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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2002年第1期23卷 104-107页

作者：全世明曾耀英何贤辉曾山狄静芳肇静娴林羿暨南大学组织移植与免疫研究中心广东广州510632

目的 :利用淋巴细胞的早期活化标记物CD6 9的表达 ,探讨放线菌酮 (CHX)对T淋巴细胞体外活化的影响 ,以进一步揭示CHX对免疫系统的影响 .方法 :分离小鼠淋巴结细胞 ,与CHX预孵 1h ,加入多克隆刺激剂继续培养 ,总计培养 2 4h后收获细胞 ,... 详细信息

目的 :利用淋巴细胞的早期活化标记物CD6 9的表达 ,探讨放线菌酮 (CHX)对T淋巴细胞体外活化的影响 ,以进一步揭示CHX对免疫系统的影响 .方法 :分离小鼠淋巴结细胞 ,与CHX预孵 1h ,加入多克隆刺激剂继续培养 ,总计培养 2 4h后收获细胞 ,进行双色免疫荧光标记 ,以流式细胞术对T细胞的CD6 9分子表达情况进行分析 .结果 :在CHX(终浓度 10 μmol/L)作用下 ,ConA和PDB活化的T细胞CD6 9表达百分率依次为 12 33%± 4 75 %、13 0 7%± 11 0 5 %,与对照组比较均有显著差异 (P <0 0 1) .结论 :CHX(10 μmol/L)对ConA、PDB活化的T淋巴细胞均显示了强烈的抑制效应 .

关键词：小鼠 CD69 T淋巴细胞放线菌酮流式细胞术细胞活化抑制效应表面抗原表达免疫应答

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外伤性视神经损伤后视神经及视网膜形态的动态观察

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中国病理生理杂志 2002年第10期18卷 1268-1270,T007页

作者：史剑波狄静芳徐锦堂沈伟哉暨南大学医学院眼科教研室暨南大学生命科学院组织移植与免疫中心暨南大学医学院解剖学教研室广东广州510632

目的 :了解外伤性视神经损伤后的病理变化、溃变特点与时相间的关系。方法 :参照Allen脊髓损伤法 ,造成视神经眶尖段间接 6 0 0gcm力冲击、挤压伤。伤后对视神经和视网膜行形态学动态观察。结果 :①伤后 4 8h ,视神经轻度肿胀和空泡反应... 详细信息

目的 :了解外伤性视神经损伤后的病理变化、溃变特点与时相间的关系。方法 :参照Allen脊髓损伤法 ,造成视神经眶尖段间接 6 0 0gcm力冲击、挤压伤。伤后对视神经和视网膜行形态学动态观察。结果 :①伤后 4 8h ,视神经轻度肿胀和空泡反应 ;1周时损伤处视神经出现溃变 ,神经胶质细胞增生 ,视网膜神经节细胞 (retinalganglioncells,RGCs)形态改变不明显 ;2周时神经纤维轴束间空泡样改变 ,局灶性坏死 ,RGCs核固缩和细胞数量减少。术后 3月 ,视神经损伤部位直径缩小 ,形成胶质疤痕 ,RGCs数量明显减少 ,核固缩细胞增多。②RGCs数量于术后 4 8h、1周、2周、1月和 3月分别比正常对照组低 3 35 %、13 2 3%、19 74 %、2 3 2 0 %、2 9 2 8%。③视网膜细胞在 4 8h内出现凋亡。结论 :本实验模型可造成明确的视神经和视网膜损伤 ,神经元的损伤程度从节细胞、中间神经元、感光细胞的次序依次递减。视网膜和视神经损伤的严重程度与时间呈相关性。RGCs数量在 4 8h至 1周时下降速率最快。

关键词：视神经创伤损伤视网膜神经节细胞病理学

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雷公藤多甙滴眼液眼内药代动力学的实验研究

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眼科研究 2002年第2期20卷 117-119页

作者：邓宏伟李辰陈建苏侯励狄静芳曾山黄仲立暨南大学第一附属医院眼科广州510632 暨南大学第一附属医院药剂科广州510632 组织移植免疫中心中山大学测试中心

目的首次研制出雷公藤多甙（TⅡ）滴眼液,并用高效液相色谱仪法对该滴眼液的药代动力学参数进行研究。方法将0.03％TⅡ滴眼液50μl滴入兔眼下睑结膜囊内,在4h中定时采取房水做为测试样本,经处理后,用高效液相色谱仪测定样本中的雷公... 详细信息

目的首次研制出雷公藤多甙（TⅡ）滴眼液,并用高效液相色谱仪法对该滴眼液的药代动力学参数进行研究。方法将0.03％TⅡ滴眼液50μl滴入兔眼下睑结膜囊内,在4h中定时采取房水做为测试样本,经处理后,用高效液相色谱仪测定样本中的雷公藤内酯醇质量浓度。结果TⅡ滴眼液在新西兰白兔眼内为一室模型,主要药代动力学参数为:A=2.703 μg/Ml;Ke=2.047h-1;Ka=2.708h-1;Lagtime=0.456h;t1/2（ka）=0.256h;t1/2（ke）=0.339h;T（max）=0.880h;C（max）=0.278μg/ml;AUC=0.323μg/（h·ml）。其拟合的动力学方程为C（t）=178.123×Dose× （e-2.047×（t-0.456）-e-2.708×（t-0.456））。结论TⅡ滴眼液眼内有效峰浓度出现在点药后0.88h,4h基本被代谢消除。

关键词：雷公藤多甙滴眼液房水高效液相色谱仪药代动力学

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应用酚提取法纯化孕妇血浆及血清中胎儿游离DNA

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中华医学遗传学杂志 2002年第5期19卷 449-451页

作者：陈小蔓黄艳仪孔舒郑育红曾耀英孙荭李冰张立冬麦艳明广州市第二人民医院妇产科研究所 510150 暨南大学组织移植和免疫实验中心

目的　应用酚提取法以提高纯化孕妇血中胎儿 DNA的浓度 ,并应用套式 PCR技术确定男性胎儿 SRY基因的存在。方法　孕妇血浆和血清 5～ 10 ml采自孕龄为 7～ 38周孕 1产 0的孕妇 2 6名。其中孕男性单胎正常孕妇 18名 ,孕女胎正常孕妇 8名... 详细信息

目的　应用酚提取法以提高纯化孕妇血中胎儿 DNA的浓度 ,并应用套式 PCR技术确定男性胎儿 SRY基因的存在。方法　孕妇血浆和血清 5～ 10 ml采自孕龄为 7～ 38周孕 1产 0的孕妇 2 6名。其中孕男性单胎正常孕妇 18名 ,孕女胎正常孕妇 8名。加入等体积的苯酚∶氯仿∶异戊醇抽提 ,并经冰浴离心 ,所得 DNA应用套式 PCR技术确定男性胎儿 SRY基因的存在。结果　血浆标本在第 1次 PCR扩增后有 12名出现 35 1bp的阳性扩增带。其余 6名在第 2次扩增后出现 2 5 4 bp的阳性扩增带。第 1次扩增确定性别的准确率是 72 .2 % ,第 2次扩增是 10 0 %。血清标本在第 1次扩增后有 9名出现 35 1bp阳性扩增带 ,第 2次有 16名出现 2 5 4 bp阳性扩增带。第 1次扩增确定性别的准确率为 5 0 % ,两次准确率共为 88.9%。同时对 2例 X-连锁遗传病患者 (假性肥大性肌营养不良症和无汗性外胚层发育不良症的患者 )进行了产前性别判断。结论　单纯应用酚提取的方法也可以纯化孕妇血浆及血清中胎儿游离 DNA的浓度 ,可以应用较大量的孕妇血浆及血清进行 DNA提取 ,以获得较高胎儿 DNA的浓度。加用套式 PCR使确定胎儿性别的准确率得到提高。提示可用此方法对有

关键词：酚提取法胎儿DNA 男性血浆血清产前诊断孕妇血遗传学诊断

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活细胞染料CFDA,SE在淋巴细胞增殖研究中的应用

活细胞染料CFDA,SE在淋巴细胞增殖研究中的应用

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中国免疫学会第四届学术大会

作者：肇静娴曾耀英何贤辉王南狄静芳曾山暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室

活细胞染料羧基荧光素乙酰乙酸Carboxyfluo—rescein diacetate,succinimidyl ester(CFDA,SE)自从1994年被引介给广大免疫学工作者以来[1],利用CFSE荧光强度的系列减半特征通过流式细胞术分析淋巴细胞增殖的技术已越来越广泛地被应用。... 详细信息

活细胞染料羧基荧光素乙酰乙酸Carboxyfluo—rescein diacetate,succinimidyl ester(CFDA,SE)自从1994年被引介给广大免疫学工作者以来[1],利用CFSE荧光强度的系列减半特征通过流式细胞术分析淋巴细胞增殖的技术已越来越广泛地被应用。这项技术能够实现对体外或体内的8至10个不同细胞分裂周期的可视化。

关键词：淋巴细胞增殖活细胞 CFDA,SE

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槲皮素对小鼠T细胞CD69表达的抑制作用

槲皮素对小鼠T细胞CD69表达的抑制作用

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中国免疫学会第四届学术大会

作者：王南曾耀英何贤辉肇静娴邱海霞暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室

本实验采用双色荧光标记结合流式细胞术,通过槲皮素对佛波醇酯(Phorbol12,13-dibutyrate,PDB)或刀豆蛋白A(concanavalin,Con A)刺激下的T淋巴细胞CD69表达的影响,分析槲皮素对T细胞活化的影响,由于PDB及ConA在T细胞活化信息传递通路中... 详细信息

本实验采用双色荧光标记结合流式细胞术,通过槲皮素对佛波醇酯(Phorbol12,13-dibutyrate,PDB)或刀豆蛋白A(concanavalin,Con A)刺激下的T淋巴细胞CD69表达的影响,分析槲皮素对T细胞活化的影响,由于PDB及ConA在T细胞活化信息传递通路中定位明确,可通过槲皮素对其活化作用的影响而推测槲皮素的作用位点,且因为槲皮素是天然植物提取物,副作用小,可用槲皮素考虑替代环孢霉素A减少其副作用的可能。

关键词：抑制作用槲皮素

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通痹灵对多克隆刺激剂作用下小鼠T细胞CD69表达影响的血清免疫药理评价

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中国免疫学杂志 2002年第5期18卷 330-333页

作者：全世明曾耀英陈纪藩胡英杰暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广州510632 广州中医药大学第一附属医院广州510405

目的：应用血清免疫药理方法探讨通痹灵对T细胞体外活化的影响，以进一步揭示通痹灵的免疫调节分子机理，为临床用药提供理论依据。方法：分离小鼠淋巴结细胞，分别与CHX、5％CHX血清、CsA、5％CsA血清、5％通痹灵血清预孵后加入多克隆... 详细信息

目的：应用血清免疫药理方法探讨通痹灵对T细胞体外活化的影响，以进一步揭示通痹灵的免疫调节分子机理，为临床用药提供理论依据。方法：分离小鼠淋巴结细胞，分别与CHX、5％CHX血清、CsA、5％CsA血清、5％通痹灵血清预孵后加入多克隆刺激剂继续培养，总计培养24h后收获细胞，进行双色免疫荧光标记，以流式细胞术对T细胞的CD69分子表达情况进行分析。结果：5％通痹灵作用下ConA活化的T细胞CD69表达百分率为（54．67±6．69）％，与相应对照［（64．35 ±10．13）%］比较有显著差异（P<0．05）；药物作用下PDB活化的T细胞CD69表达的百分率为（80．99±6．18）%，与相应对照［（79．68±4．17）％］比较无显著差异（P>0．05）。结论：通痹灵含药血清选择性地抑制ConA刺激的T细胞活化，而对PDB刺激的T细胞活化无影响；推测抑制类风湿关节炎疾病启动与发展中异常的T细胞活化，是通痹灵治疗类风湿关节炎重要机制之一；。

关键词：中药复方 CD69 T淋巴细胞血清免疫药理学类风湿关节炎通痹灵动物实验

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黄连素对T淋巴细胞活化和增殖的抑制作用

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中国病理生理杂志 2002年第10期18卷 1183-1186页

作者：何贤辉曾耀英徐丽慧邱海霞蔡小嫦暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632 暨南大学生物工程研究所广东广州510632 暨南大学医学院第一附属医院皮肤科广东广州510632

目的 :研究黄连素 (Ber)对T细胞体外活化和增殖的影响及作用机制。方法 :正常人外周血全血培养 ,以植物血凝素 (PHA)或佛波醇酯 (PDB)加离子霉素 (Ion)刺激活化淋巴细胞 ,双荧光染色及溶血获取有核细胞后 ,以流式细胞仪分析T细胞表达活... 详细信息

目的 :研究黄连素 (Ber)对T细胞体外活化和增殖的影响及作用机制。方法 :正常人外周血全血培养 ,以植物血凝素 (PHA)或佛波醇酯 (PDB)加离子霉素 (Ion)刺激活化淋巴细胞 ,双荧光染色及溶血获取有核细胞后 ,以流式细胞仪分析T细胞表达活化抗原CD6 9和CD2 5的水平 ,并以碘化丙锭染色分析细胞周期分布 ,7-AAD活染分析细胞死亡率。结果 :浓度为 10 0 μmol/L和 5 0 μmol/L的Ber对PDB +Ion或PHA激活T细胞表达CD6 9有明显抑制 ,而 2 5 μmol/L的Ber抑制效应无显著性 ;随时间延长 ,对CD6 9表达的抑制程度下降 ;对于CD2 5表达 ,上述 3个浓度的Ber抑制作用均有显著性 ,且呈剂量依赖性。同时 ,这 3个浓度的Ber均能明显阻止淋巴细胞进入S期和G2 /M ,对细胞周期的抑制作用没有时相特异性。活染分析显示Ber对淋巴细胞无明显细胞毒性。结论 :Ber通过干扰早期活化信号转导通路而抑制T细胞活化和增殖 ,发挥其免疫抑制作用。

关键词：黄连素 T淋巴细胞活化抗原细胞周期

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单纯疱疹病毒性角膜炎的免疫学

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眼科新进展 2002年第1期22卷 1-3页

作者：李志杰暨南大学组织移植与免疫中心眼科学教研室广州市510632

单纯疱疹病毒性角膜炎(herpes simplex keratitis, 　　HSK)是世界范围内角膜盲的最常见原因.单纯疱疹病毒(herpes simplex 　　virus,HSV)不仅可直接导致角膜的感染性破坏,而且还可通过免疫病理机制诱导某些难以处理的疾病,如基质型角... 详细信息

单纯疱疹病毒性角膜炎(herpes simplex keratitis, 　　HSK)是世界范围内角膜盲的最常见原因.单纯疱疹病毒(herpes simplex 　　virus,HSV)不仅可直接导致角膜的感染性破坏,而且还可通过免疫病理机制诱导某些难以处理的疾病,如基质型角膜炎.　　……

关键词：单纯疱疹性角膜炎细胞因子抗原提呈自身免疫 T淋巴细胞疫苗潜伏感染

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在反复自然流产模型CBA/J×DBA/2小鼠血清中未检测出抗精子抗体

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2002年第3期23卷 121-124页

作者：林羿曾耀英曾山詹美意关洁宾狄静芳冯铮全世明暨南大学组织移植与免疫研究中心广东广州510632 暨南大学病理教研室广东广州510632 暨南大学实验动物中心广东广州510632

目的 :评价抗精子抗体 (anti -spermantibody ,AsAb)与反复自然流产 (recurrentspontaneousabortion ,RSA)小鼠模型CBA/J×DBA/ 2生殖力特点的关系 .方法 :对CBA/J×DBA/ 2小鼠的生殖力特点做为期 6 0d的观察 ,与生殖力正常的BA... 详细信息

目的 :评价抗精子抗体 (anti -spermantibody ,AsAb)与反复自然流产 (recurrentspontaneousabortion ,RSA)小鼠模型CBA/J×DBA/ 2生殖力特点的关系 .方法 :对CBA/J×DBA/ 2小鼠的生殖力特点做为期 6 0d的观察 ,与生殖力正常的BALB/c×DBA/ 2小鼠进行比较 ,并检测上述雌鼠血清AsAb水平 .结果 :CBA/J×DBA/ 2小鼠平均每窝产仔数和雌雄同笼至第 1窝鼠仔出生的平均时间均与BALB/c×DBA/ 2小鼠有显著差异 ,分别为 (3 0± 1 1)只与 (6 1± 1 6 )只 ,P <0 0 0 1,和 (33 5± 7 1)d与 (2 5 8± 3 2 )d ,P <0 0 1.在这些CBA/J×DBA/ 2和BALB/c×DBA/ 2组合的雌鼠血清中均未检测出AsAb .结论 :CBA/J×DBA/

关键词： CBA/J×DBA/2 小鼠反复自然流产抗精子抗体动物模型血清检测生殖力发病机制

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