检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞与分子免疫学杂志 2005年第6期21卷 798-800页

作者：于哲邢飞跃曾耀英暨南大学教育部组织移植与免疫重点实验室广东广州510632

Jagged1(新近被命名为CD339[1])是存在于哺乳动物细胞膜上Notch受体的主要配体之一,为单次跨膜糖蛋白,表达于骨髓、胎儿肝基质细胞和胸腺上皮细胞等多种组织,参与调控许多组织的生长发育,在维持正常造血前体细胞及其增殖过程中起着重要... 详细信息

Jagged1(新近被命名为CD339[1])是存在于哺乳动物细胞膜上Notch受体的主要配体之一,为单次跨膜糖蛋白,表达于骨髓、胎儿肝基质细胞和胸腺上皮细胞等多种组织,参与调控许多组织的生长发育,在维持正常造血前体细胞及其增殖过程中起着重要作用[2]。Jagged1在抗原提呈细胞(antigenpresenting cells,APC),如树突状细胞(dendritic cells,DC)、B细胞和巨噬细胞表面表达丰富,介导DC成熟和分化[3]。临床上发现,Jagged-Notch信号转导异常与类风湿性关节炎的产生密切相关[4]。近来发现,Jagged1与其受体结合后,激活Notch信号通路

关键词： Jagged1 调节性T细胞分化成熟

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转化生长因子-β与妊娠高血压综合征

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中国妇幼保健 2005年第6期20卷 765-767页

作者：沈媛曾耀英暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室 510632

转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)是一种多功能生长因子,可对众多的组织器官产生生物学效应,具有调节细胞生长、分化和免疫功能,抑制炎症,促进组织修复和胚胎发育等功能[1],尤其在滋养细胞的增殖、分化、免疫与... 详细信息

转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)是一种多功能生长因子,可对众多的组织器官产生生物学效应,具有调节细胞生长、分化和免疫功能,抑制炎症,促进组织修复和胚胎发育等功能[1],尤其在滋养细胞的增殖、分化、免疫与内分泌功能调节中具有重要意义.目前,妊高征的病因尚不明确,但其发病机制主要与滋养细胞有关[2].近年来,国外有学者将对滋养层细胞的生物学行为与功能有重要调节作用的TGF-β应用到妊高征的病因研究[3],初步证实两者之间存在密切关系.现将有关TGF-β与妊高征关系的研究综述如下.

关键词：转化生长因子-β 妊娠高血压综合征免疫功能细胞生长胚胎发育滋养细胞

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地塞米松介导胸腺细胞凋亡过程中线粒体和细胞结构蛋白的变化

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中国病理生理杂志 2005年第7期21卷 1415-1418页

作者：王通曾耀英肇静娴林羿梁佩燕暨南大学教育部组织移植与免疫重点实验室广东广州510632

目的:研究地塞米松(DEX)介导的小鼠胸腺细胞凋亡过程中线粒体质量和结构蛋白变化特点。方法:以地塞米松(DEX)诱导小鼠胸腺细胞凋亡为模型,利用AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术研究细胞凋亡和坏死,JC-1染色流式细胞术检测线粒体膜电势(△... 详细信息

目的:研究地塞米松(DEX)介导的小鼠胸腺细胞凋亡过程中线粒体质量和结构蛋白变化特点。方法:以地塞米松(DEX)诱导小鼠胸腺细胞凋亡为模型,利用AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术研究细胞凋亡和坏死,JC-1染色流式细胞术检测线粒体膜电势(△Ψm)和线粒体质量,利用CFDA-SE染色流式细胞术检测细胞结构蛋白变化。结果:在1×10-6mol/LDEX诱导下,小鼠胸腺细胞在6h凋亡比率为(51.25±5.51)%,对照组为(12.03±2.00)%,差异显著(P<0.01);DEX组坏死比率为(30.25±3.67)%,对照组为(10.11±1.11)%,差异显著(P<0.01)。DEX组在6h时点的线粒体质量显著低于对照组(P<0.01),FL1平均荧光强度分别为(561.62±54.27)和(900.25±38.80)。DEX同时引起线粒体膜电势的显著下降(P<0.01),对照组FL2平均荧光强度为(267.51±26.48),DEX组为(133.17±12.29)。成熟T细胞培养48h,CFDA-SE法仅检测到亲代单一细胞峰;而在ConA刺激条件下出现3个子代峰。对照组小鼠胸腺细胞在CFDA-SE染色培养6h条件下,存在(5.25±1.15)%的低荧光强度细胞群,而在DEX刺激下,该群细胞占(47.39±9.76)%,并且在直方图结果上形成明显的细胞峰。结论:DEX诱导小鼠胸腺细胞凋亡过程中,线粒体质量和细胞结构蛋白均有所下降;CFDA-SE染色流式细胞术可以作为基于细胞结构蛋白变化的凋亡定量检测方法。

关键词：地塞米松胸腺细胞细胞结构蛋白细胞凋亡线粒体

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人EGF受体L2结构域在大肠杆菌中表达、包涵体柱上复性及纯化

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生物工程学报 2005年第4期21卷 597-603页

作者：徐丽慧洪岸何贤辉暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广州510632 暨南大学生物工程研究所

以PCR方法从克隆的EGFR胞外区cDNA中扩增编码EGFR_L2结构域的DNA片段,在其3′端加入编码His6标签的序列,与pET_3c连接构建EGFR_L2原核表达载体。该蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达,免疫印迹分析表明表达产物全部以包涵体形式存在... 详细信息

以PCR方法从克隆的EGFR胞外区cDNA中扩增编码EGFR_L2结构域的DNA片段,在其3′端加入编码His6标签的序列,与pET_3c连接构建EGFR_L2原核表达载体。该蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达,免疫印迹分析表明表达产物全部以包涵体形式存在,分步透析法和稀释法都不能获得可溶性复性产物,而Ni2+_NTA柱上复性法不仅能够获得可溶性的EGFR_L2蛋白,而且产物同时得到高度纯化,纯度>95%,复性的EGFR_L2与其配基EGF具有特异性的结合活性,但亲和力较低。这表明His6标签不但便于纯化目标蛋白,而且可利用Ni2+_NTA柱进行柱上复性,适用于不易通过常规方法复性的重组蛋白的制备。

关键词：表皮生长因子受体 L2结构域原核表达包涵体重折叠

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紫外线对角质细胞线粒体功能及凋亡的影响研究

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中国病理生理杂志 2006年第5期22卷 1020-1023页

作者：王会营曾耀英王通邢飞跃肇静娴季煜华暨南大学教育部组织移植与免疫重点实验室广东广州510632

目的:分析紫外线(UV)照射对HaCaT角质细胞系线粒体功能及凋亡的影响。方法:以紫外线低剂量(UVA2J/cm2,UVB10mJ/cm2)和高剂量(UVA6J/cm2,UVB30mJ/cm2)照射HaCaT细胞,继续培养15 h,用流式细胞仪检测线粒体膜电位(△ψm)、线粒体质量(mitoc... 详细信息

目的:分析紫外线(UV)照射对HaCaT角质细胞系线粒体功能及凋亡的影响。方法:以紫外线低剂量(UVA2J/cm2,UVB10mJ/cm2)和高剂量(UVA6J/cm2,UVB30mJ/cm2)照射HaCaT细胞,继续培养15 h,用流式细胞仪检测线粒体膜电位(△ψm)、线粒体质量(mitochondrial mass);使用碘化丙啶(PI)进行DNA染色并用流式细胞仪检测亚二倍体分析凋亡,以及进行Annexin V-FITC与PI共染色,用激光共聚焦显微镜观察细胞凋亡情况。结果:HaCaT细胞经紫外线照射后,△ψm下降的细胞比例随着照射剂量的增加而增加,对照组、低剂量组及高剂量组分别为7.94%±1.02%、25.87%±4.55%、39.27%±5.32%;线粒体质量降低的细胞比例同样随着照射剂量的增加而增加,对照组、低剂量组以及高剂量组分别为15.19%±1.58%、40.36%±4.41%、68.79%±5.46%。用PI检测DNA含量所产生的亚二倍体峰观测凋亡率,对照组、低剂量组以及高剂量组凋亡率分别为1.82%±0.51%、30.16%±5.47%、58.49%±5.98%。用Annexin V-FITC/PI染色分析细胞凋亡程度,其结果与PI-DNA染色所得结果一致,对照组仅有少量细胞死亡,低剂量组凋亡细胞较对照组为多(Annexin V-FITC单阳性细胞),高剂量组以坏死细胞为多(Annexin V-FITC/PI双阳性)。结论:HaCaT细胞经紫外照射后,线粒体去极化作用增强,同时线粒体质量降低,这些变化与细胞凋亡相关。

关键词： HaCaT细胞紫外线线粒体细胞凋亡

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喜树碱诱导Jurkat细胞线粒体膜电势和线粒体质量变化的研究

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中国病理生理杂志 2006年第5期22卷 846-850页

作者：江颖娟曾耀英王通肇静娴刑飞跃王希朝梁佩燕暨南大学教育部组织移植与免疫重点实验室广东广州510632

目的:研究喜树碱(camptothecin,CPT)诱导Jurkat细胞凋亡过程中线粒体膜电势和线粒体质量的变化。方法:用喜树碱处理Jurkat细胞,利用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术研究细胞早期凋亡,PI染色流式细胞术测细胞周期,Annexin V-PE/DiOC6(3... 详细信息

目的:研究喜树碱(camptothecin,CPT)诱导Jurkat细胞凋亡过程中线粒体膜电势和线粒体质量的变化。方法:用喜树碱处理Jurkat细胞,利用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术研究细胞早期凋亡,PI染色流式细胞术测细胞周期,Annexin V-PE/DiOC6(3)双染流式细胞术检测线粒体膜电势(△ψm),NAO染色流式细胞术检测线粒体质量。结果:在10μmol.L-1CPT诱导下,6 h时Jurkat细胞早期凋亡的细胞比率(22.59±1.04)%显著高于对照组(3.93±0.73)%(P<0.01)。CPT组坏死比率(2.48±0.53)%与对照组(2.78±0.63)%无显著差异(P>0.05);并可使细胞出现明显的凋亡峰。晚期凋亡的细胞比率为(13.58±0.97)%显著高于对照组(3.18±0.51)%(P<0.01),CPT组G0/G1期细胞比率(48.14±0.96)%,明显高于对照组(44.09±0.43)%(P<0.01)。CPT组线粒体发生明显去极化现象,AnnexinV+DiOC6(3)-的细胞比率为(19.47±0.69)%,而对照组比率为(4.21±0.40)%,差异显著(P<0.01)。同时,CPT组线粒体质量显著低于对照组:CPT组NAO+细胞比率为(74.77±1.66)%,对照组为(92.24±1.41)%(P<0.01)。结论:CPT诱导Jurkat细胞凋亡过程中线粒体去极化作用增强并且线粒体质量下降,表明该凋亡过程与线粒体途径密切相关。

关键词：喜树碱 Jurkat细胞线粒体膜电位细胞凋亡

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地塞米松影响小鼠胸腺细胞线粒体膜电势变化研究

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中国病理生理杂志 2005年第5期21卷 962-965页

作者：梁佩燕曾耀英王通肇静娴邢飞跃江逊暨南大学教育部组织移植与免疫重点实验室广东广州510632

目的研究地塞米松刺激小鼠胸腺细胞过程中线粒体膜电势(△Ψm)的变化。方法以终浓度1×10-6mol/L地塞米松(DEX)刺激小鼠胸腺细胞,通过JC-1染色流式细胞术,在0、1、3、5、7、9、11、24和27h时点分别检测小鼠胸腺细胞平均J-aggregate(... 详细信息

目的研究地塞米松刺激小鼠胸腺细胞过程中线粒体膜电势(△Ψm)的变化。方法以终浓度1×10-6mol/L地塞米松(DEX)刺激小鼠胸腺细胞,通过JC-1染色流式细胞术,在0、1、3、5、7、9、11、24和27h时点分别检测小鼠胸腺细胞平均J-aggregate(FL2)和平均J-monomer(FL1)含量,并计算线粒体膜电势(FL2/FL1)。结果本研究中,小鼠胸腺细胞离体后FL1所反映的线粒体质量迅速下降,至5h对照组达到平台期(913.38±70.11),然后缓慢下降到27h的(622.80±22.81)。DEX组FL1在1h和3h与对照组没有显著差异(P>0.05),而从5h(660.91±72.95)开始显著低于对照组(P<0.01),并且随培养时间延长呈下降趋势,至27h的(309.70±53.35)。对照组和DEX组FL2随培养时间延长而降低。1-9h,对照组和DEX的△Ψm没有显著差异(P>0.05)。而在11、24和27h,对照组△Ψm分别为(256.41±21.59)、(214.14±23.21)和(146.14±17.97),而DEX组△Ψm显著低于对照组(P<0.01),分别为(138.28±20.59)、(111.61±29.67)和(72.92±17.86)。结论DEX诱导小鼠胸腺细胞凋亡过程中,线粒体质量降低和△Ψm下降是早期事件,而细胞内现存线粒体△Ψm下降则是较晚期的事件。在本研究中,线粒体质量下降与现存线粒体膜电势的变化之间关系不紧密。

关键词： JC-1染色流式细胞术线粒体膜电位地塞米松小鼠胸腺细胞细胞凋亡

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雌二醇、孕酮对小鼠同种异基因移植物的影响

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免疫学杂志 2006年第2期22卷 129-131页

作者：肇静娴曾耀英王青王通倪兴华狄静芳暨南大学组织移植与免疫教研室教育部重点实验室广州510630

目的通过研究雌二醇(E2)、孕酮(P4)对小鼠同种异基因移植物存活时间的影响,探讨妊娠期间母体外周血中雌、孕激素水平对母体免疫应答能力以及对母胎免疫耐受的影响。方法雌性受体小鼠通过切除双侧卵巢去势,胃饲E2或P4,使外周血E2或P4浓... 详细信息

目的通过研究雌二醇(E2)、孕酮(P4)对小鼠同种异基因移植物存活时间的影响,探讨妊娠期间母体外周血中雌、孕激素水平对母体免疫应答能力以及对母胎免疫耐受的影响。方法雌性受体小鼠通过切除双侧卵巢去势,胃饲E2或P4,使外周血E2或P4浓度达到相当于小鼠妊娠中期水平。以腹腔注射CsA的小鼠作为对照,进行耳后同种异基因半心移植,观察各组移植物存活时间,并取移植部位组织进行石蜡切片HE染色。结果同基因移植组心肌长期存活(>300 d),异基因移植对照组心肌平均存活时间为(12.8±0.8)d。与异基因移植对照组比较,CsA组心肌存活时间显著延长(>20 d),P<0.01;E2组移植心肌存活时间显著缩短(9.7±0.5)d,P<0.01;P4组心肌存活时间与对照组比较无显著差异,平均(12±0.6)d,P>0.05。结论妊娠期母体外周血中E2和P4水平对母体的系统性免疫应答无明显抑制作用,不是维持非胎盘部位母胎免疫耐受的主导性因素。

关键词：雌二醇孕酮同种异基因移植母胎耐受

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阻断ERK途径对地塞米松诱导胸腺细胞凋亡中线粒体膜电势的影响

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中国病理生理杂志 2006年第4期22卷 625-629页

作者：王通曾耀英梁佩燕邢飞跃罗文亭江逊暨南大学教育部组织移植与免疫重点实验室广东广州510632

目的:研究阻断ERK途径对地塞米松(DEX)诱导的胸腺细胞凋亡中线粒体膜电势的影响。方法:利用PD098059(PD)阻断小鼠胸腺细胞ERK途径,分别设对照组(control)、单纯PD组(PD only)、DEX组和PD+DEX组;在3h、5h和7h时点,利用Annexin V-FITC/PI... 详细信息

目的:研究阻断ERK途径对地塞米松(DEX)诱导的胸腺细胞凋亡中线粒体膜电势的影响。方法:利用PD098059(PD)阻断小鼠胸腺细胞ERK途径,分别设对照组(control)、单纯PD组(PD only)、DEX组和PD+DEX组;在3h、5h和7h时点,利用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;在3h、7h和11h,利用JC-1染色流式细胞术检测线粒体膜电势(△ψm)变化。结果:在1μmol·L-1DEX刺激下,小鼠胸腺细胞在3h、5h和7h凋亡率分别为(19·63±0·35)%、(41·84±1·67)%和(67·00±2·43)%,对照组分别为(4·98±0·39)%、(6·08±0·33)%和(9·31±0·34)%,差异显著(P<0·01);相同时点下,PD only组细胞凋亡率分别为(7·95±0·60)%、(10·69±0·48)%和(22·20±1·24)%,显著高于对照组(P<0·01);PD+DEX组在3h和5h时点细胞凋亡率显著高于DEX组(P<0·01),而在7h时点,两组差异不显著(P>0·05)。在3h、7h和11h,DEX组△ψm降低的细胞比率分别为(21·23±1·43)%、(55·34±1·78)%和(70·88±2·87)%,对照组分别为(5·25±1·22)%、(8·01±0·97)%和(12·88±1·10)%,差异显著(P<0·01);相同时点下,PD only组△ψm降低的细胞比率分别为(11·09±2·00)%、(16·21±2·25)%和(21·15±3·70)%,显著高于对照组(P<0·01);PD+DEX组在3h和5h时点细胞凋亡率显著高于DEX组,分别为(30·55±2·99)%和(65·22±4·32)%(P<0·01),11h时点两组差异不显著(P>0·05)。结论:DEX诱导小鼠胸腺细胞凋亡至少部分通过ERK途径,阻断ERK途径在该凋亡过程中具有重要生物学意义。

关键词：地塞米松胸腺细胞细胞凋亡线粒体有丝分裂素激活蛋白激酶类

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体外快速筛选抗HIV药物的一种新方法

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2006年第2期27卷 233-238页

作者：曾祥凤曾耀英李海仙暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632

目的:介绍一种体外快速筛选抗H IV药物的新方法。方法:采用荧光染料钙荧光素(Cal-ce in-AM)标记H IV感染的慢性H9细胞(H9/H IV-1ⅢB)与不同稀释浓度的药物作用后,与靶细胞MT-2细胞混合培养,2 h后用荧光显微镜观察MT-2和H9/H IV-1ⅢB融... 详细信息

目的:介绍一种体外快速筛选抗H IV药物的新方法。方法:采用荧光染料钙荧光素(Cal-ce in-AM)标记H IV感染的慢性H9细胞(H9/H IV-1ⅢB)与不同稀释浓度的药物作用后,与靶细胞MT-2细胞混合培养,2 h后用荧光显微镜观察MT-2和H9/H IV-1ⅢB融合细胞的变化;孵育3 d后用MTT法检测药物对H IV感染细胞的保护作用和H IV-1p24抗原试剂盒检测药物作用后的细胞培养上清p24抗原含量的变化。结果:药物(双黄连粉针剂)能够抑制MT-2和H9/H IV-1ⅢB细胞融合(双黄连粉针剂抑制融合的EC50为3.18 mg/L,选择指数SI大于314.5);能够保护H IV感染细胞的死亡(EC50为10.59 mg/L,SI大于94.43)和减少H IV-1p24抗原的表达(EC50为23.29 mg/L,SI大于42.9)。结论:运用此方法4~6 h即可初步判断药物是否具有抗H IV的作用,此方法可简便直观,敏感快速进行抗H IV药物的筛选。

关键词：药物筛选模型艾滋病人免疫缺陷病毒

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