检索结果-内蒙古大学图书馆

暨南大学学报（自然科学与医学版） 2005年第2期26卷 221-223页

作者：刘德许曾耀英狄静芳王曦林弈季煜华暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632

目的:为移植免疫及药物免疫机理研究建立小鼠同种异基因皮肤移植动物模型。方法:受体BALB/c分为A～E共5组,即对照组,5 0、7 5、10、2 0mg/kg环孢菌素A(CsA)剂量组,通过背-背法进行C5 7BL/ 6的全厚皮皮片移植,以探求通过较小剂量CsA及... 详细信息

目的:为移植免疫及药物免疫机理研究建立小鼠同种异基因皮肤移植动物模型。方法:受体BALB/c分为A～E共5组,即对照组,5 0、7 5、10、2 0mg/kg环孢菌素A(CsA)剂量组,通过背-背法进行C5 7BL/ 6的全厚皮皮片移植,以探求通过较小剂量CsA及优化实验条件和护理方式建立供免疫机理研究的动物试验平台。结果:5 0、7 5、10mg/kg组相对于对照组皮片排斥时间无明显差别,而2 0mg/kg组植皮能较长时间存活。结论:2 0mg/kg的CsA剂量可以经济。

关键词：同种异基因皮片移植环孢菌素A

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胸腺保护与抗衰老

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中国临床康复 2005年第23期9卷 164-166页

作者：王通曾耀英暨南大学教育部组织移植与免疫重点实验室广东省广州市510632

目的:本文通过分析胸腺的中枢耐受和退化,探讨胸腺保护与机体抗衰老的关系。资料来源:应用计算机检索美国NCBIPubmed数据库1980-01/2004-02关于胸腺保护和机体抗衰老的文章,主要检索主题词包括“thymus,toler-ance,involution,aging”,... 详细信息

目的:本文通过分析胸腺的中枢耐受和退化,探讨胸腺保护与机体抗衰老的关系。资料来源:应用计算机检索美国NCBIPubmed数据库1980-01/2004-02关于胸腺保护和机体抗衰老的文章,主要检索主题词包括“thymus,toler-ance,involution,aging”,语言设为英语。资料选择:选取报道胸腺细胞表达自身抗原、胸腺细胞凋亡和退化影响因素的原创实验性文章以及2001年以来权威期刊关于胸腺中枢耐受和衰老的相关综述文章。纳入标准:①具有原创性,论点论据可靠的实验文章。②观点明确,分析全面的综述文章。③文献主体内容与本课题联系紧密的文章。排除标准:具有明显实验设计和结果错误的文章及观点模糊的综述。质量评价主要考察资料的真实性、实施过程是否严密。资料提炼:共检索到关于胸腺保护和机体抗衰老的文献40篇,25篇文献符合纳入标准。排除的15篇文献均为重复性文章。资料综合:25篇文献分别阐明了中枢耐受、机体衰老和胸腺退化的影响因素问题。胸腺执行着重要的T细胞中枢耐受。该耐受过程伴随着动态的正负选择,正选择保持抗原特异性T细胞输出。保护胸腺是目前惟一能够维持输出抗原特异性T细胞的手段。保护胸腺的前提是从根本上了解胸腺退化的具体影响因素。结论:胸腺表达了几乎所有外周自身抗原,不但可以维持免疫系统特异性T细胞的输出,同时对避免自身免疫疾病及免疫缺陷病有着重要的意义。物理化学、激素、疾病、药物和年龄等因素引起的胸腺退化过程往往伴随者正负选择平衡的打破。胸腺衰老即指示人体衰老,保护胸腺实际上就是一种抗衰老策略。

关键词：胸腺免疫耐受衰老

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小檗碱对DNFB诱导的小鼠迟发型超敏反应的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2005年第4期21卷 418-421页

作者：杜丽蕊何贤辉徐丽慧曾耀英暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632 暨南大学生物工程研究所广东广州510632

目的:研究小檗碱(Ber)对二硝基氟苯(DNFB)诱导的小鼠迟发型超敏反应(DTH)的影响,探讨其免疫抑制作用的机制。方法:BALB/c小鼠分为对照组、DTH组与Ber处理的DTH组。对照组以不含DNFB的溶剂处理,DTH组以5g/LDNFB腹部致敏、耳廓激发的方法... 详细信息

目的:研究小檗碱(Ber)对二硝基氟苯(DNFB)诱导的小鼠迟发型超敏反应(DTH)的影响,探讨其免疫抑制作用的机制。方法:BALB/c小鼠分为对照组、DTH组与Ber处理的DTH组。对照组以不含DNFB的溶剂处理,DTH组以5g/LDNFB腹部致敏、耳廓激发的方法建立模型,Ber处理的DTH组每天腹腔注射(i.p)Ber,连续7d,总剂量为30mg/kg体质量。激发后48h,取小鼠双耳称重了解Ber对炎症抑制率的影响。镜下观察耳廓局部组织的变化;以结晶紫法检查Ber对脾脏T淋巴细胞与细胞外基质(ECM)黏附作用的影响;以膜联蛋白V(AnnexinV)染色检查淋巴结细胞的凋亡率。结果:双耳称重的结果显示,Ber处理的DTH组与DTH组具有显著的差异(P<0.05),能明显抑制DNFB引起的炎症反应;耳廓局部组织学检测也表明,Ber能够抑制DNFB诱导的DTH,明显减少淋巴细胞的浸润。Ber处理的DTH组的T细胞与ECM的黏附能力明显降低(P<0.05)。Ber处理的DTH组与DTH组和对照组的细胞凋亡率均无明显差异(P>0.05)。结论:Ber对DNFB诱导的小鼠DTH具有明显的抑制作用,降低小鼠T细胞与ECM的黏附能力可能是其抑制DTH的机制之一。

关键词：小檗碱淋巴细胞细胞黏附迟发型超敏反应

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碱性成纤维细胞生长因子对无血清培养大鼠生长板软骨细胞的影响

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2005年第6期26卷 734-739,745页

作者：季煜华曾耀英俞瑜暨南大学组织移植与免疫研究中心教育部重点实验室广东广州510632

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)用于无血清培养扩增软骨细胞的可行性及最适质量浓度.方法:分离、培养大鼠肋生长板软骨细胞(rat costochondral growth plate chondrocyte,RGC).细胞化学和免疫细胞化学染色的方法检测第1代RGC中... 详细信息

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)用于无血清培养扩增软骨细胞的可行性及最适质量浓度.方法:分离、培养大鼠肋生长板软骨细胞(rat costochondral growth plate chondrocyte,RGC).细胞化学和免疫细胞化学染色的方法检测第1代RGC中蛋白多糖和Ⅱ型胶原的表达.观察0.1、1.0、10.0和100.0μg/L bFGF对无血清培养RGC形态的影响,并分别用3H-TdR和3H-Proline掺入法检测上述质量浓度bFGF对无血清培养RGC增殖和胶原合成的影响.结果:第1代RGC表达蛋白多糖和Ⅱ型胶原,保持了软骨细胞的分化表型.随着bFGF质量浓度的增加RGC的形态由多角形变为梭形和圆形.与无血清对照组相比,上述4个质量浓度的bFGF均显著促进RGC的增殖和胶原合成(P＜0.05),其中1.0和10.0μg/L bFGF促RGC增殖的作用与10%胎牛血清(FBS)对照组差异无显著性意义(P＞0.05),但促胶原合成作用较弱,相当于10%FBS对照组的60%左右(P＜0.05).结论:bFGF可用于无血清扩增软骨细胞,1.0～10.0 μg/L是适宜的质量浓度范围,但其促胶原合成作用较弱,还需添加其他因子以弥补促胶原合成作用的不足.

关键词：肋生长板软骨细胞碱性成纤维细胞生长因子无血清培养

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一种分离、培养扩增小鼠NK细胞方法的建立

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细胞与分子免疫学杂志 2005年第3期21卷 379-381,389页

作者：杨志刚曾耀英何贤辉王通江逊唐德燊暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632 广东医学院附属医院广东湛江524001

目的:建立小鼠NK细胞的分离及培养扩增的方法。方法:用两步黏附分离法和磁珠活化的细胞分选(MACS)法,从小鼠脾脏的单个核细胞(MNC)中分离NK细胞,计数所得细胞的总数,并用FITC抗小鼠CD3和PE抗小鼠NK1.1单克隆荧光抗体染色后,用流式细胞仪... 详细信息

目的:建立小鼠NK细胞的分离及培养扩增的方法。方法:用两步黏附分离法和磁珠活化的细胞分选(MACS)法,从小鼠脾脏的单个核细胞(MNC)中分离NK细胞,计数所得细胞的总数,并用FITC抗小鼠CD3和PE抗小鼠NK1.1单克隆荧光抗体染色后,用流式细胞仪(FACS)检测NK细胞的纯度。以YAC -1为靶细胞,用MTT比色法检测NK细胞的杀伤活性。结果:将两步黏附分离法分离的2×107个脾MNC培养5、10、15、20d,计数细胞的总数并检测CD3-NK1.1+细胞百分率,分别为0.5×107、1.4×107、2.6×107、3.0×107和18.36%、43.44%、55.68%、60.03%。效靶细胞25∶1时,NK细胞的杀伤率分别为54.38%、66.54%、79.38%和83.86%,明显高于脾MNC(41.93%)(P<0.01)。MACS法纯化前后细胞的总数和CD3-NK1.1+细胞的百分率,分别为1.0×108、1.5×106和2.54%、93.60%;但纯化后的细胞在体外培养20d时,只扩增到1.9×106个。结论:用两步黏附分离法分离的小鼠NK细胞,培养2～3wk可获得大量的NK细胞,纯度可达55%～60%;在效靶细胞为25∶1时,NK细胞对YAC1细胞的杀伤率约为80%。

关键词： NK细胞分离培养扩增增殖 IL-2

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白藜芦醇对小鼠T细胞活化、增殖及细胞因子分泌的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2005年第6期21卷 697-699,703页

作者：俞瑜曾耀英季煜华肇静娴刘良暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632 香港浸会大学中医药学院

目的:研究白藜芦醇(RSV)对小鼠T淋巴细胞增殖及细胞因子分泌的影响,为阐明其免疫抑制作用提供实验依据。方法:无菌分离小鼠淋巴结细胞,加入不同浓度的RSV预先孵育1h,用多克隆刺激剂佛波醇酯和离子霉素刺激T细胞活化增殖。采用3H-TdR掺... 详细信息

目的:研究白藜芦醇(RSV)对小鼠T淋巴细胞增殖及细胞因子分泌的影响,为阐明其免疫抑制作用提供实验依据。方法:无菌分离小鼠淋巴结细胞,加入不同浓度的RSV预先孵育1h,用多克隆刺激剂佛波醇酯和离子霉素刺激T细胞活化增殖。采用3H-TdR掺入法检测RSV对T细胞增殖的影响;用RT-PCR检测IL-2及IFN-γmRNA的表达;用胞内细胞因子染色法分析IL-2和IFN-γ的分泌。结果:RSV能抑制T细胞增殖,也能在mRNA水平及蛋白水平上抑制IL-2及IFN-γ的分泌。结论:RSV对T细胞的免疫抑制作用,可能与其抑制T细胞的活化、增殖和细胞因子的分泌有关。

关键词：白藜芦醇活化增殖细胞因子

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中药喘可治对小鼠胸腺细胞抗凋亡作用研究

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辽宁中医杂志 2005年第5期32卷 490-491页

作者：王通曾耀英俞渝暨南大学教育部组织移植与免疫重点实验室广东广州510630

目的:研究中药喘可治(CKZ)对小鼠胸腺细胞的抗凋亡作用。方法:以地塞米松(DEX )诱导小鼠胸腺细胞凋亡建模,以CKZ保护小鼠胸腺细胞;6h时点以AnnexinV -FITC/PI双染流式细胞术检测早期凋亡和坏死细胞、以PI染色流式细胞术检测晚期凋亡。结... 详细信息

目的:研究中药喘可治(CKZ)对小鼠胸腺细胞的抗凋亡作用。方法:以地塞米松(DEX )诱导小鼠胸腺细胞凋亡建模,以CKZ保护小鼠胸腺细胞;6h时点以AnnexinV -FITC/PI双染流式细胞术检测早期凋亡和坏死细胞、以PI染色流式细胞术检测晚期凋亡。结果:CKZ +DEX组早期凋亡比率(3 5 2 9±2 73 ) %显著低于DEX组(4 5 97±1 3 9) %(P <0 0 1) ;该两组坏死细胞比率差异不显著。DEX +CKZ组晚期凋亡百分率为(17 2 6±4 5 8) % ,显著低于CKZ组(3 3 88±5 61) % (P <0 0 1)。上述各组数据与对照组差异显著(P <0 0 1)。

关键词：喘可治地塞米松抗凋亡流式细胞术动物实验

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氧化苦参碱抑制二硝基氟苯所致小鼠接触性皮炎及淋巴细胞增殖

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中国病理生理杂志 2005年第5期21卷 931-935页

作者：伍斌蔡小嫦曾耀英施军王通肇静娴黄秀艳暨南大学附属第一医院皮肤科广东广州510632 暨南大学组织移植与免疫中心教育部重点实验室广东广州510632

目的探讨氧化苦参碱(OMT)对二硝基氟苯(DNFB)所致小鼠变应性接触性皮炎(ACD)的抑制作用及小鼠淋巴细胞增殖的影响。方法①建立DNFB所致小鼠ACD模型,以不同剂量的OMT、PBS、氢化可的松(HCT)进行腹腔注射,检测小鼠耳廓肿胀度变化。②利用... 详细信息

目的探讨氧化苦参碱(OMT)对二硝基氟苯(DNFB)所致小鼠变应性接触性皮炎(ACD)的抑制作用及小鼠淋巴细胞增殖的影响。方法①建立DNFB所致小鼠ACD模型,以不同剂量的OMT、PBS、氢化可的松(HCT)进行腹腔注射,检测小鼠耳廓肿胀度变化。②利用羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)染色,流式细胞术检测OMT对小鼠淋巴细胞增殖的影响。结果①OMT对DNFB所致小鼠ACD呈剂量依赖性抑制作用,且与同等剂量HCT作用效果相似,但副作用明显减小。②体外实验证明,在500、125和31mg/L组,OMT对小鼠淋巴细胞增殖呈剂量依赖性抑制。结论OMT对DNFB所致小鼠ACD有显著的抑制作用,而且抑制小鼠淋巴细胞增殖;OMT是一种免疫抑制剂。

关键词：二硝基氟苯皮炎,变应性接触性苦参淋巴细胞

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重组人bFGF的原核表达及其高效价抗血清的制备

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免疫学杂志 2005年第3期21卷 186-189页

作者：徐丽慧洪岸何贤辉汪炬暨南大学生物工程研究所暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室

目的以重组人碱性成纤维生长因子为免疫原,制备高效价抗hbFGF抗血清。方法通过PCR方法改造5’编码区的12个密码子,构建hbFGF原核表达载体并在大肠杆菌(***)中表达,以纯化的hbFGF免疫新西兰兔,制备高效价抗血清,用于重组hbFGF的免疫印迹... 详细信息

目的以重组人碱性成纤维生长因子为免疫原,制备高效价抗hbFGF抗血清。方法通过PCR方法改造5’编码区的12个密码子,构建hbFGF原核表达载体并在大肠杆菌(***)中表达,以纯化的hbFGF免疫新西兰兔,制备高效价抗血清,用于重组hbFGF的免疫印迹分析。结果经过改造的hbFGF基因在***中获得较高水平表达。从可溶性部分纯化得到纯度95%以上的重组hbFGF,以该重组蛋白免疫兔子,在二次加强后以间接ELISA检测抗血清效价可达1∶512000。免疫印迹分析显示该抗血清与***中表达的重组hbFGF和标准hbFGF均有特异性反应,但与某些细菌蛋白存在弱交叉反应,经***菌体蛋白吸附的抗血清,与菌体蛋白的弱交叉反应消失。结论以纯化的重组hbFGF为免疫原制备了高效价的特异性抗血清,经菌体蛋白吸附可消除存在的交叉反应性。

关键词：碱性成纤维生长因子可溶性表达抗血清交叉反应性

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免疫突触形成过程中T细胞受体的重定向运动:涡旋驱动模型

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中国免疫学杂志 2005年第11期21卷 818-821,825页

作者：刘顺会韩博平曾耀英何贤辉广东药学院广州510224 暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广州510623

目的:建立T细胞受体(TCR)在免疫突触形成过程中作重定向(reorientation)运动的机制模型.方法:基于经典流体力学环境中的双分子反应传能原理,提出了T细胞受体的涡旋驱动模型,利用免疫突触内耦合的受体或配体分子作为涡源驱动T细胞受体分... 详细信息

目的:建立T细胞受体(TCR)在免疫突触形成过程中作重定向(reorientation)运动的机制模型.方法:基于经典流体力学环境中的双分子反应传能原理,提出了T细胞受体的涡旋驱动模型,利用免疫突触内耦合的受体或配体分子作为涡源驱动T细胞受体分子的募集.结果:模型计算的结果表明,在强度及作用频率同时具备一定范围的涡旋连续驱动下,TCR重定向运动速度可达到实验测定的范围(0.04～0.1 μm/s).结论:本模型证明突触内受体/配体对耦合时通过将其结合自由能转化为细胞内外流体涡旋运动的机械能可能直接提供了TCR重定向运动的驱动力.

关键词：免疫突触 T细胞受体重定向运动涡旋

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