检索结果-内蒙古大学图书馆

免疫学杂志 2008年第2期24卷 230-233页

作者：李莉平林羿康佳丽夏薇王自能广州市第一人民医院妇产科广州510180 暨南大学组织移植与免疫国家重点实验室广州510632 暨南大学第一临床医学院妇产科教研室广州510632

目的探讨早、中、晚孕期胎盘因子(PF)体外抗人免疫缺陷病毒-1(HIV-1)及在HIV-1垂直传播中的作用。方法荧光染料Calcien-AM标记的H9/HIV-1ⅢB分别与早、中、晚孕期不同稀释浓度的PF作用后,与MT2细胞混合培养,荧光显微镜下观察合胞体的形... 详细信息

目的探讨早、中、晚孕期胎盘因子(PF)体外抗人免疫缺陷病毒-1(HIV-1)及在HIV-1垂直传播中的作用。方法荧光染料Calcien-AM标记的H9/HIV-1ⅢB分别与早、中、晚孕期不同稀释浓度的PF作用后,与MT2细胞混合培养,荧光显微镜下观察合胞体的形成;用HIV-1ⅢB感染MT2细胞,并分别与早、中、晚孕期不同稀释浓度的PF作用后,用MTT法检测HIV-1感染细胞的存活率,用ELISA方法检测细胞培养上清中p24抗原水平。结果各孕期PF并不能抑制MT2和H9/HIV-1ⅢB细胞的融合,但可以增加HIV-1感染细胞的存活率及减少HIV-1p24抗原的表达,且效应以早孕期PF最大,中孕期PF其次,晚孕期PF最小,并与剂量呈正相关。结论PF在体外具有抗HIV-1的作用,并呈现孕期和剂量相关性,可能在阻断HIV-1垂直传播中具有一定作用。

关键词：胎盘因子 HIV-1 垂直传播 Calcien-AM

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流式细胞术微球阵列法检测急性白血病血清IL-6、IL-10和TNF水平

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2008年第4期29卷 375-377页

作者：肖平曾耀英林蔚暨南大学组织移植与免疫实验中心广东广州510632 广东省佛山市第一人民医院临床医学研究所广东佛山528000

目的:探讨流式细胞术微球阵列法(CBA)在细胞因子检测中的应用及血清肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素10(IL-10)在不同亚型急性白血病(AL)中的表达水平。方法:采用BD CBA F lex Set IL-6、IL-10、TNF试剂盒和流式细胞... 详细信息

目的:探讨流式细胞术微球阵列法(CBA)在细胞因子检测中的应用及血清肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素10(IL-10)在不同亚型急性白血病(AL)中的表达水平。方法:采用BD CBA F lex Set IL-6、IL-10、TNF试剂盒和流式细胞术检测29例急性白血病患者和20例正常人血清样本中3种细胞因子水平。结果:AL患者IL-6、IL-10和TNF水平显著高于正常对照组,急性淋巴细胞白血病(ALL)的IL-10和TNF水平较急性非淋巴细胞白血病(ANLL)有显著性提高(P<0.05)。在ANLL亚型中,M1型IL-6水平最高。结论:CBA法能快速、准确地定量检测细胞因子;AL血清中IL-6、IL-10和TNF水平升高,可能与疾病的发生发展存在相关性。

关键词：流式细胞术微球阵列法急性白血病细胞因子

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荨麻疹患者外周血嗜碱性粒细胞表面CD63表达的研究

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实用皮肤病学杂志 2008年第2期1卷 82-83,78页

作者：李振肇静娴蔡小嫦邓列华深圳市龙岗区人民医院皮肤科深圳518116 暨南大学组织移植与免疫中心暨南大学附属第一医院皮肤科

目的观察荨麻疹患者外周血中活化的嗜碱性粒细胞表面表达CD63的数量,探讨嗜碱性粒细胞的活化程度,为临床检测提供新方法。方法用屋尘螨浸液作划破试验,筛选敏感的荨麻疹患者。用CD63-FITC等抗体标记嗜碱性粒细胞,流式细胞技术检测CD63... 详细信息

目的观察荨麻疹患者外周血中活化的嗜碱性粒细胞表面表达CD63的数量,探讨嗜碱性粒细胞的活化程度,为临床检测提供新方法。方法用屋尘螨浸液作划破试验,筛选敏感的荨麻疹患者。用CD63-FITC等抗体标记嗜碱性粒细胞,流式细胞技术检测CD63的表达情况。结果急、慢性患者活化嗜碱性粒细胞百分率分别为33.77～15.75%、11.66～5.25%,与正常人比较均有显著差异(P<0.05);经变应原刺激后,急、慢性患者活化嗜碱性粒细胞百分率分别为60.25～18.88%、22.22～7.89%,急、慢性患者活化前、活化后也均存在明显差异(P<0.05),而且急性患者活化程度更高(P<0.05)。结论通过测定嗜碱性粒细胞表达CD63可能有助于过敏的诊断。

关键词：荨麻疹嗜碱性粒细胞 CD63 流式细胞术

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早、中、晚孕期胎盘因子体外抗HIV-1的研究

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现代生物医学进展 2008年第6期8卷 1001-1004页

作者：李莉平康佳丽夏薇曾耀英广州市第一人民医院妇产科广东广州510180 暨南大学组织移植与免疫中心广东广州510632

目的:探讨早、中、晚孕期胎盘因子(PF)体外抗人免疫缺陷病毒-1(HIV-1)的作用及其在HIV-1垂直传播中可能的作用。方法:采用荧光染料Calcien-AM标记的H9/HIV-1ⅢB分别与早、中、晚孕期不同稀释浓度的PF作用后,与MT2细胞混合培养,荧光显微... 详细信息

目的:探讨早、中、晚孕期胎盘因子(PF)体外抗人免疫缺陷病毒-1(HIV-1)的作用及其在HIV-1垂直传播中可能的作用。方法:采用荧光染料Calcien-AM标记的H9/HIV-1ⅢB分别与早、中、晚孕期不同稀释浓度的PF作用后,与MT2细胞混合培养,荧光显微镜下观察合胞体的形成;用游离的HIV-1ⅢB感染MT2细胞,并分别与早、中、晚孕期不同稀释浓度的PF作用后,用MTT法检测HIV-1感染细胞的存活率,用HIV-1 p24抗原试剂盒检测细胞培养上清中p24抗原含量的变化。结果:各孕期PF并不能抑制MT2和H9/HIV-1ⅢB细胞的融合,但可以增加HIV-1感染细胞的存活率及减少HIV-1 p24抗原的表达,且效应以早孕期PF最大,中孕期PF其次,晚孕期PF最小,并与剂量呈正相关。结论:PF在体外具有抗HIV-1的作用,并呈现孕期和剂量相关性,可能在阻断HIV-1垂直传播中具有一定作用。

关键词：胎盘因子 HIV-1 垂直传播 Calcien—AM

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H-2D^b四聚体的制备及其在检测LCMV特异性CD8^＋T细胞中的应用

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生物工程学报 2008年第2期24卷 278-284页

作者：刘毅徐丽慧曾学思孙建方何贤辉中国医学科学院中国协和医科大学皮肤病研究所南京210042 暨南大学生命科学技术学院生物工程研究所广州510632 暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫实验中心广州510632

MHC四聚体技术是研究抗原特异性淋巴细胞应答的关键技术之一。为研究H-2D^b基因型(如C57BL/6)小鼠的特异性CD8^+T细胞免疫应答,需要建立H-2D^b四聚体制备技术平台。首先以RT-PCR方法克隆H-2D^b重链基因的cDNA,进而构建H-2D^b胞外域与生... 详细信息

MHC四聚体技术是研究抗原特异性淋巴细胞应答的关键技术之一。为研究H-2D^b基因型(如C57BL/6)小鼠的特异性CD8^+T细胞免疫应答,需要建立H-2D^b四聚体制备技术平台。首先以RT-PCR方法克隆H-2D^b重链基因的cDNA,进而构建H-2D^b胞外域与生物素化酶BirA底物肽(BSP)融合蛋白的表达载体,并在大肠杆菌中获得表达。在LCMV GP_(33-41)抗原肽(KAVYNFATC,KAV)和人β_2-微球蛋白存在时,通过稀释法复性获得H-2D^b/KAV单体。该单体经生物素化并纯化后与PE-链亲和素按4:1的比例混合,即形成四聚体。通过流式细胞术检测经KAV肽免疫的C57BL/6小鼠体内的LCMV特异性CD8^+T细胞的频率.结果表明在外周血、引流淋巴结和脾脏中均可检测到一定频率的LCMV特异性CD8^+T细胞,其中以对外周血标本染色的效果最佳。成功建立了小鼠H-2D^b四聚体制备技术平台,为监测及分析基于H-2D^b基因型小鼠的实验性免疫治疗创造了条件。

关键词： H-2D^b MHC四聚体淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒原核表达

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皮肤角朊细胞与表皮干细胞双向电泳图谱的建立及差异分析

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中华生物医学工程杂志 2008年第5期14卷 332-335页

作者：李孝建李延仓曾耀英沈雁杨小红暨南大学第四附属医院广州市红十字会医院烧伤科广州510220 暨南大学生命科学院组织移植与免疫中心

目的建立皮肤角朊细胞与表皮干细胞的双向电泳图谱，并分析二者表达蛋白质的差异，为进一步研究体外调控表皮干细胞的增殖、分化提供线索。方法酶消化法获取单个表皮细胞悬液。Ⅳ型胶原快速贴壁法分选表皮干细胞。利用双向电泳技术（2-D... 详细信息

目的建立皮肤角朊细胞与表皮干细胞的双向电泳图谱，并分析二者表达蛋白质的差异，为进一步研究体外调控表皮干细胞的增殖、分化提供线索。方法酶消化法获取单个表皮细胞悬液。Ⅳ型胶原快速贴壁法分选表皮干细胞。利用双向电泳技术（2-DE）建立两种细胞的蛋白质表达图谱，并用hnagemaster 2D elite5．0软件分析两种细胞的差异表达蛋白点。结果两种细胞的2-DE蛋白表达谱具有良好的重复性和可比性。皮肤角朊细胞与表皮干细胞的电泳图谱平均蛋白质点数分别为（982±18）个和（930±15）个，匹配点数为（850±13）个和（798±11）个，匹配率是86．56％和85．81％；两种细胞蛋白质间匹配点数是（886±8）个，匹配率是76．98％。找到差异蛋白点11个，其中只在表皮干细胞中表达或高表达的有8个；只在皮肤角朊细胞中表达或高表达的有3个。结论利用双向电泳法得到了分辨率较高且重复性好的皮肤角朊细胞与表皮干细胞蛋白质组图谱，且二者存在有一定的差异。

关键词：电泳,凝胶,双向表皮干细胞角朊细胞皮肤蛋白质组图谱

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ERK3信号通路的活化阻止细胞增殖

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生物化学与生物物理进展 2007年第2期34卷 117-123页

作者：陈笛邢飞跃暨南大学组织移植与免疫中心广州510632

ERK3是ERK家族中结构较为独特的成员,尤其在分子生物学特征上与ERK家族其他成员明显不同,如基因结构中外显子之间的大内含子、蛋白质结构中活化环的丝氨酸单磷酸化位点以及激酶C端的延伸序列等.ERK3具有独特的丝氨酸单磷酸化位点,导致... 详细信息

ERK3是ERK家族中结构较为独特的成员,尤其在分子生物学特征上与ERK家族其他成员明显不同,如基因结构中外显子之间的大内含子、蛋白质结构中活化环的丝氨酸单磷酸化位点以及激酶C端的延伸序列等.ERK3具有独特的丝氨酸单磷酸化位点,导致所有以苏氨酸/酪氨酸双磷酸化位点为磷酸化靶点的MEK分子均不能活化***3的C端延伸序列能与细胞周期蛋白D3结合并调控ERK3的亚细胞定位,从而影响ERK3对细胞周期的调节.据目前文献推测,ERK3调控细胞周期的信号通路可能为:Ras→B-Raf→ERK3激酶→ERK3→G1期CDK复合物减少→S期抑制因子增多→细胞增殖阻滞于S期→细胞停止增殖,进入分化.此外,ERK3信号通路的活化与细胞分化、胚胎发育、胰岛素分泌以及肿瘤的发生密切相关.

关键词：细胞外信号调节激酶3 信号通路细胞周期

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通痹灵总生物碱抑制关节破坏的细胞免疫作用机制

通痹灵总生物碱抑制关节破坏的细胞免疫作用机制

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全国第七届中西医结合风湿病学术会议

作者：陈光星童娟刘清平沈晓燕赵诗哲陈纪藩曾耀英广州中医药大学第一附属医院六内科风湿专科暨南大学生命科学院组织移植与免疫中心

类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是最常见和致残率最高的骨关节疾病之一,侵袭着全球所有种族数以千万计的人口,目前对于 RA 还缺乏理想的疗法。中医药治疗 RA 历史悠久,具有一定疗效。但是, 中药制剂治疗 RA 的作用环节和作用... 详细信息

类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是最常见和致残率最高的骨关节疾病之一,侵袭着全球所有种族数以千万计的人口,目前对于 RA 还缺乏理想的疗法。中医药治疗 RA 历史悠久,具有一定疗效。但是, 中药制剂治疗 RA 的作用环节和作用机理仍不明确,以致影响中药在治疗 RA 等自身免疫性疾病方面的推

关键词：骨侵蚀 MTX 总生物碱免疫作用机制关节间隙磷酸化 TBL

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c—Jun氨基末端激酶在小鼠T细胞增殖中的作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第3期27卷 254-259页

作者：于哲邢飞跃王通曾耀英暨南大学组织移植与免疫中心广州510632

目的研究c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase，INK）在小鼠T细胞增殖中的作用。方法以活体染料羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯（CFSE）染色，建立了在多克隆刺激剂刀豆蛋白A（ConA）刺激下评价小鼠T细胞增殖的模型，通过流式... 详细信息

目的研究c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase，INK）在小鼠T细胞增殖中的作用。方法以活体染料羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯（CFSE）染色，建立了在多克隆刺激剂刀豆蛋白A（ConA）刺激下评价小鼠T细胞增殖的模型，通过流式细胞术分析JNK的一种新的特异性抑制剂SP600125在不同剂量、不同时间对T细胞增殖的影响，并应用CellQuest软件分析增殖细胞各代所占比例和增殖指数（PI）及抑制指数（HI）。采用碘化丙锭染色分析不同剂量SP600125对ConA或佛波醇酯（PDB）加离子霉素（Ion）刺激的小鼠T细胞周期变化的作用。结果随着SP600125浓度从1．0μmol／L逐渐增至16．0μmol／L，ConA对T细胞的促增殖作用逐渐减弱，以8．0～16．0μmol／L的抑制作用最为明显，呈剂量依赖关系（r=0．98，P〈0．01）；选择最佳剂量8．0μmol／L，SP600125对T细胞增殖的抑制作用随时间从24h递增至96h而逐渐增强；进一步发现SP600125能使PDB加Ion刺激的小鼠T细胞停滞于G0/G1期，阻止其进入S期和c2，M期，且阻止作用随上述浓度的增加而增强，呈明显剂量依赖关系（S期：r=-0．98，P〈0．01；G2／M期：r=-0．88，P〈0．05）；SP600125也呈剂量依赖性地使ConA诱导的T细胞停滞于G0/G1期，阻止其进入S期（r=-0．90，P〈0．05）。结论JNK信号通路的活化在小鼠T细胞增殖中可能起着重要作用。

关键词： c-Jun氨基末端激酶 T细胞增殖细胞周期

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茴香霉素在小鼠淋巴细胞增殖和活化中的作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第10期27卷 888-892页

作者：于哲邢飞跃王通陈笛陈玲暨南大学组织移植与免疫中心广州510632

目的研究茴香霉素在小鼠淋巴细胞增殖和活化中的作用。方法以活体染料羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰业胺酯染色,建立了在多克隆刺激剂刀豆蛋白A(Con A)刺激下评价小鼠淋巴细胞增殖的模型,通过流式细胞术及MTT法分析茴香霉素在不同剂量下对... 详细信息

目的研究茴香霉素在小鼠淋巴细胞增殖和活化中的作用。方法以活体染料羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰业胺酯染色,建立了在多克隆刺激剂刀豆蛋白A(Con A)刺激下评价小鼠淋巴细胞增殖的模型,通过流式细胞术及MTT法分析茴香霉素在不同剂量下对淋巴细胞增殖的作用;采用碘化丙锭染色分析茴香霉素对Con A或佛波醇酯(PDB)加离子霉素(Ion)刺激的小鼠淋巴细胞周期变化的作用;利用荧光标记的单克隆抗体双染技术结合流式细胞仪检测茴香霉素对小鼠CD3+淋巴细胞早期及中期活化标志分子CD69和CD25表达的影响。结果随着茴香霉素浓度从1.0 ng/ml逐渐增至25.0 ng/ml,Con A对淋巴细胞的促增殖作用逐渐减弱,以10.0 ng/ml和25.0 ng/ml茴香霉素的抑制作用最为明显,呈剂量依赖关系(r=-0.96,P<0.01)。进一步发现,1.0～25.0 ng/ml茴香霉素能够使Con A或PDB加Ion诱导的淋巴细胞停滞于G0/G1期,阻止其进入S期,且阻止作用随上述浓度的增加而增强,呈明显剂量依赖关系(r=-0.97,P<0.01和r=-0.98,P<0.01)。据此选用最佳剂量10.0 ng/ml,茴香霉素能够明显抑制淋巴细胞表面分子CD69和CD25的表达(P均<0.01)。结论茴香霉素能明显抑制小鼠淋巴细胞的增殖和活化。

关键词：茴香霉素淋巴细胞增殖细胞周期活化

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