检索结果-内蒙古大学图书馆

暨南大学学报（自然科学与医学版） 2007年第6期28卷 537-540,545页

作者：杨志曾耀英黄秀艳滕菲李林宋兵姚满林暨南大学组织移植与免疫实验中心广东广州510632

目的:探讨红车轴草提取物(Trifoliumpratense Leguminosaeextract,TLE)对小鼠T淋巴细胞的体外活化和增殖的影响。方法:MTT比色法检测TLE对细胞的毒副作用及增殖抑制情况;双色荧光抗体染色结合流式细胞术分析TLE对小鼠T淋巴细胞在多克隆... 详细信息

目的:探讨红车轴草提取物(Trifoliumpratense Leguminosaeextract,TLE)对小鼠T淋巴细胞的体外活化和增殖的影响。方法:MTT比色法检测TLE对细胞的毒副作用及增殖抑制情况;双色荧光抗体染色结合流式细胞术分析TLE对小鼠T淋巴细胞在多克隆刺激剂(ConA)刺激下体外活化抗原CD69表达的影响;羧基荧光素乙酰乙酸(carboxyfluorescein diacetate,succinimidyl ester,CFDA-SE)标记技术结合流式细胞术,分析CD3+T淋巴细胞增殖相关指数。结果:TLE对小鼠淋巴结来源的淋巴细胞微毒副作用;终质量浓度为10、20、30、40 mg/L的TLE对ConA刺激下的T淋巴细胞体外活化抗原CD69表达具有明显的抑制作用(P<0.01),40 mg/L抑制达到峰值;MTT法和CFDA-SE染色法都显示,10、20、30、40 mg/LTLE对ConA诱导的T淋巴细胞增殖具有显著的抑制作用(P<0.01)。结论:TLE对小鼠T淋巴细胞的体外活化和增殖具有明显的抑制作用。

关键词：红车轴草提取物 T淋巴细胞活化增殖

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橙皮素对小鼠T淋巴细胞体外活化与增殖的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2009年第4期25卷 315-318页

作者：周玉英曾耀英黄秀艳宋兵暨南大学组织移植与免疫研究中心广东广州510632

目的：研究橙皮素（Hes）对小鼠T细胞体外活化和增殖的影响，并探讨其作用机制。方法：用ConA刺激小鼠淋巴结来源的淋巴细胞，以不同终浓度Hes与T细胞共培养，利用荧光标记抗体双染色结合流式细胞术（FCM），检测各药物浓度Hes对ConA诱... 详细信息

目的：研究橙皮素（Hes）对小鼠T细胞体外活化和增殖的影响，并探讨其作用机制。方法：用ConA刺激小鼠淋巴结来源的淋巴细胞，以不同终浓度Hes与T细胞共培养，利用荧光标记抗体双染色结合流式细胞术（FCM），检测各药物浓度Hes对ConA诱导的小鼠T细胞表达早期活化抗原CD69的作用；以酶标仪结合MTT比色法检测Hes药物的细胞毒性和对ConA诱导的小鼠淋巴结来源的淋巴细胞增殖的影响；以羧基荧光素乙酰乙酸（CFDA—SE）染色结合FCM检测Hes对ConA诱导的小鼠T细胞增殖的作用，并应用ModFit软件分析其增殖指数（PI）。结果：淋巴细胞的存活率说明0．2mT／LDMSO和25～75μmol／L范围内的Hes对小鼠T淋巴细胞无毒副作用；MTT法、CFDA—SE法、双抗体染色法检测Hes对ConA诱导的小鼠T淋巴细胞的增殖和活化结果均显示，终浓度为25、50、75μmol／L的Hes对ConA诱导的小鼠T淋巴细胞的增殖和活化均有抑制作用且呈剂量依赖关系。结论：有望通过进一步的研究将Hes发展为免疫抑制药物。

关键词：橙皮素 T淋巴细胞活化增殖

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可溶性三聚化CD40-异亮氨酸拉链融合蛋白的制备及鉴定

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生物工程学报 2006年第3期22卷 477-482页

作者：徐丽慧刘毅何贤辉暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室

以克隆的CD40cDNA为模板,经多步PCR构建羧基端融合异亮氨酸拉链(isoleucine zipper,IZ)三聚化基序和His6标签的可溶性CD40融合蛋白(sCD40IZ)的原核表达载体,在大肠杆菌中获得高效表达,分子量为27kD,与理论大小相符,表达产物主要存在于... 详细信息

以克隆的CD40cDNA为模板,经多步PCR构建羧基端融合异亮氨酸拉链(isoleucine zipper,IZ)三聚化基序和His6标签的可溶性CD40融合蛋白(sCD40IZ)的原核表达载体,在大肠杆菌中获得高效表达,分子量为27kD,与理论大小相符,表达产物主要存在于包涵体中,对包涵体蛋白进行稀释复性和纯化得到可溶性的sCD40IZ重组蛋白,该蛋白在溶液中的分子量为91kD,表明最有可能以三聚体形式存在。活性分析显示该蛋白能够与细胞上的CD40L结合,并且其结合活性与不含IZ基序的可溶性CD40相比明显提高。这些结果表明,在可溶性CD40羧基端融合IZ基序能够促进形成三聚体,并且具有增强的配基结合活性。

关键词： CD40,三聚化,异亮氨酸拉链,原核表达,包涵体复性

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灭活HIV-1颗粒对人CD4^+ T细胞活化和全血Th1/Th2细胞因子分泌的影响

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中国病理生理杂志 2008年第11期24卷 2179-2185页

作者：黄秀艳曾耀英赵令斋林长乐暨南大学组织移植与免疫中心广东广州510632

目的:体外研究AT-2灭活的HIV-1颗粒对人CD4+T细胞活化和全血(whole blood,WB)Th1/Th2细胞因子分泌的影响。方法:AT-2灭活HIV-1ⅢB型病毒颗粒,运用ELISA法测定所制备的灭活病毒中p24抗原的含量,按照1/500、1/50和1/5(V/V)的浓度加入到WB... 详细信息

目的:体外研究AT-2灭活的HIV-1颗粒对人CD4+T细胞活化和全血(whole blood,WB)Th1/Th2细胞因子分泌的影响。方法:AT-2灭活HIV-1ⅢB型病毒颗粒,运用ELISA法测定所制备的灭活病毒中p24抗原的含量,按照1/500、1/50和1/5(V/V)的浓度加入到WB中,以植物血凝素(phytohemagglutinin,PHA)组为阳性对照;24h后,收集WB培养上清,运用流式微球分析法(cytometric bead array,CBA)检测WB分泌Th1(IL-2、IFN-γ和TNF-α)和Th2(IL-4、IL-6和IL-10)细胞因子水平;同时运用免疫荧光抗体染色技术结合流式细胞术检测WB中CD4+ T细胞早期活化标记分子CD69的表达百分率。结果:我们所制备的灭活病毒中p24抗原的含量为85.5μg/L;24h后,空白对照组中,CD4+T细胞CD69的表达百分率为(1.62±0.63)%,PHA组为(38.82±6.00)%,HIV-1(1/500)组为(3.83±1.07)%,HIV-1(1/50)组为(5.94±0.85)%,HIV-1(1/5)组为(9.30±1.22)%;空白对照组WB培养上清中细胞因子主要为IL-6和TNF-α,PHA组中Th1和Th2细胞因子全部升高,3个浓度的HIV-1组中Th1和Th2细胞因子也全部升高。结论:AT-2灭活的HIV-1ⅢB颗粒能够明显引起WB中CD4+ T细胞活化,并上调WB培养上清中Th1和Th2细胞因子的水平,其机制可能是除了HIV-1病毒蛋白的作用外,HIV-1出胞时,许多宿主细胞来源的免疫分子整合到病毒颗粒包膜中,而模拟抗原提呈细胞,从而产生免疫调节作用。

关键词： HIV颗粒细胞因子类 CD4^+T细胞

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金银花提取物对小鼠淋巴细胞体外活化与增殖的影响

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免疫学杂志 2008年第2期24卷 178-180,183页

作者：侯会娜曾耀英黄秀艳尹乐乐暨南大学组织移植与免疫中心广州510632

目的研究金银花(Flos lonicerae,FL)提取物对小鼠淋巴细胞体外活化和增殖的影响,并初探其免疫抑制作用机制。方法分离小鼠淋巴结细胞,以荧光标记的单克隆抗体染色结合流式细胞术,检测FL对刀豆蛋白A(Concanavalin A,ConA)刺激的小鼠淋巴... 详细信息

目的研究金银花(Flos lonicerae,FL)提取物对小鼠淋巴细胞体外活化和增殖的影响,并初探其免疫抑制作用机制。方法分离小鼠淋巴结细胞,以荧光标记的单克隆抗体染色结合流式细胞术,检测FL对刀豆蛋白A(Concanavalin A,ConA)刺激的小鼠淋巴细胞活化的影响;利用羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)染色,分析FL对淋巴细胞增殖情况。结果细胞活化分析表明,金银花提取物对ConA诱导的小鼠淋巴细胞CD69、CD25和CD71表达均有明显的抑制作用,且这种抑制程度与其药物浓度呈正相关(P<0.05)。CFDA-SE染色分析显示,不同浓度的金银花提取物均能明显抑制淋巴细胞的增殖(P<0.05)。结论金银花提取物对ConA诱导下的小鼠淋巴细胞体外活化和增殖均有明显抑制作用,是一种有潜在能力的免疫抑制剂。

关键词：金银花提取物淋巴细胞活化增殖

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淫羊藿甙对小鼠T淋巴细胞体外活化和增殖的影响

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免疫学杂志 2008年第6期24卷 613-617页

作者：滕菲曾耀英黄秀艳杨志姚满林宋兵李林暨南大学组织移植与免疫中心广州510632

目的研究淫羊藿甙(ICA)对刀豆蛋白A(ConA)刺激的小鼠T淋巴细胞体外早期活化和增殖的影响。方法以MTT法检测T细胞药物毒性;利用流式细胞术(FCM)结合双色荧光抗体染色技术检测早期活化标志CD69分子的表达;运用流式细胞术结合活体染料羧基... 详细信息

目的研究淫羊藿甙(ICA)对刀豆蛋白A(ConA)刺激的小鼠T淋巴细胞体外早期活化和增殖的影响。方法以MTT法检测T细胞药物毒性;利用流式细胞术(FCM)结合双色荧光抗体染色技术检测早期活化标志CD69分子的表达;运用流式细胞术结合活体染料羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)染色技术和荧光抗体染色技术检测T细胞增殖。结果ICA在终浓度0.3、1.5、3.0μmol·L-1时对于CD69的表达以及淋巴细胞48和72h增殖,均有明显的抑制作用(P<0.01)。结论ICA能抑制ConA刺激的小鼠T淋巴细胞的早期活化和增殖,并呈剂量依赖性,即在最高浓度3.0μmol·L-1时抑制率最强。

关键词：淫羊藿甙 T淋巴细胞活化增殖流式细胞术

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茴香霉素对小鼠T细胞反应性及其杀伤作用的影响

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免疫学杂志 2008年第1期24卷 38-41,44页

作者：于哲邢飞跃王通暨南大学组织移植与免疫中心广州510623

目的茴香霉素对小鼠T细胞活化、反应性、杀伤作用及其同种异基因皮肤移植的影响。方法利用荧光标记的单克隆抗体双染技术结合流式细胞仪检测茴香霉素对小鼠CD3+T细胞早期及中期活化标志分子CD69和CD25表达的影响;用MTT法检测茴香霉素刺... 详细信息

目的茴香霉素对小鼠T细胞活化、反应性、杀伤作用及其同种异基因皮肤移植的影响。方法利用荧光标记的单克隆抗体双染技术结合流式细胞仪检测茴香霉素对小鼠CD3+T细胞早期及中期活化标志分子CD69和CD25表达的影响;用MTT法检测茴香霉素刺激下T细胞在单向或双向混合淋巴细胞反应中T细胞的反应性及其对大鼠肝癌(7919)细胞的杀伤效应;建立小鼠同种异基因皮肤移植动物模型,观察茴香霉素对移植皮肤存活时间的影响。结果在最佳剂量10.0ng/mL时,茴香霉素能够明显抑制T细胞表面分子CD69和CD25的表达,且能抑制单向或双向混合淋巴细胞反应中T细胞的反应性(P<0.01);10.0ng/mL茴香霉素亦能明显抑制T细胞对大鼠肝癌细胞的杀伤效应(P<0.01);5.0和15.0mg/kg茴香霉素能够明显延长小鼠移植皮肤的存活时间(P<0.01)。结论茴香霉素对T细胞的活化、反应性、杀伤效应及同种异基因皮肤移植排斥反应均有明显抑制作用,可能为治疗免疫反应性疾病提供新的策略。

关键词：茴香霉素 T淋巴细胞混合淋巴细胞反应细胞毒作用皮肤移植

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Bisindolylmaleimide Ⅷ对Jurkat T细胞生物学行为的影响

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免疫学杂志 2010年第8期26卷 649-652,668页

作者：吕梦捷曾耀英赵晓慧宋兵暨南大学组织移植与免疫中心广州510632

目的研究BisⅧ对Jurkat T细胞活化、增殖、周期和凋亡的影响,并对其抗肿瘤机制进行初步探讨。方法以Jurkat T细胞为模型;以双色荧光抗体染色技术结合流式细胞术检测BisⅧ对T淋巴细胞早期活化抗原CD69的表达的影响;利用噻唑蓝(MTT)比色... 详细信息

目的研究BisⅧ对Jurkat T细胞活化、增殖、周期和凋亡的影响,并对其抗肿瘤机制进行初步探讨。方法以Jurkat T细胞为模型;以双色荧光抗体染色技术结合流式细胞术检测BisⅧ对T淋巴细胞早期活化抗原CD69的表达的影响;利用噻唑蓝(MTT)比色法观察BisⅧ对JurkatT细胞增殖影响;使用倒置显微镜观察BisⅧ对Jurkat T细胞集落形成的情况的影响;采用碘化丙锭(PI)染色检测BisⅧ对Jurkat T细胞周期的影响;应用钙黄绿素(Calcien-AM)染色检测BisⅧ对JurkatT细胞凋亡的影响。结果终浓度为5、10、20μmol/L的BisⅧ对Jurkat T细胞的早期活化抗原CD69的表达具有明显的抑制作用(P<0.05);BisⅧ对Jurkat T细胞增殖具有显著的抑制作用(P<0.01),且呈剂量依赖性。随着BisⅧ浓度的增高,Jurkat T细胞停滞于G0/G1期;BisⅧ对JurkatT细胞凋亡具有明显的促进作用,并呈剂量依赖性。结论 BisⅧ对JurkatT细胞细胞生物学行为有抑制作用,是潜在治疗白血病的抗肿瘤药物。

关键词： BisⅧ JurkatT细胞活化增殖凋亡

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白杨素对HIV-1感染、复制和CD4^+ T细胞活化的抑制作用研究

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中国免疫学杂志 2007年第2期23卷 99-102,107页

作者：赵令斋曾耀英曾祥凤林长乐李海仙黄秀艳王通暨南大学组织移植与免疫中心广州510632

目的:研究白杨素(CR)体外对人类免疫缺陷病毒(HIV-1)感染和复制的影响及对植物血凝素(PHA)刺激的正常人外周血CD4+T细胞活化的影响。方法:以CR对Calcein-AM标记的慢性感染HIV-1ⅢB的H9细胞(H9/HIV-1ⅢB)和MT-2细胞的融合、对HIV-1诱导的... 详细信息

目的:研究白杨素(CR)体外对人类免疫缺陷病毒(HIV-1)感染和复制的影响及对植物血凝素(PHA)刺激的正常人外周血CD4+T细胞活化的影响。方法:以CR对Calcein-AM标记的慢性感染HIV-1ⅢB的H9细胞(H9/HIV-1ⅢB)和MT-2细胞的融合、对HIV-1诱导的MT-2细胞形成合胞体及对感染HIV-1的MT-2细胞产生p24抗原的影响,探讨其抗HIV-1活性;以PHA刺激人外周血单个核细胞,利用流式细胞术,检测CD4+T细胞CD69表达的百分率,分析CR对免疫活化的影响。结果:CR抑制H9/HIV-1ⅢB细胞与MT-2细胞融合、HIV-1诱导的MT-2细胞形成合胞体和P24抗原产生的选择指数分别为7.24±0.43、6.74±0.47和8.16±0.30;CR降低PHA刺激的CD4+T细胞CD69的表达。结论:CR体外对HIV-1的感染和复制有一定的抑制作用,且可抑制抗原刺激的CD4+T细胞的活化。

关键词：白杨素 HIV-1 细胞融合慢性免疫活化流式细胞术

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反复自然流产小鼠妊娠免疫耐受机理研究

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中华妇产科杂志 2002年第2期37卷 122-123页

作者：林羿曾耀英暨南大学组织移植免疫中心广州510632

妊娠免疫耐受机理是近年国内外研究的热点。探讨这一机理，有助于对流产、早产、不孕症和先兆子痫等疾病的深入理解，并提高诊治水平，还有助于对组织和器官移植免疫排斥的深入研究。DBA／2雄鼠与CBA／雌鼠交配组合（实验动物学命名为CB... 详细信息

妊娠免疫耐受机理是近年国内外研究的热点。探讨这一机理，有助于对流产、早产、不孕症和先兆子痫等疾病的深入理解，并提高诊治水平，还有助于对组织和器官移植免疫排斥的深入研究。DBA／2雄鼠与CBA／雌鼠交配组合（实验动物学命名为CBA／J*DBA／2）作为反复自然流产的动物模型，已经在国际上受到广泛关注。采用动物模型研究具有很多优势，更可能取得突破性进展。

关键词： T细胞受体 TNF-α 自镣杀伤细胞干扰素反应因子妊娠免疫耐受机理反复自然流产动物模型

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