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第四军医大学学报 2006年第13期27卷 1163-1165页

作者：曾祥凤曾耀英李海仙林长乐赵令斋李莉平肇静娴暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632

目的:探讨穿琥宁粉针剂在体外是否具有抗H IV作用.方法:采用荧光染料Calc ien AM标记H IV感染的慢性H9细胞(H9/H IV-1ⅢB)与不同稀释浓度的穿琥宁药物作用后,与靶细胞MT-2细胞混合培养,观察MT-2和H9/H IV-1ⅢB融合细胞的变化;MTT法检测... 详细信息

目的:探讨穿琥宁粉针剂在体外是否具有抗H IV作用.方法:采用荧光染料Calc ien AM标记H IV感染的慢性H9细胞(H9/H IV-1ⅢB)与不同稀释浓度的穿琥宁药物作用后,与靶细胞MT-2细胞混合培养,观察MT-2和H9/H IV-1ⅢB融合细胞的变化;MTT法检测穿琥宁对H IV感染细胞的保护作用;H IV-1P24抗原试剂盒检测药物作用后的细胞培养上清P24抗原含量的变化.结果:穿琥宁粉针剂能够抑制MT-2和H9/H IV-1ⅢB细胞融合(其抑制融合的EC50为5.49 mg/L,选择指数SI为327.6);能够保护H IV感染细胞的死亡(EC50为64.57 mg/L,SI为27.85)和减少HIV-1 P24抗原的表达(EC50为194.67 mg/L,SI为9.23).结论:穿琥宁粉针剂在体外具有抗HIV-1的作用.

关键词：穿琥宁粉针剂艾滋病病毒细胞融合钙黄绿素

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山茱萸总甙滴眼液防治角膜移植免疫排斥反应的实验研究

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中国实用眼科杂志 2003年第1期21卷 64-67页

作者：孟晶黄丽娜陈建苏李辰赵松滨狄静芳杨皓庄暨南大学第一附属医院眼科 510632 暨南大学深圳眼科医院暨南大学组织移植与免疫中心暨南大学病理生理教研室

目的 :观察山茱萸总甙 (COG)滴眼液局部应用对角膜移植免疫排斥反应的影响。方法 :建立封闭群大鼠角膜移植模型 ,随机分组 :A、B、C、D组为Wistar SD组间同种异体角膜移植 ,Wistar为受体 ,SD为供体 ,其中A组为空白对照组、B组为 0 5 %... 详细信息

目的 :观察山茱萸总甙 (COG)滴眼液局部应用对角膜移植免疫排斥反应的影响。方法 :建立封闭群大鼠角膜移植模型 ,随机分组 :A、B、C、D组为Wistar SD组间同种异体角膜移植 ,Wistar为受体 ,SD为供体 ,其中A组为空白对照组、B组为 0 5 %COG滴眼液组、C组为 1%COG滴眼液组 ,D组为 2 %COG滴眼液组 ,E组为Wis tar Wistar对照组 ,即Wistar大鼠间同种异体移植组。用裂隙灯显微镜记录及比较各组 :角膜植片透明度、水肿度、新生血管度、移植排斥指数 (RI)及角膜排斥发生时间。结果 :术后各组移植排斥指数及发生角膜移植排斥时间 ,A组与B组、A组与C组、A组与D组、B组与C组、C组与D组比较均有显著性差异 ,P <0 0 1;B组与D组之间比较P >0 0 5 ,无显著性差异。结论 :COG滴眼液能有效地防治角膜移植免疫排斥反应 ,1%COG滴眼液更有效。

关键词：山茱萸总甙滴眼液防治角膜移植免疫排斥反应

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泪腺的免疫学

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眼科新进展 2003年第1期23卷 1-4页

作者：李志杰暨南大学组织移植与免疫中心

眼分泌性免疫系统是保护眼表面免受微生物和毒性物质侵袭的第一道防线[1-3].泪腺是眼分泌性免疫系统的主要组成部分.分泌性免疫系统的效应功能主要通过分泌性免疫球蛋白A(secretory immunoglobulin A,sIgA)所介导.sIgA可以抑制细菌的粘... 详细信息

眼分泌性免疫系统是保护眼表面免受微生物和毒性物质侵袭的第一道防线[1-3].泪腺是眼分泌性免疫系统的主要组成部分.分泌性免疫系统的效应功能主要通过分泌性免疫球蛋白A(secretory immunoglobulin A,sIgA)所介导.sIgA可以抑制细菌的粘附和群集,干扰病毒的粘附和内在化,减少寄生虫入侵,以及防止毒素对粘膜上皮的损伤.因此,眼分泌性免疫系统极大地限制了眼对感染和过敏因素的易感性,并帮助维持角结膜的完整性和视功能.本文旨在介绍泪腺的免疫学特征及其调节因素.

关键词：泪腺免疫学淋巴细胞免疫活性成分调节因素泪液抗体细胞因子神经内分泌

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CTLA4-EGFP融合蛋白在K562细胞中的表达及其亚细胞定位研究

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细胞与分子免疫学杂志 2004年第2期20卷 135-139页

作者：何贤辉徐丽慧刘毅蔡小嫦曾耀英暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632 暨南大学第一附属医院皮肤科广东广州510632

目的 :构建增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)与CTLA4融合蛋白真核表达载体 ,分析其在K562细胞中的表达和亚细胞定位。方法 :以RT PCR方法克隆人CTLA4基因 ,构建CTLA4 EGFP融合蛋白的表达载体。以其转染K562细胞后 ,以流式细胞仪和激光共聚焦... 详细信息

目的 :构建增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)与CTLA4融合蛋白真核表达载体 ,分析其在K562细胞中的表达和亚细胞定位。方法 :以RT PCR方法克隆人CTLA4基因 ,构建CTLA4 EGFP融合蛋白的表达载体。以其转染K562细胞后 ,以流式细胞仪和激光共聚焦显微镜分析融合蛋白的表达及其亚细胞定位。结果 :从人外周血细胞中克隆到CTLA4基因的cDNA。通过PCR方法在起始位点前加入Kozak序列并删除终止密码 ,成功地构建CTLA4 EGFP融合蛋白表达载体。以该质粒转染K562细胞 2 4h后 ,CTLA4和EGFP双阳性细胞的百分率为 16%。表达的融合蛋白主要分布于胞内 ,细胞膜上分布较少。相反 ,转染空载体的细胞仅表达EGFP ,且其在细胞内呈弥散样分布。以佛波醇酯加离子霉素刺激后 ,CTLA4 EGFP融合蛋白在细胞表面表达水平升高到 2 9% ,且分布于胞内的融合蛋白向细胞膜靠近并与质膜融合 ;而转染空载体的细胞内EGFP的分布无明显改变。结论 :成功地构建CTLA4 EGFP融合蛋白表达载体 ,并在K562细胞中得到表达。

关键词： CTLA4 绿色荧光蛋白融合蛋白共聚焦显微术

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人PD-L1 cDNA的克隆及其胞外区蛋白在大肠杆菌中的表达

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细胞与分子免疫学杂志 2004年第6期20卷 659-663页

作者：何贤辉徐丽慧刘毅蔡小嫦曾耀英暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632 暨南大学生物工程研究所广东广州510632

目的 :克隆人PD L1基因的cDNA并构建PD L1胞外区基因的原核表达载体 ,在大肠杆菌中进行表达。方法 :以RT PCR法从活化的人淋巴细胞总RNA中 ,扩增并克隆PD L1的cDNA ,构建PD L1胞外区基因的原核表达载体 ,在大肠杆菌BL2 1(ED3)中进行表... 详细信息

目的 :克隆人PD L1基因的cDNA并构建PD L1胞外区基因的原核表达载体 ,在大肠杆菌中进行表达。方法 :以RT PCR法从活化的人淋巴细胞总RNA中 ,扩增并克隆PD L1的cDNA ,构建PD L1胞外区基因的原核表达载体 ,在大肠杆菌BL2 1(ED3)中进行表达并鉴定。结果 :克隆到PD L1cDNA编码区的全长序列 ,经DNA测序证明其与已报道的序列一致。同时构建了在羧基端带有His6标签的PD L1胞外区基因的原核表达载体 ,并在大肠杆菌中表达。免疫印迹分析表明 ,在IPTG诱导后表达的PD L1胞外区蛋白 ,相对分子质量 (Mr)为 2 50 0 0 ,与理论值的大小相符。该重组蛋白能与抗His6标签的单抗 (mAb)特异性反应。结论 :成功地克隆PD L1基因 ,其胞外区蛋白在大肠杆菌中获得表达 ,为利用PD L1转基因修饰移植物或以PD

关键词： PD-L1 cDNA克隆淋巴细胞重组蛋白

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重组人bFGF的原核表达及其高效价抗血清的制备

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免疫学杂志 2005年第3期21卷 186-189页

作者：徐丽慧洪岸何贤辉汪炬暨南大学生物工程研究所暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室

目的以重组人碱性成纤维生长因子为免疫原,制备高效价抗hbFGF抗血清。方法通过PCR方法改造5’编码区的12个密码子,构建hbFGF原核表达载体并在大肠杆菌(***)中表达,以纯化的hbFGF免疫新西兰兔,制备高效价抗血清,用于重组hbFGF的免疫印迹... 详细信息

目的以重组人碱性成纤维生长因子为免疫原,制备高效价抗hbFGF抗血清。方法通过PCR方法改造5’编码区的12个密码子,构建hbFGF原核表达载体并在大肠杆菌(***)中表达,以纯化的hbFGF免疫新西兰兔,制备高效价抗血清,用于重组hbFGF的免疫印迹分析。结果经过改造的hbFGF基因在***中获得较高水平表达。从可溶性部分纯化得到纯度95%以上的重组hbFGF,以该重组蛋白免疫兔子,在二次加强后以间接ELISA检测抗血清效价可达1∶512000。免疫印迹分析显示该抗血清与***中表达的重组hbFGF和标准hbFGF均有特异性反应,但与某些细菌蛋白存在弱交叉反应,经***菌体蛋白吸附的抗血清,与菌体蛋白的弱交叉反应消失。结论以纯化的重组hbFGF为免疫原制备了高效价的特异性抗血清,经菌体蛋白吸附可消除存在的交叉反应性。

关键词：碱性成纤维生长因子可溶性表达抗血清交叉反应性

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喜树碱诱导的HL-60细胞凋亡过程中线粒体的变化

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细胞与分子免疫学杂志 2006年第2期22卷 144-147页

作者：贺芳曾耀英王通邢飞跃林羿梁佩燕肇静娴暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫中心教育部重点实验室广东广州510632

目的:研究喜树碱(CPT)诱导的人早幼粒细胞性白血病细胞HL-60凋亡过程中线粒体的质量和膜电势的变化。方法:以CPT诱导HL-60细胞凋亡为模型,利用膜联蛋白V(annexinV)-FITC/PI双染流式细胞术,研究HL-60细胞的凋亡和坏死。用DiOC6(3)染色流... 详细信息

目的:研究喜树碱(CPT)诱导的人早幼粒细胞性白血病细胞HL-60凋亡过程中线粒体的质量和膜电势的变化。方法:以CPT诱导HL-60细胞凋亡为模型,利用膜联蛋白V(annexinV)-FITC/PI双染流式细胞术,研究HL-60细胞的凋亡和坏死。用DiOC6(3)染色流式细胞术,检测线粒体的膜电势(△ψm)。用NAO染色流式细胞术,检测线粒体的质量。结果:在4×10-6mol/LCPT的诱导下,HL-60细胞(12h)早期的凋亡率为(12.75±4.61)%,对照组为(2.88±2.49)%,二者相比较差异显著(P<0.01);CPT组坏死比率为(3.48±1.67)%,对照组为(0.71±1.10)%(P<0.01)。PI染色的结果显示,HL-60细胞(12h)晚期凋亡细胞的百分率,CPT组为(3.52±1.07)%,对照组为(0.46±1.06)%(P<0.01)。同时观察到,G2/M期细胞出现阻滞,G2/M期细胞的百分率,对照组为(22.46±2.19)%,CPT组为(13.45±1.91)%(P<0.01)。在12h时间点,CPT组线粒体的质量显著低于对照组(P<0.01),低线粒体质量的细胞所占百分率,对照组为(4.53±1.26)%,CPT组为(25.74±2.09)%。同时,CPT组线粒体的膜电势显著下降(P<0.01),CPT组线粒体膜电势降低的比率为(17.71±5.23)%,对照组为(1.64±2.00)%。结论:CPT诱导HL-60细胞凋亡过程中,线粒体的质量和膜电势均有所下降,但其去极化作用增强。

关键词：喜树碱人HL-60细胞凋亡线粒体

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复杂性人工晶体眼裂孔性视网膜脱离玻璃体切除术的疗效

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中山大学学报（医学科学版） 2006年第4期27卷 459-462页

作者：邹秀兰赖铭莹曾祥凤暨南大学第一附属医院眼科广东广州510630 暨南大学附属深圳眼科中心广东深圳518001 暨南大学组织移植与免疫中心广东广州510632

【目的】探讨复杂性人工晶体眼裂孔性视网膜脱离(PRRD)玻璃体切除术的疗效及其并发症。【方法】106例资料完整,随访6个月以上的复杂性PRRD且行玻璃体切除作为首选手术的患者被回顾。其中,27例术前检查未发现裂孔,26例曾行Nd:YAG后囊膜... 详细信息

【目的】探讨复杂性人工晶体眼裂孔性视网膜脱离(PRRD)玻璃体切除术的疗效及其并发症。【方法】106例资料完整,随访6个月以上的复杂性PRRD且行玻璃体切除作为首选手术的患者被回顾。其中,27例术前检查未发现裂孔,26例曾行Nd:YAG后囊膜切开术。【结果】术后视网膜首次和最终复位率分别是72.6%(77/106)和98.1%(104/106)。术后59.4%(63/106)的患者术后视力>0.3,仅15.1%(16/106)<0.1,与术前视力(>0.3者仅34%,<0.1则50%)相比具有显著性差异(χ2=23.31,P<0.001)。手术并发症主要是术中医源性裂孔(6.6%);术后增殖性玻璃体视网膜病变(14.2%)和黄斑前膜(23.6%)。【结论】玻璃体切除治疗复杂性PRRD能取得较好的解剖和功能效果,但应尽量避免医源性裂孔等手术并发症的发生。

关键词：人工晶体眼玻璃体切除术裂孔性视网膜脱离增殖性玻璃体视网膜病变

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口服S抗原对抗原诱导性葡萄膜视网膜炎影响的实验研究

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中国病理生理杂志 2000年第12期16卷 1255-1259页

作者：陈建苏李志杰李辰暨南大学医学院眼科广东广州510632 暨南大学医学院组织移植与免疫中心广东广州510632

目的 :观察口服牛视网膜S抗原对Wistar大鼠抗原诱导性葡萄膜视网膜炎 (ATU)的影响。方法 :用纯化牛视网膜S抗原和福氏完全佐剂的混合乳剂致敏大鼠 ,14d后接种S抗原于致敏鼠眼玻璃体腔复制AIU模型。观察致敏前后口服S抗原或牛血清白蛋白 ... 详细信息

目的 :观察口服牛视网膜S抗原对Wistar大鼠抗原诱导性葡萄膜视网膜炎 (ATU)的影响。方法 :用纯化牛视网膜S抗原和福氏完全佐剂的混合乳剂致敏大鼠 ,14d后接种S抗原于致敏鼠眼玻璃体腔复制AIU模型。观察致敏前后口服S抗原或牛血清白蛋白 (BSA)对AIU眼部表现 ,组织学改变、血清抗体效价、迟发型超敏反应 (DTH)、淋巴细胞增殖反应的影响。结果 :致敏前后口服BSA对AIU的炎性反应和免疫反应无影响。与口服BSA组比较 ,预口服S抗原组在AIU第 1、3、5d的临床分级参数显著降低 ,炎症持续时间显著缩短 ,组织炎性细胞浸润显著减轻 ,血清特异性抗体滴度降低 ,DTH显著降低 ,受S抗原刺激的脾淋巴细胞增殖反应显著降低 ,加入IL - 2共孵育后S抗原刺激的淋巴细胞增殖反应增高。致敏后口服S抗原组在AIU第 5d的临床分级参数、炎症持续时间和DTH显著降低 ,血清特异性抗体滴度降低。结论 :口服S抗原可以抑制AIU的炎性反应、细胞免疫反应和体液免疫反应。

关键词：免疫耐受葡萄膜视网膜炎 S抗原大鼠 ATU

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雷公藤内酯醇滴眼液眼内药代动力学的实验研究

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中国药理学通报 2002年第3期18卷 356-357页

作者：黄仲立邓宏伟李辰陈建苏侯励狄静芳中山大学测试中心广州510275 暨南大学第一附属医院眼科广州510632 暨南大学第一附属医院药剂科广州510632 暨南大学组织移植免疫中心广州510632

角膜移植免疫排斥反应是角膜移植失败的主要原因，寻找高效低毒的免疫抑制剂一直是临床面临的主要问题。雷公藤（Tripterygium wilfordii Hook. f.，TWHf）有免疫抑制、抗炎、抗生育、抗肿瘤和抗菌作用，可用于治疗多种自身免疫性疾病... 详细信息

角膜移植免疫排斥反应是角膜移植失败的主要原因，寻找高效低毒的免疫抑制剂一直是临床面临的主要问题。雷公藤（Tripterygium wilfordii Hook. f.，TWHf）有免疫抑制、抗炎、抗生育、抗肿瘤和抗菌作用，可用于治疗多种自身免疫性疾病，过敏性疾病，皮肤性疾病，器官移植术后抑制免疫排斥反应，但由于其全身应用对造血系统、心、肌、肾及生殖系统毒副作用较大，阻碍了其广泛的临床应用。

关键词：雷公藤内酯醇滴眼液房水高效液相色谱药代动力学

来源：评论

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