检索结果-内蒙古大学图书馆

免疫学杂志 2000年第3期16卷 210-213页

作者：张雷葛琪孙尔维曾耀英闵志廉上海长征医院泌尿外科上海200003 暨南大学组织移植与免疫国家专业实验室广东广州510632 广州珠江医院肾移植科广东广州510282

目的为明确 CD6 9体内外表达动力学并进一步探讨其作用。方法 Con A体内外刺激小鼠 T细胞后 ,选取不同时间点 ,流式细胞仪观察 T细胞 CD6 9表达率。结果 Con A刺激后 2 h CD6 9即有明显表达 ,6～ 8h达到峰值 ;CD8-与 CD8+T细胞相比无明... 详细信息

目的为明确 CD6 9体内外表达动力学并进一步探讨其作用。方法 Con A体内外刺激小鼠 T细胞后 ,选取不同时间点 ,流式细胞仪观察 T细胞 CD6 9表达率。结果 Con A刺激后 2 h CD6 9即有明显表达 ,6～ 8h达到峰值 ;CD8-与 CD8+T细胞相比无明显差异 ;体外条件对 CD6 9的表达有显著的影响。结论结果提示 CD8-和 CD8+T细胞的活化均需要 CD6 9的参与 ;T细胞可能在活化早期一过性高表达 CD6 9;CD6 9很可能是一个

关键词： T细胞活化 CD69 动力学 ConA 小鼠

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HIV感染治疗学的新概念——艾滋病药物研发的新靶点和药物治疗的新策略

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河南中医学院学报 2005年第1期20卷 3-8页

作者：曾耀英暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室

HIV感染的治疗策略目前还处在探索中 ,在综述了HIV药物治疗和药物开发的基础上 ,总结了艾滋病药物研发潜在的新靶点和药物治疗的新策略。

关键词： HIV感染疫苗研究免疫学研究药物开发药物治疗

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视网膜Müller细胞原代培养的技术研究

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眼科研究 1998年第1期16卷 13-15页

作者：彭广华李志杰李辰暨南大学组织移植与免疫中心眼科学实验室

目的介绍一种新的视网膜Ｍüｌｅｒ细胞条件化原代培养的方法。方法使用ＣｏｎＡ活化脾细胞培养上清液作为条件化培养基，分别培养人、大鼠、小鼠的视网膜Ｍüｌｅｒ细胞，并进行形态学观察及免疫组织化学染色。结果用该方法原... 详细信息

目的介绍一种新的视网膜Ｍüｌｅｒ细胞条件化原代培养的方法。方法使用ＣｏｎＡ活化脾细胞培养上清液作为条件化培养基，分别培养人、大鼠、小鼠的视网膜Ｍüｌｅｒ细胞，并进行形态学观察及免疫组织化学染色。结果用该方法原代培养不同种类的视网膜Ｍüｌｅｒ细胞，免疫组织化学染色显示９０％以上的视网膜Ｍüｌｅｒ细胞的神经胶质纤维酸性蛋白（ｇｌｉａｌｆｉｂｒｉｌａｒｙａｃｉｄｉｃｐｒｏｔｅｉｎ，ＧＦＡＰ）和Ｓ－１００蛋白染色阳性。结论视网膜Ｍüｌｅｒ细胞的条件化原代培养是一种可靠的、快速获得不同种类视网膜Ｍüｌｅｒ细胞的理想方法。

关键词：视网膜细胞培养 Mueller细胞原代培养

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槲皮素对小鼠T细胞CD69表达的抑制作用

槲皮素对小鼠T细胞CD69表达的抑制作用

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中国免疫学会第四届学术大会

作者：王南曾耀英何贤辉肇静娴邱海霞暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室

本实验采用双色荧光标记结合流式细胞术,通过槲皮素对佛波醇酯(Phorbol12,13-dibutyrate,PDB)或刀豆蛋白A(concanavalin,Con A)刺激下的T淋巴细胞CD69表达的影响,分析槲皮素对T细胞活化的影响,由于PDB及ConA在T细胞活化信息传递通路中... 详细信息

本实验采用双色荧光标记结合流式细胞术,通过槲皮素对佛波醇酯(Phorbol12,13-dibutyrate,PDB)或刀豆蛋白A(concanavalin,Con A)刺激下的T淋巴细胞CD69表达的影响,分析槲皮素对T细胞活化的影响,由于PDB及ConA在T细胞活化信息传递通路中定位明确,可通过槲皮素对其活化作用的影响而推测槲皮素的作用位点,且因为槲皮素是天然植物提取物,副作用小,可用槲皮素考虑替代环孢霉素A减少其副作用的可能。

关键词：抑制作用槲皮素

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活细胞染料CFDA,SE在淋巴细胞增殖研究中的应用

活细胞染料CFDA,SE在淋巴细胞增殖研究中的应用

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中国免疫学会第四届学术大会

作者：肇静娴曾耀英何贤辉王南狄静芳曾山暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室

活细胞染料羧基荧光素乙酰乙酸Carboxyfluo—rescein diacetate,succinimidyl ester(CFDA,SE)自从1994年被引介给广大免疫学工作者以来[1],利用CFSE荧光强度的系列减半特征通过流式细胞术分析淋巴细胞增殖的技术已越来越广泛地被应用。... 详细信息

活细胞染料羧基荧光素乙酰乙酸Carboxyfluo—rescein diacetate,succinimidyl ester(CFDA,SE)自从1994年被引介给广大免疫学工作者以来[1],利用CFSE荧光强度的系列减半特征通过流式细胞术分析淋巴细胞增殖的技术已越来越广泛地被应用。这项技术能够实现对体外或体内的8至10个不同细胞分裂周期的可视化。

关键词：淋巴细胞增殖活细胞 CFDA,SE

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SARS-CoV Sars7a和EGFP融合蛋白真核表达载体构建及其表达

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中国病毒学 2004年第3期19卷 209-213,i001页

作者：何贤辉徐丽慧刘毅蔡小嫦曾耀英暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632 暨南大学第一附属医院皮肤科广东广州510632

根据SARS-CoVsars7a基因设计并化学合成部分重叠引物,经二轮PCR获得sars7a基因片段,以此片段为模板并利用一对带有Kozak序列及删除终止密码的引物进行PCR,获得产物与pEGFP-N1载体连接,使sars7a基因位于EGFP的基因上游,得到含编码Sars7a-... 详细信息

根据SARS-CoVsars7a基因设计并化学合成部分重叠引物,经二轮PCR获得sars7a基因片段,以此片段为模板并利用一对带有Kozak序列及删除终止密码的引物进行PCR,获得产物与pEGFP-N1载体连接,使sars7a基因位于EGFP的基因上游,得到含编码Sars7a-EGFP融合蛋白基因的哺乳动物细胞表达载体。采用细胞核转染技术将重组表达载体转染K562细胞,以流式细胞仪和共聚焦显微镜分析,可检测到EGFP的绿色荧光,表明Sars7a-EGFP得到表达,该蛋白分布于整个细胞,提示Sars7a并非膜蛋白,更可能是胞浆蛋白。此外,该蛋白的表达对K562细胞凋亡无明显影响。

关键词：严重急性呼吸综合征冠状病毒 Sars7a 绿色荧光蛋白融合蛋白表达

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人外周血T细胞活化状态对血卟啉单甲醚吸收的影响

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中国病理生理杂志 2006年第2期22卷 234-238页

作者：邱海霞顾瑛刘凡光曾耀英黄秀艳肇静娴曾晶中国人民解放军总医院激光医学科北京100853 暨南大学组织移植与免疫实验室广东广州516032

目的:观察健康人外周血T细胞的活化状态对其吸收新型光敏剂血卟啉单甲醚(HMME)的影响。以期为进一步研究HMME-PDT对活化T细胞选择性作用提供实验依据。方法:以流式细胞仪检测孵育浓度和孵育时间对活化T细胞吸收HMME的影响。密度梯度法... 详细信息

目的:观察健康人外周血T细胞的活化状态对其吸收新型光敏剂血卟啉单甲醚(HMME)的影响。以期为进一步研究HMME-PDT对活化T细胞选择性作用提供实验依据。方法:以流式细胞仪检测孵育浓度和孵育时间对活化T细胞吸收HMME的影响。密度梯度法常规分离人外周血淋巴细胞,分别以多克隆刺激剂PHA和PDB+Ion刺激T细胞活化,同时设立未加刺激剂的静止T细胞作对照。在评价孵育浓度对T细胞吸收HMME的影响时,将上述处理的淋巴细胞分别与0、5、10、20、30和40mg/L的HMME孵育1h,经CD3抗体染色后进行T细胞HMME吸收分析。在评价T细胞活化状态对HMME吸收量与孵育时间相关性的影响时,将培养的淋巴细胞与10mg/L的HMME分别孵育0-160min后进行检测。结果:T细胞的活化使其HMME吸收量的孵育浓度相关曲线以及孵育时间相关曲线较静止T细胞右移和上移。在一定孵育浓度范围内(5-20mg/L),活化T细胞对HMME的吸收量明显大于静止T细胞,差别具有统计学意义。然而,随着孵育浓度的进一步增加,活化T细胞与静止T细胞对HMME吸收量的差异逐渐减小。在10mg/L HMME孵育浓度的条件下,不论活化与否,随着孵育时间的延长,T细胞内HMME的吸收量在逐渐增强。在15-60min之间,活化T细胞HMME吸收量明显高于静止T细胞。结论:活化T细胞与静止T细胞HMME吸收量的差别取决于其孵育浓度和孵育时间,在一定孵育浓度和孵育时间范围内,活化T细胞HMME的吸收量明显高于静止T细胞,提示这可能有助于形成选择性删除活化T细胞的剂量关联和时间关联的HMME-PDT治疗窗口。

关键词： T淋巴细胞血卟啉类光化学疗法

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通痹灵对多克隆刺激剂作用下小鼠T细胞CD69表达影响的血清免疫药理评价

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中国免疫学杂志 2002年第5期18卷 330-333页

作者：全世明曾耀英陈纪藩胡英杰暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广州510632 广州中医药大学第一附属医院广州510405

目的：应用血清免疫药理方法探讨通痹灵对T细胞体外活化的影响，以进一步揭示通痹灵的免疫调节分子机理，为临床用药提供理论依据。方法：分离小鼠淋巴结细胞，分别与CHX、5％CHX血清、CsA、5％CsA血清、5％通痹灵血清预孵后加入多克隆... 详细信息

目的：应用血清免疫药理方法探讨通痹灵对T细胞体外活化的影响，以进一步揭示通痹灵的免疫调节分子机理，为临床用药提供理论依据。方法：分离小鼠淋巴结细胞，分别与CHX、5％CHX血清、CsA、5％CsA血清、5％通痹灵血清预孵后加入多克隆刺激剂继续培养，总计培养24h后收获细胞，进行双色免疫荧光标记，以流式细胞术对T细胞的CD69分子表达情况进行分析。结果：5％通痹灵作用下ConA活化的T细胞CD69表达百分率为（54．67±6．69）％，与相应对照［（64．35 ±10．13）%］比较有显著差异（P<0．05）；药物作用下PDB活化的T细胞CD69表达的百分率为（80．99±6．18）%，与相应对照［（79．68±4．17）％］比较无显著差异（P>0．05）。结论：通痹灵含药血清选择性地抑制ConA刺激的T细胞活化，而对PDB刺激的T细胞活化无影响；推测抑制类风湿关节炎疾病启动与发展中异常的T细胞活化，是通痹灵治疗类风湿关节炎重要机制之一；。

关键词：中药复方 CD69 T淋巴细胞血清免疫药理学类风湿关节炎通痹灵动物实验

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碱烧伤对眼前房免疫赦免状态的削弱和破坏

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眼科研究 1998年第3期16卷 193-195页

作者：李志杰李辰暨南大学组织移植与免疫中心眼科学实验室

目的观察碱烧伤后眼免疫赦免状态的改变。方法使用０．５ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ在兔眼建立碱烧伤模型。通过胸腺细胞刺激反应检测碱烧伤后不同时间房水的免疫抑制水平。另外，观察了碱烧伤对前房相关免疫偏离（ＡＣＡＩＤ）的支持能力。结... 详细信息

目的观察碱烧伤后眼免疫赦免状态的改变。方法使用０．５ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ在兔眼建立碱烧伤模型。通过胸腺细胞刺激反应检测碱烧伤后不同时间房水的免疫抑制水平。另外，观察了碱烧伤对前房相关免疫偏离（ＡＣＡＩＤ）的支持能力。结果碱烧伤后眼房水的正常免疫抑制效应显著下降，即使在碱烧伤后２个月。烧伤眼接种抗原后ＡＣＡＩＤ诱导失败。结论碱烧伤后角膜移植免疫排斥反应的高发率除与植床的高度血管化和炎症背景外。

关键词：碱烧伤眼外伤免疫赦免角膜移植兔眼前房

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加载HCMV抗原肽的HLA-A*0201单体及其四聚体制备和鉴定

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生物工程学报 2004年第3期20卷 382-388页

作者：何贤辉徐丽慧刘毅蔡小嫦曾耀英组织移植与免疫教育部重点实验室暨南大学广州510632 暨南大学生物工程研究所广州510632 暨南大学第一附属医院皮肤科广州510632 郑州大学第一附属医院皮肤科郑州450052

细胞毒T淋巴细胞 (CTL)在控制病原体感染以及抗肿瘤过程中发挥重要作用 ,因而特异性CTL的检测相当重要 ;而过去检测CTL的方法都是间接的 ,最近发展起来的四聚体技术则是直接检测抗原特异性CTL的有效而特异的方法 ,成为目前研究T细胞免... 详细信息

细胞毒T淋巴细胞 (CTL)在控制病原体感染以及抗肿瘤过程中发挥重要作用 ,因而特异性CTL的检测相当重要 ;而过去检测CTL的方法都是间接的 ,最近发展起来的四聚体技术则是直接检测抗原特异性CTL的有效而特异的方法 ,成为目前研究T细胞免疫应答的关键技术。报道一种简化的四聚体制备程序 ,利用该程序成功制备加载人巨细胞病毒 (HCMV)抗原肽的HLA_A2四聚体 ,具有特异性结合CTL活性。HLA_A 0 2 0 1重链基因是通过RT_PCR方法从HLA_A2 + 供者白细胞中克隆 ,进而以PCR方法构建在羧基端融合生物素化酶BirA底物肽 (BSP)的HLA_A 0 2 0 1(A2 )重链胞外区原核表达载体 ,A2重组蛋白在大肠杆菌中得到高表达 ,主要以包涵体形式存在。加载抗原肽的可溶性A2单体是A2胞外区在轻链 β2 微球蛋白和HLA_A2限制性HCMVpp6 5 495_50 3抗原肽 (NLVPMVATV ,NLV)存在时通过稀释法复性获得 ,以BirA对其进行生物素化 ,然后以阴离子交换树脂纯化 ,得到的纯化A2_NLV单体与Streptavidin_PE按 4 :0 8比例混合形成四聚体 ,结合程度在 85 %以上 ,流式细胞仪分析显示该四聚体具有与HLA_A2 + 供者的特异性CTL结合活性。总之 ,这种简化的四聚体制备程序 ,不仅有利于该技术的推广 ,为特异性T细胞免疫研究建立必要的技术平台。

关键词：人类白细胞抗原四聚体细胞毒T淋巴细胞包涵体人巨细胞病毒

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