检索结果-内蒙古大学图书馆

现代生物医学进展 2011年第15期11卷 2864-2867页

作者：尤朋涛邢飞跃唐征乐李卓暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫实验中心广东广州510632

目的:探讨Anisomycin诱导EAC细胞凋亡的机制。方法:利用MTT法观察Anisomycin对EAC细胞增殖的影响;应用AnnexinV-FITC和PI双染色检测Anisomycin作用下EAC细胞凋亡的变化;琼脂糖凝胶电泳检测Anisomycin作用下EAC细胞的DNA断裂片断;采用RT-... 详细信息

目的:探讨Anisomycin诱导EAC细胞凋亡的机制。方法:利用MTT法观察Anisomycin对EAC细胞增殖的影响;应用AnnexinV-FITC和PI双染色检测Anisomycin作用下EAC细胞凋亡的变化;琼脂糖凝胶电泳检测Anisomycin作用下EAC细胞的DNA断裂片断;采用RT-PCR检测Anisomycin作用下Caspase-3 mRNA的转录水平;Western Blot分析Anisomycin处理的EAC细胞内Caspase-3蛋白的表达。结果:Anisomycin对EAC细胞增殖的抑制率随浓度的升高而增高,EAC细胞的凋亡水平也上升,随着Anisomycin浓度升高EAC细胞DNA断裂的寡核苷酸片段亦越趋明显,Caspase-3的mRNA和蛋白水平也上调,并明显高于阿霉素组结论:结果表明,Anisomycin能够抑制EAC细胞的增殖,在体外可能通过激活Caspase-3凋亡信号而诱导EAC细胞的凋亡。

关键词： Anisomycin 细胞凋亡艾氏腹水癌

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非孕与早孕妇女外周血、宫内膜和蜕膜组织自然杀伤细胞亚群的变化

非孕与早孕妇女外周血、宫内膜和蜕膜组织自然杀伤细胞亚群的变化

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第一届中华医学会生殖医学分会、中国动物学会生殖生物学分会联合年会

作者：侯倩曾耀英王自能江西省妇幼保健院辅助生殖中心暨南大学组织移植与免疫中心

目的:探讨非孕与早孕妇女的外周血、宫内膜和蜕膜组织之间的自然杀伤（NK）细胞亚群的差异,以及雌、孕激素对外周血、宫内膜和蜕膜组织 NK 细胞的影响。方法:用流式细胞仪检测非孕和早孕妇女外周血、宫内膜和蜕膜组织 NK 细胞表面标记 C... 详细信息

目的:探讨非孕与早孕妇女的外周血、宫内膜和蜕膜组织之间的自然杀伤（NK）细胞亚群的差异,以及雌、孕激素对外周血、宫内膜和蜕膜组织 NK 细胞的影响。方法:用流式细胞仪检测非孕和早孕妇女外周血、宫内膜和蜕膜组织 NK 细胞表面标记 CD56和 CD16分子,以及用放射免疫沉淀法测定外周血清雌二醇（E）和孕酮（P）水平,并进行比较分析。结果:早孕外周血组 NK 细胞的 CD56CD16、CD56CD16和 CD56CD16三组亚群的百分率均明显高于非孕外周血组（分别为 P≤0.013,P<0.001,P≤0.001）;非孕宫内膜组的 NK 细胞以 CD56为主,为20.82%,且其 CD56CD16的百分率明显高于其外周血组,而其 CD56CD16的百分率明显小于外周血组（P<0.001）,二组的 CD56CD16的百分率无差异（P>0.05）;非孕宫内膜组 CD56CD16的百分率明显高于 CD56CD16和 CD56CD16（均为 P<0.001）,而非孕外周血组的 NK 细胞以 CD16为主, 且其 CD56CD16的百分率明显高于 CD56CD16和 CD56CD16（均为 P<0.001）。早孕蜕膜组的 NK 细胞以 CD56为优势,为62.42%;早孕蜕膜组 NK 细胞的 CD56CD16、CD56CD16和 CD56CD16三组亚群的百分率均明显高于非孕宫内膜组（均为 P<0.001）;而早孕周围血中的 NK 细胞以 CD56CD16和 CD16为主,分别为9.93%和10.65%,且与 CD56CD16比较均有显著性差异（均为 P<0.001）;早孕外周血组 CD16NK 细胞的百分率明显高于蜕膜组（P≤0.001）,且二组的 CD56CD16的百分率无差异（P>0.05）。结论:孕激素能明显促进宫内膜 CD56NK 细胞的增殖和分化,雌、孕激素水平的协同升高可增加外周血和宫内膜组织的 CD56、CD56CD16、和 CD16NK 细胞亚群的百分率;CD56CD16NK 细胞在在早孕外周血和蜕膜组织之间,以及在非孕外周血和宫内膜组织之间均可能起免疫调控作用。

关键词：宫内膜蜕膜外周血自然杀伤细胞雌激素孕酮

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中药喘可治对小鼠T淋巴细胞活化的双向调节作用机理研究

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世界中西医结合杂志 2010年第8期5卷 672-675页

作者：孙成宏张亚兴唐先高王晓东黄秀艳曾耀英许铮弟暨南大学组织移植与免疫实验中心广东广州510632 广州万正药业有限公司广东广州510663

目的研究中药喘可治(Chuankezhi,CKZ)对小鼠T淋巴细胞活化的双向调节作用的机理。方法无菌分离小鼠淋巴结并制备单个淋巴细胞悬液,分别加入巴戟天(Bajitian,BJT)提取物(50μg·mL-1)、淫羊藿(Yinyanghuo,YYH)提取物(100μg·mL... 详细信息

目的研究中药喘可治(Chuankezhi,CKZ)对小鼠T淋巴细胞活化的双向调节作用的机理。方法无菌分离小鼠淋巴结并制备单个淋巴细胞悬液,分别加入巴戟天(Bajitian,BJT)提取物(50μg·mL-1)、淫羊藿(Yinyanghuo,YYH)提取物(100μg·mL-1)和喘可治(50μg·mL-1BJT+100μg·mL-1YYH),预孵育4h后,加入刺激剂,12h后,运用流式细胞术结合双色荧光抗体染色技术检测CD3+T淋巴细胞早期活化标志CD69的表达水平。结果与对照组相比,巴戟天提取物处理组中CD3+T淋巴细胞CD69的表达水平明显升高;与刺激组相比,巴戟天提取物可以协同刺激CD69的表达。淫羊藿提取物对静息状态下的CD+3T淋巴细胞CD69的表达作用不明显,但可以抑制刺激剂引起的CD3+T淋巴细胞CD69的表达。与前两者相比,喘可治则呈现明显的双向免疫调节作用,即上调静息状态的CD+3T淋巴细胞CD69的表达,下调刺激状态的CD3+T淋巴细胞CD69的表达。结论喘可治对T淋巴细胞活化的双向调节作用是巴戟天和淫羊藿共同作用的结果,其中巴戟天具有促进免疫应答的作用,而淫羊藿具有抑制免疫应答的作用。

关键词：喘可治巴戟天淫羊藿 T淋巴细胞活化

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寡肽丙-谷胺-甘-缬抑制多聚次黄苷酸-胞苷酸所致流产的作用

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中华围产医学杂志 2007年第5期10卷 312-317页

作者：林羿仲艳敏王自能 Nisar Khan 李莉平 Robbert Benner 暨南大学组织移植与免疫研究中心广州510632 暨南大学第一临床学院妇产科荷兰鹿特丹Erasmus医学中心广州市第一人民医院妇产科

目的探讨人绒毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotropin，hCG）来源的寡肽丙-谷胺-甘-缬（Ala—Gln—Gly-Val，AQGV）是否具有抗poly I：C诱导的小鼠胚胎吸收的作用及其可能的免疫机制。方法给予异基因妊娠的BALB／c小鼠腹腔注... 详细信息

目的探讨人绒毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotropin，hCG）来源的寡肽丙-谷胺-甘-缬（Ala—Gln—Gly-Val，AQGV）是否具有抗poly I：C诱导的小鼠胚胎吸收的作用及其可能的免疫机制。方法给予异基因妊娠的BALB／c小鼠腹腔注射多聚次黄苷酸-胞苷酸（poly I：C）建立胚胎吸收模型，注射磷酸盐缓冲液组作为对照，观察孕期多次注射AQGV对胚胎吸收率的影响，并采用流式细胞术检测孕9．5d和13．5d胎盘和外周血中免疫活性细胞，包括T细胞、NK细胞、NKT细胞、B细胞和巨噬细胞等的百分率，以及早期活化标志CD25、共刺激分子CD86和细胞内细胞因子IL-12水平。结果孕9．5d时AQGV组胎盘中巨噬细胞和B细胞所占比率和CD45^＋细胞内IL-12水平显著低于流产模型组；孕13．5d时除上述变化外，AQGV组胎盘中T细胞所占比率显著低于流产模型组；孕9．5d时AQGV组外周血CD45^＋细胞内IL-12水平明显低于流产模型组；孕13．5d时外周血NK细胞、巨噬细胞、B细胞所占百分率和CD45^＋细胞内IL-12水平明显低于流产模型组。与此相应，AQGV组孕9．5d和13．5d胚胎吸收率也显著下降。结论 AQGV可降低胎盘局部和外周血免疫活性细胞的构成比和抑制免疫反应向Th1型转化，从而抑制poly I：C诱导的小鼠胚胎吸收。

关键词：流产,自然动物模型寡肽类免疫耐受

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从孕妇外周血分离胎儿细胞及胎儿游离的DNA作无创性产前遗传诊断的研究

从孕妇外周血分离胎儿细胞及胎儿游离的DNA作无创性产前遗传诊断...

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作者：黄艳仪曾耀英陈小蔓吴菁孙荭孔舒孙筱放黎青葛琪冯铮陈小兵佘若菁广州市第二人民医院暨南大学组织移植与免疫中心

第一部分研究成果主要归纳三点：①建立了从孕妇外周血中分离胎儿细胞的细胞分离技术，提高了从孕妇外周血中分离胎儿细胞的精确度；②成功的应用免疫磁珠细胞分离仪从孕妇外周血中富集胎儿细胞，该研究成果使孕妇外周血分离胎儿细胞技... 详细信息

标准号: 0701950159

第一部分研究成果主要归纳三点：①建立了从孕妇外周血中分离胎儿细胞的细胞分离技术，提高了从孕妇外周血中分离胎儿细胞的精确度；②成功的应用免疫磁珠细胞分离仪从孕妇外周血中富集胎儿细胞，该研究成果使孕妇外周血分离胎儿细胞技术能更广泛的应用于临床，推动了无创性产前诊断方法的开展；③孕妇外周血中经磁珠分离的胎儿细胞进行遗传学诊断，应用于临床对患X-性连锁遗传病孕妇胎儿进行性别诊断。该研究成果处于全国先进水平，在全国率先应用磁珠分离仪从孕妇外周血富集胎儿细胞，并进行遗传产前诊断。(1)建立了孕妇外周血分离胎儿细胞的细胞的分离技术，提出应用转铁蛋白受体CD71阳性选择+糖蛋白A双抗抗体和CD45阴性选择(CD71++GPA+/CD45-)多参数细胞分离能提高从孕妇外周血分离胎儿细胞的精确度。(2)成功的应用免疫磁珠细胞分离仪从孕妇外周血分离胎儿细胞。(3)建立经磁珠分离的胎儿细胞荧光原位杂交(FISH)技术作染色体检查，并用于X-性连锁遗传病产前诊断。(4)成功的应用酚提取法提取孕妇血浆中胎儿游离DNA，应用巢式PCR技术确定男性胎儿SRY基因，并用此法对X-性连锁遗传病家庭史的患者进行产前诊断。(5)成功地应用荧光定量PCR(FQ-PCR)检测母体血浆中的胎儿DNA，该研究证实SRY基因作为睾丸决定因子具有很高的特异性，并得出早、中、晚期不同孕周胎儿SRY基因DNA的量与总的DNA的量，该成果可用于无创性产前诊断开辟了新的途径。第二部分研究成果包括：1.证实母体血浆中存在胎儿DNA，且含量较高，其浓度随着孕周的增长而增加；2.荧光定量PCR用于检测母体血浆胎儿游离DNA均有较高的敏感性和特异性，而荧光定量PCR更具有优越性；3.该研究证实SRY基因作为睾丸决定因子具有很高的特异性，可用于产前胎儿性别诊断，并作为检测胎儿DNA的重要标志物。4.该研究成果成功的建立孕妇血浆中胎儿游离DNA的提取技术，应用先进的分子生物学技术、DNA的定性、荧光定量检测技术，通过孕妇血中胎儿SRY基因的检测，可对X-性连锁遗传病孕妇胎儿作出性别判断，应用于临床；5.应用孕妇血浆中的胎儿游离DNA进行产前诊断，为非侵入性产前遗传诊断开辟了新的途径，有非常广泛的应用前景和非常重要的临床意义。

关键词：产前遗传诊断孕妇外周血胎儿细胞分离染色体检查

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人白细胞介素7重组蛋白原核表达载体在大肠杆菌中的表达和鉴定

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2010年第4期31卷 331-335页

作者：耿梅陈清徐丽慧张延亭何贤辉暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫实验中心广东广州510632 暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632 暨南大学生命科学技术学院生物工程研究所广东广州510632

目的:构建重组人白细胞介素7(rhIL-7)的原核表达载体,在大肠杆菌中表达并鉴定。方法:以RT-PCR方法扩增编码IL-7的cDNA片段,插入至pET-3d载体中,构建rhIL-7的原核表达载体,阳性克隆经测序鉴定,转化至大肠杆菌BL21(DE3),优化rhIL-7表达条... 详细信息

目的:构建重组人白细胞介素7(rhIL-7)的原核表达载体,在大肠杆菌中表达并鉴定。方法:以RT-PCR方法扩增编码IL-7的cDNA片段,插入至pET-3d载体中,构建rhIL-7的原核表达载体,阳性克隆经测序鉴定,转化至大肠杆菌BL21(DE3),优化rhIL-7表达条件,利用免疫印迹鉴定重组蛋白。结果:重组载体经DNA测序显示包含正确的rhIL-7编码序列,重组载体转入大肠杆菌后,经IPTG诱导后外源蛋白表达,相对分子质量为17 400,与IL-7理论分子质量一致;免疫印迹显示,外源蛋白可以被人IL-7特异性抗体识别,表明在原核表达的外源蛋白是rhIL-7。rhIL-7主要表达于包涵体中,包涵体表达优化条件为:温度为37℃、IPTG浓度为0.4 mmol/L、诱导时间为4h。结论:成功的构建了rhIL-7的原核表达载体。

关键词：白细胞介素7 原核表达载体包涵体表达免疫印迹

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交感性眼炎的免疫病理学及其免疫治疗

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眼科新进展 2005年第1期25卷 1-4页

作者：李志杰 C.Wayne Smith 暨南大学组织移植与免疫中心 Section of Leukocyte Biology Department of Pediatrics and ImmunologyBaylor College of Medicine1100 BatesRoom 6014HoustonTX 77030America

交感性眼炎是一眼穿透性外伤后发生的双侧肉芽肿性葡萄膜炎。其主要病理特征为葡萄膜的弥散性非坏死性肉芽肿性炎症反应。免疫病理学研究证实 :T淋巴细胞在发病机制中起着重要的作用。疾病早期的T淋巴细胞主要为CD4 + 细胞 ,而晚期则以C... 详细信息

交感性眼炎是一眼穿透性外伤后发生的双侧肉芽肿性葡萄膜炎。其主要病理特征为葡萄膜的弥散性非坏死性肉芽肿性炎症反应。免疫病理学研究证实 :T淋巴细胞在发病机制中起着重要的作用。疾病早期的T淋巴细胞主要为CD4 + 细胞 ,而晚期则以CD8+ 细胞为主。B细胞占脉络膜浸润细胞的 2 0 %以下 ,可能与疾病的慢性过程相关。另外 ,局部还存在黏附分子、MHC和FasL等免疫相关分子的表达增加。交感性眼炎患者具有一定的遗传倾向 ,与宿主的HLA状态存在某种关联性。其治疗原则是使用免疫抑制剂尽快控制眼内炎症 ,但应密切观察其相应的毒副作用。另外 ,还讨论了有关眼球摘除的问题。

关键词：交感性眼炎免疫机制免疫疗法

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rhFGF-7对体外培养人皮肤角质形成细胞增殖的影响

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中国皮肤性病学杂志 2009年第5期23卷 262-264页

作者：朱国兴吴晓萍曾耀英刘钧澄聂燕芳黄秀艳中山大学附属第三医院皮肤性病科广东广州510630 暨南大学组织移植与免疫实验中心广东广州510632 中山大学附属第一医院小儿外科广东广州510080

目的建立一种人皮肤角质形成细胞分离和培养的方法,研究重组人成纤维细胞生长因子7(rhFGF-7)对人皮肤角质形成细胞增殖的影响。方法取环切术后包皮,分别用胰酶和dispaseⅡ酶消化法分离表皮,用无血清培养基进行无滋养层培养,采用免疫细... 详细信息

目的建立一种人皮肤角质形成细胞分离和培养的方法,研究重组人成纤维细胞生长因子7(rhFGF-7)对人皮肤角质形成细胞增殖的影响。方法取环切术后包皮,分别用胰酶和dispaseⅡ酶消化法分离表皮,用无血清培养基进行无滋养层培养,采用免疫细胞化学方法对培养的细胞进行鉴定,并用细胞计数法测定细胞的生长曲线,MTT法检测rhFGF-7对人皮肤角质形成细胞增殖的影响。结果与胰酶消化分离表皮相比,dispaseⅡ酶消化获得的表皮,其细胞贴壁率高,增殖速度快,且成纤维细胞污染少;荧光显微镜下细胞胞浆呈黄绿色,为角蛋白阳性染色;培养的角质形成细胞可持续增殖至第8代,10ng/mL的rhFGF-7促角质形成细胞增殖作用最显著。结论所建立的人皮肤角质形成细胞分离和培养方法,可获得高纯度的人皮肤角质形成细胞,rhFGF-7可促进体外培养人皮肤角质形成细胞的增殖。

关键词：人皮肤角质形成细胞细胞培养细胞增殖

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IL-22参与介导NOD小鼠自发性胚胎丢失

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现代免疫学 2010年第5期30卷 370-374页

作者：许洁涵陈琳琳赵晓明陈翃王文静林羿上海交通大学医学院附属仁济医院生殖医学中心上海200001 暨南大学组织移植与免疫研究中心广州510632 上海交通大学医学院附属仁济医院妇产科学研究所上海200001

为研究IL-22与NOD小鼠自发性胚胎吸收率增高的关系,多次腹腔注射中和抗体抑制IL-22,采用流式细胞术检测子宫CD4+IL-22+细胞百分率,并观察NOD×C57BL/6小鼠交配组合中孕鼠胚胎吸收率的变化。结果显示,NOD×C57BL/6孕鼠子宫CD4+IL... 详细信息

为研究IL-22与NOD小鼠自发性胚胎吸收率增高的关系,多次腹腔注射中和抗体抑制IL-22,采用流式细胞术检测子宫CD4+IL-22+细胞百分率,并观察NOD×C57BL/6小鼠交配组合中孕鼠胚胎吸收率的变化。结果显示,NOD×C57BL/6孕鼠子宫CD4+IL-22+细胞百分率显著高于BALB/c×C57BL/6孕鼠(52.4%±2.1%与14.3%±4.4%,P<0.01)。多次腹腔注射中和抗体可显著降低NOD×C57BL/6孕鼠子宫内CD4+IL-22+细胞数量(18.7%±2.8%;与未抑制组相比,P<0.01),并可显著降低这些小鼠孕12.5 d的胚胎吸收率(4.8%±2.0%与19.1%±5.1%,P<0.05)。线性相关-回归分析显示,胚胎吸收率与子宫CD4+IL-22+细胞百分率呈正相关。提示妊娠子宫内CD4+IL-22+细胞相对数量过多是妊娠不利因素,可能是造成NOD×C57BL/6孕鼠胚胎吸收率增高的原因之一。

关键词：流产母-胎界面免疫调节免疫耐受

来源：评论

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ICAM-1参与脂多糖刺激引起蜕膜细胞应激状态的机制研究

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现代免疫学 2012年第3期32卷 222-225页

作者：姬萌霞林羿狄静芳秦晓黎赵晓明上海交通大学医学院附属仁济医院生殖医学科上海交通大学医学院附属仁济医院妇产科学研究所上海200001 暨南大学组织移植与免疫研究中心广州510632

为探讨细胞间粘附分子-1(ICAM-1)参与脂多糖(LPS)刺激引起蜕膜细胞应激状态的机制,本研究采用LPS刺激和联合阻断ICAM-1及其受体LFA-1(CD11a/CD18,α1β1整合素)的策略,观察小鼠蜕膜LFA-1+细胞和调节性T细胞相对数量的改变,并检测胚胎吸... 详细信息

为探讨细胞间粘附分子-1(ICAM-1)参与脂多糖(LPS)刺激引起蜕膜细胞应激状态的机制,本研究采用LPS刺激和联合阻断ICAM-1及其受体LFA-1(CD11a/CD18,α1β1整合素)的策略,观察小鼠蜕膜LFA-1+细胞和调节性T细胞相对数量的改变,并检测胚胎吸收率的相应变化。LPS刺激可使小鼠胚胎丢失率显著增高,而采用中和抗体抑制ICAM-1/LFA-1通路则可基本消除这一效应。进一步研究发现,LPS可使小鼠蜕膜LFA-1+细胞相对数量显著增多,调节性T细胞相对数量显著减少。相反,抑制ICAM-1/LFA-1可消除上述LPS所造成的影响。结果提示,LPS刺激可激活ICAM-1/LFA-1信息通路,减少蜕膜Treg细胞的相对数量,并导致小鼠母-胎间免疫耐受失衡而发生流产。

关键词：动物模型细胞信息转导免疫调节妊娠耐受

来源：评论

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