化及增殖均具有明显的抑制作用,是一种潜在的免疫抑制剂。

关键词：人参皂苷Rb1 T淋巴细胞活化增殖凋亡

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激光对细胞内反应氧、钙离子浓度及细胞膜完整性的影响

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解剖学报 2007年第3期38卷 330-333页

作者：季煜华曾耀英钱中清暨南大学组织移植与免疫中心广州510632

目的探讨在激光扫描共焦显微镜(LSCM)观测活细胞的过程中,激光对细胞内反应氧(ROS)、细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)和细胞膜完整性的影响。方法用H2DCFDA、Fluo-4AM和Calcein-AM/PI分别检测488nm激光对脐静脉内皮细胞株(ECV-304)细胞内ROS... 详细信息

目的探讨在激光扫描共焦显微镜(LSCM)观测活细胞的过程中,激光对细胞内反应氧(ROS)、细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)和细胞膜完整性的影响。方法用H2DCFDA、Fluo-4AM和Calcein-AM/PI分别检测488nm激光对脐静脉内皮细胞株(ECV-304)细胞内ROS、[Ca2+]i和细胞膜完整性的影响,Ultra view LCI(live cell image)共聚焦成像系统采集并分析结果。结果激光照射后细胞内DCF的荧光强度迅速上升,约80s达到峰值,随后下降并逐渐回到基础水平;Fluo-4的荧光强度在70min内持续平缓地上升;Calcein的荧光强度明显下降,少量细胞PI阳性染色。结论488nm激光照射可引起细胞内ROS和[Ca2+]i的增加,但对细胞膜的完整性没有显著影响。

关键词：激光反应氧细胞内钙离子浓度细胞活性激光扫描共焦显微镜脐静脉内皮细胞株

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Forskolin对佛波醇酯类刺激的小鼠体外T淋巴细胞行为的影响

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免疫学杂志 2009年第2期25卷 177-182,186页

作者：宋兵曾耀英黄秀艳李林杨志滕菲姚满林暨南大学组织移植与免疫中心

目的分析Forskolin对佛波醇酯多克隆刺激剂(phorbol12,13-dibutyrate,PDB)联合离子霉素(ionomycin,Ion)刺激的小鼠CD3+T淋巴细胞体外增殖和周期的影响,在此基础上进一步研究Forskolin对单纯PDB刺激的小鼠CD3+T淋巴细胞早期活化标志CD69... 详细信息

目的分析Forskolin对佛波醇酯多克隆刺激剂(phorbol12,13-dibutyrate,PDB)联合离子霉素(ionomycin,Ion)刺激的小鼠CD3+T淋巴细胞体外增殖和周期的影响,在此基础上进一步研究Forskolin对单纯PDB刺激的小鼠CD3+T淋巴细胞早期活化标志CD69分子和中期活化标志CD25分子的影响,从而阐明其作用机制。方法无菌分离小鼠淋巴结并制备单个淋巴细胞悬液,与不同浓度的Forskolin孵育48h后,运用羧基荧光素已酰已酸(CFDA-SE)染色技术和碘化丙锭(PI)染色技术结合流式细胞术、CELLQuest和ModFitLT软件,分别检测Forskolin对PDB+Ion刺激下小鼠CD3+T淋巴细胞增殖和周期的影响;与不同浓度的Forskolin孵育2h、10h,运用流式细胞术结合双色荧光抗体染色技术检测Forskolin对PDB诱导下的小鼠CD3+T淋巴细胞CD69分子和CD25分子表达的影响。结果Forskolin(10-7、10-6、10-5mol.L-1)均能明显抑制PDB+Ion刺激的小鼠CD3+T淋巴细胞的增殖并将细胞阻滞在G0/G1期;同时也能明显抑制单纯PDB刺激下的CD3+T细胞早期和中期活化,且呈明显的量效关系。结论提示Forskolin在CD3+T细胞活化过程中信号转导的某个环节上有抑制作用,从而通过抑制T淋巴细胞的活化,发挥免疫抑制作用,是一种潜在的免疫抑制剂。

关键词： Forskolin CD69 CD25 增殖周期流式细胞术

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黄芩苷对不同刺激剂诱导的小鼠T淋巴细胞体外活化的影响

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中草药 2008年第8期39卷 1188-1191页

作者：李林曾耀英黄秀艳宋兵杨志姚满林滕菲暨南大学组织移植与免疫中心广东广州510632

目的分析黄芩苷对小鼠T淋巴细胞体外活化的影响,探讨其对免疫系统的作用,阐明其免疫抑制作用机制。方法无菌分离小鼠淋巴结,制备淋巴细胞悬液,以不同终质量浓度的黄芩苷预孵育淋巴细胞4 h,再以刀豆蛋白A(Con A)或佛波醇酯类多克隆刺激剂... 详细信息

目的分析黄芩苷对小鼠T淋巴细胞体外活化的影响,探讨其对免疫系统的作用,阐明其免疫抑制作用机制。方法无菌分离小鼠淋巴结,制备淋巴细胞悬液,以不同终质量浓度的黄芩苷预孵育淋巴细胞4 h,再以刀豆蛋白A(Con A)或佛波醇酯类多克隆刺激剂(PDB)诱导小鼠淋巴细胞活化,利用流式细胞术分别结合双色免疫荧光单克隆抗体染色技术检测CD3+T细胞早期活化标志CD69和中期活化标志CD25分子的表达。结果黄芩苷(10、20、30 mg/L)能明显抑制Con A或PDB诱导T细胞活化分子CD69和CD25的表达,且呈浓度依赖性。结论黄芩苷能够明显抑制多克隆刺激剂Con A或PDB诱导的T细胞早期和中期活化,且呈明显的量效关系。提示黄芩苷在T细胞活化过程的信号转导中有抑制作用,从而可以通过抑制T淋巴细胞的活化,发挥免疫抑制作用,是一种潜在的免疫抑制剂。

关键词：黄芩苷 T淋巴细胞 CD69 CD25

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