检索结果-内蒙古大学图书馆

中药材 2008年第7期31卷 1008-1012页

作者：宋兵曾耀英黄秀艳李林滕菲杨志姚满林暨南大学组织移植与免疫中心广东广州510632

目的:研究Forskolin对刀豆蛋白A(Con A)刺激的小鼠CD3+T淋巴细胞活化、增殖和周期的影响,初步探讨其免疫调节作用机制。方法:无菌分离小鼠淋巴结并制备单个淋巴细胞悬液,与不同浓度的Forskolin孵育,运用流式细胞术结合双色荧光抗体染色... 详细信息

目的:研究Forskolin对刀豆蛋白A(Con A)刺激的小鼠CD3+T淋巴细胞活化、增殖和周期的影响,初步探讨其免疫调节作用机制。方法:无菌分离小鼠淋巴结并制备单个淋巴细胞悬液,与不同浓度的Forskolin孵育,运用流式细胞术结合双色荧光抗体染色技术来检测CD3+T细胞早期活化标志CD69的表达水平;用羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)染色技术结合流式细胞术和CELLQuest、Mod FitLT软件,分析T细胞增殖情况;用碘化丙锭(PI)染色技术分析细胞周期分布。结果:加入终浓度为10-7、10-6、10-5M的Forskolin,孵育8 h后,CD3+T细胞CD69的表达水平和平均荧光强度(MFI)与Con A组相比都有显著的降低,且呈梯度依赖性;对Con A刺激的小鼠CD3+T细胞的增殖指数(PI)也有梯度性抑制;对细胞周期的影响表现为:随着Forskolin浓度升高,处于G0/G1期的细胞增加,S期细胞减少,G2/M期的细胞也有少量减少。结论:Forskolin能有效抑制小鼠T淋巴细胞的体外活化和增殖,阻滞细胞从G0/G1期进入S、G2/M期。由此推断Forskolin在某种程度上是一种潜在的免疫抑制剂。

关键词： Forskolin 活化增殖周期流式细胞术

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乙酰半胱氨酸对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制

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细胞与分子免疫学杂志 2009年第8期25卷 719-721页

作者：曾山林羿狄镜芳冯铮暨南大学组织移植与免疫中心广东广州510632

目的:观察乙酰半胱氨酸对糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注后导致的细胞凋亡的影响,探讨其机制。方法:链尿佐菌素诱导糖尿病大鼠模型,随机分为假手术组、缺血/再灌注组和缺血/再灌注+乙酰半胱氨酸治疗组。组织匀浆检测心肌组织还原型谷胱甘肽(... 详细信息

目的:观察乙酰半胱氨酸对糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注后导致的细胞凋亡的影响,探讨其机制。方法:链尿佐菌素诱导糖尿病大鼠模型,随机分为假手术组、缺血/再灌注组和缺血/再灌注+乙酰半胱氨酸治疗组。组织匀浆检测心肌组织还原型谷胱甘肽(GSH)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的活性;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)和琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段化两种方法检测心肌细胞凋亡并计算凋亡指数。结果:缺血/再灌注后,糖尿病和非糖尿病组均出现明显的心肌细胞凋亡,同时伴有GSH含量降低,GSSG含量和Caspase-3的活性升高,上述变化糖尿病组比非糖尿病组更明显(P<0.05);乙酰半胱氨酸干预的糖尿病和非糖尿病大鼠的心肌细胞凋亡均减轻,同时伴有GSH含量上升,GSSG含量和Caspase-3的活性下降,上述变化非糖尿病组比糖尿病组更明显(P<0.05)。结论:乙酰半胱氨酸干预可以通过提高心肌GSH含量、降低Caspase-3的活性减轻糖尿病和非糖尿病大鼠缺血/再灌注引起的心肌细胞凋亡,对缺血/再灌注心肌有保护作用,但糖尿病组的疗效低于非糖尿病组。

关键词：心肌再灌注损伤乙酰半胱氨酸半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3

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淫羊藿提取物对小鼠T淋巴细胞体外活化和增殖的影响

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中草药 2008年第9期39卷 1355-1359页

作者：滕菲曾耀英黄秀艳杨志姚满林宋兵李林暨南大学组织移植与免疫中心广东广州510632

目的研究淫羊藿水溶性提取物对刀豆蛋白A(ConA)刺激的小鼠T淋巴细胞体外早期活化和增殖的影响。方法无菌分离小鼠各部位淋巴结,制备单细胞悬液,加入不同终质量浓度(5、25、50mg/L)的淫羊藿提取物,以MTT法检测药物对T细胞活性的影响;利... 详细信息

目的研究淫羊藿水溶性提取物对刀豆蛋白A(ConA)刺激的小鼠T淋巴细胞体外早期活化和增殖的影响。方法无菌分离小鼠各部位淋巴结,制备单细胞悬液,加入不同终质量浓度(5、25、50mg/L)的淫羊藿提取物,以MTT法检测药物对T细胞活性的影响;利用流式细胞术(FCM)结合双色荧光抗体染色技术检测早期活化标志CD69分子的表达;运用流式细胞术结合活体染料CFDA-SE染色技术和荧光抗体染色技术检测T细胞增殖。结果MTT法检测淫羊藿提取物在50mg/L时细胞存活率达52.36%。ConA作用6h后,对照组CD69+表达率为(4.61±0.85)%,ConA组CD69+T细胞的比率上升至(38.30±2.54)%,淫羊藿提取物在终质量浓度5、25、50mg/L时均抑制ConA诱导的CD3+T淋巴细胞CD69的表达(P<0.01),其表达率分别下调为(36.16±2.14)%,(30.5±1.72)%,(15.99±0.87)%。培养48、72后,对照组增殖指数(PI)分别为1.01±0.01和1.05±0.01,ConA组PI分别达到1.42±0.01、2.32±0.01,淫羊藿提取物在终质量浓度5、25、50mg/L均抑制T淋巴细胞增殖(P<0.01),48h时PI分别为1.28±0.01、1.26±0.01、1.21±0.01;72h时PI分别为2.30±0.03、2.13±0.02、2.10±0.01。结论淫羊藿提取物能明显抑制ConA刺激的小鼠T淋巴细胞的早期活化和增殖,并呈剂量依赖性。

关键词：淫羊藿提取物 T淋巴细胞活化增殖

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桑色素对小鼠T淋巴细胞体外活化、增殖和细胞周期的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2007年第3期23卷 197-200页

作者：臧宁曾耀英黄秀艳王通叶雪仪周建国王会营暨南大学组织移植与免疫中心广东广州510632

目的:研究桑色素(morin)对小鼠T淋巴细胞活化、增殖和细胞周期的影响。方法:以刀豆蛋白A(ConA)刺激培养的淋巴结来源的小鼠淋巴细胞,再以不同终浓度的morin与T细胞共培养,利用流式细胞术(FCM),检测早期T细胞活化的标志CD69分子的表达,... 详细信息

目的:研究桑色素(morin)对小鼠T淋巴细胞活化、增殖和细胞周期的影响。方法:以刀豆蛋白A(ConA)刺激培养的淋巴结来源的小鼠淋巴细胞,再以不同终浓度的morin与T细胞共培养,利用流式细胞术(FCM),检测早期T细胞活化的标志CD69分子的表达,以羧基荧光素双醋酸盐琥珀酰脂(CFDA-SE)染色检测T细胞的增殖;以碘化丙锭(PI)染色分析T细胞的细胞周期。结果:小鼠T细胞培养6 h后,未经ConA刺激的对照组中CD69+T的细胞比率为(2.97±0.12)%,经ConA刺激的CD69+T细胞的比率明显增高,达到(72.52±0.66)%,与对照组相比差别明显(P<0.01)。终浓度为25、50、100μmol/L的morin均下调CD69+T细胞的比率,其中,100μmol/L的morin抑制作用最强,为(48.95±0.81)%,与对照组比较具有统计学意义(P<0.01)。CFDA-SE染色分析显示,ConA组培养48 h和72 h的T细胞的增殖指数(PI)分别为(1.58±0.04)和(1.95±0.02),各浓度的morin对ConA刺激的T细胞增殖,具有明显地抑制作用,以100μmol/L的morin抑制作用最明显。培养48 h的ConA组T细胞的PI为(1.02±0.02)、培养72 h的ConA组T细胞的PI为(1.03±0.01),与相应时间的对照组比较,均有统计学意义(P<0.01)。PI染色后流式细胞术分析的结果表明,ConA组处于S期的T细胞的比率为(27.05±0.39)%,显著高于对照组的比率(5.10±0.07)%。morin组中S期的细胞比率较高。结论:Morin可显著抑制ConA刺激的T细胞活化及增殖;其对增殖的抑制作用主要表现为S期的细胞的阻滞。

关键词：桑色素 T细胞活化增殖细胞周期

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茴香霉素对小鼠同种异基因皮肤移植的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2008年第3期24卷 228-230页

作者：陈笛邢飞跃狄静芳陈玲暨南大学组织移植与免疫中心广东广州510623

目的:阐明茴香霉素对淋巴细胞反应性的影响以及在皮肤移植中抑制排斥反应的作用。方法:用MTT法检测茴香霉素刺激下淋巴细胞在单向或双向混合淋巴细胞反应中的反应性。C57BL/6小鼠作为供体,BALB/c小鼠作为受体。手术前3d分别给3组BALB/c... 详细信息

目的:阐明茴香霉素对淋巴细胞反应性的影响以及在皮肤移植中抑制排斥反应的作用。方法:用MTT法检测茴香霉素刺激下淋巴细胞在单向或双向混合淋巴细胞反应中的反应性。C57BL/6小鼠作为供体,BALB/c小鼠作为受体。手术前3d分别给3组BALB/c小鼠皮下注射生理盐水、环胞霉素A以及茴香霉素,手术当天继续注射至术后第7天。环胞霉素A及茴香霉素的注射剂量分别为:20mg/kg、12.5mg/kg。结果:在剂量10.0μg/L时,茴香霉素能抑制单向或双向混合淋巴细胞反应中淋巴细胞的反应性(P均<0.01);茴香霉素组移植皮肤的存活时间明显高于环胞霉素A组以及对照组。结论:茴香霉素能明显抑制淋巴细胞的反应性;并且能明显延长受体对皮肤移植物的耐受时间,可能为移植免疫排斥的治疗提供新的途径。

关键词：茴香霉素混合淋巴细胞反应皮肤移植

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Jagged-1对骨髓来源树突状细胞生成细胞因子的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2009年第2期25卷 100-103页

作者：方志远邢飞跃郭中锋陈玲暨南大学组织移植与免疫中心广东广州510632

目的:探讨可溶性Jagged-1/Fc嵌合蛋白(Jagged-1)对重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和白细胞介素4(rmIL-4)体外诱导小鼠骨髓来源树突状细胞(DC)产生细胞因子的影响。方法:建立rmGM-CSF和rmIL-4体外诱导DC的模型,观察Jagge... 详细信息

目的:探讨可溶性Jagged-1/Fc嵌合蛋白(Jagged-1)对重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和白细胞介素4(rmIL-4)体外诱导小鼠骨髓来源树突状细胞(DC)产生细胞因子的影响。方法:建立rmGM-CSF和rmIL-4体外诱导DC的模型,观察Jagged-1/Fc对DC分化的形态学影响,通过Luminex蛋白液相芯片技术和ELISA检测其细胞因子的表达水平,藉MTT法测定可溶性Jagged-1/Fc诱导的DC对同种异基因淋巴细胞增殖的刺激能力。结果:除了TGF-β,Jag-ged-1/Fc诱导的DC与细菌脂多糖(LPS)或酵母聚糖A诱导的DC不同,表现为生成TNF-α的水平明显降低,IL-4显著增高,而IL-10、IL-6、IL-2、IL-12和IFN-γ的水平与对照组无明显差异。γ分泌酶抑制剂DAPT能逆转Jagged-1/Fc抑制DC生成TNF-α。混合淋巴细胞反应显示Jagged-1/Fc诱导的DC对T细胞增殖的刺激能力最弱,LPS诱导的DC的刺激能力最强。结论:Jagged-1/Fc诱导的DC倾向介导免疫耐受,指导初始T细胞向Th2细胞偏离。

关键词： Jagged-1 细菌脂多糖酵母聚糖A 树突状细胞细胞因子

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乙酰半胱氨酸对小鼠缺血再灌注损伤肝肺组织的保护作用及机制

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细胞与分子免疫学杂志 2009年第11期25卷 1058-1060页

作者：曾山林羿狄镜芳冯铮暨南大学组织移植与免疫中心广东广州510632

目的:研究抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)对小鼠肝脏缺血再灌注损伤模型中肝肺组织的保护作用及机制。方法:制备BALB/c小鼠肝部分缺血再灌注损伤模型,将小鼠随机分为3组:假手术组(SH组),缺血再灌注组(I/R组)和NAC组(I/R-NAC组)。分别于再... 详细信息

目的:研究抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)对小鼠肝脏缺血再灌注损伤模型中肝肺组织的保护作用及机制。方法:制备BALB/c小鼠肝部分缺血再灌注损伤模型,将小鼠随机分为3组:假手术组(SH组),缺血再灌注组(I/R组)和NAC组(I/R-NAC组)。分别于再灌注后1 h、3 h取静脉血测定血清TNF-α浓度和ALT水平;取肺组织标本测湿干质量比及病理。同时取肝、肺组织行RT-PCR以观测Toll样受体2/4(TLR2/4)表达。结果:肺组织病理结果显示I/R组肺组织毛细血管充血,肺泡结构破坏,肺泡间质中性粒细胞浸润,肺泡腔内不同程度渗出及少量红细胞。肺湿干质量比显示肺水肿。缺血再灌注后静脉血清TNF-α浓度和ALT水平较假手术组显著升高。受损肝叶和肺组织内均出现TLR2/4 mR-NA高表达,NAC干预后,肺水肿明显减轻;TLR2/4 mRNA表达受到抑制;血清TNF-α浓度和ALT水平较I/R组明显下降。结论:N-乙酰半胱氨酸抑制再灌注后TLR2/4的活化,降低TNF-α的分泌,从而减轻缺血再灌注肝、肺组织的损伤。

关键词：乙酰半胱氨酸缺血再灌注肺损伤

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淫羊藿甙对小鼠T淋巴细胞体外中期和晚期活化的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2008年第11期24卷 1059-1061,1065页

作者：滕菲曾耀英黄秀艳杨志姚满林宋兵李林暨南大学组织移植与免疫中心广东广州510632

目的:研究淫羊藿甙(ICA)对刀豆蛋白A(ConA)刺激的小鼠T淋巴细胞体外中期和晚期活化的影响。方法:采用流式细胞术(FCM)结合双色荧光抗体染色技术分别检测中期和晚期活化标志CD25和CD71分子的表达;取中期活化的细胞上清,利用LuminexTM100... 详细信息

目的:研究淫羊藿甙(ICA)对刀豆蛋白A(ConA)刺激的小鼠T淋巴细胞体外中期和晚期活化的影响。方法:采用流式细胞术(FCM)结合双色荧光抗体染色技术分别检测中期和晚期活化标志CD25和CD71分子的表达;取中期活化的细胞上清,利用LuminexTM100分析上清中IL-2、IL-4、IL-10、TNF-α、IFN-γ的含量变化。结果:ICA在终浓度0.3、1.5、3.0μmol/L时明显抑制CD25的表达而对CD71没有明显影响;下调Th2型细胞因子及上调Th1型细胞因子的分泌量,但没有剂量依赖效应。结论:ICA下调CD25、IL-2和Th2型细胞因子水平,抑制T细胞活化,同时有一定程度的促进细胞免疫反应,因此ICA可能具有双向调节免疫平衡的作用。

关键词：淫羊藿甙 T淋巴细胞 CD25 CD71 流式细胞术

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p38对放线菌酮经线粒体途径诱导HL-60细胞死亡的影响

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中华血液学杂志 2006年第6期27卷 398-402页

作者：梁佩燕曾耀英王通邢飞跃肇静娴江逊狄静芳暨南大学组织移植与免疫研究中心广州510632

目的研究 p38对放线菌酮(CHX)经线粒体途径诱导 HL-60细胞死亡的影响。方法利用 p38持异性阻断剂 SB203580(SB)阻断 HL-60细胞 p38途径,分别设对照组、单纯 SB 组、CHX组和 CHX 联合 SB 组;于处理6,9,12,18,24 h 利用碘化丙锭(PI)染色... 详细信息

目的研究 p38对放线菌酮(CHX)经线粒体途径诱导 HL-60细胞死亡的影响。方法利用 p38持异性阻断剂 SB203580(SB)阻断 HL-60细胞 p38途径,分别设对照组、单纯 SB 组、CHX组和 CHX 联合 SB 组;于处理6,9,12,18,24 h 利用碘化丙锭(PI)染色流式细胞术检测亚二倍体峰细胞比率;于处理6和18 h 进行膜联蛋白Ⅴ(Annexin Ⅴ)/PI 双标流式细胞术测定凋亡和坏死细胞比率;于处理18 h 利用 JC-1染色流式细胞术分析,通过对 FL2的划分比较不同处理时间高 JC-1集合体量细胞比率;测定细胞 JC-1集合体(FL2)和 JC-1单体(FL1)平均荧光强度,并计算线粒体膜电势(△Ψ_m,FL2/FL1)。结果在 CHX 处理6 h HL-60细胞亚二倍体峰细胞比率显著高于对照组,在此过程中阻断 p38途径则在处理9 h 开始亚二倍体峰细胞比率显著高于 CHX 组。处理18 h 凋亡细胞比率:CHX组[(27.9±0.52)%]和 CHX 联合 SB 组[(28.54±1.38)%]均显著高于对照组[(2.45±0.65)%](P<0.01);CHX 联合 SB 组与 CHX 组比较差异无统计学意义(P>0.05)。处理18 h 坏死细胞比率:CHX 组和 CHX 联合 SB 组均显著高于对照组(P<0.01);CHX 联合 SB 组显著高于 CHX 组(P<0.01)。此外,CHX 组和 CHX 联合 SB 组高 JC-1集合体细胞比率均显著低于对照组(P<0.01),CHX联合 SB 组高 JC-1集合体细胞比率显著低于 CHX 组(P<0.01)。处理18 h 时各实验组△Ψ_m CHX 组(0.17+0.01)和 CHX 联合 SB 组(0.05±0.003)均显著低于对照组(0.38±0.02)(P<0.01),CHX 联合 SB 组△Ψ_m 显著低于 CHX 组(P<0.01)。结论 CHX 可诱导 HL-60细胞凋亡和线粒体去极化,在该过程中阻断 p38途径可使线粒体的去极化作用增强,本模型中 p38途径可能与 HL-60细胞的坏死密切相关。

关键词：放线菌酮细胞系,HL-60 细胞凋亡膜电位,线粒体有丝分裂素激活蛋白激酶类

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根皮素的抗炎和免疫抑制作用(英文)

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药学学报 2009年第5期44卷 480-485页

作者：陆晓宇曾耀英叶燕霞周玉英慕静静赵晓慧暨南大学组织移植与免疫实验中心广东广州510632

探讨根皮素(phloretin)在体外对小鼠T淋巴细胞增殖、活化、周期和巨噬细胞NO释放、吞噬功能的影响。CFDA-SE标记技术结合流式细胞术检测根皮素对T淋巴细胞增殖的影响。荧光抗体染色结合流式细胞术分析根皮素对T淋巴细胞在ConA的刺激下C... 详细信息

探讨根皮素(phloretin)在体外对小鼠T淋巴细胞增殖、活化、周期和巨噬细胞NO释放、吞噬功能的影响。CFDA-SE标记技术结合流式细胞术检测根皮素对T淋巴细胞增殖的影响。荧光抗体染色结合流式细胞术分析根皮素对T淋巴细胞在ConA的刺激下CD69和CD25的表达水平的影响。碘化丙啶(PI)染色检测细胞周期的分布情况。Griess试剂盒和荧光微球分别用以检测巨噬细胞NO释放和吞噬功能。结果显示,根皮素(40、60和80μmol.L-1)明显抑制T淋巴细胞增殖,增殖指数(PI)从1.41±0.13分别下降到1.34±0.16、1.19±0.12和1.07±0.06。根皮素可明显抑制CD69和CD25的表达(P<0.01)。细胞周期分析显示,根皮素可将细胞抑制在G0/G1期。巨噬细胞在LPS和IFN-γ的刺激下的NO释放量为(26.72±3.57)μmol.L-1,而在根皮素作用下NO释放量明显下降(P<0.01)。巨噬细胞吞噬率在根皮素作用下也明显下降(P<0.01)。以上结果表明,根皮素有望发展成为一种新的免疫抑制药物。

关键词：根皮素 T淋巴细胞巨噬细胞流式细胞术

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