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第十四届全国免疫学学术大会

作者：曾冲曾博宁周荣程李筠熊永佳蔡镇隆邹海玲席名昕王丹康亚玲刘宁罗琪肖浦刘静邢飞跃暨南大学免疫生物学系组织移植与免疫研究中心暨南大学口腔医学院口腔修复学系暨南大学肿瘤分子生物学教育部重点实验室

Th22 cells play a crucial part in pathogenesis of autoimmune diseases.H owever,little is known about a mechanistic process of regulating their *** this study,Jagged-1 signaling suppressed the deviation of naive CD4+T cells into Th22,which could be rescued by DAPT or hes-1 ***-1 contributed to the reduction of Th22 by lessening AHR level,but the knockdown of arnt or ahr could facilitate Th22 *** were the significant interactions among Hes-1,AHR level and ARNT,whereas their up-or down-stream relationships were confirmed by various ***-1 signaling markedly alleviated the joint swelling and clinical scores in the rheumatoid arthritis-bearing mice via the diminished Th22 with the inhibition of TNF-α and *** findings strongly indicate that the activated Jagged-1/Notch pathway suppresses the skewing of naive CD4T cells into Th22 to relieve rheumatoid arthritis through reduction of IL-22 and TNF-α by Hes-1/ARNT/AHR signaling.

关键词： Jagged-1 Hes-1 AhR ARNT Th22 differentiation rheumatoid arthritis

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Hsp90通过调节Jagged-1/Notch信号通路抑制Th22细胞分化（英文）

Hsp90通过调节Jagged-1/Notch信号通路抑制Th22细胞分化（英文）

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第十四届全国免疫学学术大会

作者：史圣楠曾博宁邹海玲熊永佳李筠蔡镇隆席名昕王丹康亚玲刘宁罗琪曾山肖浦刘静邢飞跃暨南大学免疫生物学系组织移植与免疫研究中心暨南大学口腔医学院口腔修复学系暨南大学肿瘤分子生物学教育部重点实验室

Our previous results proved that Jagged-1/Notch signaling inhibits the phenotypic transformation of naive CD4+T cells into Th22 induced by both IL-6 and TNF-α.The current study showed that this process was facilitated by hsp90 knockdown or SNX2112 with the augment of il-22,ahr and arnt,the attenuation of hes-1 as well as the high productions of Th22 cytokines and CCR6,which could be reversed by Hsp90 overexpression or *** Jagged-1 or DAPT caused downregulation or upregulation of Th22 phenotype,no changes were observed at the levels of Hsp90 mRNA and ***,the inhibition or activation of Hsp90 was able to reduce or enhance downstream Hes-1 via interacting with NICD and *** in vivo overexpression of Hsp90 could suppress deviation of Th22,which were rescued by hsp90 *** data demonstrate that Hsp90 can stabilize NICD and AhR to boost Notch signaling transduction,suggesting that it regulates Notch signaling to mediate Th22 differentiation.

关键词： Hsp90 Notch NICD,Hes-1 AhR,ARNT Th22 differentiation

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衰老对肌腱的影响

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中华老年病研究电子杂志 2024年第3期11卷 38-44页

作者：于小鲁钟章锋邹德华陈陟阳王景浩周平辉王华军郑小飞暨南大学附属第一医院运动医学科广州市精准骨科与再生医学重点实验室广东省速度能力研究重点实验室广州510630 澳门科技大学中药质量研究国家重点实验室澳门科技大学中医药学院中国澳门999078 暨南大学教育部再生医学重点实验室衰老与再生医学研究院广州510632 暨南大学附属第一医院药学部寒地心血管病全国重点实验室广州市慢病基础研究与转化重点实验室广州510630 蚌埠医科大学第一附属医院骨科蚌埠医科大学组织移植安徽省重点实验室蚌埠233030

随着社会老龄化程度的不断加重,衰老对肌腱的影响备受关注。目前,衰老相关致病机制尚未完全阐明。本文总结了衰老对肌腱细胞、肌腱干细胞及细胞外基质等方面的影响,并探讨了衰老相关肩袖损伤、跟腱断裂等疾病的流行病学特征和衰老肌腱... 详细信息

随着社会老龄化程度的不断加重,衰老对肌腱的影响备受关注。目前,衰老相关致病机制尚未完全阐明。本文总结了衰老对肌腱细胞、肌腱干细胞及细胞外基质等方面的影响,并探讨了衰老相关肩袖损伤、跟腱断裂等疾病的流行病学特征和衰老肌腱潜在的改善及治疗方法,旨在为进一步研究衰老肌腱相关病理生理机制、开发有效干预策略以及相关疾病治疗提供新思路。

关键词：肌腱干细胞衰老运动医学

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丙戊酸钠对人外周血T淋巴细胞细胞因子表达的影响(英文)

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中国病理生理杂志 2011年第6期27卷 1199-1205页

作者：耿梅王飞鹏欧阳东云徐丽慧陈清张延亭何贤辉暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫实验中心广东广州510632 暨南大学生命科学技术学院再生医学教育部重点实验室广东广州510632

目的:研究丙戊酸钠(VPA)对人外周血T淋巴细胞的活化、凋亡及细胞因子表达的影响。方法:双色荧光抗体染色结合流式细胞术分析VPA对多克隆刺激剂二丁酸佛波酯(PDB)和离子霉素(Ion)刺激下的人外周血T细胞CD69表达的影响,DiOC6(3)染色检测VP... 详细信息

目的:研究丙戊酸钠(VPA)对人外周血T淋巴细胞的活化、凋亡及细胞因子表达的影响。方法:双色荧光抗体染色结合流式细胞术分析VPA对多克隆刺激剂二丁酸佛波酯(PDB)和离子霉素(Ion)刺激下的人外周血T细胞CD69表达的影响,DiOC6(3)染色检测VPA对T细胞凋亡的影响。利用胞内细胞因子染色检测T细胞IL-2、IL-4、IFN-γ和TNF-α的表达,以探讨VPA的保护机制。结果:VPA(1和5 mmol/L)对PDB和Ion诱导的人外周血T细胞CD69的表达具有明显的促进作用(P<0.01)。DiOC6(3)染色结果表明VPA(1和5 mmol/L)可以增强线粒体膜电势,抑制T细胞活化诱导的凋亡,高浓度则作用相反。胞内细胞因子染色分析显示,VPA在低浓度时能明显促进IL-2表达而高浓度时则抑制。同时,VPA能显著促进IFN-γ和TNF-α的表达(P<0.05),并呈剂量依赖性,而对IL-4表达的影响较小。结论:VPA对多克隆刺激剂诱导的人外周血T细胞的活化和凋亡具有双向调节作用,诱导IL-2、IFN-γ和TNF-α的表达。

关键词：丙戊酸 CD69 细胞凋亡细胞因子类淋巴细胞

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尿酸钠对BALB/c小鼠抗体应答及树突状细胞和迟发型超敏反应的影响

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中国病理生理杂志 2010年第3期26卷 424-429页

作者：刘春永王飞鹏郭贺高琦何贤辉暨南大学组织移植与免疫实验中心广东广州510632 暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632

目的:探讨尿酸钠作为佐剂对BALB/c小鼠体液和细胞免疫应答的影响。方法:利用尿酸钠悬浮液为佐剂、天花粉蛋白(TCS)为免疫原对BALB/c小鼠进行免疫,以酶联免疫测定法检测特异性抗体IgG的效价。体外诱导小鼠树突状细胞(DC),流式细胞术分析D... 详细信息

目的:探讨尿酸钠作为佐剂对BALB/c小鼠体液和细胞免疫应答的影响。方法:利用尿酸钠悬浮液为佐剂、天花粉蛋白(TCS)为免疫原对BALB/c小鼠进行免疫,以酶联免疫测定法检测特异性抗体IgG的效价。体外诱导小鼠树突状细胞(DC),流式细胞术分析DC表型,评价尿酸钠体外对DC成熟的效应。以二硝基氟苯建立迟发型超敏反应(DTH)模型,分析尿酸钠在体内对细胞免疫应答的影响。结果:传统弗氏佐剂可极大地增强小鼠对TCS的抗体应答,尿酸钠佐剂对抗体应答不但没有促进,与单独使用免疫原相比,抗体应答反而明显降低。流式细胞术分析显示,尿酸钠对DC表达CD11c和CD83没有影响,但可明显提高MHCII的表达水平。DTH模型中,尿酸钠增强致敏原引发的耳廓肿胀程度,并促进DTH小鼠淋巴细胞的体外增殖能力。结论:尿酸钠悬浮液作为佐剂,对细胞免疫有显著增强作用,而对体液免疫应答却有一定的抑制作用,提示该佐剂在疫苗研究中有潜在应用前景。

关键词：尿酸钠体液免疫应答树突细胞迟发型超敏反应

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中国恒河猴Mamu-B*1703/EGFP在K562和B16细胞中的表达及分布

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第三军医大学学报 2010年第9期32卷 874-878页

作者：欧阳东云徐丽慧高琦郭贺何贤辉暨南大学组织移植与免疫实验中心广州510632 暨南大学再生医学教育部重点实验室暨南大学生物工程研究所广州510632

目的分析恒河猴主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)Ⅰ类分子重链的亚细胞分布,建立适于体外研究恒河猴MHCⅠ类分子表达和抗原呈递功能的细胞系。方法将含Mamu-B*1703重链基因真核表达载体pEGFP-N1分别转染K562... 详细信息

目的分析恒河猴主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)Ⅰ类分子重链的亚细胞分布,建立适于体外研究恒河猴MHCⅠ类分子表达和抗原呈递功能的细胞系。方法将含Mamu-B*1703重链基因真核表达载体pEGFP-N1分别转染K562和B16细胞,细胞收集后以W6/32单克隆抗体或抗Mamu-B*1703抗血清及PE标记二抗染色,利用激光共聚焦显微镜和流式细胞术分析Mamu-B*1703复合体在细胞内和细胞表面的表达。结果在K562和B16细胞的细胞质内均可观察到与Mamu-B*1703重链基因融合表达的绿色荧光蛋白激发后的绿色荧光,即2种细胞均可表达外源Mamu-B*1703重链分子;但通过藻红蛋白标记的抗MHCⅠ类分子复合体抗体染色显示,Mamu-B*1703复合体仅表达于K562细胞表面,而不表达于B16细胞表面。结论Mamu-B*1703重链可与人K562细胞而不能与小鼠B16细胞内的βm轻链结合组装成复合体,表达于细胞表面,提示研究恒河猴的MHCⅠ分子表达应利用人类的细胞株。

关键词：主要组织相容性复合体Ⅰ类分子 Mamu-B＊1703 中国恒河猴转染

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重组人ASCT2的C-末端胞外结构域的原核表达、纯化及鉴定

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中国生物工程杂志 2010年第4期30卷 39-43页

作者：欧阳东云徐丽慧高琦郭贺陈清何贤辉暨南大学组织移植与免疫实验中心广州510632 暨南大学再生医学教育部重点实验室广州510632 暨南大学生物工程研究所广州510632

中性氨基酸转运蛋白(ASCT2)是人类内源性病毒的包膜蛋白合胞素在细胞膜上的主要受体,其最大的胞外结构域存在于C-末端的105个氨基酸(以下简称TAIL)。通过RT-PCR方法从人乳腺癌MCF-7细胞中克隆ASCT2基因编码区全长序列,再从中扩增ASCT2的... 详细信息

中性氨基酸转运蛋白(ASCT2)是人类内源性病毒的包膜蛋白合胞素在细胞膜上的主要受体,其最大的胞外结构域存在于C-末端的105个氨基酸(以下简称TAIL)。通过RT-PCR方法从人乳腺癌MCF-7细胞中克隆ASCT2基因编码区全长序列,再从中扩增ASCT2的TAIL序列,与pET-41b(克隆位点的N-和C-端分别有谷胱甘肽转移酶和His6标签序列)连接构建原核表达载体,重组质粒在大肠杆菌中获得表达,免疫印迹显示重组蛋白TAIL在细菌裂解液上清和沉淀(包涵体)中均有表达,可溶性部分经亲和层析纯化获得高纯度的TAIL蛋白,该蛋白可结合在表达合胞素的MCF-7细胞表面,提示其可能具有结合合胞素的活性。

关键词：合胞素中性氨基酸转运蛋白胞外结构域原核表达

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双氢青蒿素对小鼠T细胞的免疫抑制作用

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中国病理生理杂志 2010年第3期26卷 417-423页

作者：叶燕霞曾耀英黄秀艳陆晓宇曾祥凤王希朝暨南大学组织移植与免疫中心广东广州510632 华南师范大学激光生命科学教育部重点实验室广东广州510631

目的:研究双氢青蒿素(DHA)在体外对ConA诱导的小鼠T细胞增殖的影响,探讨其可能的免疫作用机制。方法:加入不同浓度DHA,以多克隆刺激剂刀豆蛋白A(ConA)诱导T细胞活化增殖,用羧基荧光素双醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)染色法分析T细胞增殖... 详细信息

目的:研究双氢青蒿素(DHA)在体外对ConA诱导的小鼠T细胞增殖的影响,探讨其可能的免疫作用机制。方法:加入不同浓度DHA,以多克隆刺激剂刀豆蛋白A(ConA)诱导T细胞活化增殖,用羧基荧光素双醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)染色法分析T细胞增殖情况;利用流式细胞术(FCM)结合双色免疫荧光染色技术检测CD3+T细胞早、中、晚期活化标志CD69、CD25、CD71表达情况;用Fluo-4/AM荧光钙离子探针技术检测细胞内钙离子([Ca2+]i)浓度的变化;以碘化丙锭(PI)染色分析细胞周期分布;运用流式细胞术(FCM)结合三色荧光染色技术检测CD4+CD25highTreg早期活化抗原CD69表达情况。结果:CFDA-SE染色结果显示,DHA能有效抑制ConA诱导的T细胞增殖,并呈时间-剂量依赖性;DHA对ConA刺激的CD3+T细胞CD69、CD25的表达有促进作用,而对CD71的表达有抑制作用,均呈剂量依赖性;DHA单独作用不能引起T细胞[Ca2+]i的升高,在ConA的刺激下能引起[Ca2+]i浓度升高;PI染色流式分析结果显示,DHA阻滞细胞于G0/G1期,阻止细胞进入S期和G2/M期;DHA能够下调CD4+CD25highTreg细胞CD69的表达。结论:DHA对小鼠淋巴细胞的增殖有明显的抑制作用,是一种潜在的免疫抑制剂。

关键词：双氢青蒿素免疫抑制 T淋巴细胞 CD4+CD25highTreg 流式细胞术

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人白细胞介素7重组蛋白原核表达载体在大肠杆菌中的表达和鉴定

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2010年第4期31卷 331-335页

作者：耿梅陈清徐丽慧张延亭何贤辉暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫实验中心广东广州510632 暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632 暨南大学生命科学技术学院生物工程研究所广东广州510632

目的:构建重组人白细胞介素7(rhIL-7)的原核表达载体,在大肠杆菌中表达并鉴定。方法:以RT-PCR方法扩增编码IL-7的cDNA片段,插入至pET-3d载体中,构建rhIL-7的原核表达载体,阳性克隆经测序鉴定,转化至大肠杆菌BL21(DE3),优化rhIL-7表达条... 详细信息

目的:构建重组人白细胞介素7(rhIL-7)的原核表达载体,在大肠杆菌中表达并鉴定。方法:以RT-PCR方法扩增编码IL-7的cDNA片段,插入至pET-3d载体中,构建rhIL-7的原核表达载体,阳性克隆经测序鉴定,转化至大肠杆菌BL21(DE3),优化rhIL-7表达条件,利用免疫印迹鉴定重组蛋白。结果:重组载体经DNA测序显示包含正确的rhIL-7编码序列,重组载体转入大肠杆菌后,经IPTG诱导后外源蛋白表达,相对分子质量为17 400,与IL-7理论分子质量一致;免疫印迹显示,外源蛋白可以被人IL-7特异性抗体识别,表明在原核表达的外源蛋白是rhIL-7。rhIL-7主要表达于包涵体中,包涵体表达优化条件为:温度为37℃、IPTG浓度为0.4 mmol/L、诱导时间为4h。结论:成功的构建了rhIL-7的原核表达载体。

关键词：白细胞介素7 原核表达载体包涵体表达免疫印迹

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ASCT2胞外域ECL2原核可溶性表达条件的优化及其纯化

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医学分子生物学杂志 2010年第2期7卷 126-130页

作者：陈清欧阳东云徐丽慧耿梅张延亭何贤辉暨南大学组织移植与免疫实验中心广州市510632 暨南大学再生医学教育部重点实验室广州市510632 暨南大学生物工程研究所广州市510632

目的构建重组人ASCT2胞外域ECL2融合蛋白的原核表达载体，优化其在大肠埃希菌中可溶性表达的条件，并获得纯化的ECL2蛋白。方法以PCR方法扩增编码ECL2的DNA片段，插入至pET-41b载体中，构建ECL2的原核表达载体，转化至大肠埃希菌，优化... 详细信息

目的构建重组人ASCT2胞外域ECL2融合蛋白的原核表达载体，优化其在大肠埃希菌中可溶性表达的条件，并获得纯化的ECL2蛋白。方法以PCR方法扩增编码ECL2的DNA片段，插入至pET-41b载体中，构建ECL2的原核表达载体，转化至大肠埃希菌，优化可溶性表达条件，GSH—Agarose亲和层析纯化并鉴定，与MCF-7细胞结合活性的测定。结果免疫印迹显示，ECL2融合蛋白既表达于包涵体中，也能以可溶性形式表达。随IPTG浓度的增高，可溶性表达水平提高；培养温度为28℃和33℃时可溶性产物高于37℃；而随诱导时间的延长至12h以上，可溶性表达量下降。可溶性表达优化条件为：温度33℃、IPTG浓度0．4mmol／L、诱导时间4h。经亲和层析获得高纯度ECL2蛋白并具有与MCF-7细胞结合活性。结论优化了ECL2融合蛋白的可溶性表达条件，通过亲和层析一步法可获得高纯度融合蛋白。

关键词：中性氨基酸转运蛋白2 胞外结构域可溶性表达合胞素

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