检索结果-内蒙古大学图书馆

第二军医大学学报 2005年第3期26卷 267-270页

作者：杨志刚曾耀英王通江逊王青暨南大学组织移植与免疫学教育部重点实验室

目的:研究自然杀伤细胞(NK)在异基因骨髓移植中对移植物抗宿主病(GVHD)的影响。方法:以近交系小鼠C57BL/6 (H 2b)为供鼠、BALB/c (H 2d)为受鼠,在移植物中增加供者的外周T细胞和(或)NK细胞进行异基因骨髓移植,根据临床表现和病理检查,... 详细信息

目的:研究自然杀伤细胞(NK)在异基因骨髓移植中对移植物抗宿主病(GVHD)的影响。方法:以近交系小鼠C57BL/6 (H 2b)为供鼠、BALB/c (H 2d)为受鼠,在移植物中增加供者的外周T细胞和(或)NK细胞进行异基因骨髓移植,根据临床表现和病理检查,比较不同移植组的存活率和GVHD发生情况。结果:增加1×106供鼠NK细胞的移植组中40%小鼠出现GVHD,增加2×106 供鼠NK细胞的移植组中仅30%出现GVHD;与单纯异基因骨髓移植组(80%急性GVHD、20%慢性GVHD)和骨髓+T细胞组(100%急性GVHD)比较,GVHD发生率显著下降(P<0.01),30、60 和120 d存活率显著增高(P<0.01)。结论:在小鼠异基因骨髓移植中,同种异基因反应性NK细胞可抑制GVHD效应,延长存活期。

关键词：自然杀伤细胞骨髓移植移植物抗宿主病

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人EGF受体L2结构域在大肠杆菌中表达、包涵体柱上复性及纯化

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生物工程学报 2005年第4期21卷 597-603页

作者：徐丽慧洪岸何贤辉暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广州510632 暨南大学生物工程研究所

以PCR方法从克隆的EGFR胞外区cDNA中扩增编码EGFR_L2结构域的DNA片段,在其3′端加入编码His6标签的序列,与pET_3c连接构建EGFR_L2原核表达载体。该蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达,免疫印迹分析表明表达产物全部以包涵体形式存在... 详细信息

以PCR方法从克隆的EGFR胞外区cDNA中扩增编码EGFR_L2结构域的DNA片段,在其3′端加入编码His6标签的序列,与pET_3c连接构建EGFR_L2原核表达载体。该蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达,免疫印迹分析表明表达产物全部以包涵体形式存在,分步透析法和稀释法都不能获得可溶性复性产物,而Ni2+_NTA柱上复性法不仅能够获得可溶性的EGFR_L2蛋白,而且产物同时得到高度纯化,纯度>95%,复性的EGFR_L2与其配基EGF具有特异性的结合活性,但亲和力较低。这表明His6标签不但便于纯化目标蛋白,而且可利用Ni2+_NTA柱进行柱上复性,适用于不易通过常规方法复性的重组蛋白的制备。

关键词：表皮生长因子受体 L2结构域原核表达包涵体重折叠

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卵巢切除对成年小鼠免疫系统淋巴细胞亚群组成的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2005年第2期21卷 254-255页

作者：赵莉曾耀英罗璐俞瑜王青狄静芳暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632

　目的: 研究卵巢切除对成年小鼠胸腺和外周淋巴器官淋巴细胞亚群组成的影响。方法: 用双色免疫荧光结合流式细胞仪, 检测成年小鼠双侧卵巢切除 14d后, 胸腺、脾脏和腹腔淋巴细胞亚群的比例。结果: 与伪手术组相比较, 卵巢切除的成年小... 详细信息

　目的: 研究卵巢切除对成年小鼠胸腺和外周淋巴器官淋巴细胞亚群组成的影响。方法: 用双色免疫荧光结合流式细胞仪, 检测成年小鼠双侧卵巢切除 14d后, 胸腺、脾脏和腹腔淋巴细胞亚群的比例。结果: 与伪手术组相比较, 卵巢切除的成年小鼠胸腺CD4+ CD8+ T细胞的比率显著升高(P<0. 05), CD4- CD8- T细胞和CD4+ CD8- T细胞的比率显著降低(P<0. 05); 脾脏和淋巴结中CD4+ CD8- T细胞的比率显著降低(P<0. 05)。结论: 成年小鼠切除卵巢后, 可明显影响免疫系统淋巴细胞亚群的组成; 对于胸腺T细胞的发育及向外周输出也有一定的影响。

关键词：卵巢切除胸腺细胞流式细胞术

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喘可治延长小鼠异基因移植皮片存活时间与CD4^+CD25^+调节性T细胞相关性研究

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中国病理生理杂志 2005年第4期21卷 765-767页

作者：王幼萍曾耀英肇静娴赵莉邢飞跃狄静芳江逊李海仙暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632

目的:研究喘可治抑制小鼠异基因皮片移植排斥作用与小鼠体内CD4 + CD2 5 + 调节性T细胞(CD4 +CD2 5 + Tr)变化的相关性。方法:建立小鼠同种异基因与同基因皮片移植模型,通过腹腔注射给药喘可治(CKZ)观察其对皮片移植存活时间的影响,并利... 详细信息

目的:研究喘可治抑制小鼠异基因皮片移植排斥作用与小鼠体内CD4 + CD2 5 + 调节性T细胞(CD4 +CD2 5 + Tr)变化的相关性。方法:建立小鼠同种异基因与同基因皮片移植模型,通过腹腔注射给药喘可治(CKZ)观察其对皮片移植存活时间的影响,并利用3色免疫荧光标记和流式细胞术分析受鼠外周血CD4 + CD2 5 + Tr变化规律。结果:同种异基因移植CKZ组的移植皮片存活时间显著长于同种异基因移植对照组,分别为(19 .5±2 .3)d和(10 . 2±2 .2 )d ,P <0 . 0 1;在同种异基因皮片移植后,受体外周血CD4 + CD2 5 + Tr占CD4 + T细胞百分率明显升高,术后8d达到高峰(P <0 . 0 1) ,然后出现下降趋势,其中同种异基因移植对照组在术后13d时已回落至正常水平,而同种异基因移植CKZ组在术后2 3d时仍维持在高于移植前水平;在同基因皮片移植后,CKZ组与对照组外周血CD4 + CD2 5 +Tr水平均无明显升高(P >0 . 0 5 )。结论:喘可治可延长小鼠同种异基因移植皮片存活时间,通过升高CD4 + CD2 5 + Tr水平而发挥免疫抑制效应可能是其机制之一。

关键词：喘可治 CD4^+CD25^+调节性T细胞移植,皮肤流式细胞术

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雌二醇对人树突状细胞成熟和功能的影响

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中国病理生理杂志 2005年第3期21卷 455-458页

作者：沈媛曾耀英肇静娴江逊王通狄静芳暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632

目的 :研究雌二醇 (17β -estradiol,E2 )对人外周血来源树突状细胞 (DCs)成熟和免疫学功能的影响。方法 :在人外周血来源DC体外培养时加入两种浓度的E2 (10 -7mol/L和 10 -6mol/L)处理 ,光镜和电镜下观察DCs的生成情况及形态变化 ,以... 详细信息

目的 :研究雌二醇 (17β -estradiol,E2 )对人外周血来源树突状细胞 (DCs)成熟和免疫学功能的影响。方法 :在人外周血来源DC体外培养时加入两种浓度的E2 (10 -7mol/L和 10 -6mol/L)处理 ,光镜和电镜下观察DCs的生成情况及形态变化 ,以流式细胞仪分析各组细胞的免疫表型 ,用ELISA方法测定其分泌的IL - 12水平 ,[3 H]-TdR掺入法检测体外混合淋巴细胞反应中DCs刺激同种反应性T细胞的增殖能力。结果 :加入E2 培养后 ,DCs树突状和膜面状伪足减少 ,表达低水平MHC -II分子和共刺激分子CD4 0、CD80和CD86 ,其分泌的IL - 12水平明显下降 ,DCs刺激同种反应性T细胞的功能显著下降。结论 :E2 抑制人外周血来源DC的成熟 ,对其免疫学功能具有负性调节作用。

关键词：树突细胞雌二醇免疫功能

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多聚次黄苷酸-胞苷酸诱发性小鼠流产模型CD200^+CK7^+滋养层细胞分析

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中国病理生理杂志 2005年第8期21卷 1498-1502页

作者：林羿曾耀英狄静芳曾山肇静娴王通曾祥凤冯铮暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632

目的:在多聚次黄苷酸-胞苷酸[poly(I∶C)]诱发性流产小鼠模型中研究CD200+CK7+细胞与胚胎吸收的关系。方法:采用Balb/c×C57BL/6和Balb/c×Balb/c小鼠,在孕早期注射poly(I∶C)以建立诱发性流产模型,并采用流式细胞术检测胎盘CD2... 详细信息

目的:在多聚次黄苷酸-胞苷酸[poly(I∶C)]诱发性流产小鼠模型中研究CD200+CK7+细胞与胚胎吸收的关系。方法:采用Balb/c×C57BL/6和Balb/c×Balb/c小鼠,在孕早期注射poly(I∶C)以建立诱发性流产模型,并采用流式细胞术检测胎盘CD200+CK7+/CK7+细胞百分率和CD200+CK7+细胞的绝对数,采用免疫组化法对CD200+细胞在母-胎界面的分布情况进行定位检测。结果:在每例检测104个细胞的情况下,poly(I∶C)处理组上述细胞百分率和绝对数均显著低于对照组(Balb/c×C57BL/6小鼠:6·3%±6·2%vs36·1%±9·3%,P<0·01;140±111vs1941±809,P<0·01。Balb/c×Balb/c小鼠:8·5%±4·8%vs26·1%±8·0%,P<0·01;701±499vs1886±1112,P<0·05)。与此相应,poly(I∶C)处理组孕13·5d的胚胎吸收率也显著增高(Balb/c×C57BL/6小鼠:从9·1%升至37·0%,P<0·01;Balb/c×Balb/c小鼠:从5·8%升至29·0%,P<0·01)。免疫组化法检测发现,这些CD200+细胞主要分布在胎盘和子宫交界处的胎盘组织中。结论:在母-胎界面CK7+细胞群中CD200分子适当水平的表达,对于维持小鼠妊娠免疫耐受过程可能具有重要意义。

关键词：流产滋养层角蛋白

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正常妊娠中人外周血树突状细胞亚群的研究

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中国病理生理杂志 2005年第1期21卷 50-53页

作者：沈媛曾耀英何贤辉肇静娴江逊暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632

目的探讨髓样DC(MDC)和浆细胞淋巴样DC(PDC)在正常妊娠中母胎免疫耐受机制中的作用。方法选择正常妊娠妇女30例,分别在每个妊娠妇女早期、中期和晚期妊娠时采集外周血。应用流式细胞仪术,检测MDC和PDC占外周血单个核细胞的百分率及MDC/... 详细信息

目的探讨髓样DC(MDC)和浆细胞淋巴样DC(PDC)在正常妊娠中母胎免疫耐受机制中的作用。方法选择正常妊娠妇女30例,分别在每个妊娠妇女早期、中期和晚期妊娠时采集外周血。应用流式细胞仪术,检测MDC和PDC占外周血单个核细胞的百分率及MDC/PDC比率,正常未妊娠女性为对照组。结果与未妊娠妇女外周血中MDC和PDC的百分率(MDC,032%±008%;PDC,012%±005%)及MDC/PDC比率(296±139)相比早期妊娠妇女外周血中MDC和PDC的百分率(MDC,029%±007%;PDC,011%±004%)及MDC/PDC比率(295±085)无显著差异(P>005);中期妊娠妇女外周血中MDC和PDC的百分率(MDC,011%±006%;PDC,007%±003%)及MDC/PDC比率(152±044)降低(P<001);晚期妊娠妇女外周血中MDC和PDC的百分率(MDC,012%±006%;PDC,008%±003%)及MDC/PDC比率(154±043)降低(P<001)。与正常早期妊娠妇女外周血中MDC和PDC的百分率及MDC/PDC比率相比,中、晚期妊娠显著降低(P<001)。结论正常妊娠妇女中期和晚期妊娠时外周血中MDC和PDC的百分率及MDC/PDC比率均降低。

关键词：妊娠树突细胞免疫抑制

来源：评论

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CD4^+CD25^+调节性T细胞的发育与胸腺CD4^-CD25^+细胞关联性的探讨

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中国病理生理杂志 2005年第7期21卷 1406-1410页

作者：肇静娴曾耀英暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632

目的:探讨CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+regulatoryTcells,CD4+CD25+Tr)的发育及其与胸腺CD4-CD25+细胞的关系。方法:以流式细胞术检测小鼠从出生至发育成熟过程中,胸腺、脾脏、淋巴结和外周血中CD4+CD25+Tr比例变化,以及胸腺CD4-CD25... 详细信息

目的:探讨CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+regulatoryTcells,CD4+CD25+Tr)的发育及其与胸腺CD4-CD25+细胞的关系。方法:以流式细胞术检测小鼠从出生至发育成熟过程中,胸腺、脾脏、淋巴结和外周血中CD4+CD25+Tr比例变化,以及胸腺CD4-CD25+细胞比例变化;通过磁激活细胞分选(MACS)从小鼠淋巴结纯化CD4+CD25+T和CD4+CD25-T细胞,经CFDA-SE标记,以多种刺激形式诱导增殖。结果:小鼠出生1d到10周的发育过程中,胸腺CD4+CD25+Tr比例一直比较恒定,但在脾脏、淋巴结和外周血,随鼠龄增加而不断升高,从1d龄到1周时升高最迅速,其后的升高速度逐渐减慢,10周龄时达平台期。胸腺中CD4-CD25+细胞在出生1d的小鼠比例非常高,1d龄到1周龄期间迅速下降,10周龄时达平台期。ConA不能诱导CD4+CD25+Tr和CD4+CD25-T细胞增殖,但CD4+CD25+Tr出现一过性细胞增大;佛波醇酯加离子霉素能诱导CD4+CD25+Tr和CD4+CD25-T细胞增殖;包被的抗CD3抗体加可溶性抗CD28抗体能刺激CD4+CD25-T细胞增殖,但CD4+CD25+Tr不增殖,加入高浓度IL-2,CD4+CD25-T细胞增殖更强,CD4+CD25+Tr出现增殖。结论:胸腺CD4-CD25+细胞很有可能是CD4+CD25+Tr的前体。

关键词： CD4^+CD25^+ 调节性T细胞胸腺 CD4^-CD25^+细胞

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地塞米松介导胸腺细胞凋亡过程中线粒体和细胞结构蛋白的变化

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中国病理生理杂志 2005年第7期21卷 1415-1418页

作者：王通曾耀英肇静娴林羿梁佩燕暨南大学教育部组织移植与免疫重点实验室广东广州510632

目的:研究地塞米松(DEX)介导的小鼠胸腺细胞凋亡过程中线粒体质量和结构蛋白变化特点。方法:以地塞米松(DEX)诱导小鼠胸腺细胞凋亡为模型,利用AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术研究细胞凋亡和坏死,JC-1染色流式细胞术检测线粒体膜电势(△... 详细信息

目的:研究地塞米松(DEX)介导的小鼠胸腺细胞凋亡过程中线粒体质量和结构蛋白变化特点。方法:以地塞米松(DEX)诱导小鼠胸腺细胞凋亡为模型,利用AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术研究细胞凋亡和坏死,JC-1染色流式细胞术检测线粒体膜电势(△Ψm)和线粒体质量,利用CFDA-SE染色流式细胞术检测细胞结构蛋白变化。结果:在1×10-6mol/LDEX诱导下,小鼠胸腺细胞在6h凋亡比率为(51.25±5.51)%,对照组为(12.03±2.00)%,差异显著(P<0.01);DEX组坏死比率为(30.25±3.67)%,对照组为(10.11±1.11)%,差异显著(P<0.01)。DEX组在6h时点的线粒体质量显著低于对照组(P<0.01),FL1平均荧光强度分别为(561.62±54.27)和(900.25±38.80)。DEX同时引起线粒体膜电势的显著下降(P<0.01),对照组FL2平均荧光强度为(267.51±26.48),DEX组为(133.17±12.29)。成熟T细胞培养48h,CFDA-SE法仅检测到亲代单一细胞峰;而在ConA刺激条件下出现3个子代峰。对照组小鼠胸腺细胞在CFDA-SE染色培养6h条件下,存在(5.25±1.15)%的低荧光强度细胞群,而在DEX刺激下,该群细胞占(47.39±9.76)%,并且在直方图结果上形成明显的细胞峰。结论:DEX诱导小鼠胸腺细胞凋亡过程中,线粒体质量和细胞结构蛋白均有所下降;CFDA-SE染色流式细胞术可以作为基于细胞结构蛋白变化的凋亡定量检测方法。

关键词：地塞米松胸腺细胞细胞结构蛋白细胞凋亡线粒体

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转化生长因子-β与妊娠高血压综合征

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中国妇幼保健 2005年第6期20卷 765-767页

作者：沈媛曾耀英暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室 510632

转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)是一种多功能生长因子,可对众多的组织器官产生生物学效应,具有调节细胞生长、分化和免疫功能,抑制炎症,促进组织修复和胚胎发育等功能[1],尤其在滋养细胞的增殖、分化、免疫与... 详细信息

转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)是一种多功能生长因子,可对众多的组织器官产生生物学效应,具有调节细胞生长、分化和免疫功能,抑制炎症,促进组织修复和胚胎发育等功能[1],尤其在滋养细胞的增殖、分化、免疫与内分泌功能调节中具有重要意义.目前,妊高征的病因尚不明确,但其发病机制主要与滋养细胞有关[2].近年来,国外有学者将对滋养层细胞的生物学行为与功能有重要调节作用的TGF-β应用到妊高征的病因研究[3],初步证实两者之间存在密切关系.现将有关TGF-β与妊高征关系的研究综述如下.

关键词：转化生长因子-β 妊娠高血压综合征免疫功能细胞生长胚胎发育滋养细胞

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