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2014年广州运动与健康国际学术研讨会

作者：王力先何贤辉季建民广东省体育科学研究所国家体育总局体能与训练适应控制系统重点实验室广东广州510663 暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫中心广东广州510632 暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫中心广东广州510632 广东省体育科学研究所国家体育总局体能与训练适应控制系统重点实验室广东广州510663

目的：通过研究广东省优秀皮划艇运动员2周大强度训练前后外周血T淋巴细胞、Th/Ts以及CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Regulatory T cell,Treg)的变化情况,探讨大强度运动训练对运动员外周血T淋巴细胞及其亚群的影响和运动员免疫应答模式... 详细信息

目的：通过研究广东省优秀皮划艇运动员2周大强度训练前后外周血T淋巴细胞、Th/Ts以及CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Regulatory T cell,Treg)的变化情况,探讨大强度运动训练对运动员外周血T淋巴细胞及其亚群的影响和运动员免疫应答模式的变化情况.方法：随机选取广东省优秀皮划艇运动员25人(男运动员13人,年龄17.3±2.8岁,身高184.8±5.6 cm,体重84.3±7.4,BMI 25.2±1.7;女运动员12人,年龄17.1±2.5岁,身高173.5±4.3cm,体重67.5±8.3,BMI 22.3±2.6),所有研究对象均无肝、肾及内分泌疾病史,调查研究期间未感染疾病、未服用刺激免疫或抑制免疫的中西药物.以2周大强度训练为调查期间.所有研究对象根据教练员训练安排,参加正常训练.堂课最大心率为186.4±4.3次/min,课后乳酸为9.2±2.5.实验室在训练阶段开始前和结束12h后各采一次血样进行测试.晨起安静状态下肘静脉采血2ml置EDTA抗凝管,密度梯度离心法分离运动员外周血淋巴细胞,荧光抗体染色后(所有抗体均购自BD公司),以BD Calibur流式细胞仪检测T细胞、Th/Ts和CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的表达情况,实验数据采用SPSS 13.0软件包进行处理.结果：训练阶段结束后,T细胞百分比、T细胞计数、Th/Ts、CD4+CD25+Foxp3+百分比、CD4+CD25+Foxp3+计数均极显着下降(P＜0.01).结论：大强度训练可导致外周血T淋巴细胞、Th/Ts以及调节性T细胞极显着下降,提示运动员机体由T细胞介导的免疫应答受抑制.

关键词：运动员调节性T细胞 Treg 淋巴细胞训练

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细胞自噬与炎症反应相互作用的研究进展

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2013年第2期34卷 125-128页

作者：何贤辉何健欧阳东云暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫研究中心免疫生物学系广东广州510632

细胞自噬是维持细胞内环境自稳的一种自我保护机制,是由溶酶体介导的降解细胞内受损的蛋白质或者细胞器的代谢过程。细胞自噬与炎症反应密切相关,模式识别受体Toll样受体的激活能够诱导细胞自噬的发生,而细胞自噬又对炎症反应有调控作... 详细信息

细胞自噬是维持细胞内环境自稳的一种自我保护机制,是由溶酶体介导的降解细胞内受损的蛋白质或者细胞器的代谢过程。细胞自噬与炎症反应密切相关,模式识别受体Toll样受体的激活能够诱导细胞自噬的发生,而细胞自噬又对炎症反应有调控作用。同时细胞自噬与抗感染免疫密切相关,而细胞自噬的缺损是诱发炎症反应和炎症性疾病的一个重要因素。本文简要综述细胞自噬与炎症反应的相互作用,为研究细胞自噬调控炎症反应的机制提供参考。

关键词：细胞自噬炎症炎症性疾病

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曲古抑菌素A对SH-SY5Y细胞缺氧/缺糖损伤的保护作用

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中国药理学通报 2013年第10期29卷 1395-1400页

作者：黄琼越茂松季秋虹王进京季煜华暨南大学生命科学技术学院组织移植和免疫研究中心广东广州510632 南通大学附属医院神经内科江苏南通226001 暨南大学功能蛋白质研究广东普通高校重点实验室广东广州510632

目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)对人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)缺氧/缺糖(oxygen-glucose deprivation,OGD)损伤的保护作用及其可能机制。方法采用化学方法建立SH-SY5Y细胞不同时间(1、2、4、6和8 h)... 详细信息

目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)对人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)缺氧/缺糖(oxygen-glucose deprivation,OGD)损伤的保护作用及其可能机制。方法采用化学方法建立SH-SY5Y细胞不同时间(1、2、4、6和8 h)持续性OGD损伤模型,MTT法检测细胞活性,以评估持续性OGD损伤对SH-SY5Y细胞的损伤程度。继而观察TSA(10、20、40、80 nmol·L-1)对OGD诱导的神经元损伤的影响,实验指标如下:倒置显微镜观察细胞形态学变化,MTT检测TSA对细胞活性的影响,Propidium iodide(PI)和Hoechst 33258染色检测细胞凋亡与坏死情况,荧光显微镜检测各组细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量和线粒体膜电位(mitochondrion membrane potential,MMP)的变化。结果 OGD损伤2 h,模型组的细胞活性和MMP水平较对照组明显降低,并随OGD时间的延长而变化越明显。而ROS含量较对照组明显升高,Hoechst和PI双染检测也发现染色质凝聚,核碎裂,凋亡小体产生,并随OGD时间的延长,凋亡和坏死细胞的数量增加。与模型组相比,40 nmol·L-1TSA能明显提高OGD诱导的神经元的活性,降低细胞内ROS含量,以及提高MMP水平。结论TSA对OGD诱导SH-SY5Y细胞缺氧/缺糖损伤具有明显的保护作用,其保护机制可能与降低细胞内ROS水平及维持MMP的高能状态有关。

关键词：曲古抑菌素A SH—SY5Y细胞缺氧缺糖损伤氧化应激活性氧线粒体膜电位

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曲古抑菌素A对缺糖/缺氧损伤PC12细胞的保护作用

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中国药理学通报 2013年第5期29卷 688-692页

作者：越茂松黄琼王进京季秋虹季煜华暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫研究中心广州510632 南通大学附属医院神经内科南通226001 暨南大学功能蛋白质研究广东普通高校重点实验室广州510632

目的研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)对PC12大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞缺糖/缺氧损伤的保护作用及其可能的作用机制。方法建立PC12细胞缺糖/缺氧(oxygen and glucose deprivation,OGD)损伤模型,1-640 nmol.L-... 详细信息

目的研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)对PC12大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞缺糖/缺氧损伤的保护作用及其可能的作用机制。方法建立PC12细胞缺糖/缺氧(oxygen and glucose deprivation,OGD)损伤模型,1-640 nmol.L-1TSA处理细胞,噻唑蓝(MTT)检测对PC12细胞活性的影响,Propidium iodide(PI)和Hoechst33258染色检测细胞凋亡与坏死,荧光显微镜和流式细胞仪检测各组细胞内活性氧(ROS)的含量。结果与模型组相比,80 nmol.L-1TSA可明显提高ODG PC12的细胞存活率,降低细胞内的ROS含量(P<0.05)。结论 TSA对OGD损伤的PC12细胞具有保护作用,其机制可能是通过增加细胞内能量代谢中各种酶的乙酰化水平来应对缺血损伤。

关键词： TSA PC12细胞缺糖缺氧能量代谢乙酰化活性氧

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银杏内酯B对小鼠腹膜巨噬细胞体外增殖、吞噬及产生NO和ROS的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2012年第1期28卷 4-7页

作者：王晓东曾耀英宋兵暨南大学组织移植与免疫实验中心广东广州510632

目的:银杏内酯B(GB)是已知的天然而强效的血小板激活因子(PAF)受体(PAFR)拮抗剂,本研究中GB对小鼠腹膜巨噬细胞的增殖、吞噬及产生NO和ROS的影响,初步探讨其潜在的免疫调节作用与机制,从而为临床应用提供可靠的实验依据。方法:分离纯化... 详细信息

目的:银杏内酯B(GB)是已知的天然而强效的血小板激活因子(PAF)受体(PAFR)拮抗剂,本研究中GB对小鼠腹膜巨噬细胞的增殖、吞噬及产生NO和ROS的影响,初步探讨其潜在的免疫调节作用与机制,从而为临床应用提供可靠的实验依据。方法:分离纯化小鼠腹膜巨噬细胞(PM),以不同浓度的GB(1.25～20μmol/L)预孵后加以脂多糖(LPS)刺激并继续培养至相应时间点;以MTT法检测GB对PM活力及LPS诱导的增殖的影响;以荧光微球的摄入结合流式细胞术评价PM的吞噬作用;以Griess法检测GB对LPS诱导的NO释放的影响;以H2DCFDA标记结合流式细胞术检测PM的ROS水平。结果:LPS刺激后24 h时PM吞噬能力增强,ROS水平显著上升,并释放大量NO,至48 h时PM增殖明显,而经终浓度为5、10、20μmol/L GB在LPS刺激前对PM进行4 h预孵处理可以大幅下调PM对荧光微球的吞噬作用,显著降低PM的ROS水平及NO释放量,并能有效抑制PM的增殖。结论:GB能有效抑制LPS诱导的细胞增殖、吞噬作用、产生NO和ROS的水平,凭借GB对巨噬细胞的体外行为和功能的出色调节作用,理应将其作为天然的免疫抑制剂候选者进行更深入的研究。

关键词：银杏内酯B 巨噬细胞增殖吞噬活性氧簇一氧化氮

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基于聚苯胺纳米纤维复合膜界面构建电化学细胞传感器及其对癌细胞的识别检测

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分析化学 2012年第2期40卷 184-190页

作者：王辉汪甜叶燕霞张亚兴杨培慧蔡怀鸿蔡继业暨南大学化学系暨南大学药学院暨南大学组织移植与免疫实验中心光电信息与传感技术广东普通高校重点实验室(暨南大学)

合成了聚苯胺纳米纤维,直径在50～70 nm之间;基于静电作用构建聚苯胺纳米纤维-纳米金复合膜界面,并在此界面上层层组装修饰叶酸分子,构建叶酸功能化传感界面,基于叶酸分子与癌细胞表面过量表达的叶酸受体之间的特异性识别作用,将此传感... 详细信息

合成了聚苯胺纳米纤维,直径在50～70 nm之间;基于静电作用构建聚苯胺纳米纤维-纳米金复合膜界面,并在此界面上层层组装修饰叶酸分子,构建叶酸功能化传感界面,基于叶酸分子与癌细胞表面过量表达的叶酸受体之间的特异性识别作用,将此传感界面应用于对癌细胞的识别和捕获。结果表明:叶酸功能化传感界面能够特异性识别和捕获叶酸受体过量表达的癌细胞。采用电化学阻抗技术,以HeLa细胞为模型,应用于对癌细胞的识别和检测,细胞在1.0×104～6.4×106cells/mL浓度范围内与阻抗变化值ΔRct呈良好的线性关系;检出限为2000 cells/mL。本方法简单、快速灵敏、重现性和稳定性良好;制备的传感器可以再生使用。

关键词：细胞传感器聚苯胺纳米纤维纳米金癌细胞

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脱水淫羊藿素对小鼠巨噬细胞免疫功能的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2012年第4期28卷 374-376,380页

作者：赖新强黄秀艳曾耀英暨南大学分析测试中心广东广州510632 暨南大学组织移植与免疫中心广东广州510632

目的:研究脱水淫羊藿素(AHI)在体外对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞免疫功能的影响。方法:分离制备小鼠骨髓来源巨噬细胞;CCK-8法检测不同终浓度的AHI对巨噬细胞的毒性;采用Griess试剂盒检测AHI对巨噬细胞产生NO的影响;流式细胞术(FCM... 详细信息

目的:研究脱水淫羊藿素(AHI)在体外对脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞免疫功能的影响。方法:分离制备小鼠骨髓来源巨噬细胞;CCK-8法检测不同终浓度的AHI对巨噬细胞的毒性;采用Griess试剂盒检测AHI对巨噬细胞产生NO的影响;流式细胞术(FCM)检测AHI对巨噬细胞吞噬***颗粒的影响;利用FCM结合双色免疫荧光染色技术检测AHI对巨噬细胞早期活化标志CD69的表达情况;使用流式液相蛋白定量检测技术(CBA)检测AHI对LPS刺激巨噬细胞分泌细胞因子的影响。结果:终浓度为2.5、5、10μmol/L的AHI对活化的小鼠巨噬细胞均具有明显的免疫抑制作用,特别是5μmol/L AHI能明显抑制经LPS刺激的巨噬细胞早期活化,释放NO,吞噬***颗粒,以及分泌IL-6、MCP-1、TNF和IL-12p70四种细胞因子。结论:AHI对LPS诱导的小鼠巨噬细胞的活化具有明显的抑制作用,是一种潜在的免疫抑制剂。

关键词：脱水淫羊藿素巨噬细胞脂多糖免疫抑制

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葫芦素B抗肿瘤作用及其机制研究进展

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中国药理学与毒理学杂志 2012年第1期26卷 112-115页

作者：张延亭欧阳东云何贤辉暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫实验中心广东广州510632

葫芦素是从葫芦科等植物中分离的三萜类天然产物,具有多种药理作用。葫芦素B是葫芦素家族的重要成员,对多种肿瘤具有抑制作用,是潜在的抗肿瘤药物。葫芦素B能够抑制肿瘤细胞STAT3转录因子的活化,干扰丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路,诱... 详细信息

葫芦素是从葫芦科等植物中分离的三萜类天然产物,具有多种药理作用。葫芦素B是葫芦素家族的重要成员,对多种肿瘤具有抑制作用,是潜在的抗肿瘤药物。葫芦素B能够抑制肿瘤细胞STAT3转录因子的活化,干扰丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路,诱导细胞周期阻滞于G2/M期,诱导肿瘤细胞凋亡,引起细胞骨架变化。越来越多的研究表明,葫芦素B的抗肿瘤作用可能与其破坏肌动蛋白细胞骨架的活性密切相关。本文综述了葫芦素B的抗肿瘤作用及其可能的机制。

关键词：葫芦素B 抗肿瘤药 STAT3转录因子细胞骨架微丝

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去乙酰化酶抑制剂TSA通过激活ERK和p38抑制间充质干细胞成脂分化

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中国生物化学与分子生物学报 2012年第1期28卷 35-41页

作者：龚雨琴季煜华李智耀王奎栋暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫实验中心广州510632

本文研究了丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinases,MAPKs)信号通路在组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitors,HDACis)曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)抑制间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)C3H10T1/2成脂分化中的调节机制.首先利用MTT法检测TSA对其增殖活性的影响;Western印迹法首先检测MAPKs信号通路中pERK和p-p38蛋白在间充质干细胞C3H10T1/2成脂分化过程中的表达情况,以及不同浓度、不同时间TSA处理对pERK和p-p38蛋白差异变化情况;其次再用Western印迹检测TSA对成脂分化过程中间充质干细胞pERK和p-p38蛋白表达的影响.MTT结果显示,TSA浓度在1 nmol/L～100 nmol/L范围内抑制C3H10T1/2细胞的增殖活性,且TSA浓度约为60 nmol/L时即抑制一半以上的C3H10T1/2细胞增殖活性.Western印迹结果显示,TSA处理5 min～80 min,及浓度在1 nmol/L～100 nmol/L范围内激活MAPK信号通路中pERK和p-p38蛋白的表达;C3H10T1/2细胞成脂分化过程中,胞内pERK和p-p38蛋白的表达呈现下调趋势;而TSA抑制了成脂分化过程中C3H10T1/2细胞内pERK和p-p38蛋白的表达变化.本研究结果提示,在C3H10T1/2细胞成脂分化过程中,MAPK信号途径分子pERK和p-p38表达下调;TSA可能是通过活化pERK和p-p38进而抑制间充质干细胞C3H10T1/2成脂分化.

关键词：曲古抑菌素A(TSA) 丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号通路 C3H10T1/2细胞成脂分化

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双黄连粉针剂体外对小鼠腹腔巨噬细胞NO分泌与吞噬功能的影响

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免疫学杂志 2012年第6期28卷 550-552页

作者：杨志邓文强曾耀英韶关学院医学院免疫教研室 512026 暨南大学组织移植与免疫实验中心广州510632

目的探讨双黄连粉针剂(以下简称SHL)体外对小鼠腹腔巨噬细胞NO分泌与吞噬功能的影响。方法无菌条件下制备小鼠腹腔巨噬细胞悬液;MTT法检测药物对细胞悬液的毒性情况;Griess反应系统检测SHL对脂多糖(LPS)刺激的小鼠腹腔巨噬细胞NO分泌的... 详细信息

目的探讨双黄连粉针剂(以下简称SHL)体外对小鼠腹腔巨噬细胞NO分泌与吞噬功能的影响。方法无菌条件下制备小鼠腹腔巨噬细胞悬液;MTT法检测药物对细胞悬液的毒性情况;Griess反应系统检测SHL对脂多糖(LPS)刺激的小鼠腹腔巨噬细胞NO分泌的影响;1μm与2μm直径的荧光微球结合流式细胞术分析SHL对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬作用的影响。结果终质量浓度为40、80 mg/L的SHL对细胞的毒性小;SHL抑制了腹腔巨噬细胞的NO分泌与吞噬作用,与非SHL组比较P<0.01。结论 SHL对小鼠腹腔巨噬细胞的NO分泌和吞噬作用的影响可能是SHL调节小鼠免疫系统的途径。

关键词：双黄连粉针剂巨噬细胞一氧化氮吞噬

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